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气肿疽梭菌胶体金诊断试纸条的研制

江苏农业科学 2016年第11期44卷 283-286页

作者：任春宇姜丹丹车达云巾宴司唯段雪岩金鑫延边州畜牧总站/延边州动物疫病预防控制中心/延边大学农学院动物医学系吉林延吉133000 大理大学公共卫生医学院云南大理671000

为建立快速、准确、简便的检测气肿疽的胶体金免疫层析试纸条,以免疫层析法为指导,根据抗原-抗体的特性,建立了不需要再加入任何检测试剂且快速简便的检测方法。结果表明,胶体金与该单抗的最佳结合量为30μg/m L,最佳pH值为8.4,最佳NC膜... 详细信息

为建立快速、准确、简便的检测气肿疽的胶体金免疫层析试纸条,以免疫层析法为指导,根据抗原-抗体的特性,建立了不需要再加入任何检测试剂且快速简便的检测方法。结果表明,胶体金与该单抗的最佳结合量为30μg/m L,最佳pH值为8.4,最佳NC膜为Millipore HFB1350220型。将纯化的气肿疽梭菌多抗及羊抗鼠IgG分别以1∶4和1∶8的稀释倍数喷于硝酸纤维素膜的T线和C线。对胶体金诊断试纸条进行验证,敏感度高,可检测到的最低抗原量为1×10~5CFU/m L,特异性强、无假阳性与交叉反应现象、有较好的稳定性。本研究旨在建立快速、准确、简便的检测气肿疽的胶体金免疫层析试纸条。

关键词：气肿疽梭菌胶体金免疫层析试纸条

利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建

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安徽农业科学 2013年第24期41卷 9921-9923页

作者：李香春金鑫朴春宇金成德朴春实延边大学农学院动物医学系吉林延吉133000 延吉市动物卫生检疫站吉林延吉133000 吉林省晖春畜牧管理局吉林晖春133000 吉林省珲春市动物卫生监督所吉林晖春133300

[目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗。[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法。... 详细信息

[目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗。[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法。[结果]试验成功扩增出了融合基因FliA(C)-NanA。[结论]SOE-PCR方法无需在引物设计中加入酶切位点进行连接,降低了试验成本,且2个基因间未加入其他核酸序列,避免了表达出影响免疫效果的蛋白;TD-PCR的应用节省了试验时间,避免了筛选退火温度的繁琐步骤,解决了基因丢失的问题。

关键词：气肿疽梭菌融合基因 SOE-PCR TD-PCR

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气肿疽梭菌免疫学检测方法概述

养殖与饲料 2021年第5期20卷 133-135页

作者：张文璇曲庭伟方程金鑫严昌国延边大学农学院动物医学系吉林延吉133000 东北寒区肉牛科技创新教育部工程研究中心/延边大学吉林延吉133002 延边大学农学院动物科学系吉林延吉133000

气肿疽梭菌是一种具有组织毒性、有鞭毛的孢子化革兰氏阳性菌,可引气肿疽这种反刍动物高致死性急性疾病。常见的典型临床症状为发病动物肌肉丰满部位发炎、肿胀,触压可听到类似捻发音,流行呈现一定的季节性,并有区域性流行的特征。牛气... 详细信息

气肿疽梭菌是一种具有组织毒性、有鞭毛的孢子化革兰氏阳性菌,可引气肿疽这种反刍动物高致死性急性疾病。常见的典型临床症状为发病动物肌肉丰满部位发炎、肿胀,触压可听到类似捻发音,流行呈现一定的季节性,并有区域性流行的特征。牛气肿疽在养殖场中一旦传播流行,往往会伴随巨大的经济损失,所以更加需要加强对该病的防控与诊断。本文整理了气肿疽梭菌的3种免疫学检测方法(间接ELISA、Dot-ELISA、免疫胶体金技术),以供参考。

关键词：气肿疽梭菌免疫学检测方法

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气肿疽梭菌主要抗原及毒力因子的研究进展

养殖与饲料 2021年第4期20卷 40-42页

气肿疽梭菌是一种严格厌氧的有芽孢的杆菌,可引起常见反刍家畜组织毒性缺氧,严重可致死,常为畜牧养殖业带来巨大的经济损失。气肿疽对反刍动物的影响存在已久,但其确切发病机制和相关毒力因子的作用仍未能被完全解读。随着研究的深入,... 详细信息

气肿疽梭菌是一种严格厌氧的有芽孢的杆菌,可引起常见反刍家畜组织毒性缺氧,严重可致死,常为畜牧养殖业带来巨大的经济损失。气肿疽对反刍动物的影响存在已久,但其确切发病机制和相关毒力因子的作用仍未能被完全解读。随着研究的深入,已发现气肿疽梭菌的4种主要抗原和毒力因子在气肿疽发病过程中起着重要的作用。本文主要对气肿疽梭菌的4种主要抗原和毒力因子(细胞毒素A、鞭毛蛋白、神经氨酸酶和透明质酸酶)的相关研究进行总结概述,期望能为日后气肿疽检测方法和新型疫苗的研究提供参考。

关键词：气肿疽梭菌抗原毒力因子

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一起猪气肿疽梭菌感染病例的诊治

云南畜牧兽医 2017年第5期 8-8页

作者：杨靖华肖文学李忠文宁蒗县动物卫生监督所云南宁蒗674300 宁蒗县新营盘乡畜牧兽医站云南宁蒗674304

气肿疽是由专性厌氧菌气肿疽梭菌引起的反刍动物急性败血性传染病，然而笔者在防治一起牛气肿疽疫情过程中发现，猪群也可以被气肿疽梭菌所感染，在治疗气肿疽梭菌感染的猪群过程中，采用治疗牛羊气肿疽的方法，同样能够收到良好的治疗... 详细信息

