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脉冲电磁场对椎间盘退行性病变大鼠A2A腺苷受体及p38 MAPK信号通路的影响

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中华物理医学与康复杂志 2023年第9期45卷 769-775页

作者：黎清波蔡磊王正坤方为志周传坤周逸驰姚智魏梦诚张诗爽刘伟军武汉市第四医院脊柱科武汉430030 华中科技大学同济医学院武汉430030 江汉大学医学院武汉430056

目的观察脉冲电磁场(PEMF)对椎间盘退行性病变(IDD)大鼠A2A腺苷受体(A2AR)及p38 MAPK信号通路的影响。方法采用随机数字表法将40只SD大鼠分为对照组、IDD模型组(简称模型组)、PEMF组和PEMF联合CGS-21680治疗组(简称观察组)。将模型组、P... 详细信息

目的观察脉冲电磁场(PEMF)对椎间盘退行性病变(IDD)大鼠A2A腺苷受体(A2AR)及p38 MAPK信号通路的影响。方法采用随机数字表法将40只SD大鼠分为对照组、IDD模型组(简称模型组)、PEMF组和PEMF联合CGS-21680治疗组(简称观察组)。将模型组、PEMF组及观察组大鼠制成IDD动物模型,PEMF组于制模后给予PEMF干预,观察组则给予PEMF干预并注射A2AR激动剂CGS-21680。于造模8周后采用番红O-快绿染色评估各组大鼠椎间盘病理改变,同时检测各组大鼠椎间盘A2AR、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、基质金属蛋白酶-3(MMP3)表达水平。结果模型组大鼠髓核组织皱缩,纤维成分及软骨细胞增多,观察组大鼠髓核形态基本趋于正常,纤维环完整无破裂。模型组椎间盘组织A2AR蛋白表达及mRNA水平均高于对照组,观察组A2AR蛋白表达及mRNA水平均显著高于其他各组(P椎间盘cAMP含量及PKA mRNA表达均较模型组增高,且观察组与模型组间差异具有统计学意义(P椎间盘p38 MAPK、p-p38 MAPK含量及p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均显著高于对照组(P病变的重要原因之一。PEMF联合A2AR激动剂干预能激活A2AR/cAMP/PKA信号通路,进而抑制p38 MAPK磷酸化,减少髓核细胞凋亡,缓解IDD损伤。

关键词：脉冲电磁场 A2A腺苷受体 p38 MAPK 椎间盘退行性病变

夹脊电针对腰椎间盘退行性病变兔模型椎间盘髓核蛋白聚糖表达的影响

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中国中西医结合杂志 2018年第2期38卷 223-226页

作者：邹璟姜梦雅李解黄国付武汉市第一医院针灸科武汉430000 湖北省新华医院康复科武汉430000 武汉市武昌医院针灸科武汉430000

目的观察夹脊电针对腰椎间盘退行性病变(LDD)兔模型腰椎间盘髓核蛋白聚糖表达的影响。方法 40只新西兰兔随机分为正常组、假手术组、模型组和治疗组,组内分为28d、56d两个取材时间点作为亚组,每个亚组5只。轴向压力诱导LDD后行L4、L5夹... 详细信息

目的观察夹脊电针对腰椎间盘退行性病变(LDD)兔模型腰椎间盘髓核蛋白聚糖表达的影响。方法 40只新西兰兔随机分为正常组、假手术组、模型组和治疗组,组内分为28d、56d两个取材时间点作为亚组,每个亚组5只。轴向压力诱导LDD后行L4、L5夹脊穴电针干预28d,各组于28d、56d取椎间盘组织,Western Blot法检测二聚糖(BGN)及核心蛋白多糖(DCN)蛋白表达。结果与正常组同期比较,假手术组各时间点BGN及DCN蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);模型组28d、56dBGN及DCN蛋白表达降低(P椎间盘髓核组织中蛋白聚糖的表达防治LDD。

关键词：电针夹脊穴椎间盘退行性病变二聚糖核心蛋白多糖

Tenascin-C在椎间盘退行性病变中的作用及机制研究

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中国医科大学学报 2020年第6期49卷 546-550,555页

