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肉桂子不同部位桂皮醛的含量比较及挥发性成分分析

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药品评价 2024年第4期21卷 417-420页

作者：徐载萍喻何云赵雯杨莘锴万林春江西省药品检验检测研究院国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心江西南昌330029

目的比较肉桂子不同部位的桂皮醛含量,并对其挥发性成分进行定性鉴别,明确肉桂子桂皮醛积累部位及挥发性成分组成。方法采用Capcell pak C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(45∶55);流速为1 mL/min;柱温为30℃;检测波长为290... 详细信息

目的比较肉桂子不同部位的桂皮醛含量,并对其挥发性成分进行定性鉴别,明确肉桂子桂皮醛积累部位及挥发性成分组成。方法采用Capcell pak C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(45∶55);流速为1 mL/min;柱温为30℃;检测波长为290 nm。采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对样品进行分析测定,通过检索NIST谱库对样品进行定性分析,并应用峰面积归一化法对各组分进行定量分析。结果肉桂子主要成分桂皮醛在不同部位中含量为:肉桂子宿萼>肉桂子果实,分别为51.28、2.40 mg/g;采用GC-MS鉴定出肉桂子饮片含有挥发性成分30种,宿萼中含有26种,果实中含有23种。其三者之间含量和挥发性成分均存在差异。结论该方法操作简单,重现性好,可为肉桂子研究与资源的开发利用奠定基础。

关键词：肉桂子不同部位桂皮醛含量测定成分分析

HPLC法测定金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的含量

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中国药物评价 2024年第2期41卷 97-100页

作者：朱艳艳刘德鸿吴倩颖朱良辉陈伟康江西中医药大学江西南昌330004 江西省药品检验检测研究院国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室江西省药品医疗器械质量工程研究中心江西南昌330029

目的:建立金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的HPLC含量测定方法。方法:采用C 18色谱柱,流动相为乙腈和0.1%磷酸溶液,检测器检测波长设置为290 nm,输液泵流速1.0 mL·min^(-1),色谱柱柱温设置为25℃。结果:肉桂酸、桂皮醛分别在0.2079~10.3... 详细信息

目的:建立金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的HPLC含量测定方法。方法:采用C 18色谱柱,流动相为乙腈和0.1%磷酸溶液,检测器检测波长设置为290 nm,输液泵流速1.0 mL·min^(-1),色谱柱柱温设置为25℃。结果:肉桂酸、桂皮醛分别在0.2079~10.3938μg·mL^(-1)、0.2025~10.1270μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=1.0000),回收率分别为100.3%、102.6%,回收率RSD分别为1.57%、1.82%。结论:该方法简单、稳定,可用于金丹附延颗粒中肉桂酸和桂皮醛的含量测定。

关键词：金丹附延颗粒含量测定肉桂酸桂皮醛高效液相色谱

桂皮醛对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成影响的研究

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中国预防兽医学报 2023年第1期45卷 88-94页

作者：旷年玲左丽郝柳杭高庆羽石玉祥钟翠红张永英河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056000 河北省禽病技术创新中心河北邯郸056021

为探究桂皮醛对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物被膜(BF)的形成及其相关基因转录水平的影响,本研究利用牛津杯法分别检测桂皮醛对3株BF强阳性(E-39、E-40、E-41)和3株中等阳性(E-27、E-30、E-42)APEC的抑菌圈,分析桂皮醛对APEC的抑菌活性;... 详细信息

