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不同产地太白贝母中11种核苷与碱基类成分分析及产地差异研究

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中药新药与临床药理 2024年第3期35卷 411-418页

作者：梅春梅陈富贵赵雨薇王丹史长灿邱鸿凯周浓李伟东南京中医药大学药学院中药炮制重点实验室江苏南京210046 重庆三峡学院生物与食品工程学院三峡库区道地药材绿色种植与深加工重庆市工程研究中心重庆404120

目的对10批采自重庆、云南、陕西等5个省(市)的太白贝母样品中11种核苷和碱基类成分的含量进行测定,采用化学计量学分析法比较太白贝母中的核苷和碱基类成分的含量差异,对其质量进行综合评价,为规范化种植和产地优选提供参考。方法水超... 详细信息

目的对10批采自重庆、云南、陕西等5个省(市)的太白贝母样品中11种核苷和碱基类成分的含量进行测定,采用化学计量学分析法比较太白贝母中的核苷和碱基类成分的含量差异,对其质量进行综合评价,为规范化种植和产地优选提供参考。方法水超声提取太白贝母中的核苷和碱基类成分,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法测定样品中各成分含量,并采用主成分分析(Principal component analysis,PCA)、层次聚类分析(Hierarchical cluster analysis,HCA)对产地进行划分,偏最小二乘判别分析(Partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)确定太白贝母中差异性的指标成分,比较指标性成分在不同产地样品间的含量差异。结果11种核苷和碱基类成分在不同产地太白贝母中存在显著差异;主成分分析和层次聚类分析可将样品聚为4类;PLS-DA鉴定出5个指标性成分,分别为尿嘧啶、胞嘧啶、尿苷、肌苷、腺苷,以重庆、湖北产地样品所含核苷和碱基成分相对较高,质量相对较优。结论该方法操作简单、重复性好、准确可靠,筛选出了鉴定不同产地太白贝母中的特征性核苷和碱基类成分,可用于初步阐明不同产地样品的差异性,并能够较好地反映太白贝母的品质,为太白贝母药材采购产地选择和质量控制提供参考。

关键词：太白贝母产地核苷类碱基类高效液相色谱-二极管阵列检测器法主成分分析层次聚类分析偏最小二乘判别分析

基于HPLC指纹图谱与核苷类成分含量测定的鸡内金质量评价研究

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中国中药杂志 2023年第1期48卷 114-125页

作者：樊佳刘晓谦孟辰笑凝焦森冯伟红闫利华王智民中国中医科学院中药研究所北京100700

鸡内金为雉科动物家鸡Gallus gallus domesticus的干燥沙囊内壁,是中医临床常用的消食类中药。但由于质地和组成的特殊性,其有效成分至今未明确,也缺乏质量评价指标。该研究采用UPLC-Q-TOF-MS对鸡内金水提液的化学成分进行分析,首次从... 详细信息

鸡内金为雉科动物家鸡Gallus gallus domesticus的干燥沙囊内壁,是中医临床常用的消食类中药。但由于质地和组成的特殊性,其有效成分至今未明确,也缺乏质量评价指标。该研究采用UPLC-Q-TOF-MS对鸡内金水提液的化学成分进行分析,首次从中鉴定出10种核苷类成分;采用HPLC建立了鸡内金水提液的指纹图谱,并对7种核苷类成分进行定量分析。40批鸡内金样品指纹图谱相似度为0.765~0.959,表明不同炮制方法的鸡内金饮片差异较大。进一步采用SPSS 22.0和SIMCA 14.1软件对鸡内金19个共有峰的峰面积进行聚类分析和主成分分析,40批样品可按生鸡内金、炒鸡内金、醋鸡内金明显分为3类;采用正交偏最小二乘法判别分析标记了鸡内金中8个差异性成分,其中2个为腺嘌呤和胸腺嘧啶。含量测定结果表明,7种核苷类成分总量在生鸡内金、炒鸡内金、醋鸡内金中分别为182.5~416.8、205.3~368.7、194.2~283.0μg·g^(-1)。次黄嘌呤、胸腺嘧啶和胸苷的含量在不同炮制方法的饮片间均存在显著性差异(P醋鸡内金>生鸡内金,提示次黄嘌呤、胸腺嘧啶和胸苷的含量在炒制过程中有升高趋势,且变化幅度可能与受热程度有关。该研究建立的方法操作简便、重复性好,可用于鸡内金生品及炮制品的定性定量分析。研究结果可为以化学成分为指标的鸡内金质量评价方法提供参考。