作者：丁萌萌贾儒林赵平中国医科大学附属盛京医院麻醉科沈阳110004 中国刑事警察学院法医系沈阳110854

目的通过观察Tenascin-C(TNC)在椎间盘退行性病变(DDD)中的表达变化,探讨TNC在椎间盘退行性病变中的作用及机制。方法实时PCR和Western blotting检测人髓核细胞和小鼠椎间盘细胞在炎性条件下TNC、胶原蛋白Ⅱ和蛋白聚糖的变化,酶谱法及... 详细信息

目的通过观察Tenascin-C(TNC)在椎间盘退行性病变(DDD)中的表达变化,探讨TNC在椎间盘退行性病变中的作用及机制。方法实时PCR和Western blotting检测人髓核细胞和小鼠椎间盘细胞在炎性条件下TNC、胶原蛋白Ⅱ和蛋白聚糖的变化,酶谱法及基质金属蛋白酶(MMP)活性检测MMP活性的变化。加入外源性TNC,研究TNC对DDD是否起到保护作用。体内实验验证TNC的表达情况及位置。结果在椎间盘发生退行性病变时,TNC表达增高,胶原蛋白Ⅱ和蛋白聚糖表达降低,MMP活性增高。加入外源性TNC后,胶原蛋白Ⅱ和蛋白聚糖表达增高,MMP活性降低。结论TNC能够调节MMP活性,对椎间盘细胞起保护作用。

关键词： Tenascin-C 细胞外基质蛋白椎间盘退行性病变炎症反应

多b值DWI在椎间盘退行性病变中的应用价值

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放射学实践 2018年第5期33卷 483-487页

作者：方纪成李丽胡军武万常华朱文珍华中科技大学同济医学院附属同济医院放射科武汉430030

目的:采用穿刺模型模拟椎间盘退行性病变,探讨双指数模型多b值DWI在椎间盘退变性病变中的应用价值。方法:选取18只雌性大鼠,每组3只,分为正常对照组及针刺3h、48h、3d、7d、10d共6组,针刺C_6/C_7或C_7/C_8尾椎椎间盘,采集其多b值DWI数... 详细信息

目的:采用穿刺模型模拟椎间盘退行性病变,探讨双指数模型多b值DWI在椎间盘退变性病变中的应用价值。方法:选取18只雌性大鼠,每组3只,分为正常对照组及针刺3h、48h、3d、7d、10d共6组,针刺C_6/C_7或C_7/C_8尾椎椎间盘,采集其多b值DWI数据。对获取的数据行Mann-Whitney U检验。结果:与正常对照组对比,针刺48h、3d、7d、10d组的ADC_(standard)、ADC_(slow)、DDC值差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论:ADC_(standard)、ADC_(slow)、DDC值等定量指标对反映椎间盘退行性病变的水分子扩散等特性有重要价值,且与病理过程有一定的相关性。

关键词：椎间盘退行性病变磁共振成像扩散加权成像双指数模型

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椎间盘退行性病变相关基因多态性的研究进展

中国中医骨伤科杂志 2016年第4期24卷 78-82页

作者：王想福王兴盛范有福孙凤岐甘肃省中医院兰州730050 甘肃省中医药研究院

椎间盘具有分散压力,维持椎间高度,允许节段运动的功能。其内结构类似于胶冻状的髓核,主要成分为蛋白聚糖（Poteoglycans,PG）,水份及胶原蛋白（Cllagens）。外层为纤维环（Anulus fibrosus,AF）是一个富含胶原蛋白的同心薄片状纤维软... 详细信息

椎间盘具有分散压力,维持椎间高度,允许节段运动的功能。其内结构类似于胶冻状的髓核,主要成分为蛋白聚糖（Poteoglycans,PG）,水份及胶原蛋白（Cllagens）。外层为纤维环（Anulus fibrosus,AF）是一个富含胶原蛋白的同心薄片状纤维软骨结构。胶原蛋白在AF内主要是I型,主要作用为抗张力及保持结构的稳定。

