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核多角体病毒在昆虫细胞系内的装配方式

微生物学报 1991年第5期31卷 346-350页

作者：裘卫朱国凯中国科学院上海昆虫研究所

本文对AcNPV、HaNPV和EsNPV在各自敏感细胞系内的装配过程作了研究。除在复制时间上稍有差别外,均具以下特点:核衣壳装配与病毒基质(Vs)和发夹结构(HC)有密切的关系,有些核衣壳尚需经剪切加工;有两种表型子代病毒,封存体(OB)和未埋入型... 详细信息

本文对AcNPV、HaNPV和EsNPV在各自敏感细胞系内的装配过程作了研究。除在复制时间上稍有差别外,均具以下特点:核衣壳装配与病毒基质(Vs)和发夹结构(HC)有密切的关系,有些核衣壳尚需经剪切加工;有两种表型子代病毒,封存体(OB)和未埋入型病毒(NOV);前者在核内完成装配,后者可在核内、核膜上、胞质内或细胞膜上完成套膜装配,且与细胞膜系统密切相关;AcNPV 复制晚期出现不完全装配现象.

关键词：核多角体病毒昆虫细胞系装配

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核多角体病毒对斜纹夜蛾成虫及其后代的影响

中国生物防治学报 2011年第1期27卷 136-139页

作者：肖留斌柏立新谭永安赵洪霞江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014

本文研究了核多角体病毒(SpltMNPV)对斜纹夜蛾Spodoptera litura成虫及子代幼虫的生存、繁殖、生长发育等的影响。结果表明,斜纹夜蛾成虫通过补充营养摄入病毒后,平均寿命及单雌产卵量明显下降,雄性单独摄入、雌性单独摄入、雌雄同时摄... 详细信息

本文研究了核多角体病毒(SpltMNPV)对斜纹夜蛾Spodoptera litura成虫及子代幼虫的生存、繁殖、生长发育等的影响。结果表明,斜纹夜蛾成虫通过补充营养摄入病毒后,平均寿命及单雌产卵量明显下降,雄性单独摄入、雌性单独摄入、雌雄同时摄入SpltMNPV的平均单雌产卵量分别为1213、1340、1087粒,而未摄入SpltMNPV的单雌产卵量为1530粒。成虫摄入病毒,对子代种群有很好的控制作用。仅雄性或雌性单独摄入病毒,对子代幼虫种群控制作用干扰指数(IIPC)分别为0.2658和0.3046;而雌雄成虫同时摄食后,其后代的IIPC值为0.1807。

关键词：斜纹夜蛾核多角体病毒种群生命表

斜纹夜蛾核多角体病毒几丁质酶基因的克隆及序列分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第5期32卷 537-540页

作者：胡国栋庞义杨凯李充璧苏德明中山大学生物防治国家重点实验室/昆虫学研究所!广州510275 复旦大学生命科学学院病毒学研究室!上

以苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (Autographacalifornicamultinucleocapsidnuclearpolyhedrosisvirus,AcMN PV)基因组含几丁质酶基因 (chiA)的 pstIM片段为探针 ,通过Southern杂交将斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus,SpltNPV)的chiA基因定位在其基因组DNA两个相邻的XbaI片段(5 .1kb及 2 .1kb片段 )上 ,克隆了包含该基因完整序列的片段 ,并测定了它的核苷酸全序列。该基因读码框为16 95个核苷酸 ,编码 5 6 4个氨基酸的蛋白质 ,分子量为 6 2 .9kD ,在起始密码子ATG上游 - 10处有一个杆状病毒晚期启动子模体TAAG ,在终止密码子TAA下游有一个真核生物基因mRNA转录poly(A)加尾信号序列AATAAA。在SpltNPVchiA基因氨基酸序列的N端预期有由 2 3个氨基酸构成的真核生物信号肽。SpltNPVchiA基因氨基酸序列与AcMNPVchiA基因序列的同源性为 5 7%。

关键词：斜纹夜蛾核多角体病毒几丁质酶基因序列分析

斜纹夜蛾核多角体病毒egt基因的克隆和部分序列分析

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中山大学学报（自然科学版） 1998年第3期37卷 125-127页

作者：闫庆生庞义农广欧阳晓光龙綮新中山大学生物防治国家重点实验室

用ＡｃＭＮＰＶｅｇｔ基因中的保守区部分片段为探针，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交确定ＳｌＭＮ－ＰＶｅｇｔ基因的位置在ＰｓｔⅠ４９７０ｂｐ和ＸｂａⅠ２６００ｂｐ的片段上．采用双链ＤＮＡ序列分析方法测序，在２６００ｂｐ片段上的... 详细信息