关键词：鸡内金水提液核苷类 UPLC-Q-TOF-MS 指纹图谱含量测定

“4+7”带量采购对南京中医药大学附属南京医院核苷类抗病毒性肝炎药物使用影响分析

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现代药物与临床 2022年第2期37卷 408-414页

作者：沈洁束艳童宁张小玉南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院) 江苏南京210003

目的分析南京中医药大学附属南京医院自2019年底开始执行"4+7"带量采购后对核苷类抗病毒性肝炎药物使用情况的影响,为临床药学服务和医院药事管理提供参考。方法采用回顾性分析方法,汇总南京中医药大学附属南京医院自2018年7月—2021年6... 详细信息

目的分析南京中医药大学附属南京医院自2019年底开始执行"4+7"带量采购后对核苷类抗病毒性肝炎药物使用情况的影响,为临床药学服务和医院药事管理提供参考。方法采用回顾性分析方法,汇总南京中医药大学附属南京医院自2018年7月—2021年6月6种核苷类抗肝炎药物的门诊使用数据,对用药种类、消耗量、用药频度(DDDs)和日治疗费用(DDC)等进行统计分析。结果 "4+7"集采前后,6种药物总的消耗量提高了27.91%,销售总金额降低了80.66%;进入集采的3种药物阿德福韦酯片(阿甘定)、恩替卡韦片(木泽)、富马酸替诺福韦二吡呋酯片(倍信)的DDDs排名进入了前3位,DDC值也排进了前3,降价明显;新上市的富马酸丙酚替诺福韦片消耗量和销售金额却稳步提高。结论 "4+7"集中采购可以有效降低医院药占比,切实减轻了部分患者的用药负担,促进医院合理用药,提升了医保基金的使用效率,创新药物也有长足发展空间。

关键词： “4+7”带量采购核苷类抗肝炎用药频度日治疗费用阿德福韦酯片恩替卡韦片

冬虫夏草菌继代培养过程中核苷类物质变化及抗氧化活性分析

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冬虫夏草菌继代培养过程中核苷类物质变化及抗氧化活性分析

作者：王娜贵州师范大学

学位级别：硕士

冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)是一种传统的名贵滋补中药,具有免疫调节、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。冬虫夏草菌作为冬虫夏草无性型,具有与冬虫夏草相似的化学成分与药理功效。研究表明,产地来源、菌株类型和培养条件对真菌代谢物... 详细信息

冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)是一种传统的名贵滋补中药,具有免疫调节、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。冬虫夏草菌作为冬虫夏草无性型,具有与冬虫夏草相似的化学成分与药理功效。研究表明,产地来源、菌株类型和培养条件对真菌代谢物合成具有重要影响。然而,目前针对不同地区冬虫夏草菌之间的差异以及冬虫夏草菌菌种退化的特征尚不明确。针对上述问题,本实验收集各产地新鲜冬虫夏草,分离出不同产地冬虫夏草无性型菌株,比较各个菌株菌丝体之间的差异,同时以YS-CS211117菌株为例,探究传代培养过程中冬虫夏草菌的特性。1.本研究共分离鉴定出9株冬虫夏草菌,16株冬虫夏草相关真菌。基于ITS序列构建NJ系统发育树分析各产地冬虫夏草菌及其相关真菌的进化关系,所有真菌共分化出9个分支,其中冬虫夏草菌聚类为同一分支,并出现低程度分化。冬虫夏草菌与其相关真菌的进化距离由近到远依次为:Tolypocladium、Fusarium、Roesleria、Penicilium、Truncatella、Cladosporium、Epicoccum、Juxtiphoma、Coprinus、Mortierella。2.以单因素实验与正交实验结合分析的方法探究冬虫夏草菌生物量的影响因素,研究发现碳源是最大的影响因子。优化后的培养基配方为:土豆300 g/L,牛肉膏4 g/L,葡萄糖40 g/L,硫酸镁0.15 g/L,维生素B0.05g/L,氯霉素0.1 g/L,磷酸二氢钾0.1 g/L。3.利用HPLC方法对8株冬虫夏草菌中尿苷、鸟苷、肌苷、腺苷、胞苷和虫草素6种核苷类物质进行定性与定量分析。鸟苷、尿苷、腺苷是所有冬虫夏草菌最主要的核苷类物质,理塘样品中腺苷成分最高,林芝样品中腺苷含量最低。黑水样品和理塘样品中尿苷含量最高,林芝样品中含量最低。各个菌丝样品中肌苷含量差异不显著,玉树样品中胞苷含量最高,虫草素在各个样品中含量极低。抗氧化活性研究表明,8株不同来源冬虫夏草菌DPPH自由基清除力、ABTS自由基清除力与总还原力活性均存在差异,理塘样品和黑水样品DPPH清除力、ABTS清除力与总还原力活性更强,林芝样品活性最差。4.对YS-CS211117菌株传代培养过程中核苷类物质含量和抗氧化活性进行比较分析。6次传代实验表明,第3代菌丝量达到峰值,而第2代菌丝中总核苷类成分含量最高。6个传代菌丝样品三个抗氧化活性体系结果表明,第2代菌丝样品的活性均为最强,随着代数增加抗氧化活性逐渐减弱。

关键词：冬虫夏草菌分离鉴定系统发育分析核苷类抗氧化活性

茶藨子叶状层菌中核苷类成分的UPLC-Q-TOF-MS定性分析和HPLC含量测定

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中国中药杂志 2021年第12期46卷 2912-2922页

作者：陈两绵刘晓谦张永欣高慧敏冯伟红孟辰笑凝王智民中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室国家中医药管理局中药过程控制技术重点研究室北京100700

茶藨子叶状层菌为锈革孔菌科真菌茶藨子叶状层菌Phylloporia ribis寄生在忍冬科植物忍冬Lonicera japonica茎基部的干燥子实体,具有多方面的活性,但其药效物质基础迄今尚不完全明确,质量控制和评价鲜有报道。该文采用UPLC-Q-TOF-MS定性... 详细信息

茶藨子叶状层菌为锈革孔菌科真菌茶藨子叶状层菌Phylloporia ribis寄生在忍冬科植物忍冬Lonicera japonica茎基部的干燥子实体,具有多方面的活性,但其药效物质基础迄今尚不完全明确,质量控制和评价鲜有报道。该文采用UPLC-Q-TOF-MS定性分析茶藨子叶状层菌中的核苷类成分,并建立HPLC同步测定10种核苷类成分的含量。在正离子模式下,采集一级和二级质谱数据,通过与对照品进行比对,并结合相关文献和ChemSpider,PubChem等化合物数据库,首次从茶藨子叶状层菌水提物中定性鉴别出18种核苷类成分。通过HPLC条件优化,确定以Welch Ultimate AQ C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长260 nm,柱温30℃。通过提取方法、提取溶剂和提取时间的考察,确定供试品溶液的制备方法为以水为溶媒冷浸提取18 h。在当前HPLC条件下,尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、肌苷、鸟苷、2′-脱氧肌苷、2′-脱氧鸟苷和胸苷等10种成分的分离度良好(R>1.5),分别在质量浓度0.24724.7、0.28328.3、0.27327.3、0.25625.6、0.25725.7、0.31831.8、0.24524.5、0.26726.7、0.25025.0、0.26726.7 mg·L^(-1)呈良好的线性关系(r>0.9999),平均回收率为95.78%104.5%,RSD为2.2%5.2%(n=6)。茶藨子叶状层菌不同样品中10种核苷类成分的含量差别较大,尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、肌苷、鸟苷、2′-脱氧肌苷、2′-脱氧鸟苷、胸苷和10种核苷总质量分数分别为0.0210.122、0.0040.029、0.0140.226、0.0090.442、0.0030.014、0.0020.146、0.0070.098、00.054、0.0050.069、0.0040.081、0.0721.28 mg·g^(-1),说明其内在质量存在较大差异,需要良好的质量控制才能保障其功效。该研究为茶藨子叶状层菌的药效物质发现、质量控制和评价提供科学依据。

