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拟除虫菊酯类农药法医毒物动力学研究（一） ——氰戊菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯在家兔体内的死后分布研究

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拟除虫菊酯类农药法医毒物动力学研究（一） ——氰戊菊酯、甲氰...

作者：关培英山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1.建立家兔拟除虫菊酯类农药灌胃染毒致死模型。2.建立拟除虫菊酯类农药气相色谱、气相色谱/质谱联用检测方法。3.研究拟除虫菊酯类农药在灌胃染毒致死家兔体内的分布。方法:1.动物模型建立家兔24只,随机分为实验组(15只)和对照组(... 详细信息

目的:1.建立家兔拟除虫菊酯类农药灌胃染毒致死模型。2.建立拟除虫菊酯类农药气相色谱、气相色谱/质谱联用检测方法。3.研究拟除虫菊酯类农药在灌胃染毒致死家兔体内的分布。方法:1.动物模型建立家兔24只,随机分为实验组(15只)和对照组(9只),实验组分为氰戊菊酯组,甲氰菊酯组和氯氰菊酯组,分别经口灌胃染毒1.64g/kg、0.65g/kg和0.53g/kg,对照组家兔注入等体积生理盐水。2.观察从开始染毒到动物死亡的中毒症状。3.样品采集与处理家兔灌胃后,实验组家兔血压、呼吸和心电全部消失后,迅速解剖动物,取全部心血、外周血、胆汁、尿和部分心、肝、脾、肺、肾、脑、胃壁等组织,放置于-20℃冰箱内保存待检。另一部分心、肝、脾、肺、肾、脑、胃和肌肉等组织用4%甲醛固定,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下观察。4.拟除虫菊酯类农药分析样品经酸处理后,三氯甲烷萃取,气相色谱和气相色谱-质谱联用检测,根据三种拟除虫菊酯类农药各自的特征离子峰、保留时间定性与内标法、工作曲线法定量。结果:1.症状实验组家兔在经口灌胃后出现中毒症状,染毒后2-3h部分实验家兔出现湿毛,角弓反张,大小便失禁,痉挛,角膜反射减弱或消失,肌张力下降,呼吸减弱或消失。三种拟除虫菊酯农药染毒家兔分别于染毒后9.97±3.97h、6.37±2.71h和7.95±3.15h死亡。对照组家兔未出现以上症状,未死亡。拟除虫菊酯农药致死家兔主要脏器病理改变基本相似,为一般中毒表现。2.气相色谱法:本研究建立气相色谱检测生物样本中拟除虫菊酯类农药的方法,达到良好的分离,线性范围为2-400μg/g或μg/ml,最低检出浓度是0.125μg/g或μg/ml,回收率均在95%以上。3.家兔体内的拟除虫菊酯类农药分布实验组家兔体内拟除虫农药的平均含量从高到低依次为:氰戊菊酯组:胃壁、肝、脾、大脑、肺、胆汁、心、肾、周围血、心血;甲氰菊酯组:胃壁、肾、肝、大脑、心、脾、胆汁、肺、周围血、心血;氯氰菊酯组:胃壁、肝、肾、心、肺、尿、脾、大脑、周围血、心血胆汁。结论:1.本研究建立了三种拟除虫菊酯类农药灌胃染毒致死的动物模型,三种拟除虫菊酯农药染毒家兔分别于染毒后9.97±3.97h、6.37±2.71h和7.95±3.15h死亡。本模型可应用于拟除虫菊酯类农药意外死亡和中毒案件的法医学研究。2.三种拟除虫菊酯类农药经口灌胃致死家兔体内分布趋势分别为氰戊菊酯组:胃壁、肝、脾、大脑、肺、胆汁、心、肾、周围血、心血;甲氰菊酯组:胃壁、肾、肝、大脑、心、脾、胆汁、肺、周围血、心血;氯氰菊酯组:胃壁、肝、肾、心、肺、尿、脾、大脑、周围血、心血胆汁。为拟除虫菊酯类农药中毒致死案件的检材采取、检测、结果分析、死因判定及法医学鉴定提供科学依据。3.拟除虫菊酯类农药意外死亡和中毒案件进行法医学鉴定时,除常见检材心血和外周血外仍需采取肝、肾、胆汁、心、脾、脑等组织进行全面的农药定性和定量分析,并结合症状及体征发现进行综合判定。

关键词：拟除虫菊酯类农药中毒死后分布气相色谱/质谱联用气相色谱

甲胺磷的法医毒物动力学研究 ——甲胺磷在犬体内的死后分布、保存检材和埋葬尸体中的分解动力学

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甲胺磷的法医毒物动力学研究 ——甲胺磷在犬体内的死后分布、保...

