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核磷蛋白与肿瘤的发生

军事医学科学院院刊 2008年第4期32卷 382-385页

作者：徐诚望杨晓明军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

核磷蛋白(nucleophosmin,NPM)是一个具有多种功能的重要蛋白,定位于核仁,可在胞核与胞浆之间快速穿梭。NPM基因在多种人类肿瘤中过表达,因此被公认为肿瘤标志物和癌基因。后来研究发现NPM也具有抑制肿瘤的功能,它的缺失、突变甚至重排... 详细信息

核磷蛋白(nucleophosmin,NPM)是一个具有多种功能的重要蛋白,定位于核仁,可在胞核与胞浆之间快速穿梭。NPM基因在多种人类肿瘤中过表达,因此被公认为肿瘤标志物和癌基因。后来研究发现NPM也具有抑制肿瘤的功能,它的缺失、突变甚至重排与多种肿瘤的发生密切相关。这表明NPM的作用及其机制非常复杂,可能通过多种机制调控肿瘤的发生。

关键词：核磷蛋白肿瘤 p53 抑癌蛋白富精氨酸因子肿瘤标记生物学癌基因突变

核磷蛋白A型突变体对髓性白血病细胞系增殖的影响

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临床检验杂志 2008年第1期26卷 20-23页

作者：骆展鹏何鹏张伶杨松钟晓明高玉洁重庆医科大学医学检验系临床血液教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016

目的研究核磷蛋白A型突变体基因转染对人髓性白血病细胞系体外增殖的影响。方法构建含核磷蛋白A型突变基因(NPM-mA)的真核表达质粒pEGFPC1-NPM-mA,选择NPM-mA阴性、抑癌基因p14ARF有无缺失的两株人髓性白血病细胞KG-1a和K562作为靶细胞,... 详细信息

目的研究核磷蛋白A型突变体基因转染对人髓性白血病细胞系体外增殖的影响。方法构建含核磷蛋白A型突变基因(NPM-mA)的真核表达质粒pEGFPC1-NPM-mA,选择NPM-mA阴性、抑癌基因p14ARF有无缺失的两株人髓性白血病细胞KG-1a和K562作为靶细胞,将pEGFPC1-NPM-mA重组质粒和pEGFPC1空质粒分别转染白血病细胞,以未转染组为对照。用RT-PCR和免疫组化来分析转染细胞目的基因mRNA和蛋白质的表达。采用台盼蓝拒染法计数活细胞,绘制转染前后生长曲线,观察细胞体外生长的改变。结果转染后的两种白血病细胞株表达NPM-mA mRNA,胞浆内NPM-mA蛋白阳性,符合NPM突变蛋白胞质移位的特点。细胞生长曲线显示,转染NPM-mA质粒的KG-1a细胞较空质粒转染和未转染组细胞生长速度明显加快,而转染NPM-mA质粒的K562细胞则较对照组细胞生长明显受抑制(P<0.05)。结论NPM-mA基因稳定转染可影响白血病细胞的增殖活性,在无ARF缺失时NPM-mA突变体可促进白血病细胞体外生长。

关键词：白血病核磷蛋白基因突变

姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡过程中核磷蛋白的表达与定位变化

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解剖学报 2014年第2期45卷 221-227页

作者：石松林陈兰英刘用金杨海波路锟杨玲李祺福厦门大学医学院基础医学部福建厦门361102 河南城建学院生命科学与工程学院河南平顶山467036

目的探讨核磷蛋白NPM在癌细胞诱导凋亡过程中在细胞内、细胞核基质上的定位与表达变化,以及NPM与凋亡调控相关蛋白的关系,探索其在凋亡调控中的作用。方法在姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡的基础上,以亚细胞蛋白质组学方法分析NPM在... 详细信息

目的探讨核磷蛋白NPM在癌细胞诱导凋亡过程中在细胞内、细胞核基质上的定位与表达变化,以及NPM与凋亡调控相关蛋白的关系,探索其在凋亡调控中的作用。方法在姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡的基础上,以亚细胞蛋白质组学方法分析NPM在核基质中的存在与变化,并以免疫印迹法杂交实验进行确证;激光扫描共焦显微镜观察NPM在EC9706细胞凋亡过程中的定位与变化,以及NPM与Bax、Bcl-2等基因产物的共定位关系。结果 NPM存在于EC9706细胞核基质蛋白组分中,并在姜黄素处理后表达下调。NPM在EC9706细胞凋亡过程中发生显著的胞质-核之间的穿梭定位变化,并与Bax、Bcl-2等蛋白具有共定位关系,且共定位区域发生了变化。结论 NPM是一种核基质结合蛋白,在EC9706细胞凋亡中的表达与定位变化,及其与凋亡调控蛋白的共定位关系提示,它在EC9706细胞凋亡调控中具有重要作用。