关键词：茶藨子叶状层菌核苷类 UPLC-Q-TOF-MS 定性分析含量测定

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核苷类抗乙肝病毒药物研究近况

中国新药与临床杂志 2002年第6期21卷 370-374页

作者：姚光弼静安区中心医院上海200040

主要根据 2 0 0 1年 11月 9～ 13日在美国德州达拉斯市召开的第 5 2届美国肝病学年会的内容对新一代核苷类抗乙肝病毒的药物作一介绍。在这次会议上报告了 7种新的核苷类抗乙肝药 ,已分别进入Ⅰ期 ,Ⅱ期和Ⅲ期临床试验阶段 ,其中阿德福... 详细信息

主要根据 2 0 0 1年 11月 9～ 13日在美国德州达拉斯市召开的第 5 2届美国肝病学年会的内容对新一代核苷类抗乙肝病毒的药物作一介绍。在这次会议上报告了 7种新的核苷类抗乙肝药 ,已分别进入Ⅰ期 ,Ⅱ期和Ⅲ期临床试验阶段 ,其中阿德福韦、恩替卡韦和依曲西他平已在作Ⅲ期临床。但是阿得福韦的肾毒性 ,恩替卡韦的长期安全性和依曲西他平与拉米夫定的交叉耐药性在正式批准临床应用阶段需作进一步的观察。本文还阐述了核苷类药物结构与抗病毒活性的关系。

关键词：药物研究乙型肝炎病毒核苷类临床试验抗病毒药

不同生长年限粉沙参游离氨基酸和核苷类成分分析

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中国现代应用药学 2020年第10期37卷 1187-1195页

作者：柳玲玲陈建伟南京中医药大学南京210023

目的探讨野生粉沙参中氨基酸和核苷类成分的含量与其生长年限的关系。方法采用超快速液相色谱和三重四级杆-线性离子阱串联质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS),对6个不同生长年限粉沙参及其明党参根皮中的氨基酸类和核苷类成分进行含量测定,并采用... 详细信息

目的探讨野生粉沙参中氨基酸和核苷类成分的含量与其生长年限的关系。方法采用超快速液相色谱和三重四级杆-线性离子阱串联质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS),对6个不同生长年限粉沙参及其明党参根皮中的氨基酸类和核苷类成分进行含量测定,并采用主成分分析(PCA)与聚类分析(HCA)对其不同生长年限的差异性及其代表性成分进行了分析。色谱柱为氨基柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相乙腈-0.2%甲酸水(梯度洗脱),流速为0.4 mL·min^-1,柱温为30℃;质谱检测采用电喷雾正离子(ESI+)及多反应监测(MRM)模式。结果野生粉沙参中含量最高的是具有化痰止咳功效的天门冬酰胺,其2~3年生者含量高达2.97%,且>3年各生长年限粉沙参中含量均恒定在同一水平[(1.77±0.048)%];不同生长年限粉沙参差异代表性成分为2~3年生为天门冬酰胺,4~5年生和9~15年生均为丙氨酸和鸟苷,6~8年生为鸟苷和腺苷,16~18年生为缬氨酸和精氨酸,19~20年生为甲硫氨酸和天冬氨酸。明党参根皮中氨基酸和核苷类成分含量则随生长年限增加而下降。结论天门冬酰胺为粉沙参主要功效成分之一;依据差异代表性氨基酸和核苷可以大致判别粉沙参的生长年限;明党参根皮含有粉沙参同样的氨基酸和核苷类成分,具有开发利用的价值。