作者：肖昆山西医科大学

学位级别：硕士

目的：1.建立犬甲胺磷死后分布、保存检材和埋葬尸体中的分解动力学动物模型;2.改进甲胺磷气相色谱检测,建立其GC-FPD、气相色谱／质谱联用检测方法;3.研究甲胺磷在犬体内的死后分布、保存检材中的分解动力学及埋葬尸体中的分解动力学... 详细信息

目的：1.建立犬甲胺磷死后分布、保存检材和埋葬尸体中的分解动力学动物模型;2.改进甲胺磷气相色谱检测,建立其GC-FPD、气相色谱／质谱联用检测方法;3.研究甲胺磷在犬体内的死后分布、保存检材中的分解动力学及埋葬尸体中的分解动力学。方法：1.甲胺磷在犬体内的死后分布研究：取犬6只,分别经口灌胃染毒8LD50甲胺磷农药,死后迅速解剖动物,取心、肝、脾、肺、肾、脑、胃壁、心血、胆汁、胸肌、右后肢肌肉、右前肢肌肉等组织,放置于-20℃冰箱内保存待检,样品经酸处理后,二氯甲烷萃取,气相色谱和气相色谱-质谱联用检测,根据甲胺磷的特征离子峰、保留时间定性与内标法、工作曲线法定量,研究犬体内的甲胺磷分布情况。2.甲胺磷在保存检材中的分解动力学研究：取犬3只,8倍LD50剂量甲胺磷灌胃染毒,死后立即解剖取肝和血,每只犬心血和肝分四等份,其中三份分别置于20℃、4℃、-20℃保存;另一份心血中加氟化钠至1%,另一份肝脏加4%甲醛溶液固定,20℃保存;分别于0小时、7天、16天、60天、180天检测其中甲胺磷含量。3.甲胺磷在埋葬尸体中的分解动力学研究(1)埋葬尸体中甲胺磷含量随时间变化：取健康犬30只,8倍LD50剂量甲胺磷灌胃染毒致死。0d的立即解剖取材,其余装入塑料袋,不封口,埋于太原市东山实验基地。分别于29天、58天、89天、139天、211天、225天挖出后,解剖,取材,GC-FPD、GC/MS法检测其中甲胺磷含量。(2)埋葬方式对甲胺磷在埋葬尸体中分解动力学的影响：取健康犬9只,8倍LD50剂量甲胺磷灌胃染毒致死后随机分成3组,分别装入塑料袋、编织袋和木箱(棺材)中埋于实验基地,75天后挖出解剖取材,检测其中甲胺磷的含量。(3)埋藏温度(季节)对甲胺磷在埋葬尸体中分解动力学的影响：健康犬6只,其中3只于09／3／28以8倍LD50剂量甲胺磷灌胃染毒致死后埋葬,于75天后(09／6／12)挖出,另3只同剂量同方式处死,于09／8／24埋葬,于75天(09／11／8)挖出。解剖取材,检测各脏器中甲胺磷含量。结果：1.死后分布：研究结果显示,8倍LD50灌胃致死犬体内甲胺磷浓度由高到低分别为胃(99.84±30.87μg／g)>脾(46.87±28.67μg/g)、肝(43.82±22.74μg/g)、肾(43.79±29.04μg/g)、心血(35.36±13.98μg／ml)、肺(35.25±18.59μg／g)、尿(34.81μg／g)＞胸肌(19.23±17.18μg／g)、右前肢(16.92±8.98μg／g)、心(15.09±6.11μg／gμg／g)、右后肢(12.83±7.63μg/g)、脑(10.91±4.13μg/g)>胆汁(6.75±1.45μg／ml)、玻璃体液(6.2263±4.97μg／ml)(t检验,p<0.05)。2.保存检材分解动力学：不同条件保存血和肝中甲胺磷含量均呈下降趋势,20℃、4℃、-20℃、20℃(1%NaF)保存第7天、16天、7天和4天犬血中甲胺磷含量显著下降至初始浓度的55.1±18.2%、16.8±6.6%、61.5±11.0%和4.2±3.5%(p<0.05);20℃、4℃、-20℃、20℃(4%甲醛)保存至7天、7天、16天、7天肝中甲胺磷含量显著下降至初始浓度的25.8±12.7,36.7±16.8%、51.2±14.1%和6.9±2.2%(p<0.05);20℃、4℃、-20℃、20℃(加NaF至1%)保存180天、180天、180天和12天犬血中甲胺磷浓度分别显者下降至最初浓度的0.2±0.2%、1.4±1.2%、4.5±2.1%和0.6±0.2%，20℃、4℃、-20℃、20℃(4%甲醛)保存180天时,肝脏中甲胺磷浓度分别显者下降至最初浓度的2.6±1.5%、2.9±1.1%、5.2±2.8%、2.1±0.3%。1%NaF血组外其余组分解符合一级动力学过程二室开放模型,可用Ct=Co-αt+Cle-βt表示。NaF血组分解符合一级动力学过程一室模型,可用Ct=Co-αt表示。20℃、4℃、-20℃、20℃(4%甲醛)保存肝脏中甲胺磷的快速分解半衰期(t1/2α)和慢速分解半衰期(t1／2B)分别为3.37天、9.46天、16.28天、1.38天和0天(无)、354.72天、195281.20天、113.93天;20℃、4℃、-20℃、20℃(1%NaF)保存血液中甲胺磷的快速分解半衰期(t1/2α)和慢速分解半衰期(t1/2β)分别是2.38天、14.42天、10.04天、0.68天和15.61天、47696.27天、

关键词：甲胺磷法毒物动力学死后分布毒物分解动力学 GC/MS GC-FPD

苯巴比妥的法医毒物动力学研究（二）——苯巴比妥的死后分布、死后弥散和分解动力学研究

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苯巴比妥的法医毒物动力学研究（二）——苯巴比妥的死后分布、死...