关键词：椎间盘退行性病变基因多态性

腰椎间盘退行性病变的生物学干细胞治疗研究进展

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腰椎间盘退行性病变的生物学干细胞治疗研究进展

作者：王熙瀚北京中医药大学

学位级别：硕士

研究背景由于腰椎间盘退行性病变(Disc Degenerative Diseases, DDD)导致的腰椎间盘突出、腰椎管狭窄等疾病是骨科门诊的常见病。随着我国老龄化社会的到来,腰椎退行性疾患对人民健康已构成威胁并严重影响患者的生活质量。伴随机械化... 详细信息

研究背景由于腰椎间盘退行性病变(Disc Degenerative Diseases, DDD)导致的腰椎间盘突出、腰椎管狭窄等疾病是骨科门诊的常见病。随着我国老龄化社会的到来,腰椎退行性疾患对人民健康已构成威胁并严重影响患者的生活质量。伴随机械化及电脑办公的普及,长期以坐姿进行工作的人越来越多,由此导致的腰椎间盘突出症患者呈上升趋势,且发病趋于年轻化,因此腰椎间盘退行性病变已成为当今研究的热点问题。椎间盘退变是困扰骨科医生的问题之一,椎间盘一旦退变难以逆转。目前的治疗方法有保守治疗和手术治疗。腰椎间盘退变及突出症的保守治疗方法很多,其中药物治疗方面,无外乎使用非甾体抗炎药(NSAIDs)及活血镇痛中成药等用以缓解疼痛症状,随着椎间盘退变的进一步加重,症状严重的许多患者将面临脊柱外科手术治疗,给患者在心理上和经济上带来严重的负担。因此,开发研制延缓腰推间盘退变过程及促进再生的治疗方法是新时代所需。而椎间盘的生物治疗正是这样一种很有潜力的治疗。研究对象在腰椎间盘生物治疗的研究方面,目前研究最为热门的是椎间盘组织工程学研究,近5年内的椎间盘组织工程研究中,干细胞治疗椎间盘退行性病变的研究成果丰富,对于干细胞治疗椎间盘退变的机制、干细胞及相关辅助材料的获得、植入干细胞的方案以及临床应用的相关问题有较多进展。相比于5年前的椎间盘组织工程研究成果,近5年更多的是干细胞具体应用的研究,包括干细胞植入的适应症、干细胞植入方法、植入的安全性、植入细胞的存活及分化控制。目前细胞治疗属于生物治疗的一部分,本篇综述主要通过文献研究椎间盘退行性病变的细胞治疗进展。对近五年的文献研究发现,细胞治疗的生物学基础研究已较完善,包括细胞的选择、支架材料的研究、细胞信号因子的作用以及评价方法的研究;而对于临床应用细胞疗法的研究是近五年的热点。对细胞疗法的适应症的研究、细胞治疗的治疗周期、植入方式的安全性研究以及植入细胞的生长是临床中最为关注的问题;在国外文献中已经有相当大量的研究支持细胞疗法的临床应用。研究结论细胞疗法治疗椎间盘退行性病变是非常有吸引力的一种治疗方法,但是推广至临床应用前仍有许多问题需要探讨。将细胞送入椎间盘内的技术,目前最常用的是穿刺的方法,但是穿刺技术对椎间盘的损伤以及加速椎间盘退变存在潜在的风险。而目前对于干细胞在椎间盘中生存的营养供应与存活问题,拥有大量的动物实验证实,营养供应障碍的椎间盘是不适宜细胞治疗的。通过特定和MRI技术可以评价椎间盘的营养供应情况。临床推广细胞疗法目前仍不成熟,对于细胞疗法的适应症的界定仍无统一的方法,在细胞植入方法的安全性方面有待进一步研究。而细胞疗法漫长的治疗周期中,康复指导以及疗效检测评估也缺乏可靠的方案。

关键词：细胞治疗椎间盘退行性病变组织工程

N-乙酰半胱氨酸碳点纳米酶在椎间盘退行性病变中的应用研究

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N-乙酰半胱氨酸碳点纳米酶在椎间盘退行性病变中的应用研究

