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朝医鹿茸大补汤对咳嗽变异性哮喘豚鼠TLR4/WNT-5A信号通路的影响

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中国药理学通报 2023年第5期39卷 978-985页

作者：李慧文金丽娜宋艺兰李良昌延光海孟庆玲李欢刘凯月郑明昱吉林省过敏性常见疾病免疫与靶向研究重点实验室吉林延吉133002 延边大学附属医院新生儿科吉林延吉133002 延边大学医学院吉林延吉133002

目的探讨鹿茸大补汤对咳嗽变异性哮喘的作用机制。方法将豚鼠随机分为正常组(CON)、模型组(OVA)、鹿茸大补汤高剂量组(HIGH)、鹿茸大补汤低剂量组(LOW)、地塞米松组(DEX)。通过烟熏加注射卵清蛋白(OVA)、氢氧化铝溶液及雾化吸入激发咳... 详细信息

目的探讨鹿茸大补汤对咳嗽变异性哮喘的作用机制。方法将豚鼠随机分为正常组(CON)、模型组(OVA)、鹿茸大补汤高剂量组(HIGH)、鹿茸大补汤低剂量组(LOW)、地塞米松组(DEX)。通过烟熏加注射卵清蛋白(OVA)、氢氧化铝溶液及雾化吸入激发咳嗽来创建咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)模型。最后一次刺激豚鼠后24 h内解剖,取其肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。利用免疫吸附(ELISA)法测定BALF中炎症细胞种类和炎性细胞因子的含量;取左肺中叶,进行HE染色和Masson染色,观察病理变化;用免疫组织化学染色法观察肺部组织中TLR4和WNT-5A蛋白的表达分布;从左肺上叶提取蛋白做免疫蛋白印迹(Western blot),测肺组织中TLR4、WNT-5A蛋白水平;用免疫荧光法检测肺组织中TLR4、WNT-5A荧光强度;采用流式细胞术在豚鼠肺组织中检测IL-4和IFN-γ。结果鹿茸大补汤能够改善豚鼠气道炎症反应,抑制胶原纤维沉积,降低BALF中IL-4、IL-5、IL-13含量,抑制肺组织中TLR4、WNMT-5A的蛋白表达,升高肺组织中的IFN-γ水平,同时降低IL-4水平。结论鹿茸大补汤可能通过TLR4/WNT-5A信号通路抑制CVA的发生。

关键词：朝医鹿茸大补汤咳嗽变异性哮喘 TLR4 WNT-5A 豚鼠

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朝医鹿茸大补汤通过WNT5A和TLR4信号通路交互调节气道重塑的机制研究

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中国药理学通报 2023年第12期39卷 2397-2398页

作者：李欢刘凯月黄丹丹刘若白李良昌延光海郑明昱吉林省过敏性常见疾病免疫与靶向研究重点实验室延边大学医学院吉林延吉133002

支气管哮喘(bronchial asthma)属朝医学“哮喘”范畴,是以气道炎症(airway inflammation)和气道重塑[1](airway remodeling)为明显病理标志的呼吸系统疾病。鹿茸大补汤为太阴人哮喘代表方剂,有补肺气益精血的功用。课题组前期研究显示... 详细信息

支气管哮喘(bronchial asthma)属朝医学“哮喘”范畴,是以气道炎症(airway inflammation)和气道重塑[1](airway remodeling)为明显病理标志的呼吸系统疾病。鹿茸大补汤为太阴人哮喘代表方剂,有补肺气益精血的功用。课题组前期研究显示鹿茸大补汤能够通过WNT5A、TLR4等通路调控哮喘相关蛋白的表达[2],但是对通路间是否存在交互作用尚未验证。故本次利用朝医鹿茸大补汤对WNT5A和TLR4信号通路交互调节的机制进行研究。

关键词：哮喘朝医气道重塑 WNT5A TLR4 NF-κB

朝医麻黄定喘汤对哮喘小鼠MAPKs/NF-κB/VEGF信号通路的影响

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中华中医药杂志 2017年第10期32卷 4448-4452页

作者：杨今实金香孙天一池禹潼延光海朴红梅李良昌郑明善金哲悟郑明昱延边大学延吉133002 江南大学无锡214000

目的:探讨朝医麻黄定喘汤对支气管哮喘小鼠气道炎性反应及对MAPKs/NF-κB/VEGF信号通路表达的影响。方法:清洁级雄性BABL/c小鼠40只,随机分成5组:正常对照组,模型组,麻黄定喘汤低、高剂量组,地塞米松治疗组。用卵清蛋白(OVA)致敏、激发... 详细信息