关键词：核磷蛋白姜黄素核基质食管癌免疫印迹法人

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核磷蛋白在肝癌细胞多药耐药中的作用

中华实验外科杂志 2018年第10期35卷 1852-1854页

作者：李辉宇付西峰贺杰峰田彦璋朱军军赵浩亮山西医学科学院山西大医院普通外科太原030032

目的探讨核磷蛋白（NPM）在肝癌细胞多药耐药中的作用及其机制。方法通过质粒转染建立稳定的高表达NPM的肝癌细胞株：HepG2／NPM和SMMC7721／NPM细胞株，通过细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞对化疗药物的半数抑制浓度（IC50）值；划痕... 详细信息

目的探讨核磷蛋白（NPM）在肝癌细胞多药耐药中的作用及其机制。方法通过质粒转染建立稳定的高表达NPM的肝癌细胞株：HepG2／NPM和SMMC7721／NPM细胞株，通过细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞对化疗药物的半数抑制浓度（IC50）值；划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力；Westernblot和实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测各基因的蛋白和mRNA表达。结果与亲本细胞比较，NPM高表达的细胞对化疗药物的耐药性增加，阿霉素（ADM：8．31±0．89比0．38±0．13，P=0．000；14．84±1．61比1．69±0．31，P=0．001），顺铂（DDP：4．23±1．18比1．33±0．29，P=0．047；8．42±0．85比3．03±0．55，P：0．000），5-氟尿嘧啶（5-Fu：20．75±1．02比7．97±0．97，P=0．001；16．28±1．64比5．85±1．04，P=0．000），细胞的迁移和侵袭能力增强，且多药耐药基因1（MDR-1：3．85±0．67比0．97±0．22，P=0．043；4．33±0．77比1．04±0．27，P=0．021），多药耐药相关蛋白1（MRP-1：3．76±1．04比1．01±0．21，P=0．033；4．75±0．88比1．01±0．17，P=0．028）及P．糖蛋白（P-gP：2．06±0．27比1．04±0．19，P=0．000；3．47±0．93比1．02±0．17，P=0．000）的表达均增加。结论NPM可以增强肝癌细胞对化疗药物的耐药性以及迁移和侵袭能力，其机制可能与上调MDR-1／P-gP信号通路的表达相关。

关键词：肝癌多药耐药核磷蛋白 P-糖蛋白

鼻咽癌组织中核磷蛋白表达水平与患者疗效的关系

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第12期24卷 1419-1423页

作者：翁洁玲彭俊玲符珈汤涛张梅芳广州医科大学附属第二医院病理科广东广州510260 中山大学肿瘤防治中心分子诊断科广东广州510060 中山大学肿瘤防治中心病理科广东广州510060

目的:探讨核磷蛋白(nucleophosmin,NPM、B23、NO38或NPM1)在鼻咽癌活检组织中的表达水平与增殖指数和患者个体化治疗后疗效的关系。方法:随机选取中山大学肿瘤防治中心2001年1月1日至2003年12月31日期间收治的157例初诊鼻咽癌患者的治... 详细信息

目的:探讨核磷蛋白(nucleophosmin,NPM、B23、NO38或NPM1)在鼻咽癌活检组织中的表达水平与增殖指数和患者个体化治疗后疗效的关系。方法:随机选取中山大学肿瘤防治中心2001年1月1日至2003年12月31日期间收治的157例初诊鼻咽癌患者的治疗前活检蜡块,用免疫组织化学法检测鼻咽癌活检组织中NPM1和Ki67的表达,并结合相应临床病理资料,应用统计学方法对结果进行分析。结果:NPM1的表达水平与Ki67的表达水平呈正相关(r=0.445,P0.05)和临床分期(r=-0.74,P>0.05)无相关性。NPM1表达水平与有淋巴结转移组治疗后淋巴结情况呈负相关(r=-0.196,P<0.05),与无淋巴结转移组治疗后原发灶情况呈负相关(r=-0.349,P<0.05)。NPM1表达水平与预后无明显相关性。结论:NPM1在鼻咽癌组织中高表达并与Ki67的表达水平呈正相关,NPM1有促进细胞增殖的作用且可能作为一个评估个体化治疗疗效的评价指标。

关键词：核磷蛋白鼻咽癌免疫组织化学疗效评价

Cystamine对全脑缺血大鼠海马神经元凋亡相关蛋白核磷蛋白表达的研究

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Cystamine对全脑缺血大鼠海马神经元凋亡相关蛋白核磷蛋白表达的...

