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麻疯树两种核糖体失活蛋白的表达模式分析

植物生理学通讯 2008年第5期44卷 891-896页

作者：秦小波邵彩霞徐莺陈放四川大学生命科学学院成都610064

目前,麻疯树核糖体失活蛋白已发现2种:种子中的毒蛋白curcin和叶片中的逆境诱导蛋白curcin-L,其基因的表达模式均呈现出器官特异性。mRNA和蛋白质水平分析显示,curcin只在种子的胚乳中积累,且表达开始于心型胚时期,成熟时达到最高;而cur... 详细信息

目前,麻疯树核糖体失活蛋白已发现2种:种子中的毒蛋白curcin和叶片中的逆境诱导蛋白curcin-L,其基因的表达模式均呈现出器官特异性。mRNA和蛋白质水平分析显示,curcin只在种子的胚乳中积累,且表达开始于心型胚时期,成熟时达到最高;而curcin-L在正常生理条件下并不表达,但受脱落酸、水杨酸、干旱、高低温等胁迫诱导时仅在叶片中表达。

关键词：麻疯树核糖体失活蛋白胁迫表达模式

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植物的核糖体失活蛋白及其应用

植物生理学通讯 2007年第5期43卷 973-980页

作者：孙亚卿邵金旺张少英内蒙古农业大学甜菜生理研究所呼和浩特010018

对植物的核糖体失活蛋白的分类、性质、功能和应用的研究进展作概述。

关键词：核糖体失活蛋白 N-糖苷酶抗病毒抗真菌

麻疯树核糖体失活蛋白Curcin2的原核可溶性表达及其抗真菌活性研究

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中国生物工程杂志 2013年第7期33卷 43-49页

作者：邵子静蒋楠晏华立詹诚徐莺陈放四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610064

Curcin2是麻疯树幼苗在真菌侵染、干旱及高低温胁迫下诱导产生的一种核糖体失活蛋白。采用分子克隆的方法,从麻疯树基因组中扩增到Curcin2成熟肽编码基因,分别连接到质粒载体pGEX-6p-1、pMAL-c5E上,转化大肠杆菌最终获得重组菌PGC(pGEX-... 详细信息

Curcin2是麻疯树幼苗在真菌侵染、干旱及高低温胁迫下诱导产生的一种核糖体失活蛋白。采用分子克隆的方法,从麻疯树基因组中扩增到Curcin2成熟肽编码基因,分别连接到质粒载体pGEX-6p-1、pMAL-c5E上,转化大肠杆菌最终获得重组菌PGC(pGEX-6p-1-curcin2)和PMC(pMAL-c5E-curcin2)。在不同温度、IPTG浓度、时间诱导下,Curcin2在重组菌PGC中均以包涵体形式表达,在重组菌PMC中主要以可溶性融合蛋白形式表达,且蛋白质的表达量与诱导条件相关。重组菌PMC表达可溶性curcin2的优化条件为:温度28℃,IPTG 0.3mmol/L,时间8h,此条件下目的蛋白占总蛋白表达量的30.6%,1L培养物中可获得19.74mg电泳纯的重组蛋白。重组蛋白可被MBP TrapTMHP柱亲和纯化并与curcin抗体发生抗原抗体反应。体外抗真菌活性实验表明,纯化后的curcin2融合蛋白有抑制真菌生长作用,且对小麦赤霉、油菜菌核的抑制作用强于curcin。此蛋白的获得为其相关功能的研究奠定了基础。

关键词：麻疯树核糖体失活蛋白原核表达抗真菌活性

绞股蓝核糖体失活蛋白家族编码基因的5个cDNA及其下游非编码区

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植物学通报 2005年第2期22卷 163-168页

作者：林毅谢荔岩陈国强吴祖建谢联辉林奇英福建农林大学植物病毒研究所生物农药与化学生物学教育部重点实验室福州350002

通过3'RACE克隆策略获得绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)核糖体失活蛋白(ribosome-inac-tivating protein,RIP)Gynostemmin的5个cDNA序列gynostemminⅠ￣Ⅴ及其下游非编码区(3'untranslatedregion,3'UTR)。它们的编码区长度除gynostemminⅡ为825bp外,其余均为831bp。其下游非编码区的长度分别为279、174、170、161和171bp。在3'UTR中,gynostemminⅠ比另外4个多了两个小的茎环结构和一富含AU的不稳定子元件,其mRNA的稳定性可能因此受到影响。