作者：韩亮山西医科大学

学位级别：硕士

目的 1.建立苯巴比妥死后分布、死后弥散和保存血液中的分解动力学研究(动物)模型;2.研究苯巴比妥在家兔体内的死后分布、死后弥散和保存血液中的分解动力学规律,为苯巴比妥中毒(死)案件的法医学鉴定提供实验依据。方法 1.苯巴比妥在家... 详细信息

目的 1.建立苯巴比妥死后分布、死后弥散和保存血液中的分解动力学研究(动物)模型;2.研究苯巴比妥在家兔体内的死后分布、死后弥散和保存血液中的分解动力学规律,为苯巴比妥中毒(死)案件的法医学鉴定提供实验依据。方法 1.苯巴比妥在家兔体内的死后分布研究：健康家兔6只,随机分为口服组和静脉注射组,分别经灌胃或耳缘静脉匀速注入LD50(0.34 mg/kg)苯巴比妥。观察给药后生命体征的变化以及中毒症状,待呼吸和心跳全部消失时,迅速解剖动物,取心血、心、肝、脾、肺、肾、脑、肌、尿、胆汁、玻璃体液冷冻保存,酸性乙醚提取,气相色谱质谱法定性、气相色谱定量检测苯巴比妥。 2.苯巴比妥在家兔体内的死后弥散研究：实验家兔30只,窒息处死,1小时后经灌胃匀速注入LD50(0.34mg/kg)苯巴比妥。21只置于常温,分别于3h、6h、12h、24h、48h、72h、96h各解剖3只;9只分别置于常温(20℃)、4℃、-20℃,4天后解剖。将所取心、肝、脾、肺、左肾、右肾、脑、左下肌、右下肌、心血、周围血、尿、玻璃体液、胆汁检材冷冻保存待检。酸性乙醚提取,气相色谱质谱法定性、气相色谱定量检测苯巴比妥。 3.苯巴比妥在保存血中的分解动力学研究：取空白人血1200 mL,平均分为12份,每份100 mL;将其分为4组,分别为20℃组、4℃组、-20℃组、20℃NaF(1%)添加组;每组分别添加治疗剂量(25μg/mL)、中毒剂量(100μg/mL)、致死剂量(150μg/mL)。分别于0d、7d、14d、21d、28d、42d、56d、105d、147d、189d、231d各取1 mL,酸性乙醚提取,气相色谱质谱法定性、气相色谱定量检测苯巴比妥。 4.统计学方法：采用SPSS11.5统计软件处理数据,结果以均数±标准差(x±s)表示,方差分析及LSD检验。结果 1.死后分布：家兔苯巴比妥灌胃或静脉注射后均出现嗜睡症状,灌胃组家兔2.0±0.5h死亡,静脉注射组家兔2.0±0.1h死亡。各脏器组织中苯巴比妥含量由高到低分别为：①灌胃组：肝(183.22±11.19μg/g)>肾(143.45±13.02μg/g)>脑(115.47±6.92μg/g)、心(109.24±14.01μg/g)>肺(93.38±8.29μg/g)、心血(86.80±10.32μg/mL)>脾(69.69±12.36μg/g)、肌(66.14±4.63μg/g)、胆汁(65.52±4.56μg/g)、尿(52.04±9.62μg/mL)>玻璃体液(29.02±10.86μg/g);②静注组：尿(311.36±37.26μg/g)>肝(155.74±29.35μg/g)>脑(104.40±9.43μg/g)、心(96.96±18.91μg/g)、肾(91.13±2.06μg/g)、心血(89.81±8.32μg/mL)>胆汁(75.19±5.09μg/mL)、肌(62.69±6.67μg/g)、脾(57.38±17.06μg/g)>肺(41.32±8.80μg/g)、玻璃体液(29.60±8.56μg/mL) (LSD检验,P死后弥散：死后染毒家兔常温保存时,除3h、6h尿液未测出外,其余3-96小时内所有时间点所取检材中均检出苯巴比妥,并且心和肺、肝和脾的变化趋势相同。死后染毒家兔不同温度保存4天后,常温组(20℃)所取检材中均可检出苯巴比妥;4℃组除尿液、左/右下肢肌中未检出外,其他所取检材中均检出苯巴比妥;-20℃组除玻璃体液、尿液、脑、左/右下肢肌未检出外,其他所取检材中均检出苯巴比妥。 3.分解动力学：不同保存条件下,血中添加苯巴比妥浓度均可降低,其分解均符合一级动力学过程,可用公式Ct=D/V*EXP(-K10*t)表示。20℃保存7天和231天,治疗浓度组、中毒浓度组、致死浓度组血中苯巴比妥浓度分别下降为初始浓度的76.59%、93.58%、88.69%和5.15%、3.60%、5.02%(P<0.05),其分解半衰期为70.9天、61.1天、36.6天;4℃保存14天和231天治疗浓度组、中毒浓度组、致死浓度组血中苯巴比妥浓度分别下降为初始浓度的78.72%、90.33%、84.28%和20.14%、22.78%、19.50%(P<0.05),其分解半衰期为105.7天、97.4天、88.5天;-20℃保存21天和231天,治疗浓度组、中毒浓度组、致死浓度组血中苯巴比妥浓度分别下降为初始浓度的83.28%、91.29%、82.75%和35.05%、35.71%、30.20%(p<0.05),其分解半衰期为172.2天、147.5天、143.8天;20℃添加1%NaF时保存7和231天,治疗浓度组、中毒浓度组、致死浓度组血中苯巴比妥浓度分别下