作者：亓蕾山东大学

学位级别：硕士

目的①研究大鼠全脑缺血再灌注模型不同时间点凋亡相关蛋白核磷蛋白(NPM)在海马的表达;②缺血再灌注后应用Cystamine(CYS)对核磷蛋白表达水平的影响;③从而探讨全脑缺血时Cystamine保护脑组织的可能机制。材料和方法采用4血管阻断法制... 详细信息

目的①研究大鼠全脑缺血再灌注模型不同时间点凋亡相关蛋白核磷蛋白(NPM)在海马的表达;②缺血再灌注后应用Cystamine(CYS)对核磷蛋白表达水平的影响;③从而探讨全脑缺血时Cystamine保护脑组织的可能机制。材料和方法采用4血管阻断法制作大鼠全脑缺血模型,脑电图验证成功与否。78只成年雄性SD大鼠(模型成功率75%,死亡后补充动物),体重280-320g,随机分为假手术组(sham)、全脑缺血组(GI)、全脑缺血+Cystamine治疗组(GI+CYS)3组,其中Sham组6只,GI组、GI+CYS组各36只。GI组和GI+CYS组各按照再灌注后6小时、12小时、1天、3天、5天和7天随机分为6亚组,每亚组6只大鼠。其中GI+CYS组于双侧颈总动脉夹闭10分钟后立即给予CYS(150mg/kg)腹腔注射,缺血时间在24小时内的只在缺血后给予一次CYS (150mg/kg)腹腔注射,超过1天的每天在初次注射的相应时间点再各给予CYS (150mg/kg/day)腹腔注射。Sham组仅暴露两侧椎动脉及颈总动脉,不予电凝及夹闭,每天给予生理盐水1ml腹腔注射,于第3天处死。GI组每天给予等剂量生理盐水腹腔注射。将GI组和GI+CYS组大鼠分别在相应时间点,麻醉后断头取脑的海马组织。蛋白免疫印迹方法检测再灌注后不同时间点海马核磷蛋白表达水平的变化。使用ImageJ分析电泳条带灰度比。所有数据均采用均数±标准差(x±s)的形式表示,数据用SPSS11.5软件包做统计分析,检验水准a=0.05。结果蛋白免疫印迹(WESTERN BLOT):应用抗NPM的抗体对经SDS-PAGE并转膜的样品进行免疫检测,应用化学发光法(ECL)进行显色后在分子量37kD附近得到1条单一蛋白条带。Sham组海马有一定数量的NPM表达;GI组再灌注6小时后,海马NPM的表达较Sham组减弱,12小时后海马NPM表达增加,1天达高峰,后逐渐下降,3天、5天保持较高的水平;GI组与Sham组比较其1天、3天、5天亚组的NPM表达均明显升高,NPM条带相对较深,具有统计学意义(P<0.05);GI+CYS组再灌注6小时后,NPM表达水平即开始升高,12小时后NPM的表达开始明显增加,也在1天达高峰,后虽呈下降趋势,但再灌注7天仍维持在较高水平;仍高于假手术组;与GI组相比,1天、3天、5天、7天亚组NPM的表达显著升高,NPM条带较深,具有统计学意义(P＜0.05),12小时亚组NPM的表达水平略高于GI组,NPM条带相对较深,计算无统计学意义(P＞0.05)的表达。内参B—Actin(42 kD)显示Sham组,GI组与GI+CYS组的上样量无显著差异。结论全脑缺血急性期缺氧诱导NPM表达上调,启动细胞内信号传递途径,从而产生相应的效应分子对神经元起保护作用。在全脑缺血损伤急性期应用Cvstamine治疗,能够显著增加全脑缺血后海马NPM的表达,这可能是CYS在脑缺血性损伤中的神经保护机制之一。

关键词：全脑缺血再灌注海马 Cystamine 核磷蛋白 p53

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核磷蛋白在大肠癌发生发展中的表达及意义

中华实用诊断与治疗杂志 2011年第8期25卷 779-781页

作者：张群孙自勤魏志刘长江黄华中国人民解放军济南军区总医院消化科济南市250031

目的:探讨核磷蛋白在大肠良、恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测核磷蛋白在大肠腺瘤、大肠腺癌和癌旁正常组织中的表达情况。结果:核磷蛋白在大肠腺瘤、腺癌中阳性率分别为70.83%,76.92%;与癌旁正常组... 详细信息

目的:探讨核磷蛋白在大肠良、恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测核磷蛋白在大肠腺瘤、大肠腺癌和癌旁正常组织中的表达情况。结果:核磷蛋白在大肠腺瘤、腺癌中阳性率分别为70.83%,76.92%;与癌旁正常组织阳性率38.46%比较,差异均有统计学意义(P核磷蛋白阳性率与腺瘤伴轻、中度不典型增生核磷蛋白阳性率比较差异有统计学意义(P核磷蛋白阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。大肠癌组核磷蛋白表达强度与肿瘤Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关(P核磷蛋白在大肠腺瘤和大肠癌中均表达,其参与大肠癌发生的早期阶段,并在大肠癌发展中发挥一定作用;检测核磷蛋白的表达情况可能对大肠癌早期诊断、指导治疗、改善预后有一定价值。

关键词：大肠腺癌大肠腺瘤不典型增生核磷蛋白免疫组织化学