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人成骨肉瘤MG-63细胞在HMBA诱导分化后核基质蛋白表达的变化

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分子细胞生物学报 2006年第2期39卷 169-176页

作者：赵春红李祺福李智星陈晋安厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 厦门大学生命科学学院细胞生物学研究室厦门大学生命科学学院分析测试中心厦门361005

HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-... 详细信息

HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-鸟嘌呤糖基化酶同功酶oggl和波形蛋白表达上调,hnRNP A2/B1和肌动蛋白表达下调,60S核糖体蛋白L21和ST2蛋白仅在分化的MG-63细胞中表达。研究结果表明肿瘤细胞增殖分化过程中伴随核基质蛋白表达的变化,并为深入揭示核基质蛋白与细胞癌变和逆转的关系以及阐明细胞增殖分化的基因表达调控原理提供了依据。

关键词：核基质蛋白细胞分化人成骨肉瘤细胞 HMBA

姜黄素诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中核基质蛋白表达的变化

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分子细胞生物学报 2008年第6期41卷 473-481页

作者：李祺福郑燕彬杨海波石松林赵振利陈晋安厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室厦门361005

应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱鉴定技术研究细胞凋亡诱导物姜黄素处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化.及其核基质蛋白表达的差异。经姜黄素处理后.MG-63细胞的核基质和中间... 详细信息

应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱鉴定技术研究细胞凋亡诱导物姜黄素处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化.及其核基质蛋白表达的差异。经姜黄素处理后.MG-63细胞的核基质和中间纤维比对照组明显稀疏,且分布更加不均匀,并分别与核纤层连系,形成趋于断裂但相对还较为完整的网状结构:双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导MG-63细胞凋亡前后存在27个差异表达的核基质蛋白,经质谱鉴定了其中的21个蛋白.在凋亡的MG-63细胞中表达上调的蛋白鉴定为:DNA聚合酶zeta等7种蛋白:表达下调的蛋白质为:Prohibitin等14种蛋白。其中首次在核基质中发现的蛋白质有17个。因此,在MG-63细胞凋亡过程中不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了典型的的凋亡特征性变化.而且伴有核基质蛋白表达的差异。由此证实了与肿瘤细胞凋亡诱导相关特异核基质蛋白的存在及其对肿瘤细胞凋亡诱导的调控作用.从而对揭示核基质构型及其蛋白组成与细胞凋亡的关系和阐明细胞凋亡过程中的基因表达调控机理.均具有重要意义。

关键词：人成骨肉瘤细胞细胞凋亡姜黄素核基质-中间纤维系统核基质蛋白

核基质蛋白22定量分析及尿液细胞学检查评估膀胱癌复发的价值研究

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中国全科医学 2014年第26期17卷 3131-3134页

作者：彭晓晖梁培育欧善际祖雄兵海南医学院附属医院泌尿科海南省海口市570102 湘雅医院泌尿外科

目的评估核基质蛋白22(NMP22)定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发的诊断价值。方法选取2008—2012年在海南医学院附属医院住院的浅表性膀胱癌患者144例。在膀胱镜检查之前患者均在3 d内连续每天提供3份用于尿液细胞学检查的尿液样本... 详细信息

目的评估核基质蛋白22(NMP22)定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发的诊断价值。方法选取2008—2012年在海南医学院附属医院住院的浅表性膀胱癌患者144例。在膀胱镜检查之前患者均在3 d内连续每天提供3份用于尿液细胞学检查的尿液样本以及1份用于NMP22定量分析的尿液样本。以病理组织活检作为金标准,对NMP22定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发诊断价值的灵敏度和特异度进行评估。结果 144例患者中,52例(36.1%)诊断为复发性膀胱移行细胞癌。52例膀胱癌复发患者中,41例NMP22定量分析结果为阳性,23例尿液细胞学检查为阳性。NMP22定量分析诊断膀胱癌复发的灵敏度为78.8%(41/52),特异度为69.6%(64/92),阳性预测值为59.4%(41/69),阴性预测值为85.3%(64/75);尿液细胞学检查诊断膀胱癌复发的灵敏度为44.2%(23/52),特异度为83.7%(77/92),阳性预测值为60.5%(23/38),阴性预测值为72.6%(77/106)。两种方法诊断膀胱癌复发的灵敏度和特异度比较,差异有统计学意义(χ2=6.58、5.40,P=0.01、0.02);而两种方法诊断膀胱癌复发的阳性预测值和阴性预测值比较,差异无统计学意义(χ2=3.13、0.50,P=0.08、0.48)。NMP22定量分析与尿液细胞学检查在不同分期、分级、风险分层中的灵敏度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。NMP22定量分析联合尿液细胞学检查、NMP22定量分析联合膀胱镜检查、尿液细胞学检查联合膀胱镜检查诊断膀胱癌复发的灵敏度分别为88.5%(46/52)、98.1%(51/52)及94.2%(49/52)。结论 NMP22定量分析法可用于浅表性膀胱癌复发的检测,尤其是在低度以及中度风险的人群,但本方法也因其相对较低的特异度在使用方面受到限制。