关键词：粉沙参明党参根皮氨基酸核苷类生长年限液质联用主成分分析聚类分析

麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分区域差异性分析

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中国中药杂志 2021年第14期46卷 3494-3503页

作者：王倩刘睿朱悦杨滨丁玉华白加德温华军吴海荣段金廒赵明南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心国家中医药管理资源循环利用重点研究室中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 中国中医科学院中药研究所北京100700 江苏大丰麋鹿国家级自然保护区江苏大丰224136 北京麋鹿生态实验中心北京100076 湖北石首麋鹿国家级自然保护区湖北石首434407 江苏省溱湖国家湿地公园麋鹿苑江苏泰州225500

为了揭示麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分的区域特征,采用UPLC-QTRAPⓇ/MS2方法对4个地区39批次麋鹿角中37种核苷类和氨基酸类成分进行含量测定,并利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及聚类分析法(CA)进行综合质量评价。结果显示,不同地... 详细信息

为了揭示麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分的区域特征,采用UPLC-QTRAPⓇ/MS2方法对4个地区39批次麋鹿角中37种核苷类和氨基酸类成分进行含量测定,并利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及聚类分析法(CA)进行综合质量评价。结果显示,不同地区麋鹿角中均含有丰富的核苷类和氨基酸类成分,总质量分数分别可达45.09、634.80μg·g-1,所含成分种类及总量差异较小,但各地区之间各成分含量存在显著差异,主要差异成分为Ura、Hpro、Thr、Glu、G5P、2'-dG、Adeno、Met、Ade、Gln、Orni、Phe、2'-dA、Hit、Lys和Ile。其中,Ura、Met、Glu和Ile分别在江苏大丰、江苏溱湖、北京和湖北石首这些区域的麋鹿角药材中含量最高。OPLS-DA及CA分析结果均显示基于核苷类、游离氨基酸类成分的数据信息可将所有麋鹿角样品分为3类,反映出麋鹿角样品的区域特征性。研究结果提示麋鹿角中核苷类、游离氨基酸类成分的积累与其生境密切相关,为麋鹿角药材的品质形成研究、内在质量评价及控制以及麋鹿角的综合利用提供了有益参考。鉴于研究发现,建议可将Ura、Met、Glu和Ile的含量因素作为不同地区药材特征纳入麋鹿角质量标准体系。

关键词：麋鹿角核苷类氨基酸类区域差异

不同种质太子参核苷类成分QTRAP LC-MS/MS分析

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中药材 2015年第4期38卷 711-714页

作者：马阳侯娅邹立思刘训红徐力兰才武袁济端南京中医药大学药学院江苏南京210023 扬州市药品检验所江苏扬州225000 贵州昌昊中药发展有限公司贵州凯里556000 柘荣县药业发展局福建宁德355300

目的:分析太子参中核苷类成分,比较不同种质太子参间的差异。方法:采用QTRAP LC-MS/MS技术同时测定5个种质太子参中13种核苷类成分的含量,用SPSS 16.0对数据进行聚类分析。结果:不同种质太子参核苷含量存在一定差异,核苷总量以福建柘荣(... 详细信息

目的:分析太子参中核苷类成分,比较不同种质太子参间的差异。方法:采用QTRAP LC-MS/MS技术同时测定5个种质太子参中13种核苷类成分的含量,用SPSS 16.0对数据进行聚类分析。结果:不同种质太子参核苷含量存在一定差异,核苷总量以福建柘荣(ZS2)最高,贵州施秉(SB)最低。福建柘荣(ZS1)与安徽宣城(XC)间核苷含量差异较小。结论:为进一步阐明生态环境对太子参代谢物合成积累的影响提供了基础资料。

关键词：孩儿参种质核苷类