用ＡｃＭＮＰＶｅｇｔ基因中的保守区部分片段为探针，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交确定ＳｌＭＮ－ＰＶｅｇｔ基因的位置在ＰｓｔⅠ４９７０ｂｐ和ＸｂａⅠ２６００ｂｐ的片段上．采用双链ＤＮＡ序列分析方法测序，在２６００ｂｐ片段上的ＥｃｏＲⅠ位点两侧得到５９４ｂｐＤＮＡ碱基序列，用计算机ＤＮＡＳＩＳ和ＰＲＯＳＩＳ软件，将５９４ｂｐＤＮＡ碱基序列所推测的氨基酸序列与ＡｃＭＮＰＶ和ＳｌｉＭＮＰＶ的ｅｇｔ基因氨基酸序列进行同源比较，其同源性分别为４５％和８６．５％．

关键词：斜纹夜蛾核多角体病毒 egt基因克隆昆虫病毒

家蚕核多角体病毒双穿梭载体的构建及GFP和HBeAg融合蛋白的表达

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武汉大学学报（自然科学版） 1999年第2期45卷 220-224页

作者：邓小昭朱应刁振宇齐义鹏南京军区军事医学研究所武汉大学病毒学研究所

用ＡｃＮＰＶ穿梭载体Ａｃ－Ｂａｃｍｉｄ与野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕ＢｍＮ细胞，通过同源重组得到整合了ｌａｃＺ／Ｔｎ７ａｔ／ｍｉｎｉＦ表达盒的ＢｍＮＰＶＢａｃｍｉｄ，除能在大肠杆菌／ＢｍＮ细胞中穿梭复制外，还能感... 详细信息

用ＡｃＮＰＶ穿梭载体Ａｃ－Ｂａｃｍｉｄ与野生型ＢｍＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕ＢｍＮ细胞，通过同源重组得到整合了ｌａｃＺ／Ｔｎ７ａｔ／ｍｉｎｉＦ表达盒的ＢｍＮＰＶＢａｃｍｉｄ，除能在大肠杆菌／ＢｍＮ细胞中穿梭复制外，还能感染ＢｍＮ－ＰＶ的非允许细胞Ｓｆ９，成功地构建了ＢｍＮＰＶ的双穿梭载体．经与重组转座质粒ｐＦＧＨｅ转座，获得了插入ｇｆｐ／ＨＢＶｅ融合基因的重组ｒＢｍ－Ｂａｃｍｉｄ（ｒＢｍＧＨｅ），在家蚕细胞中表达了既能发射绿色荧光又具有ＨＢｅＡｇ抗原性的双功能融合蛋白．

关键词：转座穿梭载体 GFP HBeAg 核多角体病毒家蚕

抗家蚕核多角体病毒(BmNPV)即刻早期蛋白基因的三联核酶的设计和性质

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病毒学报 1996年第4期12卷 374-380页

作者：张晓岚陈农安祁国荣陆长德中国科学院上海生物化学研究所

以ＢｍＮＰＶＩＥ基因为靶序列，通过计算机设计了３个切割靶序列不同位点的锤头状核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）（Ｒ４７、Ｒ２０８和Ｒ６８７）。为了提高核酶的切割效率，把３个核酶串联在一起形成三联的核酶（Ｒ４２６）。为使单个核酶... 详细信息

以ＢｍＮＰＶＩＥ基因为靶序列，通过计算机设计了３个切割靶序列不同位点的锤头状核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）（Ｒ４７、Ｒ２０８和Ｒ６８７）。为了提高核酶的切割效率，把３个核酶串联在一起形成三联的核酶（Ｒ４２６）。为使单个核酶之间不相互干扰，改变了茎区Ⅱ的碱基序列。核酸二级结构计算机模拟显示，这种改变非常成功。为了减少长的侧翼序列对Ｒ４２６的影响，将Ｒ４２６基因光隆到ｐＲＧ５２３质粒的ｃｉｓ－核酶之间，限制性内切酶线性化后，用Ｔ７ＲＮＡ聚合酶进行体外转录，得到具有短的侧翼序列的Ｒ４２６分子。转录和切割实验表明，Ｒ４２６两侧的ｃｉｓ－核酶的切割效率非常高，释放出的Ｒ４２６能够特异地切割转录和合成的靶序列。说明我们设计的三种核酶的“催化中心”能使３个单价核酶不相互干扰，各自独立发挥切割作用，也不影响其两端的ｃｉｓ－核酶的切割活性。这与实验设计的预期结果完全一致。

关键词：家蚕核多角体病毒三联核酶即刻早期蛋白基因

中国棉铃虫核多角体病毒(Heliothis armigera NPV)VHA273毒株DNA的酶切分析与比较研究

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华中师范大学学报（自然科学版） 2000年第1期34卷 74-77页