关键词：移行细胞癌膀胱肿瘤诊断核基质蛋白肿瘤标志物

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白血病细胞核基质蛋白的初步研究

中华肿瘤杂志 1998年第6期20卷 425-427页

作者：李娟任显辉黄兆伟金月英王子慧邱殷庆中山医科大学第一附属医院血液内科香港沙田香港中文大学医学院解剖系北京医科大学细胞学系

目的比较白血病细胞与正常骨髓细胞核基质成分的差异。方法用高盐法抽取细胞核基质蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ分析和观察了急性粒细胞性白血病和慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及化疗前后白血病细胞核... 详细信息

目的比较白血病细胞与正常骨髓细胞核基质成分的差异。方法用高盐法抽取细胞核基质蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ分析和观察了急性粒细胞性白血病和慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及化疗前后白血病细胞核基质蛋白的改变。结果慢性粒细胞白血病慢性期、急粒变期及急性粒细胞白血病细胞核基质与正常者有明显差异，主要改变是白血病细胞分别在某些区带出现新的核基质蛋白或核基质蛋白含量的增加，慢性粒细胞白血病急性变后与慢性期相比也在某些区带出现新的核基质蛋白或核基质蛋白含量的增加。化疗前后白血病细胞核基质蛋白成分的比较，表现为化疗后核基质蛋白明显减少。结论白血病细胞与正常骨髓细胞相比，核基质蛋白有明显的差异，核基质蛋白成分的改变可能与白血病的发生、发展以及慢性粒细胞白血病的急性变有关，核基质是某些抗癌药物的作用位点。

关键词：白血病核基质蛋白药物疗法

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人原发性肝细胞癌核基质蛋白的研究

中华肿瘤杂志 1997年第5期19卷 339-341页

作者：吴珊刘宗石邱殷庆任显辉杨雷李晓明吴秉铨香港中文大学病理解剖和细胞学系北京医科大学病理系

目的比较正常肝与原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）核基质蛋白的异同，观察是否有ＨＣＣ特异性核基质蛋白的存在。方法用双向电泳方法比较了３例正常肝和８例ＨＣＣ核基质蛋白成分。结果正常肝和ＨＣＣ的核基质蛋白组成极为相似，但在ＨＣＣ中... 详细信息

目的比较正常肝与原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）核基质蛋白的异同，观察是否有ＨＣＣ特异性核基质蛋白的存在。方法用双向电泳方法比较了３例正常肝和８例ＨＣＣ核基质蛋白成分。结果正常肝和ＨＣＣ的核基质蛋白组成极为相似，但在ＨＣＣ中发现至少有４个ＨＣＣ的特异性核基质蛋白。其中以分子量为６２０００、等电点为５．３的蛋白最具代表性，它存在于所研究的８例ＨＣＣ中。其余３个ＨＣＣ特异性蛋白亦存在于大多数ＨＣＣ中。３例正常肝组织中未见有这４个ＨＣＣ特异性核基质蛋白。结论ＨＣＣ确实有ＨＣＣ特异性核基质蛋白的存在，它的发现可能会为ＨＣＣ的发生、发展、发病机理的研究提供一个新途径。

关键词：肝肿瘤肝细胞癌核基质蛋白

核基质蛋白在姜黄素诱导人永生化表皮HaCaT细胞凋亡过程中的变化研究

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核基质蛋白在姜黄素诱导人永生化表皮HaCaT细胞凋亡过程中的变化...