关键词：非编码区核糖体失活蛋白绞股蓝下游编码基因家族 cDNA序列 RACE 茎环结构 mRNA 稳定子稳定性长度克隆

金沙江干热河谷地区麻疯树单粒种子核糖体失活蛋白含量及其与种子性状的相关性

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热带亚热带植物学报 2012年第5期20卷 425-431页

作者：谢瑜蔡峰邵子静吉柔风赵欣平徐莺陈放四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部国家重点实验室成都610064

对金沙江干热河谷地区麻疯树(Jatropha curcas L.)种子中具有抗肿瘤活性的核糖体失活蛋白curcin含量及其生物学性状进行研究。结果表明,用酶联免疫吸附法测定麻疯树单颗种子的curcin含量为0.275～3.183 mg g-1,平均(1.369±0.055)mg g-1... 详细信息

对金沙江干热河谷地区麻疯树(Jatropha curcas L.)种子中具有抗肿瘤活性的核糖体失活蛋白curcin含量及其生物学性状进行研究。结果表明,用酶联免疫吸附法测定麻疯树单颗种子的curcin含量为0.275～3.183 mg g-1,平均(1.369±0.055)mg g-1。Pearson相关性分析表明:单粒麻疯树种子的curcin含量与种子其他性状的相关性均未达显著水平,但与种子质量、种仁质量及含油量存在一定程度的负相关,而与出仁率和可溶性蛋白含量存在一定的正相关,且与可溶性蛋白含量的正相关系数(0.190)和与含油率的负相关系数(–0.177)较高。这表明可在金沙江干热河谷地区开展高curcin含量麻疯树种质资源收集和选育工作,以及培育高含油量、高curcin含量的双高品种,以提高麻疯树生物燃油产业的综合效益。

关键词：麻疯树核糖体失活蛋白 Curcin 生物学性状金沙江干热河谷

滨藜(Atriplex patens)核糖体失活蛋白基因的克隆和分析

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第3期24卷 281-285页

作者：孙素荣胡俊兰海燕张富春新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046

为开发利用新疆野生植物滨藜,采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR),从滨藜(Atriplexpatens)叶中克隆核糖体失活蛋白(ribosome inactivating proteins,RIPs)基因的完整读码框ORF片段.序列分析表明,该片段大小为843bp,编码1条长280个氨基... 详细信息

为开发利用新疆野生植物滨藜,采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR),从滨藜(Atriplexpatens)叶中克隆核糖体失活蛋白(ribosome inactivating proteins,RIPs)基因的完整读码框ORF片段.序列分析表明,该片段大小为843bp,编码1条长280个氨基酸肽链,其中N端的26个氨基酸是信号肽.滨藜核糖体失活蛋白(ApRIP)属Ⅰ型核糖体失活蛋白.同源性比较分析显示,滨藜RIP与藜科植物藜的核糖体失活蛋白,天花粉蛋白(TCS)和美洲商陆蛋白(PAP)基因序列的同源性分别为82%,41%和55%.氨基酸序列比对和SWISS-MODEL同源模建分析表明,滨藜RIP的3′端氨基酸肽链具有与其它RIP相同的活性中心位点"EAARXKXI".