目的:探讨朝医麻黄定喘汤对支气管哮喘小鼠气道炎性反应及对MAPKs/NF-κB/VEGF信号通路表达的影响。方法:清洁级雄性BABL/c小鼠40只,随机分成5组:正常对照组,模型组,麻黄定喘汤低、高剂量组,地塞米松治疗组。用卵清蛋白(OVA)致敏、激发制备小鼠哮喘模型,在末次激发24h后取肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。采用免疫吸附法(ELISA)法检测BALF中炎性细胞分类及炎性细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL-13)的含量;右肺提取蛋白做蛋白印迹(Western Blot)检测肺组织中MAPKs/NF-κB/VEGF通路的表达的变化;左肺组织切片后,进行HE染色、Masson染色及MAPKs/NF-κB/VEGF免疫组织化学染色。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠BALF中炎性细胞总数、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞增多,IL-4、IL-5、IL-13水平显著增高(P朝医麻黄定喘汤可抑制哮喘小鼠气道炎性反应的发生,其机制可能是通过部分抑制MAPKs/NF-κB/VEGF信号通路的表达而实现的。

关键词：朝医麻黄定喘汤哮喘活化的丝裂原活化蛋白激酶核转录因子-κB 血管内皮生长因子

朝医麻黄定喘汤对哮喘小鼠NF-κB信号通路的影响

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中华中医药杂志 2017年第9期32卷 4146-4149页

作者：杨今实延光海朴红梅李良昌金哲悟郑明善金香孙天一郑明昱延边大学延吉133002 江南大学无锡214000

目的:探讨朝医麻黄定喘汤对支气管哮喘小鼠气道重塑及核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:50只清洁级雌性BABL/c小鼠,随机分为5组,每组10只,分别为正常对照组,模型组,麻黄定喘汤低、高剂量组,地塞米松组。以卵清蛋白致敏、激发制... 详细信息

目的:探讨朝医麻黄定喘汤对支气管哮喘小鼠气道重塑及核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:50只清洁级雌性BABL/c小鼠,随机分为5组,每组10只,分别为正常对照组,模型组,麻黄定喘汤低、高剂量组,地塞米松组。以卵清蛋白致敏、激发制备小鼠哮喘模型,在末次激发24h后处死。取小鼠肺泡灌洗液(BALF)及肺组织检测炎性细胞的数量变化,白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-13(IL-13)的水平及NF-κBp65蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组BALF中炎性细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平均增高;肺组织NF-κBp65蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,麻黄定喘汤组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平及NF-κBp65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),不同剂量麻黄定喘汤组间上述各指标间差异无统计学意义。结论:麻黄定喘汤可抑制哮喘小鼠气道重塑的发生,其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路而实现的。

关键词：朝医麻黄定喘汤哮喘气道重塑核因子-κB

朝医加味麻黄定喘汤在小鼠哮喘模型中对ERK信号通路的影响

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中华中医药杂志 2013年第12期28卷 3744-3747页

作者：李京玉冯晓纯金京丽韩莲花延光海郑明昱延边大学中医学院延吉133002 长春中医药大学附属医院长春130002 延边大学医学院延吉133002

目的:探讨加味麻黄定喘汤对哮喘小鼠气道炎症和Thl/Th2类细胞因子变化的影响及其可能机制。方法:雄性BALB/c小鼠32只随机分成4组,即正常组、模型组和加味麻黄定喘汤低、高剂量组。分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹检测支气管... 详细信息

目的:探讨加味麻黄定喘汤对哮喘小鼠气道炎症和Thl/Th2类细胞因子变化的影响及其可能机制。方法:雄性BALB/c小鼠32只随机分成4组,即正常组、模型组和加味麻黄定喘汤低、高剂量组。分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13及γ-干扰素(IFN-γ)含量,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。免疫组化法检测细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在肺内表达。结果:模型组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平升高,IFN-γ水平降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。加味麻黄定喘汤低、高剂量组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平降低,IFN-γ水平明显上升,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。加味麻黄定喘汤能明显减轻哮喘小鼠肺组织病理学改变,加味麻黄定喘汤低、高剂量组之间比较,有显著性差异(P<0.05)。模型组ERK在肺内表达较正常组增强,加味麻黄定喘汤低、高剂量组肺组织中ERK的蛋白质印迹表达均较模型组明显下降(P<0.05)。结论:加味麻黄定喘汤对哮喘小鼠具有保护作用,其机制可能与抑制ERK磷酸化,调节IL-4/IFN-γ平衡失调、减轻炎症细胞浸润有关。