作者：吴尚扬州大学

学位级别：硕士

研究背景:下腰痛(Low back pain,LBP)是如今脊柱外科最为常见的临床症状之一,其病因相对复杂,下腰痛最常见的原因之一即为椎间盘退行性疾病。目前关于椎间盘退行性疾病发病机制尚未明确,治疗方法亦相对有限。已知椎间盘退变(Interverteb... 详细信息

研究背景:下腰痛(Low back pain,LBP)是如今脊柱外科最为常见的临床症状之一,其病因相对复杂,下腰痛最常见的原因之一即为椎间盘退行性疾病。目前关于椎间盘退行性疾病发病机制尚未明确,治疗方法亦相对有限。已知椎间盘退变(Intervertebral disc degeneration,IVDD)与氧化应激所导致的活性氧 ROS(Reactive oxygen species,ROS)动态平衡紊乱有关,抗氧化应激可能作为延缓椎间盘退行性病变进展的有效治疗方法之一。纳米酶作为一种具有类似天然酶活性的纳米材料,能够有效调节细胞内的ROS水平。本研究围绕椎间盘退变相关的氧化应激机制,同时结合基础研究手段,通过水热合成法开发了一种新型碳点纳米酶,即N-乙酰半胱氨酸碳点(NAC-CDs),并被证明是一种理想的抗氧化剂和抗衰老药物。我们的结果首次证实,与N-乙酰半胱氨酸(NAC)相比,NAC-CDs具有良好的生物相容性和较强的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和较高的总抗氧化能力。通过观察过氧化氢诱导的衰老髓核细胞中ROS的减少,证明了 NAC-CDs在体外具有很强的清除自由基和抗氧化能力,对毒性ROS的清除率可达90%以上。NAC-CDs还能维持线粒体动态平衡,抑制细胞衰老,进而抑制炎症因子的表达,从而重新平衡合成代谢和分解代谢。体内影像和组织学评价显示,应用NAC-CDs后,大鼠的椎间盘高度指数(DHI)、磁共振成像(MRI)分级和组织学评分均较退变模型明显改善,证实了 NAC-CDs对椎间盘退变的治疗作用。综上所述,我们的研究以观察到的临床现象和人椎间盘组织学方面的特征为开头,围绕着椎间盘的氧化应激这一机制,制备了一种新型碳点纳米酶,采用材料的表征检测、类酶活性的测定以及体内外的相关实验的方法,证实其通过清除ROS方式来抗氧化应激,从而有效地对抗髓核细胞衰老,延缓椎间盘退行性病变。这种新的纳米材料为临床治疗IVDD提供了一种潜在的策略。第一部分:腰椎间盘退变程度与组织内ROS水平之间的相关性目的:许多研究发现椎间盘退变和氧化应激密切关联,我们推测随着退变程度加重,人椎间盘髓核组织内氧化应激水平也随之发生变化。为了验证这一假设,本研究通过分析不同人群腰椎间盘的MRI影像学特点,并检测手术人群中椎间盘髓核组织标本的活性氧水平,探索人椎间盘影像学特点随着年龄的增长而发生的变化,以及退变程度与组织内活性氧ROS水平的相关性,从而验证靶向对抗氧化应激以延缓椎间盘退行性病变所具备的可行性。方法:①临床上回顾性分析不同人群的腰椎的MRI影像图像资料,纳入人群分为青、中、老年组,每个年龄组又分为正常人群及患有腰椎间盘突出症人群。采用Image-j软件,对这些人群的椎间盘髓核的磁共振T2WI信号强度进行统计分析。②针对人群中需要做手术的患者,采用MRI的Pfirrmann分级方式,对其椎间盘退变程度据进行等级的分类,并且通过收集分级为Ⅱ级和Ⅳ级术后的髓核组织标本来进行冰冻切片的制作,最后采用超氧化物阴离子的荧光探针(Dihydroethidium,DHE)对冰冻切片进行染色。结果:①MRI分析结果:随着年龄的增长,青年、中年、老年年龄组内没有腰椎间盘突出症人群的椎间盘(L4-5)髓核磁共振T2WI信号强度表现为降低势头。而相对于同年龄组内椎间盘的形态而言,患有腰椎间盘突出症患者的病变责任节段对应的椎间盘髓核信号强度降低更为明显。②对病变椎间盘组织(Pfirrmarm Ⅱ级和Ⅳ级)冰冻切片行DHE染色都呈现阳性,并且Pfirrmann Ⅳ级退变髓核组织内DHE染色阳性率比PfirrmannⅡ级更高(78.7±10%vs 40.7±8.1%,P椎间盘突出症人群之间椎间盘的影像学差异,磁共振T2WI信号强度分析数据表明椎间盘的髓核含水量随着年龄增大表现为逐渐下降的趋势,这一特征在腰椎间盘突出症患者身上表现地尤为显著,DHE的染色结果说明人椎间盘退变组织内存在着不同水平的氧化应激现象。通过进一步的临床数据整理分析提示了对抗氧化应激以延缓椎间盘的退变方法的可行性。第二部分:N-乙酰半胱氨酸碳点纳米酶的制备和表征及其生物相容性检测目的:在从临床治疗方面来说,目前天然存在或者后天合成的抗氧化剂药物在体内发挥效率低,且缺乏靶向特异性使其作用受到限制,因此,迫切需要探索高效抑制氧化应激的新药物和发现椎间盘退变(IVDD)治疗的新靶点。在纳米医学科技发展的进程中,具备类似天然酶活性的人工纳米酶因为自身的高效催化效应成为当前研究的焦点之一。与天然酶相比,纳米酶因其相对更高的物理和化学稳定性、更强的耐久性以及在恶劣环境中更低的成本而受到关注。各类人工纳米酶中,碳点(CDs)因其超小的尺寸