关键词：苯巴比妥法医毒物动力学死后分布死后弥散分解动力学

石房蛤毒素在生物样本中的检验方法及死后分布研究

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石房蛤毒素在生物样本中的检验方法及死后分布研究

作者：张曌山西医科大学

学位级别：硕士

目的:通过建立生物样本中石房蛤毒素及其代谢物脱氨甲酰基石房蛤毒素、新石房蛤毒素的提取方法和超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,为实际中毒案件中毒素的检测提供依据,实现在血、尿、肝等生物组织中相关毒素的快速定性定... 详细信息

目的:通过建立生物样本中石房蛤毒素及其代谢物脱氨甲酰基石房蛤毒素、新石房蛤毒素的提取方法和超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,为实际中毒案件中毒素的检测提供依据,实现在血、尿、肝等生物组织中相关毒素的快速定性定量检测;通过构建急性中毒大鼠模型,研究不同给药方式、不同给药剂量下石房蛤毒素及其代谢物在大鼠血中浓度随时间的变化过程,为中毒案件取材时间提供参考,为后续相关实验提供数据参考;通过研究石房蛤毒素及其代谢物在中毒死亡大鼠体内分布情况,获得各组织中毒物浓度数据,为中毒(死亡)案件检材的选取提供依据。方法:1.提取、检测方法取待测血液样品0.2m L,加入0.6m L乙腈-0.1%乙酸甲醇(1:3,v:v),震荡、离心后取上清过膜检测。取尿液样品0.2m L,用1m L甲醇(含0.5%乙酸)提取,震荡、离心后取上清液,加入活化后的PA固相萃取柱,用含0.5%乙酸的甲醇-水(2:8,v:v)溶剂洗脱,洗脱液过膜后进样。肝脏组织(研磨)加入稀磷酸盐缓冲溶液,震荡、离心后取上清液,加入活化后的Oasis WCX固相萃取柱,用去离子水和乙腈淋洗,甲醇(含4%甲酸)洗脱,洗脱液过膜后进样。UPLC-MS/MS方法检测,以目标物的保留时间和离子对的相对丰度比定性,外标曲线法定量。2.动物实验2.1受试动物健康雄性大鼠(200±20g)(由斯贝福北京生物技术有限公司提供)。2.2石房蛤毒素急性中毒大鼠模型2.2.1经口灌胃动物模型:低剂量组:取健康雄性大鼠12只,随机分为4组:空白组3只,6μg/kg、9μg/kg和18μg/kg剂量组各3只。适应性喂养一周,实验前一天禁食。经口灌胃给药,空白组给予等量生理盐水,观察中毒症状。给药后于5min、10min、30min、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h内眦静脉丛采血0.2m L,7h后处死大鼠,实验过程中收集尿液,-20℃保存待检。高剂量组:取健康雄性大鼠12只,随机分为4组:空白组3只,36μg/kg、72μg/kg和108μg/kg剂量组各3只,其余操作同上。2.2.2经尾静脉注射动物模型:取健康雄性大鼠18只,将大鼠随机分组:12μg/kg、9μg/kg、6μg/kg、4μg/kg、3μg/kg剂量给药组和空白组各3只。适应性喂养一周,实验前一天禁食,大鼠尾静脉注射给药,空白组给予等量生理盐水,观察中毒症状。给药后于1min、5min、10min、30min、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、4h、5h、6h内眦静脉丛采血0.2m L,6h后处死大鼠,实验过程中收集尿液和大鼠死亡时心血,-20℃保存待检。2.3死后分布模型取健康雄性大鼠(200±20g)12只,适应性喂养一周,实验前隔夜禁食,6只为空白对照,剩下尾静脉注射给予12μg/kg剂量的STX,空白组给予等量生理盐水,观察中毒症状,大鼠死后立即解剖取心、肝、脾、肺、肾、胃壁、脑、右下肢肌肉、心血、尿液等,-20℃保存待检。3.数据处理含量用均数±标准差表示,采用Graphpad Prism 8.3.0软件处理数据和作图。结果:1.石房蛤毒素及其代谢物的UPLC-MS/MS检测:经检测,血添加样品中,石房蛤毒素、脱氨甲酰基石房蛤毒素和新石房蛤毒素分别在0.5～100ng/m L、1～100ng/m L、1～100ng/m L范围内线性关系良好,相关系数(r)≥0.996,毒素的检出限LOD分别为0.1ng/m L、0.5ng/m L、0.5ng/m L,定量限LOQ分别为0.5ng/m L、1ng/m L、1ng/m L。方法的回收率为63.23%～81.77%,日内精密度为3.06%～9.58%,日间精密度为3.87%～9.96%,准确度为91.67%～102.42%。尿添加样品中,三种毒素均在1～100ng/m L范围内成良好线性关系,相关系数(r)≥0.996,LOD为0.5ng/m L,LOQ为1ng/m L,回收率为65.3%～74.34%,日内精密度为3.18%～6.79%,日间精密度为5.60%～7.81%,准确度为96.25%～101.25%。肝添加样品中,石房蛤毒素、脱氨甲酰基石房蛤毒素和新石房蛤毒素分别在2～100ng/g、5～100ng/g、5～100ng/g范围内线性关系良好,相关系数(r)=0.994,LOD分别为1ng/g、3ng/g、2ng/g,LOQ分别为2ng/g、5ng/g、5ng/g。方法的回收率为71.10%～112.01%,日内精密度为1.69%～6.08%,日间精密度为4.07%～8.08%,准确度为97.64%～105.51%。2.石房蛤毒素在急性中毒大鼠血中的浓度变化研究:经口灌胃给药:低剂量组大鼠无明显中毒反应,血中未检出原体及代谢物;高剂量大鼠有精

