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核酸分子杂交技术鉴别和检测家蚕微孢子虫的研究

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山东农业大学学报（自然科学版） 2002年第1期33卷 14-18页

作者：邱宝利徐兴耀牟志美周鹏华南农业大学昆虫生态研究室广东广州510642 华南农业大学蚕业服装系广东广州510642 山东农业大学林学院山东泰安271018 热带作物生物技术国家重点实验室海南海口571101

为了将家蚕微孢子虫 (N .b .)从蚕业生产中流行的 10多种病原性微孢子虫中鉴定出来 ,并对其发病程度进行检测 ,用PCR技术合成了一段 317bp的DNA片段 ,将其克隆到大肠杆菌E .coliDH5α中 ,并大量制备该片段 ,用地高辛 (DIG)标记成探针 ,... 详细信息

为了将家蚕微孢子虫 (N .b .)从蚕业生产中流行的 10多种病原性微孢子虫中鉴定出来 ,并对其发病程度进行检测 ,用PCR技术合成了一段 317bp的DNA片段 ,将其克隆到大肠杆菌E .coliDH5α中 ,并大量制备该片段 ,用地高辛 (DIG)标记成探针 ,经点杂交和Southern杂交检测 ,发现该片段为N .b .所特有。该探针为N .b的特异性检测探针 ,灵敏度可达 1ngDNA水平。对蚕业生产上的带毒蚕蛾和蚕卵的模拟检测证明 ,该DIG探针可将N .b发病初期的带毒蚕蛾和蚕卵检出。

关键词：核酸分子杂交鉴别检测家蚕微孢子虫

核酸分子杂交技术在病毒性心肌炎与扩张型心肌病诊断中的研究进展

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重庆医学 1995年第5期24卷 294-296页

作者：陈建斌饶邦复重庆医科大学临床学院 630042

众多研究提示,部分心肌炎、扩张型心肌病(DCM)与病毒感染有关;病毒性心肌炎(VMC)与DCM间关系密切,估计在DCM患者中约有10%至20%曾患过VMC。心肌中检测到病毒或病毒核酸。

关键词：病毒性心肌炎扩张型心肌病诊断核酸分子杂交

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电镜技术在核酸分子杂交研究中的应用

生物工程进展 1993年第1期13卷 38-41页

作者：游哲李维琪江西省劳动卫生职业病防治所中科院新疆化学研究所

电子显微镜是目前唯一能直接看到DNA或RNA分子的工具,而电泳、同位素标记等技术只能间接地测定这些分子,电镜就是以它这种得天独厚的优点在核酸分子研究中崭露头角。基因的准确定位,核酸复制模型的完善,真核基因DNA倒转重复序列“十字架”

关键词：电子显微镜核酸分子杂交

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核酸分子杂交的方法及其在医学检验中的应用

国外医学（临床生物化学与检验学分册） 1994年第1期15卷 29-32页

作者：宋大栩浙江省海宁市肿瘤防治研究所 314400

核酸分子杂交技术能特异地检测细胞及微生物的核酸序列,广泛地使用于肿瘤学、遗传学、病理学、微生物学、细胞学、流行病学的基础研究和临床诊断。核酸分子杂交的技术主要包括标本的处理、探针的制备和标记、杂交及杂交物的检测。标本... 详细信息

核酸分子杂交技术能特异地检测细胞及微生物的核酸序列,广泛地使用于肿瘤学、遗传学、病理学、微生物学、细胞学、流行病学的基础研究和临床诊断。核酸分子杂交的技术主要包括标本的处理、探针的制备和标记、杂交及杂交物的检测。标本的处理用10%中性缓冲甲醛溶液固定石蜡包埋的病理切片,可用于作原位杂交;使用高浓度的硫氰酸胍直接裂解细胞并使所有的蛋白(包括核酸酶)变性形成一个适宜于杂交的液相环境,可直接进行杂交。探针的制备和标记,重点介绍了非放射性标记法,较详细介绍了生物素标记探针、地高辛标记探针、磺基化标记及叮啶酯化学发光标记等技术。杂交中使用脱(低)脂奶粉、液相杂交等简化提高检测速率。杂交物的检测,同位素标记可通过放射自显影并用计算机辅助成象分析进行定量检测;非放射性标记通过酶联产生显色反应等方法检测;化学发光检测更可能取代同位素法。

关键词：核酸分子杂交检验

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核酸分子杂交仪安全有效性评价

中国医疗器械信息 2021年第11期27卷 13-14,33页

作者：李小江梁春滢广东省药品监督管理局审评认证中心广东广州510080

核酸分子杂交仪利用碱基互补原则对核酸分子进行杂交,在分子诊断领域应用广泛。目前,该类产品尚无相关标准、指南性文件可参考。文章从医疗器械注册技术审评角度对该产品的安全性、有效性进行探讨,旨在从产品概述、研究资料、风险管理... 详细信息