作者：吴柏春华中师范大学武汉430079

VHA273毒株原为MNPV型，经纯系中国棉铃虫扩增而得出约10％的SNPV.高度纯化两型多用体，温和碱解后，酚法抽提SNPVDNA和MNPVDNA.限制性内切酶BglⅡ，BamHI，EcoRI和HindⅢ分别平行酶切两种DNA，依次均得出11，8，14和13条电泳带．比较分... 详细信息

VHA273毒株原为MNPV型，经纯系中国棉铃虫扩增而得出约10％的SNPV.高度纯化两型多用体，温和碱解后，酚法抽提SNPVDNA和MNPVDNA.限制性内切酶BglⅡ，BamHI，EcoRI和HindⅢ分别平行酶切两种DNA，依次均得出11，8，14和13条电泳带．比较分析DNA的酶切电泳图谱发现，经同一种限制性内切酶酶切，SNPVDNA与MNPVDNA不仅电泳片段数相同，电泳带位也-一对应．讨论提出：该SNPVDNA与MNPVDNA在分子、亚分子水平上是一致的．

关键词：酶切图谱 VHA273毒株 DNA 棉铃虫核多角体病毒

棉铃虫核多角体病毒新疆株生物学特性及其田间应用试验初报

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植物保护学报 1990年第1期17卷 5-10页

作者：陈誉任德新王琳娜朱国凯黄解于吴祖银蔡耘音新疆农业科学院库尔勒果树研究所中国科学院上海昆虫研究所新疆农业科学院微生物研究所新疆农二师廿九团农业试验站

1983年8月在E86°36′,N41°45′巴州奶牛场番茄地的棉铃虫幼虫尸体上发现一株病毒,编号为C-Ha-83-1。毒株包涵体为不规则的4—6边形多角体,大小为760—1432×707—1250纳米,平均为1143×978纳米;包涵体经碱释放后的病毒粒子滴膜负染,... 详细信息

1983年8月在E86°36′,N41°45′巴州奶牛场番茄地的棉铃虫幼虫尸体上发现一株病毒,编号为C-Ha-83-1。毒株包涵体为不规则的4—6边形多角体,大小为760—1432×707—1250纳米,平均为1143×978纳米;包涵体经碱释放后的病毒粒子滴膜负染,在透射电镜下观察,病毒粒子呈杆状,两端平截,大小为262—357×54—71纳米,平均为327×68纳米。超薄切片病毒粒子呈单粒包埋,感染部位为细胞核。 C-Ha-83-1毒株,隶属杆状病毒科Baculoviridae,“A”亚组,定名为棉铃虫核多角体病毒新疆株Heliothis armigera nucleopolyhebrosis virus(Xinjiang-strain),简称HaSNPV(X.-stra.)。经人工饲养活体增殖后,四、五、六龄幼虫含包涵体(PIB)量分别为3.5×10~8/头、9.12×10~8/头、1.44×10~9/头,标准样品(随机混合)为:1.1×10~9/头。通过1985—1986年在棉田和罐头番茄田防治棉铃虫试验,按不同PIB/亩剂量分别达到α=0.05或α=0.01的水平,差异显著或极显著。

关键词：棉铃虫核多角体病毒新疆株

中国棉铃虫核多角体病毒VHA273毒株DNA的特性

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病毒学报 1990年第4期6卷 352-357页

作者：吴柏春王行国华中师范大学

VHA273毒株纯多角体经碱解、酶解及饱和酚一步法和二步法抽提的基因组,具有典型的DNA吸收光谱。吲哚法亦确证为DNA,无RNA。超离心沉降分析,扫描出主峰沉降常数为26S,次峰9.7S。热变性温度法测得Tm=89.6℃,计算(G+C)％=49.53。电镜观察DN... 详细信息

VHA273毒株纯多角体经碱解、酶解及饱和酚一步法和二步法抽提的基因组,具有典型的DNA吸收光谱。吲哚法亦确证为DNA,无RNA。超离心沉降分析,扫描出主峰沉降常数为26S,次峰9.7S。热变性温度法测得Tm=89.6℃,计算(G+C)％=49.53。电镜观察DNA呈3种典型形态。大的闭环DNA平均长度29.8μ,计算得分子量是61.7×10~6;有少量极小闭环DNA存在。0.7％琼脂糖凝胶电泳显示,DNA主带清晰浓重,发现还有5条微弱次带,约2.5～3.7kb。该DNA用4种限制性核酸内切酶Bg1 Ⅱ、BamHⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ分别酶切成11、8、14和13条带。用片段积加法求出的分子量彼此很接近,平均为67.0×10~6道尔顿。酶切图谱显示,5条弱带对4种内切酶概不敏感。

关键词：中国棉铃虫核多角体病毒 DNA特性