关键词：法医毒物分析石房蛤毒素超高效液相色谱-串联质谱法死后分布

瑞芬太尼及其代谢物的毒物代谢动力学和死后分布研究

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瑞芬太尼及其代谢物的毒物代谢动力学和死后分布研究

作者：李文越山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1.建立同时检测生物检材中瑞芬太尼及其代谢物瑞芬太尼酸的高效液相色谱串联质谱检测方法。2.研究瑞芬太尼和瑞芬太尼酸在大鼠体内的毒物代谢动力学,获得毒物代谢动力学方程和参数;探究瑞芬太尼的浓度、瑞芬太尼酸的浓度和瑞芬太尼... 详细信息

目的:1.建立同时检测生物检材中瑞芬太尼及其代谢物瑞芬太尼酸的高效液相色谱串联质谱检测方法。2.研究瑞芬太尼和瑞芬太尼酸在大鼠体内的毒物代谢动力学,获得毒物代谢动力学方程和参数;探究瑞芬太尼的浓度、瑞芬太尼酸的浓度和瑞芬太尼酸/瑞芬太尼浓度比与吸毒时间的关系,推断吸毒时间方程。3.研究瑞芬太尼和瑞芬太尼酸在大鼠体内的死后分布,为静脉注射瑞芬太尼中毒和致死案件中检材的提取提供实验依据。方法:1.检测方法:生物检材中添加50%柠檬酸,混匀后,加入内标瑞芬太尼-C,然后用乙腈沉淀蛋白,采用高效液相色谱串联质谱仪进行检测,用保留时间和离子对的相对丰度比进行定性,用内标法进行定量。2.动物模型:2.1毒物代谢动力学模型:选用体重为220±20g健康SD雄性大鼠10只,适应性喂养9天,于实验前一天禁止进食。将大鼠随机分为两组:1/4LD组(5只)、1/2LD组(5只),于尾静脉注射给药后1min、3min、5min、10min、30min、1h、2h、3h、4h、6h、7h、8h、9h、11h眼静脉取血800μL,取出200μL留作血液样本,剩余血液制成血浆样本,于-80℃保存待检。2.2死后分布模型:选用体重为220±20g健康SD雄性大鼠12只,适应性喂养9天,于实验前一天禁止进食。将大鼠随机分为两组:2LD组(6只)、LD组(6只),尾静脉注射给药,待呼吸、心跳等生命体征消失后(在给药10min后生命体征未消失的大鼠,于10min脱颈处死),迅速进行解剖,立即取心、肝、胃壁、外周血、脾、肺、右下肢肌肉、肾、大脑、心血、睾丸,于-80℃密封保存。3.数据处理:通过DAS3.2.8药代动力学软件获得瑞芬太尼和瑞芬太尼酸的毒物代谢动力学方程和参数;通过回归分析对瑞芬太尼的浓度、瑞芬太尼酸的浓度及瑞芬太尼酸/瑞芬太尼浓度比与吸毒时间的关系进行拟合,获得吸毒时间推断方程。运用MATLAB R2016b软件进行吸毒时间推断;使用Graphpad Prism8.0.2进行统计学分析和作图。结果:1.瑞芬太尼和瑞芬太尼酸的检测方法:在血液中,瑞芬太尼的线性范围为0.01～200ng/m L,决定系数(R)大于0.995,最低检出限(LOD)是0.005ng/m L,最低定量限(LOQ)是0.01ng/m L;瑞芬太尼酸的线性范围为0.01～200.00ng/m L,R大于0.995,LOD是0.002ng/m L,LOQ是0.01ng/m L。