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葡萄糖调节蛋白在糖尿病性白内障发病机制中的作用

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眼视光学杂志 2008年第4期10卷 266-268页

作者：李漫丽吴雅臻戚卉范斌张小猛吉林大学附属第二医院眼科吉林长春130041

目的探讨葡萄糖调节蛋白(78 kd glucose-regu-lated protein,grp78)在糖尿病性白内障发病机制中的作用。方法32只Wistar大鼠随机分为4组:链脲佐菌素(strepto-zotocin,STZ)糖尿病大鼠1、2、3个月模型组及正常对照组,每组8只。对大鼠采用S... 详细信息

目的探讨葡萄糖调节蛋白(78 kd glucose-regu-lated protein,grp78)在糖尿病性白内障发病机制中的作用。方法32只Wistar大鼠随机分为4组:链脲佐菌素(strepto-zotocin,STZ)糖尿病大鼠1、2、3个月模型组及正常对照组,每组8只。对大鼠采用STZ 60mg/kg的剂量一次性腹腔注射制备糖尿病模型。各时段分批处死大鼠,每只大鼠左眼采用免疫组织化学法,右眼用半定量RT-PCR的方法检测晶状体上皮细胞中grp78的表达情况。结果Grp78在正常大鼠晶状体上皮细胞中少量表达,免疫组化光密度值为28.66±5.90,RT-PCR检测光密度比值为0.889±0.006;糖尿病大鼠1、2、3个月组免疫组化光密度值分别为49.56±6.54、63.74±9.05、78.15±9.05,RT-PCR光密度比值分别为0.920±0.011、0.948±0.004、0.976±0.006。经统计学分析,糖尿病组大鼠晶状体上皮细胞中grp78的表达较正常组高(P<0.01),并随着病程的延长而表达增加(P<0.05)。结论葡萄糖调节蛋白参与了糖尿病性白内障的发生、发展。

关键词：糖尿病性白内障葡萄糖调节蛋白晶状体上皮细胞大鼠

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糖性白内障免疫组化和超微结构研究

医学研究杂志 2007年第7期36卷 68-69页

作者：徐国兴王婷婷福建医科大学附属第一医院福建省眼科研究所福州350005

糖性白内障常见于皮质和后囊膜下混浊,其特点是进展较快,常常同时双眼发病.糖性白内障发病的确切机制至今仍不甚明了,糖性白内障的发病率有明显上升的趋势,但该病无明显有效防治方法.

关键词：糖性白内障细胞超微结构免疫组化晶体上皮细胞糖尿病性白内障晶状体上皮发病率后囊浑浊

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放射卫生

中国医学文摘（卫生学分册） 2007年第6期24卷 364-367页

072484 视屏辐射致电脑操作人员DNA损伤；072485 手机模拟电磁信号对人眼晶状体上皮细胞DNA损伤及修复的影响；072486 移动电话射频电磁场诱导膜受体聚簇及噪声磁场的干预；072487 电磁辐射对大鼠海马。

关键词：放射卫生细胞DNA损伤电脑操作人员磁场诱导晶状体上皮视屏辐射移动电话大鼠海马

人晶状体的基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制剂:可能与皮质性白内障形成有关

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世界核心医学期刊文摘（眼科学分册） 2005年第4期1卷 43-44页

作者： Sachdev N.H. Di Girolamo N. Nolan T.M. M.T. Coroneo 杨建刚 Department of Ophthalmology Prince of Wales Hospital University of NSW Sydney NSW 2052 Australia