关键词：细胞外信号调节蛋白激酶哮喘气道炎症细胞因子类朝医加味麻黄定喘汤

朝医鹿茸大补汤对哮喘小鼠气道炎性反应的影响

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中华中医药杂志 2016年第9期31卷 3490-3493页

作者：金燕杨今实延光海郑明善金哲悟郑明昱延边大学吉林延吉133002

目的:探讨朝医鹿茸大补汤对哮喘小鼠气道炎性反应的影响。方法:BABL/c小鼠40只随机分成5组:正常对照组,哮喘模型组,鹿茸大补汤低、高剂量组,地塞米松治疗组,每组8只。采用ELISA法检测BALF中炎性细胞分类、计数及炎性细胞因子白细胞介素-... 详细信息

目的:探讨朝医鹿茸大补汤对哮喘小鼠气道炎性反应的影响。方法:BABL/c小鼠40只随机分成5组:正常对照组,哮喘模型组,鹿茸大补汤低、高剂量组,地塞米松治疗组,每组8只。采用ELISA法检测BALF中炎性细胞分类、计数及炎性细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL-13)、干扰素-γ(IFN-γ)含量;Western blot检测肺组织中磷酸化p38MAPK及NF-κB p65蛋白的变化;左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色及NF-κB p65免疫组织化学染色。结果:与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠支气管BALF中炎性细胞计数增多,IL-4、IL-5、IL-13水平增高(P朝医鹿茸大补汤低、高剂量组和地塞米松治疗组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平和肺组织磷酸化p38MAPK及NF-κB p65蛋白表达水平均明显低,IFN-γ水平明显上升(P朝医鹿茸大补汤对小鼠哮喘具有保护作用,其机制可能部分与抑制磷酸化的p38 MAPK以及NF-κB信号通路有关。

关键词：朝医鹿茸大补汤哮喘 p38MAPK NF-κB

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基于朝医四象理论的ABO血型特点

中华中医药杂志 2017年第6期32卷 2501-2504页

作者：鲁冰金春玉林长青丁金明延边大学中医学院吉林延吉133002

目的:通过分析四象体质与ABO血型之间的冷热饮喜好、性格倾向、易感病之间的关联,探讨ABO血型在四象体质自我诊断中发挥的作用。方法:健康人为886名对象,填写设问表和专家验证的方式进行辨象诊断,检测ABO血型以及调查各志愿者的冷热饮... 详细信息

目的:通过分析四象体质与ABO血型之间的冷热饮喜好、性格倾向、易感病之间的关联,探讨ABO血型在四象体质自我诊断中发挥的作用。方法:健康人为886名对象,填写设问表和专家验证的方式进行辨象诊断,检测ABO血型以及调查各志愿者的冷热饮喜好倾向、性格倾向、胃肠病易感与否等,统计分析基于四象体质的ABO血型之间的差异。结果:ABO血型分布特征为O>A>B>AB,B型男性比率少阳太阴人(P<0.05);喜好冷热饮料比率差异:男性A、B、O型显著,AB型不显著;女性A、B、AB型显著,O型不显著;性格倾向比率差异:男性A、O、AB型显著,B型不显著;女性B、A、O型显著、AB型不显著;无论男女内向比外向差异显著。结论:ABO血型与太少阴阳人的冷热饮喜好、性格倾向,易感病之间有密切相关,而且男女有别。男性AB型、女性O型对冷热饮喜好无显著差异。性格倾向中,男A型、女B型差异显著;男性B型、女AB型差异不显著。

关键词：四象体质血型冷热饮性格易感病朝医

朝医麻黄定喘汤结合太极针通过Wnt5a通路对哮喘小鼠气道重塑模型的影响

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时珍国医国药 2020年第7期31卷 1775-1777页

作者：刘若白李慧文范任重金丽娜孟庆玲延光海郑明昱延边大学医学院延边大学附属医院

目的探究麻黄定喘汤结合太极针与哮喘小鼠气道重塑模型的改善作用,其机制是否与Wnt5a信号通路有关。方法将BABL/c雄性小鼠50只,随机分成5组:正常对照组,OVA气道重塑模型组,麻黄定喘汤组,麻黄定喘汤结合太极针组(以下简称"针药结合组"),... 详细信息