气肿疽是由专性厌氧菌气肿疽梭菌引起的反刍动物急性败血性传染病，然而笔者在防治一起牛气肿疽疫情过程中发现，猪群也可以被气肿疽梭菌所感染，在治疗气肿疽梭菌感染的猪群过程中，采用治疗牛羊气肿疽的方法，同样能够收到良好的治疗效果。

关键词：气肿疽梭菌感染病例猪群诊治败血性传染病治疗效果反刍动物厌氧菌

与气肿疽棱菌有关的牛心包炎和脑膜炎的病理学变化

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动物医学进展 1987年第6期 35-36页

作者： F.E.Malone 江萍

两年多来,研究了29例牛的气肿疽梭菌感染。14例仅有肌炎病变,8例同时有肌炎和纤维素性心包炎,6例仅有纤维素性心包炎,余1例仅见化脓性脑膜炎病变。应用荧光抗体技术在所有病变中均鉴定出气肿疽梭菌。气肿疽梭菌（Colstridium Chauvoei... 详细信息

两年多来,研究了29例牛的气肿疽梭菌感染。14例仅有肌炎病变,8例同时有肌炎和纤维素性心包炎,6例仅有纤维素性心包炎,余1例仅见化脓性脑膜炎病变。应用荧光抗体技术在所有病变中均鉴定出气肿疽梭菌。气肿疽梭菌（Colstridium Chauvoei）是世界上很多地区牛坏疽性肌炎（黑腿病）的一种已被;充认识的病原。肌肉病损已有详细描述,但有关气肿疽梭菌在其他组织引起病损的详细描述却很少,至今尚无死于气肿疽梭菌感染的动物脑和脊髓研究方面的报告。

关键词：气肿疽梭菌病变病损病例气肿疽梭状芽孢杆菌纤维素性心包炎荧光抗体技术荧光抗体法免疫技术

环青海湖地区牦牛气肿疽的流行情况及综合防制

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中国畜牧兽医 2010年第7期37卷 207-208页

作者：董永鸿李万财许正林青海省天峻县快尔玛乡兽医站天峻817200 青海省天峻县兽医站天峻817200

气肿疽(emphysematous gangrene)又称黑腿病、鸣疽,是由气肿疽梭菌(Clostridium chauvoei)引起的反刍动物的一种急性、热性、败血性传染病.病畜以轻度跛行、肌肉丰满部位(尤其是股部、肩部)发生炎性气性肿胀,压之有捻发音为主要特征.

关键词：气肿疽梭菌环青海湖地区综合防制流行情况牦牛败血性传染病反刍动物冬春季节

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气肿疽检测方法的比较

气肿疽检测方法的比较

作者：车松恩延边大学

学位级别：硕士

气肿疽(Clostridiumchauvoei),病原体为气肿疽梭菌,反刍动物易感。该病的典型发病特征为动物肌肉发生炎性肿胀,触压有捻发音,该病多发于春夏季天热多雨的气候,呈散发式流行。近年来,牛感染气肿疽的病例较为多见,这为肉牛经济的发展乃至... 详细信息

气肿疽(Clostridiumchauvoei),病原体为气肿疽梭菌,反刍动物易感。该病的典型发病特征为动物肌肉发生炎性肿胀,触压有捻发音,该病多发于春夏季天热多雨的气候,呈散发式流行。近年来,牛感染气肿疽的病例较为多见,这为肉牛经济的发展乃至整个畜牧业的生产带来了巨大的经济损失。为了针对不同的临床环境和检测需要,对疑似气肿疽病例进行快速、有效的诊断,在第一时间对疾病的流行和暴发进行控制。本研究应用4种方法对20例阳性样本进行检测。选择特异性较强的CctA基因作为PCR检测的目的基因,通过筛选最合适的退火温度,确定了最适合气肿疽检测的PCR检测方法。将气肿疽裂解后的菌体作为抗原,并优化了 ELISA检测法中的多种反应条件,进行气肿疽ELISA检测。利用抗原、抗体的特性,在免疫层析法的基础上以气肿疽胶体金免疫层析试纸条进行气肿疽的胶体金检测。通过纯化气肿疽梭菌有效抗原并免疫豚鼠作为一抗用于气肿疽梭菌双抗体夹心Dot-ELISA方法的检测。结果显示,本试验成功应用PCR、ELISA、胶体金及Dot-ELISA对气肿疽进行了临床检测,PCR及胶体金检测方法阳性检出率较高,检出率可达100%,ELISA及Dot-ELISA阳性检出率为85%。ELISA及Dot-ELISA检测方法特异性相对较低,灵敏度较高,适用于流行病学调查中的气肿疽检测。PCR检测方法在检测结果上具有较高的特异性和准确性,但在操作上对环境条件有较高的需求,适用于实验室中该病的检测。胶体金试纸条特异性较好,可长期在常温下放置,适用于基层单位和临床工作者,能够快速高效地检测大量样本。本研究为气肿疽的诊断提供了重要参考依据,为该病今后的防控和研究提供了可靠基础。

关键词：气肿疽梭菌检测方法检出率比较