PURPOSE. To characterize the expression of matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitors of matrix metalloproteinases (TIMPs) in human cortical cataract and to determine whether there is a correlation with the localization of cortical cataract. To evaluate the expression and activity of MMPs and TIMPs after cytokine and UV- B exposure in a human lens epithelial cell line. METHODS. Twenty- eight human donor eyes with cortical cataract and 21 normal human donor eyes were photographed. Thirteen cortical cataract and six normal lenses were immunohistochemically analyzed for MMP- 1, - 2,- 3, and- 9 and TIMP- 1,- 2, and- 3. Twelve fresh cortical cataract and 12 normal lenses were divided into quadrants to quantify, by ELISA, the expression of MMP- 1,- 2,- 3, and- 9 and TIMP- 1. Three fresh cortical cataract and three control lenses were assessed for MMP- 1,- 2, and- 9 activity by SDS- PAGE zy- mography. Human lens epithelial cells (HLE- SRA- 01/04) were exposed to proinflammatory cytokines and UV- B radiation to determine the protein expression profiles of MMP- 1,- 2,- 3, and- 9 and TIMP- 1 and- 2. RESULTS. Immunohistochemical analysis revealed specific localization of MMP- 1 within lens epithelium and cortical lens fibers of cortical cataract. Normal lenses had equally low MMP- 1,- 2,- 3, and- 9 and TIMP- 1, - 2, and- 3 immunoreactivity, expression, and activity in all lens quadrants. IL- 1 and TNF- α upregulated the expression of MMP- 2,- 3, and- 9, and UV- B upregulated the expression of MMP- 1 in the SRA- 01/04 HLE cell line. CONCLUSIONS. This is the first study to localize the expression of MMP- 1 in cataracts with clinically observed opacification in vivo and to examine the expression induced by UV- B, in vitro.

关键词：皮质性白内障晶状体上皮基质金属蛋白酶细胞因子免疫组化法蛋白表达谱免疫反应性酶谱法定量检查评估人

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脂筏的结构与功能及在眼科学领域的研究进展

国外医学（眼科学分册） 2005年第3期29卷 155-158页

作者：金红颖姚克浙江大学医学院附属第二医院眼科中心杭州310009

生物膜与细胞的功能息息相关。脂筏是一种特殊的膜结构微区,具有参与胞吞胞饮、信号转导、运输胆固醇等重要功能。一些传染性疾病、心血管疾病、肿瘤、肌营养不良和阮病毒病可能与脂筏的功能紊乱有关。小窝是脂筏的一种,以小窝蛋白为标... 详细信息

生物膜与细胞的功能息息相关。脂筏是一种特殊的膜结构微区,具有参与胞吞胞饮、信号转导、运输胆固醇等重要功能。一些传染性疾病、心血管疾病、肿瘤、肌营养不良和阮病毒病可能与脂筏的功能紊乱有关。小窝是脂筏的一种,以小窝蛋白为标记蛋白;后者有三种亚型,存在于不同的细胞。晶状体、视网膜和角膜上均发现有小窝的存在及小窝蛋白-1的表达。小窝蛋白-1不仅参与晶状体上皮细胞间的信号转导,还与细胞缝隙连接蛋白相互作用,参与细胞间的通讯。小窝还参与角膜伤口愈合修复及视网膜杆细胞外节突触发送器的释放过程。

关键词：眼科学小窝蛋白-1 蛋白相互作用细胞缝隙连接角膜伤口愈合信号转导传染性疾病心血管疾病肌营养不良晶状体上皮功能紊乱标记蛋白视网膜细胞间生物膜膜结构胆固醇病毒病发送器细胞外

rhLEDGF p52基因原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化

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眼科新进展 2007年第1期27卷 25-29页

作者：赵海生王一中国人民解放军第三军医大学附属西南医院眼科重庆市400038

目的构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,获得rhLEDGFp52蛋白。方法利用基因重组技术将rhLEDGFp52基因构建于原核表达载体pET30a(+)中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,经免疫蛋白印迹试验... 详细信息

目的构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,获得rhLEDGFp52蛋白。方法利用基因重组技术将rhLEDGFp52基因构建于原核表达载体pET30a(+)中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,经免疫蛋白印迹试验对rhLEDGFp52进行鉴定并用***方法进行纯化。结果成功构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得可溶性形式表达,rhLEDGFp52蛋白表达量占菌体蛋白总量的34.63%.WesternBlot结果显示rhLEDGF2蛋白能够特异性与LEDGF-ab结合。***方法进行纯化后的rhLEDGFp52,最终质量浓度达520mg·L-1,分析其纯度达87.93%.结论成功获得rhLEDGFp52蛋白,这为深入研究其生物学功能奠定了基础。

关键词：晶状体上皮 p52基因表达蛋白纯化