目的探究麻黄定喘汤结合太极针与哮喘小鼠气道重塑模型的改善作用,其机制是否与Wnt5a信号通路有关。方法将BABL/c雄性小鼠50只,随机分成5组:正常对照组,OVA气道重塑模型组,麻黄定喘汤组,麻黄定喘汤结合太极针组(以下简称"针药结合组"),地塞米松组。用卵清蛋白和氢氧化铝致敏、激发制备小鼠哮喘模型,在末次激发24h后处死小鼠,取肺泡灌洗液及双侧肺组织。采用ELISA法检测肺泡灌洗液中炎性细胞分类及炎性细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL-13)的含量;使用HE、PAS、免疫组织化学染色对切片后的左肺进行染色,检查小鼠肺组织病理学变化;使用Diff-Quick染色对小鼠肺泡灌洗液中的总细胞和嗜酸性粒细胞进行计数;取右肺提取蛋白作Western blot检测肺组织中WNT5A通路的表达的变化。结果与正常对照组比较,气道重塑哮喘模型组小鼠肺泡灌洗液中炎性细胞计数增多,IL-4、IL-5、IL-13水平增高(P朝医针药结合组和地塞米松治疗组小鼠的肺泡灌洗液中炎性细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平和肺组织Wnt5a表达水平均明显低。结论朝医麻黄定喘汤结合针灸可能通过WNT5A通路对哮喘小鼠气道模型起到改善作用。

关键词：朝医麻黄定喘汤哮喘太极针 Wnt5a

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朝医荆防败毒散对哮喘小鼠气道炎症的影响

朝医荆防败毒散对哮喘小鼠气道炎症的影响

作者：杨今实延边大学

学位级别：硕士

目的:探究朝医荆防败毒散对哮喘小鼠丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)和核因子-kB(Nuclear factor-kappa B,NF-kB)信号通路表达的影响。方法:将清洁级的雄性BALB/c小鼠60只,应用随机数表法将上述小鼠分为5组... 详细信息

目的:探究朝医荆防败毒散对哮喘小鼠丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)和核因子-kB(Nuclear factor-kappa B,NF-kB)信号通路表达的影响。方法:将清洁级的雄性BALB/c小鼠60只,应用随机数表法将上述小鼠分为5组,分别为正常对照组、哮喘模型组、朝医荆防败毒散高、低剂量组及地塞米松阳性对照组,每组均为12只。用卵清蛋白300μg,明矾3ml,0.9%氯化钠注射液15ml制成混合液,除正常对照组外,其余4组小鼠在第1、7、14天致敏,采用腹腔注射,每只给予200μl,正常对照组用生理盐水代替。从第23天开始,各组小鼠除正常对照组外,给予5%卵清蛋白(egg white,OVA)雾化吸入,使其激发,正常对照组生理盐水代替。各治疗组从第17天始起,给予灌胃,持续10天。其余各组均采用生理盐水代替。在最后一次激发24小时后,处死小鼠,并取其肺组织以及支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF)。小鼠的肺组织切片给予HE以及PAS染色,观察其病理学变化,给予Diff-Quick染色,以观察其BALF中的炎性细胞种类及数量,行酶联免疫吸附试验(Enzymes linked immunosorbent assay,ELISA)检测,评价小鼠 BALF 中白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白介素-5(Interleukin-5,IL-5)、白介素-13(Interleukin-13,IL-13)以及 γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)的水平,用免疫组织化学染色法以及蛋白印迹法(Western Blot)检测各组小鼠肺组织中p38MAPK的磷酸化及NF-kBp65的活化水平。结果:1.经HE和PAS染色法,我们可以从中观察到,各组小鼠的肺组织切片中,哮喘模型组的小鼠,其气道壁和气道的平滑肌与正常对照组相比增厚较为明显,黏膜下层较之明显增宽,而黏膜上皮出现增生,其管腔内满布阻塞的黏液,并可见杯状细胞增生;朝医荆防败毒散低、高剂量组和地塞米松组上述改变较哮喘模型组明显减轻,肺组织损伤程度轻。2.对各组小鼠的BALF离心后行细胞涂片进而进行Diff-Quick染色,哮喘模型组可观察到大量的嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)聚积,对其进行各种炎性细胞的计数,其结果显示,包括EOS、中性粒细胞(Neutrophil,NE)以及淋巴细胞(Lymphocyte,LYM)在内的多种炎症细胞明显增多(P朝医荆防败毒散以及地塞米松的治疗后,与哮喘模型组相比,聚集的EOS明显减少,细胞总数以及分类细胞数量明显降低(P朝医荆防败毒散低、高剂量组和地塞米松阳性对照的IL-4、IL-5以及IL-13的水平较哮喘组而言均有所降低,而IFN-γ水平显著升高(P朝医荆防败毒散高剂量组以及地塞米松阳性对照组与哮喘模型组相比NF-κBp65的明显减少(P朝医荆防败毒散能有效抑制p38MAPK的磷酸化和NF-κBp65的活化,能明显缓解哮喘气道炎症。

关键词：哮喘朝医荆防败毒散 p38MAPK NF-κBp65