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早孕因子的研究进展

中国生物制品学杂志 2010年第12期23卷 1392-1396页

作者：吴晓亮练玉银王家骥广州医学院公共卫生与全科医学学院广州510182

早孕因子(Early pregnancy factor,EPF)是一种具有免疫抑制和生长因子特性的分泌性蛋白质,在受精后的孕血清及某些恶性肿瘤患者血清中均能检测到。EPF与伴侣素10(Chaperonin 10,Cpn10)是同源的。EPF首先通过玫瑰花结抑制试验在哺乳动物... 详细信息

早孕因子(Early pregnancy factor,EPF)是一种具有免疫抑制和生长因子特性的分泌性蛋白质,在受精后的孕血清及某些恶性肿瘤患者血清中均能检测到。EPF与伴侣素10(Chaperonin 10,Cpn10)是同源的。EPF首先通过玫瑰花结抑制试验在哺乳动物的孕血清中被发现。EPF单克隆抗体在妊娠诊断、肿瘤诊断和治疗等方面均有广阔的应用潜力。本文就EPF的来源、化学结构和生化特性、分离纯化及检测、作用及应用等研究进展作一综述。

关键词：早孕因子玫瑰花结抑制试验伴侣素

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早孕因子对淋巴细胞增殖的影响

中国病理生理杂志 1998年第4期14卷 410-413页

作者：邓松华苏宝田徐振山安徽医科大学病理生理教研室安徽蚌埠医学院免疫学教研室

目的：探讨早孕因子（ＥＰＦ）活性物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及其在胎母免疫中的作用。方法：使用离子交换层析、亲和层析和凝胶过滤技术提纯３～６周孕妇血清中ＥＰＦ；用淋巴细胞转化法观察ＥＰＦ对淋巴细胞的作用。结果：ＥＰＦ... 详细信息

目的：探讨早孕因子（ＥＰＦ）活性物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及其在胎母免疫中的作用。方法：使用离子交换层析、亲和层析和凝胶过滤技术提纯３～６周孕妇血清中ＥＰＦ；用淋巴细胞转化法观察ＥＰＦ对淋巴细胞的作用。结果：ＥＰＦ活性物Ｇ４、Ｇ３及孕血清均能抑制淋巴细胞ＤＮＡ合成，尤以Ｇ４作用更为明显，并呈一定剂量依赖性。结论：ＥＰＦ可能在介导、调控妊娠早期诱导的免疫抑制。

关键词：淋巴细胞免疫抑制生殖早孕因子

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早孕因子分离纯化方法的优化

免疫学杂志 2012年第12期28卷 1073-1076页

作者：温志锋练玉银王家骥聂湘辉林燕棉广州医学院公共卫生学院 510182

目的对正常早孕妇女血清中早孕因子(EPF)的分离纯化过程进行优化,以提高EPF的回收率。方法依次采用DEAEFast Flow离子交换色谱和Heparin Fast Flow亲和色谱,从妊娠12周内的正常早孕妇女混合血清中提纯EPF,采用活性玫瑰花结抑制试验(Ea-R... 详细信息

目的对正常早孕妇女血清中早孕因子(EPF)的分离纯化过程进行优化,以提高EPF的回收率。方法依次采用DEAEFast Flow离子交换色谱和Heparin Fast Flow亲和色谱,从妊娠12周内的正常早孕妇女混合血清中提纯EPF,采用活性玫瑰花结抑制试验(Ea-RIT)检测各阶段产物的EPF活性,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳鉴定纯化物并测定其相对分子质量,用Western blot鉴定其特异性。结果经Ea-RIT检测后,DEAE Fast Flow离子交换色谱所现2峰中DE-Ⅰ峰为EPF活性峰,HeparinFast Flow亲和色谱所现2峰中H-Ⅱ峰为EPF活性峰。H-Ⅱ峰收集液经SDS-PAGE电泳,结果显示为1条相对分子质量为38 100的蛋白带,Western blot分析表明抗体与抗原匹配性良好。经检测其蛋白含量为0.615 mg,回收率为0.034%,与传统分离纯化四步法的回收率相比明显提高。结论本优化方法对于提纯孕血清中的EPF是可行的,大大提高了纯化效率。