为探究桂皮醛对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物被膜(BF)的形成及其相关基因转录水平的影响,本研究利用牛津杯法分别检测桂皮醛对3株BF强阳性(E-39、E-40、E-41)和3株中等阳性(E-27、E-30、E-42)APEC的抑菌圈,分析桂皮醛对APEC的抑菌活性;采用二倍稀释法测定桂皮醛对上述6株APEC的最小抑菌浓度(MIC);根据该结果,进一步采用96孔板结晶紫染色法测定MIC、1/2 MIC和1/4 MIC桂皮醛对6株APEC BF形成能力的抑制作用;采用qPCR法分别检测1/2 MIC和1/4 MIC桂皮醛对6株APEC BF形成相关基因转录水平的影响。结果显示:桂皮醛对6株APEC的抑菌圈直径为16.12±0.13 mm~23.80±0.23 mm;桂皮醛对BF强阳性和中等阳性APEC菌株的MIC均为256μg/mL;BF形成能力的检测结果显示,与未用桂皮醛处理的APEC相比,MIC、1/2 MIC和1/4 MIC的桂皮醛均极显著抑制上述6株APEC BF的形成(P桂皮醛的浓度呈正相关;经1/2 MIC和1/4 MIC桂皮醛处理3 d后,与未经桂皮醛处理的APEC阳性对照组相比,3株BF强阳性菌株组氨酸激基因qseC、鞭毛主调节器基因flhC和外膜外排蛋白基因tolC的转录水平均显著降低(P桂皮醛在体外对APEC有较强的抑菌活性,并且可通过影响APEC qseB、qseC、flhD、flhC、tolC和bdcR基因的转录水平进而抑制其BF的形成。本研究为临床防治大肠杆菌病及清除其BF提供了参考依据。

关键词：桂皮醛禽致病性大肠杆菌生物被膜基因转录

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桂皮醛对口腔链球菌多菌种生物膜的抑制作用

现代预防医学 2023年第7期50卷 1304-1309+1332页

作者：张一博张仲董千雨蔡锦林周慧灵王学润李雨庆王国庆四川大学华西口腔医学院口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西药学院四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院

目的通过多种体外实验手段评价桂皮醛对三种常见口腔链球菌（变异链球菌、血链球菌和戈登链球菌）形成的多菌种生物膜的影响。方法通过检测生长抑制作用确定桂皮醛对单菌种浮游细菌的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,... 详细信息

目的通过多种体外实验手段评价桂皮醛对三种常见口腔链球菌（变异链球菌、血链球菌和戈登链球菌）形成的多菌种生物膜的影响。方法通过检测生长抑制作用确定桂皮醛对单菌种浮游细菌的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）；桂皮醛处理组设置MIC、1/2 MIC和1/4 MIC三个质量浓度组；将BHIS液体培养基稀释的细菌培养液和桂皮醛溶液同时加入96孔板孔内，并放入恒温厌氧罐37℃培养24 h后，从每个孔中吸出混合液，并用PBS清洗平板，获得生物膜。通过结晶紫染色、活菌计数评估桂皮醛对单菌种和多菌种链球菌生物膜形成的影响；并通过实时荧光定量PCR测量多菌种生物膜形成相关毒力基因的表达。结果桂皮醛对三种口腔链球菌的生长、生物膜形成以及多菌种生物膜形成均有明显抑制作用；实时荧光定量PCR结果显示桂皮醛能够抑制多菌种生物膜中gtfB、gt鄄fC和gtfD的表达。桂皮醛还可以降低多菌种生物膜的产酸和耐酸能力。结论一定浓度的桂皮醛对变异链球菌、血链球菌和戈登链球菌生长及生物膜形成均具有抑制作用且对多菌种生物膜形成及其毒力也有抑制作用。

关键词：桂皮醛龋病变异链球菌戈登链球菌血链球菌

桂皮醛诱导人宫颈癌Siha细胞凋亡并下调HPV E6/E7蛋白表达

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天然产物研究与开发 2022年第9期34卷 1565-1572,1617页

作者：紫若·塔里哈提曙丽盼·木拉提张伟怡周文婷新疆医科大学药学院新疆天然药物活性组分与释药技术重点实验室乌鲁木齐830011

桂皮醛作为一种天然的小分子化合物具有抗炎、镇痛及抗肿瘤的活性,为了探究其对人宫颈癌Siha细胞凋亡及HPV E6/E7蛋白表达的影响,该文采用CCK-8法、流式细胞术、JC-1荧光探针以及Western blot等多种手段进行检测。结果显示,桂皮醛具有... 详细信息

桂皮醛作为一种天然的小分子化合物具有抗炎、镇痛及抗肿瘤的活性,为了探究其对人宫颈癌Siha细胞凋亡及HPV E6/E7蛋白表达的影响,该文采用CCK-8法、流式细胞术、JC-1荧光探针以及Western blot等多种手段进行检测。结果显示,桂皮醛具有明显的抗肿瘤生长作用,可导致G2/M期阻滞、线粒体膜电位降低并通过蛋白酶体途径抑制E6/E7蛋白的表达;进一步验证桂皮醛与化疗药物紫杉醇、顺铂及5-氟尿嘧啶分别联合给药后的效果,证实其具有协同抗宫颈癌作用。