在血浆中,瑞芬太尼的线性范围是0.01～200.00ng/m L,R大于0.995,LOD是0.002ng/m L,LOQ是0.01ng/m L;瑞芬太尼酸的线性范围是0.5～200.00ng/m L,R大于0.995,LOD是0.001ng/m L,LOQ是0.006ng/m L。在肝脏中,瑞芬太尼的线性范围为0.5～200ng/m L,R大于0.995,LOD是0.01ng/m L,LOQ是0.03ng/m L;瑞芬太尼酸的线性范围为0.05～200ng/m L,R大于0.995,LOD是0.01ng/m L,LOQ是0.02ng/m L。日内精密度和日间精密度均小于19.2%,准确度处于87%～119%之间。瑞芬太尼的相对提取回收率均大于103.6;瑞芬太尼酸均大于70.5%。瑞芬太尼的基质效应处于85.7～103%之间;瑞芬太尼酸处于61～137%之间。经前处理后的样品在室温下存放24h、48h后,瑞芬太尼和瑞芬太尼酸均比较稳定。2.瑞芬太尼和瑞芬太尼酸的毒物代谢动力学:不同剂量瑞芬太尼经大鼠尾静脉注射给药后,瑞芬太尼和瑞芬太尼酸均可在血液、血浆中检出。在血液、血浆中,低剂量组瑞芬太尼在4h内可以检出,高剂量组瑞芬太尼在9h内可以检出;而瑞芬太尼酸的检出时限较长,不同剂量组瑞芬太尼酸在11h内均可以检出。在血液中,低剂量组瑞芬太尼符合一级吸收二室开放模型,拟合方程为C=107.16*e+18.29*e;瑞芬太尼酸符合一级吸收三室开放模型,拟合方程为C=1166.76*e+5752.89*e+96.32*e。高剂量组瑞芬太尼符合一级吸收三室开放模型,拟合方程为C=50.91*e+59.88*e+10.32*e;瑞芬太尼酸符合一级吸收一室开放模型,拟合方程为C=7443.42*e-0.84*t。在血浆中,低剂量组瑞芬太尼符合一级吸收三室开放模型,拟合方程为C=93.4*e+19.75*e+3.18*e;瑞芬太尼酸符合一级吸收三室开放模型,拟合方程为C=2861.12*e+6186.06*e+1140.84*e。高剂量组瑞芬太尼符合一级吸收两室开放模型,拟合方程为C=102.42*e+15.58*e;瑞芬太尼酸符合一级吸收一室开放模型,拟合方程为C=13531.61*e。3.瑞芬太尼吸毒时间的推断:本研究比

关键词：法医毒物动力学毒物代谢动力学死后分布瑞芬太尼瑞芬太尼酸

普罗帕酮在家兔体内的死后分布、死后弥散及保存犬检材中的分解动力学研究

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普罗帕酮在家兔体内的死后分布、死后弥散及保存犬检材中的分解动...

作者：王莉山西医科大学

学位级别：硕士

目的1.建立普罗帕酮死后分布、死后弥散研究动物模型;建立保存检材中分解动力学研究(动物)模型。2.研究普罗帕酮在家兔体内的死后分布、死后弥散及保存犬检材中的分解动力学规律,为普罗帕酮中毒(死)案件的法医学鉴定提供实验依据。方法1... 详细信息