作者：杨海波厦门大学

学位级别：硕士

本文在鉴定姜黄素(curcumin,Cur)诱导人永生化表皮HaCaT细胞凋亡的基础上,应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术,对HaCaT细胞诱导凋亡过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成的变化进行系统研究。分析鉴定与... 详细信息

本文在鉴定姜黄素(curcumin,Cur)诱导人永生化表皮HaCaT细胞凋亡的基础上,应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术,对HaCaT细胞诱导凋亡过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成的变化进行系统研究。分析鉴定与表皮细胞凋亡相关的特异核基质蛋白,并探索它们在表皮细胞凋亡过程中的调控作用,以期能够在较为整体的水平上进一步认识表皮细胞凋亡及其机理,从而找出表皮细胞凋亡研究的新方向。实验结果显示,经7.5μg/mL姜黄素处理之后,人永生化表皮HaCaT细胞的增殖受到明显抑制,细胞生长抑制率达83.03%;细胞周期检测出现亚二倍体(亚G期)细胞峰值,细胞凋亡率达13.1%,并发生G/M期阻滞;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA“梯状”条带:光镜和透射电镜观察结果显示,经姜黄素诱导处理后的HaCaT细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、出现凋亡小体等显著的凋亡特征;而且与细胞凋亡相关的癌基因bcl-2表达下调,抑癌基因p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示,经姜黄素处理的HaCaT细胞的核基质和中间纤维比对照组明显稀疏,且分布更加不均匀,并分别与核纤层连系,形成趋于断裂但相对还较为完整的网状结构;双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导HaCaT细胞凋亡前后存在27个差异表达的核基质蛋白,经质谱分析,鉴定了其中的21个蛋白,其中在凋亡的HaCaT细胞中表达上调的9种蛋白鉴定为:Chaperonin containing TCP1、RNA binding motif、Hypothetical proteinAt4g18230、serine proteinase inhibitor、SUMO-1-specific protease、nucleoporinNUP107、coagulation factor V precursor、Apoptosis-inducing factor、Caspase 3;表达下调的6种蛋白质为LMNA protein、Vimentin、Glycosyl transferase,family 2、Actin、MAP/microtubule affinity-regulating kinase、translation initiation factor IF-2。诱导凋亡处理后新出现的6种蛋白质为Alcohol dehydrogenase[NADP]、锌指蛋白ZNF483、MHC classⅠantigen、M-phase phosphoprotein-1、Heat shock 90kDaprotein、Protein kinase D3。鉴定出的21种核基质蛋白中除vimentin、actin,LMNAprotein,NUP107,HSP90,SUMO-4蛋白酶,ZNF483 protein,MHC classⅠantigen,Chaperonin containing TCP1外,其余均为首次在核基质中发现的蛋白质。研究结果表明,7.5μg/mL姜黄素对人永生化表皮HaCaT细胞的凋亡具有显著诱导作用,在HaCaT细胞凋亡过程中不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化,而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与表皮细胞凋亡诱导相关特异核基质蛋白的存在及其对表皮细胞凋亡诱导的调控作用。

关键词：人永生化表皮HaCaT细胞核基质-中间纤维系统核基质蛋白细胞凋亡姜黄素

核基质蛋白22与尿细胞学检测对膀胱癌诊断价值的荟萃分析

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核基质蛋白22与尿细胞学检测对膀胱癌诊断价值的荟萃分析

作者：胡海洋重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：系统评价核基质蛋白22（NMP22）和尿细胞学对膀胱癌诊断价值。方法：制定纳入、排除标准和检索策略，检索相关文献，根据纳入、排除标准筛选文献并评价评价质量和提取数据，用MetaDiSc l.4进行荟萃分析。结果：共检索到相关文献26... 详细信息

目的：系统评价核基质蛋白22（NMP22）和尿细胞学对膀胱癌诊断价值。方法：制定纳入、排除标准和检索策略，检索相关文献，根据纳入、排除标准筛选文献并评价评价质量和提取数据，用MetaDiSc l.4进行荟萃分析。结果：共检索到相关文献266篇，排除256篇，对符合纳入标准的10篇文献行荟萃分析，共4895例。核基质蛋白22检测膀胱癌的总灵敏度为0.76（95%CI0.74～0.77）、总特异度为0.80（95%CI0.79～0.82）、总受试者工作特征曲线下面积（AUC）为0.8533;尿细胞学检测总灵敏度0.36（95%CI0.34～0.38）,总特异度0.94（95%CI0.93～0.95），总受试者工作特征曲线下面积为0.8628。二者总诊断精确度Q*指数分别为0.7863和0.7934。结论：核基质蛋白22对膀胱癌诊断的灵敏度较细胞学检测明显增高，特异度较细胞学检测偏低，总体诊断效能中等，与尿细胞学无明显差异，目前尚不能取代尿细胞学检测。

关键词：膀胱癌膀胱肿瘤核基质蛋白尿细胞学荟萃分析

核基质蛋白在人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中的变化研究

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核基质蛋白在人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中的变化研究