关键词：桂皮醛宫颈癌凋亡 E6/E7蛋白

基于生物信息学探讨桂皮醛对宫颈癌细胞的凋亡和蛋白表达的研究

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基于生物信息学探讨桂皮醛对宫颈癌细胞的凋亡和蛋白表达的研究

作者：紫若·塔里哈提新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:(1)用多种生物信息学工具分析鉴定宫颈癌患者样本中的生物标志物。(2)探究桂皮醛(CA)对宫颈癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响,并分析其分子机制。方法:(1)利用基因表达综合数据库(GEO)获得关于宫颈癌的3个数据集,通过R语言分析得到差... 详细信息

目的:(1)用多种生物信息学工具分析鉴定宫颈癌患者样本中的生物标志物。(2)探究桂皮醛(CA)对宫颈癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响,并分析其分子机制。方法:(1)利用基因表达综合数据库(GEO)获得关于宫颈癌的3个数据集,通过R语言分析得到差异表达基因(DEGs),并进行富集分析。利用STRING数据库建立蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并在Cytoscape中进行可视化分析鉴定出中心基因。使用UALCAN、c Bio Portal和人类蛋白质图谱(HPA)数据库进一步分析研究。(2)采用CCK-8法测定CA对宫颈癌细胞的IC值及与Tax、Pt和5-FU联合给药后的协同指数;划痕实验检测CA对宫颈癌细胞迁移的作用;流式细胞术检测CA对宫颈癌细胞周期的影响;Hoechst 33342荧光染色和Western blot检测CA对宫颈癌细胞凋亡的影响;JC-1荧光探针检测宫颈癌细胞中线粒体膜电位变化情况;Western blot检测CA通过蛋白酶体途径对宫颈癌细胞的作用及相关蛋白表达的影响。结果:(1)通过R语言分析得到257个DEGs,KEGG和GO富集分析结果显示主要富集在细胞周期、细胞凋亡、DNA复制过程等。基于MCODE、cyto Hubba插件分析得到了4个中心基因(AURKB、CDK1、KIF11和KIF2C),通过使用UALCAN、c Bio Portal、HPA数据库分析表明,这四个基因均在宫颈癌组织中高表达。(2)CA抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移;阻滞在G2/M期;破坏线粒体膜电位;通过蛋白酶体途径抑制E6和E7蛋白的表达并诱导凋亡。进一步验证桂皮醛与化疗药物Tax、Pt和5-FU具有协同抗宫颈癌作用。结论:(1)宫颈癌致癌及进展的潜在中心基因可能是宫颈癌诊断和治疗的新型生物标志物。(2)CA通过线粒体途径诱导Siha细胞凋亡,并通过蛋白酶体途径下调HPV E6和E7蛋白的表达;同时与多种宫颈癌常用化疗药物均能在细胞水平上呈现协同效果。

关键词：宫颈癌生物信息学桂皮醛 E6 E7 泛素蛋白酶体途径化疗药物

桂皮醛通过mTOR和STAT3调控记忆性T细胞促进心脏移植物长期存活的作用及机制研究

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湖南中医药大学学报 2023年第3期43卷 413-420页

作者：李师亮方明周彦华中科技大学同济医学院附属同济医院心脏大血管外科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉头颈外科湖北武汉430022

目的探索桂皮醛诱导记忆性心脏移植耐受的作用及潜在分子机制。方法将60只小鼠随机分为正常对照组(假手术,n=10)、手术组(心脏移植,n=10)、模型组(注射T细胞+心脏移植,n=10)、桂皮醛低浓度组(注射T细胞+心脏移植+10 mg/kg桂皮醛,n=10)... 详细信息