目的1.建立普罗帕酮死后分布、死后弥散研究动物模型;建立保存检材中分解动力学研究(动物)模型。2.研究普罗帕酮在家兔体内的死后分布、死后弥散及保存犬检材中的分解动力学规律,为普罗帕酮中毒(死)案件的法医学鉴定提供实验依据。方法1.死后分布：9只家兔按8LD50剂量普罗帕酮(440mg／kg)灌胃染毒,待血压、呼吸和心电全部消失后,迅速提取心、肝、脾、肺、肾、脑、右下肢肌、心血、尿、胆汁、玻璃体液冷冻保存,高效液相色谱(HPLC)内标法定量检测普罗帕酮含量。2.死后弥散：家兔15只,随机分成5组。夹闭气管处死后1小时,按8LD50剂量普罗帕酮(440mg／kg)灌胃染毒,置于室温,分别于染毒后4h、8h、12h、18h、24h各随机解剖3只动物,取心血、胆汁、尿、玻璃体液、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、左肾、右肾、脑,置于-20℃冰箱内保存。HPLC法检测检材中普罗帕酮含量。3.保存检材中的分解动力学：6只犬按4LD50剂量灌胃。1小时后处死动物,分别提取心血和肝。每只犬心血和肝分三等份分别置于20℃、4℃、-20℃冰箱内保存;分别于0小时、24小时、72小时、5天、7天、30天、60天、120天、180天、240天、300天,采用HPLC法检测其中普罗帕酮含量;WinNorLin药代动力学软件处理保存检材平均药物浓度-时间数据,AIC信息判据判定动力学模型,计算消除动力学方程和参数。4.统计方法：实验所得数据用均数±标准差(x±s)表示,多样本均数比较采用方差分析,各组数据用SPSS 11.5软件进行t检验。结果1.死后分布染毒死亡家兔体内普罗帕酮含量由大到小依次为：胆汁(109.59±66.25μg/mL)>肺(78.60±37.82μg/g)>肝(47.11±53.90μg/g)>肾(20.57±12.78μg/g)>脾(20.09±15.02μg/g)>尿(20.05±18.85μg/mL)>心血(12.99±15.87μg/mL)>心(7.47±10.63μg/g)>脑(5.62±5.99μg/g)>玻璃体液(2.10±3.51μg/mL)>右下肢肌肉(1.96±1.61μg/g)。2.死后弥散家兔死后普罗帕酮染毒,除玻璃体液和脑在4小时未检出外,其他所取检材中均检出普罗帕酮。肝、脾、右肾、左肾、尿、肌肉(右下肢)中普罗帕酮含量在死后染毒12小时达高峰,继后下降;玻璃体液、胆汁、肺、脑、心、心血、胸肌中普罗帕酮含量在死后染毒18小时达高峰。其中胆汁、脑、心中普罗帕酮含量在死后染毒24小时内呈时间依赖性递增,而玻璃体液、肺、心血、胸肌中普罗帕酮含量在死后染毒18小时后呈下降趋势。死后染毒4-8小时内,家兔各组织(体液)中普罗帕酮最高浓度均较染毒致死家兔低(P0.05),20℃、40℃和-20℃保存7天后检材中普罗帕酮含量均呈时间依赖性递减,肝脏和血液中分别由0时的100%减至37.77±5.93%、38.63±8.65%、42.81±20.27%(P死后分布、死后弥散、保存检材中分解动力学动物模型;建立了生物检材中普

关键词：普罗帕酮死后分布死后弥散分解动力学 HPLC

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普罗帕酮在家兔体内的死后分布

中西医结合心脑血管病杂志 2012年第10期10卷 1235-1236,1241页

作者：朱培培杨泽国王莉严鹏贠克明山西医科大学法医学院山西省河津市公安局

目的观察普罗帕酮在家兔体内的死后分布特点。方法家兔按8LD50剂量普罗帕酮(440mg/kg)灌胃染毒,待血压、呼吸和心电全部消失后,迅速提取胆汁、肺、肝、肾、脾、尿、心血、心、脑、玻璃体液、右下肢肌肉组织冷冻保存,高效液相色谱(HPLC)... 详细信息

目的观察普罗帕酮在家兔体内的死后分布特点。方法家兔按8LD50剂量普罗帕酮(440mg/kg)灌胃染毒,待血压、呼吸和心电全部消失后,迅速提取胆汁、肺、肝、肾、脾、尿、心血、心、脑、玻璃体液、右下肢肌肉组织冷冻保存,高效液相色谱(HPLC)内标法定量检测普罗帕酮含量。结果染毒死亡家兔体内普罗帕酮含量由大到小依次为:胆汁(109.59μg/g±66.25μg/g)>肺(78.59μg/g±37.82μg/g)>肝(47.11μg/g±53.97μg/g)>肾(20.57μg/g±12.78μg/g)>脾(20.09μg/g±15.02μg/g)>尿(20.05μg/g±18.85μg/g)>心血(12.99μg/g±15.87μg/g)>心(7.47μg/g±10.63μg/g)>脑(5.62μg/g±5.99μg/g)>玻璃体液(2.10μg/g±3.51μg/g)>右下肢肌肉(1.96μg/g±1.61μg/g)。结论普罗帕酮在家兔体内分布不均匀,毒物分析中除采取心血,还应采取胃、胆汁、肺、肝等药物分布量高的脏器,进行全面定性和定量分析。

关键词：法医毒理学普罗帕酮死后分布高效液相色谱

溴敌隆及其代谢物-苄叉丙酮在犬体内的死后分布

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中国法医学杂志 2017年第3期32卷 294-297页