核酸分子杂交仪利用碱基互补原则对核酸分子进行杂交,在分子诊断领域应用广泛。目前,该类产品尚无相关标准、指南性文件可参考。文章从医疗器械注册技术审评角度对该产品的安全性、有效性进行探讨,旨在从产品概述、研究资料、风险管理、产品技术要求、临床评价、说明书方面为注册申请人申请产品注册提供指导,同时也为相关技术审评人员提供参考。

关键词：核酸分子杂交技术审评

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核酸分子杂交技术及其应用

井冈山医专学报 1996年第Z1期3卷 15-17,5页

作者：王毓平井冈山医专生化教研室

核酸分子杂交是利用已知顺序的DNA作为控针来鉴定DNA或RNA的特殊顺序的技术。由于其特异性强,灵敏度高、定位准确等优点,目前已被广泛应用于分子生物学、生理学、遗传学、病毒学等基础学科的研究,现就其基本原理,主要步骤。

关键词：核酸分子杂交杂交技术放射自显影 DNA片段杂交分子产前诊断限制性核酸内切酶放射性核素 DNA聚合酶I 糖皮质激素

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核酸分子杂交检测黄瓜花叶病毒

湖南文理学院学报（自然科学版） 2007年第1期19卷 69-71页

作者：覃佐东徐燕慧李峰陈集双湖南文理学院生命科学系湖南常德415000 浙江理工大学生物工程研究所浙江杭州310018

为检测黄瓜花叶病毒的存在,应用Northernblot,将提取的黄瓜花叶病毒RNA样品,经甲醛变性凝胶电泳分离,使RNA解离成单链,然后用上行毛细管转移法,将凝胶上的单链RNA片段转移到尼龙膜上.经适当洗涤、干燥后,在烤箱中80℃保温2h,用于杂交.... 详细信息

为检测黄瓜花叶病毒的存在,应用Northernblot,将提取的黄瓜花叶病毒RNA样品,经甲醛变性凝胶电泳分离,使RNA解离成单链,然后用上行毛细管转移法,将凝胶上的单链RNA片段转移到尼龙膜上.经适当洗涤、干燥后,在烤箱中80℃保温2h,用于杂交.以带有黄瓜花叶病毒目的片段的细菌质粒制备DNA探针,用放射性同位素32P标记探针DNA,100℃变性处理用于杂交的探针,然后进行杂交.结果表明,在杂交膜上显示与特异性探针结合的阳性RNA条带,检测到了黄瓜花叶病毒的存在.

关键词：核酸分子杂交 Northern杂交黄瓜花叶病毒检测

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简述核酸分子杂交技术

生物学通报 1992年第6期27卷 16-16,40页

作者：尹和平张世荃河北省衡水地区防疫站 053000 河北省衡水地区农校 053000

核酸分子杂交技术是基因工程中重要的研究手段,是目前生物化学、分子生物学和细胞生物学研究中应用最广泛的技术之一。也是现阶段定性、定量和定位检测DNA与RNA序列片段必须掌握的基本技术与方法。这种技术的基本原理是,两条不同来源的... 详细信息

核酸分子杂交技术是基因工程中重要的研究手段,是目前生物化学、分子生物学和细胞生物学研究中应用最广泛的技术之一。也是现阶段定性、定量和定位检测DNA与RNA序列片段必须掌握的基本技术与方法。这种技术的基本原理是,两条不同来源的核酸链,如果具有互补碱基序列,就能够特异的结合,形成双链的杂交体。所以可用已知的DNA或RNA片段检测未知的核酸样品。在碱性环境加热或加入变性剂等条件下,杂交体双链DNA之间的氢键被破坏,解链成两条单链(或单链的RNA)。

关键词：核酸分子杂交基因工程

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提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨

细胞与分子免疫学杂志 1994年第4期11卷 32-33页

作者：王伯云彭玮丹吴人亮李玉松西安第四军医大学病理学教研室

提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨王伯云，彭玮丹，吴人亮，李玉松（西安第四军医大学病理学教研室，西安７１００３２）非同位素标记核酸探针应用于分子杂交技术，已受到重视，正在生物学和医学领域推广，在临床检测中已用于... 详细信息

提高非放射性标记核酸分子杂交敏感性的研讨王伯云，彭玮丹，吴人亮，李玉松（西安第四军医大学病理学教研室，西安７１００３２）非同位素标记核酸探针应用于分子杂交技术，已受到重视，正在生物学和医学领域推广，在临床检测中已用于一些疾病的诊断，称多基因诊断。分子...

关键词：核酸分子杂交非放射性标记非同位素标记核酸探针光敏生物素斑点杂交地高辛标记基因诊断医学领域玉松