关键词：椎间盘退行性病变氧化应激核磁共振成像碳点 N-乙酰半胱氨酸纳米酶生物相容性髓核细胞活性氧线粒体衰老

干细胞移植前处理治疗椎间盘退行性病变研究进展

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国际骨科学杂志 2017年第5期38卷 299-302页

作者：殷翰林邓国英赵庆华上海交通大学附属第一人民医院骨科 201620

椎间盘退行性病变的治疗方案主要侧重于缓解疼痛症状,但无法阻止退行性病变进程。基于此,干细胞移植治疗成为该领域的研究热点,其中干细胞移植前处理对治疗效果起决定性作用。目前移植前处理方法包括髓核细胞共培养、生长因子处理、低... 详细信息

椎间盘退行性病变的治疗方案主要侧重于缓解疼痛症状,但无法阻止退行性病变进程。基于此,干细胞移植治疗成为该领域的研究热点,其中干细胞移植前处理对治疗效果起决定性作用。目前移植前处理方法包括髓核细胞共培养、生长因子处理、低氧处理、转染、组织工程复合体及力学刺激。髓核细胞共培养可促进干细胞向髓核细胞表型分化;生长因子种类及浓度可调控干细胞的生长、分化;低氧环境前处理可显著增强干细胞的抗逆境能力;基因转染可有效调节干细胞分化,并增强其旁分泌能力;组织工程复合体可改善微环境,从而有利于维持干细胞活性;力学刺激可正性调控骨髓间充质干细胞的软骨样分化。该文就干细胞移植前处理治疗椎间盘退行性病变研究进展作一综述。

关键词：椎间盘退行性病变干细胞移植前处理

生物学标记物靶点治疗策略在椎间盘退行性病变中的前景

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中国社区医师 2016年第35期32卷 14-15页

作者：康玉南曹永华济南市历城区彩石镇社区卫生服务中心 250103 章丘市第二人民医院 250200

调节椎间盘退行性病变朝向椎间盘的再生方面发展、促进椎间盘退行性病变再恢复依赖于重新恢复椎间盘本来的性质。本文阐述生物学标记物靶点治疗策略在椎间盘退行性病变中的前景。

关键词：生物学标记物靶点治疗椎间盘退行性病变