作者：赵丹玭杨泽国尉志文傅善林刘良贠克明山西医科大学法医学院山西太原030001 河津县公安局山西河津044300 悉尼科技大学法庭科学中心华中科技大学同济医学院法医学系武汉430030

目的研究溴敌隆及其代谢物-苄叉丙酮在中毒致死犬体内死后分布规律,为溴敌隆中毒检材的采取提供实验依据。方法分别经口给予犬2倍和4倍LD_(50)溴敌隆,待其死亡后迅速解剖取材,气相色谱-质谱联用法测定心血、外周血、尿、胆汁、心、肝、... 详细信息

目的研究溴敌隆及其代谢物-苄叉丙酮在中毒致死犬体内死后分布规律,为溴敌隆中毒检材的采取提供实验依据。方法分别经口给予犬2倍和4倍LD_(50)溴敌隆,待其死亡后迅速解剖取材,气相色谱-质谱联用法测定心血、外周血、尿、胆汁、心、肝、脾、肺、肾、脑、左下肢肌、膀胱、胃、胃内容、胰等脏器和体液中溴敌隆和代谢物-苄叉丙酮的含量。结果犬经2倍和4倍LD_(50)溴敌隆灌胃染毒后3d开始出现出血症状,(178.40±20.94)h后死亡。溴敌隆和代谢物-苄叉丙酮在各组织脏器及体液中的死后分布为:溴敌隆2LD_(50)组溴敌隆:胆汁>尿、肝、心、肾>心血、外周血、脾、肺等;苄叉丙酮:胆汁、尿、心血、外周血、肺、胃内容中含量高于其他脏器。溴敌隆4LD_(50)组溴敌隆:胆汁、尿>肝、外周血>心血、胃内容物等脏器。苄叉丙酮:胆汁、尿、肺浓度高于其他脏器。结论溴敌隆及其代谢物-苄叉丙酮在中毒致死犬体内死后分布不均匀,溴敌隆在胆汁、尿、肝脏、心血和外周血含量较高,代谢物-苄叉丙酮在胆汁、尿、肺较高。胆汁、尿、肝脏、心血、外周血可作为疑似溴敌隆中毒毒物分析的检材。

关键词：法医毒物分析死后分布溴敌隆代谢物-苄叉丙酮 GC-MS/MS

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异烟肼在家兔体内的死后分布研究

中西医结合心脑血管病杂志 2011年第12期9卷 1494-1496页

作者：常明亮任飞贠克明贾美娟山西医科大学重庆市公安局

目的研究异烟肼在灌胃中毒致死家兔体内的分布规律,为异烟肼中毒致死案件的检材采取、检测、结果分析、死因判定及法医学鉴定提供科学依据。方法动物模型建立:家兔6只,经口灌胃染毒2倍LD50为0.56mg/kg。观察从开始染毒到动物死亡的中毒... 详细信息

目的研究异烟肼在灌胃中毒致死家兔体内的分布规律,为异烟肼中毒致死案件的检材采取、检测、结果分析、死因判定及法医学鉴定提供科学依据。方法动物模型建立:家兔6只,经口灌胃染毒2倍LD50为0.56mg/kg。观察从开始染毒到动物死亡的中毒症状。样品采集与处理实验组家兔灌胃后,待血压、呼吸和心电全部消失后,迅速解剖,分别取心血、部分心、肝、脾、肺、肾、脑、胃壁、肌肉等组织,置于-20℃冰箱内保存待检。衍生化薄层色谱扫描和高效液相色谱检测:体液、组织样品经水杨醛衍生化处理后,经乙酸乙酯萃取,氯仿∶甲醇(9∶1)展开后,薄层色谱扫描法定性检测其中异烟肼;经水杨醛衍生化处理后,以磷酸二氢钾-甲醇(65∶35)为流动相,高效液相色谱分析,外标法定量检测其中异烟肼。结果异烟肼2倍LD50剂量中毒致死家兔心、肝、脾、肺、肾、胃、脑、肌肉、血、玻璃体液内的异烟肼的含量分别为(31.22±16.15)μg/g(μg/mL)、(18.50±12.61)μg/g、(25.62±1.37)μg/g、(20.89±5.18)μg/g、(52.98±8.60)μg/g、(131.59±15.30)μg/g、(28.20±8.50)μg/g、(20.30±7.50)μg/g、(45.40±12.20)μg/g、(40.80±16.30)μg/g,其异烟肼含量由高到低排列顺序为:胃>肾>血>玻璃体液>心>脑>脾>肺>肌肉>肝,差异有统计学意义(P死后分布与LD50剂量染毒家兔后的死后分布不同,提示不同剂量染毒家兔体内异烟肼死后分布趋势不同,异烟肼中毒(死)案件法医学鉴定时,宜采取肾、玻璃体液、脑等受剂量影响小的脏器,并应考虑中毒量及中毒死亡时间,进行全面定性和定量分析。

关键词：异烟肼死后分布衍生化薄层色谱扫描高效液相色谱