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人骨髓间充质干细胞与人股骨头脱细胞骨基质体外黏附及生长的早期观察

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人骨髓间充质干细胞与人股骨头脱细胞骨基质体外黏附及生长的早期...

作者：熊小天泸州医学院

学位级别：硕士

目的：将正常的股骨头与缺血性坏死的股骨头经脱细胞处理，处理后的脱细胞骨基质与体外获取的人骨髓间充质干细胞（humanmesenchymal stem cells，hMSCs）混合培养，观察并记录hMSCs在两种脱细胞骨基质体外培养时早期的黏附、生长情况... 详细信息

目的：将正常的股骨头与缺血性坏死的股骨头经脱细胞处理，处理后的脱细胞骨基质与体外获取的人骨髓间充质干细胞（humanmesenchymal stem cells，hMSCs）混合培养，观察并记录hMSCs在两种脱细胞骨基质体外培养时早期的黏附、生长情况的差异,探讨产生差异现象的原因，为MSCs移植治疗股骨头坏死的研究提供基础理论及实验依据。方法：采集志愿提供无骨髓相关疾病患者的骨髓，采用全骨髓法培养、分离hMSCs，细胞鉴定;取生长状态良好的P1、P2、P3代细胞分别培养12天，绘制相应代系hMSCs的生长曲线图。收集股骨头缺血坏死及股骨颈骨折患者的股骨头，经冠状面中心截取骨片，经脱细胞处理后制作成脱细胞骨基质，分别命名为骨坏死组、非骨坏死组，对两组脱细胞骨基质进行HE染色及免疫组化处理，确定骨基质无细胞成分及观察骨基质中纤连蛋白（fibronectin，FN）、层粘连蛋白（laminin，LN）分布的情况。将两组脱细胞骨基质接种A（2×105/mL）、B（4×105/mL）、C（6×105/mL）3组不同浓度的第3代hMSCs,分别培养24小时、72小时及7天，记录观察每组的细胞黏附情况。计算相同浓度hMSCs下两组培养24小时的黏附率,并应用SPASS17.0软件分析（P 观察细胞黏附情况;对培养72小时及7天组取培养后的复合物HE染色后观察细胞黏附分布情况，分别比较骨坏死与非骨坏死组、不同浓度组细胞黏附情况的差别。结果：全骨髓法培养分离可获得纯度较高hMSCs实验用种子细胞，细胞呈均一的梭形、多角形、漩涡状或辐射状生长，其生长曲线呈符合细胞指数增殖的S形，细胞经鉴定符合hMSCs表征。脱细胞骨基质HE染色后观察未见细胞成分，免疫组化检测发现骨基质中的FN、LN在非坏死组脱细胞骨基质中反应连续，在坏死组则中断。脱细胞骨基质与hMSCs体外培养表现，12小时内细胞完全贴附于瓶壁或黏附于脱细胞骨基质上，培养液中无悬浮未贴壁或黏附细胞。接种相同hMSCs浓度培养24小时细胞黏附率均数比较，骨坏死组与非骨坏死组分别为（44.40±3.22）%、（67.01±3.08）%。共培养24小时组激光共聚焦显微镜下观察发现C组黏附细胞数量明显高于A组，其中坏死组骨坏死区域黏附的细胞数量相对要少。共培养72小时及7天组表现为，非坏死组细胞黏附较均匀，而坏死组细胞黏附相对不均匀，靠近骨坏死区域细胞黏附较差，甚至个别骨块骨坏死区域无细胞黏附现象，而远离骨坏死区域细胞黏附情分布情况均与对照非骨坏死组接近。接种hMSCs浓度越高， hMSCs在两组脱细胞骨基质上生长侵入深度均有增加，且后者细胞侵入生长深度增加要明显。结论：全骨髓法可成功分离获得hMSCs，经鉴定符合hMSCs的表型特点。运用低渗和除垢剂二步法能有效对骨块进行脱细胞处理。非股骨头缺血坏死脱细胞骨基质更利于hMSCs的黏附及生长侵入，随hMSCs接种浓度的增高，生长侵入骨基质的细胞数量及侵入深度均增加。

关键词：骨髓间充质干细胞股骨头脱细胞骨基质早期观察

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早期观察与护理干预对新生儿黄疸的影响

齐鲁护理杂志（上旬刊） 2012年第11期18卷 27-28页

作者：唐玲扬州市第一人民医院江苏扬州225001

目的:探讨早期观察与护理干预对新生儿黄疸的影响。方法:将84例黄疸患儿随机分为研究组和对照组各42例。对照组给予传统护理方法,研究组在此基础上实施早期观察及护理干预措施。分析比较两组患儿的胆红素水平下降情况及退黄时间。结果:... 详细信息