目的探索桂皮醛诱导记忆性心脏移植耐受的作用及潜在分子机制。方法将60只小鼠随机分为正常对照组(假手术,n=10)、手术组(心脏移植,n=10)、模型组(注射T细胞+心脏移植,n=10)、桂皮醛低浓度组(注射T细胞+心脏移植+10 mg/kg桂皮醛,n=10)、桂皮醛中浓度组(注射T细胞+心脏移植+20 mg/kg桂皮醛,n=10)和桂皮醛高浓度组(注射T细胞+心脏移植+40 mg/kg桂皮醛,n=10)。观察各组移植物平均存活时间、移植物排斥程度,检测脾细胞增殖情况、移植物中相关基因白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的相对表达量,以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)与信号转导及转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription3,STAT3)蛋白磷酸化的表达情况。结果(1)与正常对照组相比,手术组存活时间明显缩短(P桂皮醛高浓度组的平均存活时间显著延长(P桂皮醛治疗组的移植物排斥程度显著降低,且具有剂量依赖性。(3)与正常对照组相比,手术组及模型组脾细胞OD值升高(P桂皮醛低浓度组相比,桂皮醛中、高浓度组脾细胞OD值降低(P桂皮醛中、高浓度组移植物中IL-2、IFN-γmRNA表达明显下调(P桂皮醛中、高浓度组IL-10、TGF-βmRNA表达明显上调(P桂皮醛中、高浓度组移植物中p-mTOR、p-STAT3蛋白表达明显下调(P桂皮醛可以获得移植物长期耐受,其机制可能是通过抑制mTOR和STAT3的表达,降低移植物记忆性T细胞的免疫应答水平。

关键词：桂皮醛记忆性T细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号转导及转录激活因子3 心脏移植

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基于化学生物学的桂皮醛镇静作用机制研究

基于化学生物学的桂皮醛镇静作用机制研究

作者：刘凯昕南开大学

学位级别：硕士

现代社会中,越来越多的人们患上焦虑症、抑郁症以及失眠症等精神类疾病。这些疾病严重地影响了人们的生活质量,由于其发病机制尚未阐明,且现有精神类药物普遍具有较高的毒副作用,寻找低毒性的新型精神类药物对于精神类疾病的治疗具有重... 详细信息

现代社会中,越来越多的人们患上焦虑症、抑郁症以及失眠症等精神类疾病。这些疾病严重地影响了人们的生活质量,由于其发病机制尚未阐明,且现有精神类药物普遍具有较高的毒副作用,寻找低毒性的新型精神类药物对于精神类疾病的治疗具有重要意义。随着科学技术的发展,人们对药物的研发逐渐转变为基于作用靶点与机制的探究模式。天然产物作为新药研发的重要来源,明确活性成分的靶点与作用机制已成为天然产物研究的核心内容。与化学药物相比,天然产物普遍具有较低的毒性,且挥发油类的天然产物易于透过血脑屏障,克服了许多化学药物难以进入大脑的缺陷,这些特性对于新型精神类药物研发具有重要价值。桂皮醛作为天然产物肉桂挥发油的主要活性成分,在精神疾病动物模型中显示出镇静、抗焦虑等活性。然而,其发挥镇静作用的具体靶点和分子机制尚未阐明。因此,本论文以桂皮醛为研究对象,对其镇静作用的机制进行了深入研究。首先利用非靶向代谢组学分析了桂皮醛对于食蟹猴体内代谢的影响,通过血浆样本的主成分分析,发现给药桂皮醛后食蟹猴体内产生的代谢物与空白组相比出现了差异。对差异代谢物进行筛选,在正、负离子模式下共得到了包括L-谷氨酰胺、γ-氨基丁酸(GABA)、L-天冬酰胺以及尿苷等在内的26个显著性差异代谢物。对差异代谢物进行层次聚类和KEGG通路富集分析,选取相关性最强的GABA能突触代谢通路中的代谢流进行进一步分析,发现给药桂皮醛后L-谷氨酰胺、GABA的含量显著增加,琥珀酸的含量显著降低,GABA/谷氨酸比值显著降低,推断桂皮醛可能通过增加GABA的合成来发挥镇静作用。围绕GABA能突触途径展开了后续研究,通过氨基酸衍生化实验,发现桂皮醛对斑马鱼脑内GABA、谷氨酸和谷氨酰胺三种关键氨基酸表达的影响与代谢组学结果一致。利用斑马鱼行为学分析实验,发现桂皮醛可以显著降低野生型斑马鱼的运动距离、速率等指标,由于谷氨酸脱羧酶(GAD)67基因敲低型斑马鱼体内谷氨酸不能正常脱羧生成GABA,桂皮醛对GAD67基因敲低型斑马鱼行为学指标的影响显著减弱,说明桂皮醛是通过增加GABA能突触代谢途径中GABA的合成发挥镇静作用。随后,采用化学生物学技术合成了炔基化桂皮醛探针,通过靶点垂钓和蛋白质谱检测,鉴定出α-烯醇化酶(ENO1)是桂皮醛潜在的镇静靶点,并通过Western Blot进行了靶点蛋白的验证。炔基化桂皮醛探针可以通过点击反应与叠氮荧光标签结合,进而可以标识探针的位置,利用探针与ENO1蛋白在斑马鱼脑组织切片的免疫荧光共定位实验,发现桂皮醛主要与小脑颗粒层的ENO1蛋白发生结合。接下来通过分子对接和蛋白质谱检测,发现桂皮醛可以与ENO1蛋白的40位丝氨酸形成共价结合。对野生型和40位丝氨酸点突变型ENO1蛋白进行表达纯化,通过酶活检测和热转变分析说明桂皮醛是通过结构中的α,β-不饱和醛基团与ENO1蛋白中40位丝氨酸的羟基发生迈克尔加成反应,形成了共价结合,从而不可逆得抑制了ENO1的酶活。在此基础上,通过斑马鱼行为学分析实验比对给药桂皮醛与GABA对ENO1基因敲低型斑马鱼行为的影响,阐明桂皮醛是通过靶向ENO1并抑制其酶活,诱导GABA表达量的升高,从而发挥镇静功效的作用机制。综上所述,本研究以桂皮醛的镇静作用为基础,发现了桂皮醛可以靶向小脑颗粒层,诱导内源性GABA的表达,并进一步阐明了其发挥功效的关键靶点、与靶点蛋白之间的作用模式和生物学机制。为桂皮醛作为新型镇静药物的后续开发与应用提供了理论依据。