作者：郑燕彬厦门大学

学位级别：硕士

本文在鉴定姜黄素(curcumin, Cur)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的基础上,应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术,对MG-63细胞诱导凋亡过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成的变化进行系统研究。分析鉴定与肿... 详细信息

本文在鉴定姜黄素(curcumin, Cur)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的基础上,应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术,对MG-63细胞诱导凋亡过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成的变化进行系统研究。分析鉴定与肿瘤细胞凋亡相关的特异核基质蛋白,并探索它们在肿瘤细胞凋亡过程中的调控作用,以期能够在较为整体的水平上进一步认识肿瘤细胞凋亡及其机理,从而找出肿瘤细胞凋亡研究的新方向。实验结果显示,经7.5μg/mL姜黄素处理之后,人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖受到明显抑制,发生了G0/G1期阻滞,出现明显的亚G0/G1期凋亡峰,光镜和透射电镜观察结果显示,经姜黄素诱导处理后的MG-63细胞出现了细胞形态规则、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、出现凋亡小体等显著的凋亡特征;而且凋亡相关基因bcl-2和突变型p53的表达下调、bax和fas基因的表达上调,并且出现细胞凋亡特征性DNA降解梯状条带;选择性抽提整装光镜和电镜观察显示,经姜黄素处理的MG-63细胞的核基质和中间纤维比对照组明显稀疏,且分布更加不均匀,并分别与核纤层连系,形成趋于断裂但相对还较为完整的网状结构;双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导MG-63细胞凋亡前后存在27个差异表达的核基质蛋白,经质谱分析,鉴定了其中的21个蛋白,其中在凋亡的MG-63细胞中表达上调的蛋白鉴定为:DNA断裂诱导转录子DNA-damage-inducible transcript 4-like、盘状结构域Discoidin、DNA聚合酶zeta等7种蛋白;表达下调的蛋白质为:Prohibitin、Glutamate dehydrogenase、Vimentin、Human Nucleophosmin、Heat-shock 70等14种蛋白。其中除Vimentin、Prohibitin、Nucleophosmin和Hsp70外,其余均为首次在核基质中发现的蛋白质。研究结果表明,7.5μg/mL姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞的凋亡具有显著诱导作用,在MG-63细胞凋亡过程中不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了与其相应非肿瘤细胞相对的凋亡特征性变化,而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与肿瘤细胞凋亡诱导相关特异核基质蛋白的存在及其对肿瘤细胞凋亡诱导的调控作用。

关键词：人成骨肉瘤细胞核基质-中间纤维系统核基质蛋白细胞凋亡姜黄素

视黄酸诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化过程中核基质蛋白组成的变化

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第10期24卷 957-967页

作者：梁盈张秀艳李祺福石松林赵振利陈晋安教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

在鉴定视黄酸(retinoic acid,RA)诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的基础上,应用免疫细胞化学、选择性抽提和蛋白质组学分析技术,对SK-N-SH细胞诱导分化过程中核基质蛋白组成变化进行了系统研究.实验结果显示,经1μmol/L RA处理后SK-N... 详细信息

在鉴定视黄酸(retinoic acid,RA)诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的基础上,应用免疫细胞化学、选择性抽提和蛋白质组学分析技术,对SK-N-SH细胞诱导分化过程中核基质蛋白组成变化进行了系统研究.实验结果显示,经1μmol/L RA处理后SK-N-SH细胞呈极性状,伸出较长的轴突样突起,胞体逐渐变小变圆.免疫细胞化学结果显示,处理后神经细胞特异表达的蛋白synaptophysin、NSE、MAP2的表达量都较对照组有明显增强.双向凝胶电泳分析显示,在RA诱导SK-N-SH细胞分化前后存在52个差异表达的核基质蛋白,经质谱分析,鉴定了其中的41个蛋白.蛋白印迹杂交进一步确证了诱导分化差异表达核基质蛋白中nucleophosmin和prohibitin等的表达变化.研究结果表明,1μmol/LRA对SK-N-SH细胞具有显著的诱导分化作用,在SK-N-SH细胞分化过程中,其核基质蛋白组成发生了明显变化.这些变化对于揭示人神经母细胞瘤细胞癌变与逆转机制和肿瘤细胞增殖与分化调控机理均有十分重要的意义,从而为研究神经系统正常发育过程及神经系统疾病的发病机理提供科学依据.

关键词：核基质蛋白诱导分化人神经母细胞瘤视黄酸