目的:探讨早期观察与护理干预对新生儿黄疸的影响。方法:将84例黄疸患儿随机分为研究组和对照组各42例。对照组给予传统护理方法,研究组在此基础上实施早期观察及护理干预措施。分析比较两组患儿的胆红素水平下降情况及退黄时间。结果:研究组患儿在治疗3 d后及治疗5 d后经皮测胆红素指数明显低于对照组(P早期观察与护理干预能够有效阻止胆红素损害,缩短新生儿退黄时间,提高其生存质量。

关键词：新生儿黄疸早期观察护理干预

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早期观察与护理干预对新生儿黄疸的影响

中国实用医药 2014年第21期9卷 189-191页

作者：黄艾艾邓建平南方医科大学附属何贤纪念医院新生儿科 511400

目的探讨早期观察和护理干预对新生儿黄疸的影响。方法 100例新生儿黄疸患儿随机分为两组,实验组患儿采取早期观察和护理干预,对照组患儿采取传统的护理措施,比较两组患儿不同护理措施下的胆红素指数、退黄时间以及两组患者的治疗总有... 详细信息

目的探讨早期观察和护理干预对新生儿黄疸的影响。方法 100例新生儿黄疸患儿随机分为两组,实验组患儿采取早期观察和护理干预,对照组患儿采取传统的护理措施,比较两组患儿不同护理措施下的胆红素指数、退黄时间以及两组患者的治疗总有效率情况。结果经过治疗发现,实验组患儿治疗前后的胆红素指数与对照组患儿相比较,差异有统计学意义(P早期观察和护理干预可以提高患儿生理性黄疸恢复的有效率,缩短患儿的退黄时间,可以更好地降低新生儿的胆红素指数,避免病理性黄疸的发生。

关键词：早期观察护理干预新生儿黄疸影响

早期观察联合人工辅助激活在卵胞浆内单精子显微注射治疗周期中的应用

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现代中西医结合杂志 2018年第8期27卷 799-802页

作者：唐永梅韦继红梁明明韦立红广西柳州市妇幼保健院广西柳州545001

目的探讨卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)后早期观察卵母细胞联合人工辅助激活(AOA)技术对ICSI受精率的影响。方法选择接受ICSI的患者60例共61个ICSI周期作为研究组,观察卵母细胞第二极体释放情况,对未排出第二极体的卵母细胞用离子霉素孵... 详细信息

目的探讨卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)后早期观察卵母细胞联合人工辅助激活(AOA)技术对ICSI受精率的影响。方法选择接受ICSI的患者60例共61个ICSI周期作为研究组,观察卵母细胞第二极体释放情况,对未排出第二极体的卵母细胞用离子霉素孵育5~10 min行辅助激活,激活时间分别为3 h、5 h、18 h。以同期常规ICSI 23例23个周期为对照组。观察受精失败率及离子霉素激活时机对卵母细胞的受精率及形成胚胎的发育能力的影响。结果研究组中前次ICSI受精失败再次ICSI受精失败发生率为36.0%(9/25),严重圆头畸形精子症当次ICSI受精失败或低下(受精率0.05),18 h激活效率最低,与3 h、5 h比较差异有统计学意义(P均早期观察卵母细胞联合AOA技术可以提高ICSI受精率,是改善ICSI受精失败的有效措施,具有较好的临床应用价值。

关键词： ICSI受精失败早期观察人工辅助激活

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牛心包瓣代替心脏瓣膜的早期观察

上海医学 1980年第3期 1-5页

作者：王一山冯卓荣叶椿秀朱洪生范关荣吴国良朱晓萍郑道声陆慧华孙大金武晋鸿陆瑞昶上海第二医学院附属第三人民医院胸外科上海第二医学院附属第三人民医院心内科上海第二医学院附属第三人民医院麻醉科上海第二医学院附属第三人民医院超声心动图室上海第二医学院针麻研究室

本文报告牛心包瓣代替心脏瓣膜11例,其中风湿性二尖瓣关闭不全伴狭窄10例,主动脉瓣关闭不全1例,心代偿功能Ⅳ级者4例,Ⅲ级者7例。手术死亡2例.9例存活者随访3～9月,临床症状大部分消失,二尖瓣区杂音均消失,X线胸片示心影明显缩小,肺充... 详细信息

本文报告牛心包瓣代替心脏瓣膜11例,其中风湿性二尖瓣关闭不全伴狭窄10例,主动脉瓣关闭不全1例,心代偿功能Ⅳ级者4例,Ⅲ级者7例。手术死亡2例.9例存活者随访3～9月,临床症状大部分消失,二尖瓣区杂音均消失,X线胸片示心影明显缩小,肺充血减轻.7例超声心动图示心脏各房室内径均明显缩小,而主动脉内径都明显增大,人工瓣膜开放和关闭线条清晰.6例心阻抗图测定显示心脏排血功能明显改善.心电图改变不明显.

关键词：牛心包瓣房室环术前生物瓣二尖瓣僧帽瓣心瓣膜主动脉瓣关闭不全停搏液换置早期观察架脚低排综合征瓣环