关键词：桂皮醛镇静 GABA ENO1 结合位点

桂皮醛对关节炎大鼠炎症因子及骨桥蛋白的作用

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西部医学 2023年第11期35卷 1566-1571页

作者：杨云皓李发菊许望东何成松西南医科大学附属医院风湿免疫科四川泸州646000

目的探讨桂皮醛(Cin)对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠的作用及对骨桥蛋白(OPN)水平的影响。方法选取20只SPF级SD健康雄性大鼠,随机选取5只大鼠为对照组,其余大鼠建立Ⅱ型CIA大鼠模型。取造模成功的大鼠随机分为模型组、低剂量Cin组... 详细信息

目的探讨桂皮醛(Cin)对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠的作用及对骨桥蛋白(OPN)水平的影响。方法选取20只SPF级SD健康雄性大鼠,随机选取5只大鼠为对照组,其余大鼠建立Ⅱ型CIA大鼠模型。取造模成功的大鼠随机分为模型组、低剂量Cin组、高剂量桂Cin组,每组5只。造模成功后连续给药3周,1次/天,低、高剂量Cin组分别给予剂量为100、200 mg/kg的Cin灌胃处理,正常组和模型组使用等量生理盐水灌胃处理。观察Cin对CIA大鼠关节炎评分影响,检测各组大鼠血清中OPN、白介素-6(IL-6)、IL-17和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,免疫组织化学法(IHC)检测滑膜组织中OPN表达,Western blot法检测滑膜组织中OPN的蛋白表达,RT-QPCR方法检测软骨中OPN mRNA水平,HE染色观察各组大鼠关节组织病理改变。结果与对照组比较,模型组大鼠关节炎评分显著升高,血清中OPN、IL-6、IL-17和TNF-α的水平显著升高,OPN在滑膜、软骨表达水平升高,关节组织出现明显的炎症细胞浸润和滑膜增生;与模型组比较,低、高剂量Cin组能够降低大鼠关节炎评分,显著降低血清中OPN、IL-6、IL-17和TNF-α的水平,OPN在滑膜、软骨表达水平降低,并减轻关节组织的病理损伤,高剂量Cin组作用更显著。上述指标差异均具有统计学意义(P桂皮醛能够有效缓解CIA大鼠的关节炎症和关节损伤,其作用可能与降低OPN表达及血清中IL-6、IL-17和TNF-α水平有关。

关键词：桂皮醛关节炎大鼠骨桥蛋白炎症因子