关键词：核糖体失活蛋白滨藜克隆序列分析

6个植物核糖体失活蛋白新基因片段的克隆及特征分析

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华中农业大学学报 2008年第1期27卷 7-11页

作者：阮小蕾刘丽芳陈秀何自福李华平华南农业大学植物病毒研究室广州510642 广东省农业科学院植物保护研究所广州510640

通过分析多种不同来源的植物RIPs的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1、P2,对基因组进行PCR扩增,分别从海芋Araceae macrorrhiza、烟草Nicotiana tobaccum、剑麻Agavaccae aga-ve、望江南Cassia occidentalis、那坡指天... 详细信息

通过分析多种不同来源的植物RIPs的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1、P2,对基因组进行PCR扩增,分别从海芋Araceae macrorrhiza、烟草Nicotiana tobaccum、剑麻Agavaccae aga-ve、望江南Cassia occidentalis、那坡指天蕉Musaspp.(BB)、邻水野蕉Musaspp.(AA)中获得1个基因片段。BLAST分析表明:它们推导的氨基酸序列只与多种不同来源的RIPs有相似性。其中,与葫芦科2个代表RIP相应区段的相似性最高,与-βluffin基因的相似性分别为97.2%、98.5%、97.9%、89.4%、97.9%、97.2%,与天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)的相似性分别为63.6%、64.5%、64.1%、60.8%、64.8%、和63.6%。多重序列比对发现:6个序列中分别有10、9、11、11、9、10个残基氨基酸与TCS的N-糖苷酶活性位点的残基完全相同,只是残基位置不一致,仅有个别残基发生了变化。所有的N-糖苷酶活性位点都在P1/P2扩增区段内。

关键词：核糖体失活蛋白基因克隆序列分析

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丝瓜核糖体失活蛋白的分离与纯化

生物化学与生物物理进展 1995年第5期22卷 464-468页

作者：吴伸朱曰荣郭峰刘朵花中国科学院生物物理研究所南开大学

采用一种改进的方法，简便快速地从丝瓜（Ｌｕｆｆａｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ）籽中得到丝瓜蛋白α和β．它们在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上均呈一区带，其分子量分别为２８０００和２９０００．等电聚焦测定等电点均为１０．它们对无细胞体系蛋白... 详细信息

采用一种改进的方法，简便快速地从丝瓜（Ｌｕｆｆａｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ）籽中得到丝瓜蛋白α和β．它们在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上均呈一区带，其分子量分别为２８０００和２９０００．等电聚焦测定等电点均为１０．它们对无细胞体系蛋白质合成都有强烈的抑制活性，其ＩＤ＿（５０）分别为１０μｇ／Ｌ和５０μｇ／Ｌ，是目前发现的单链核糖体失活蛋白中活性最高的．

关键词：丝瓜核糖体失活蛋白分离提纯

苦瓜核糖体失活蛋白诱导HL-60细胞发生凋亡及其分子机制的研究

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第三军医大学学报 2003年第13期25卷 1157-1160页

作者：郎海滨糜漫天程天民张乾勇朱俊东第三军医大学预防医学系营养与食品卫生学教研室重庆400038

目的　探讨苦瓜核糖体失活蛋白 (Ribosomalinactivatingprotein ,RIP)诱导HL 60细胞凋亡的活性 ,以及对HL 60细胞Bcl 2、Bax、caspase 3表达变化的影响及其分子机制。方法　以一定浓度苦瓜RIP处理HL 60细胞 2 4～ 72h ,用TUNEL法检测细... 详细信息

目的　探讨苦瓜核糖体失活蛋白 (Ribosomalinactivatingprotein ,RIP)诱导HL 60细胞凋亡的活性 ,以及对HL 60细胞Bcl 2、Bax、caspase 3表达变化的影响及其分子机制。方法　以一定浓度苦瓜RIP处理HL 60细胞 2 4～ 72h ,用TUNEL法检测细胞凋亡。运用RT PCR和Westernblot免疫印记法检测Bcl 2、Bax、caspase 3mRNA和蛋白表达的变化。结果　苦瓜RIP在一定作用浓度下可使HL 60细胞发生凋亡 ,且随着作用时间的延长凋亡细胞比例逐渐升高。在此过程中 ,HL 60细胞的caspase 3mRNA的表达及其胞内活性亚单位水平显著升高 (P 蛋白水平明显降低 (P 蛋白表达均有所上调。结论　在苦瓜RIP诱导的HL 60细胞凋亡中 ,caspase 3发挥了极为重要的作用 ,而Bcl 2和Bax可能通过其表达量的变化。

关键词：核糖体失活蛋白细胞凋亡 Bcl-2 Bax caspase-3