关键词：早孕因子分离纯化优化

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早孕因子多克隆抗体的制备及应用

江苏农业学报 2011年第6期27卷 1321-1324页

作者：杨杰张海涛翟频潘孝青邵乐江苏省农业科学院畜牧研究所江苏南京210014 南京天邦生物科技有限公司江苏南京211102

通过含有家兔早孕因子的重组质粒EPF-pET-32a(+)转化表达宿主菌Escherichia coli Rosetta,IPTG诱导,融合表达硫氧还原蛋白-兔早孕因子Trx-EPF。亲和层析纯化Trx-EPF,并在柱上进行肠激酶酶切,得到EPF蛋白并进行复性。EPF免疫波尔山羊,制... 详细信息

通过含有家兔早孕因子的重组质粒EPF-pET-32a(+)转化表达宿主菌Escherichia coli Rosetta,IPTG诱导,融合表达硫氧还原蛋白-兔早孕因子Trx-EPF。亲和层析纯化Trx-EPF,并在柱上进行肠激酶酶切,得到EPF蛋白并进行复性。EPF免疫波尔山羊,制备羊抗兔家兔早孕因子抗血清,硫酸铵沉淀纯化多克隆抗体,用于家兔早孕检测。Western-blot结果表明,羊抗兔家兔早孕因子多克隆抗体对家兔早孕的检出率达到100%。

关键词：早孕因子家兔多克隆抗体

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早孕因子及其临床应用研究进展

黑龙江畜牧兽医 2019年第5期 41-43页

作者：张诗萌佟翠李鹏龙淼李林杨淑华何剑斌沈阳农业大学畜牧兽医学院沈阳110866

早孕因子是一种与妊娠相关的微量蛋白,已广泛应用于动物的早期妊娠诊断中。目前,国内外学者通过动物体内的血液对早孕因子的生理生化特点及检测方法进行了大量的研究。随着养殖业的不断发展,通过早孕因子可以尽早地鉴定出妊娠母畜,以便... 详细信息

早孕因子是一种与妊娠相关的微量蛋白,已广泛应用于动物的早期妊娠诊断中。目前,国内外学者通过动物体内的血液对早孕因子的生理生化特点及检测方法进行了大量的研究。随着养殖业的不断发展,通过早孕因子可以尽早地鉴定出妊娠母畜,以便降低空怀率,节约饲养成本,由此可见,早孕因子的检测对生产实践具有重大意义。文章主要阐述了早孕因子的理化性质、作用机制及临床应用,并对其在家畜早孕诊断方面的应用前景进行了展望。

关键词：早孕因子化学特性作用机制临床应用早孕诊断应用前景

早孕因子的生物学特性及其在动物繁殖领域中的应用

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中国畜牧兽医 2009年第4期36卷 122-125页

作者：权凯张改平郑州牧业工程高等专科学校郑州450011 河南省免疫学重点实验室郑州450004

早孕因子(early pregnancy factor,EPF)最初发现于孕鼠血清,是妊娠哺乳动物血清中存在的一种具有免疫抑制和生长调节作用的妊娠相关蛋白。EPF的氨基酸序列包括102个氨基酸残基,与伴侣蛋白10(chaperonin 10,Cpn10)高度同源,是Cpn10在细... 详细信息

早孕因子(early pregnancy factor,EPF)最初发现于孕鼠血清,是妊娠哺乳动物血清中存在的一种具有免疫抑制和生长调节作用的妊娠相关蛋白。EPF的氨基酸序列包括102个氨基酸残基,与伴侣蛋白10(chaperonin 10,Cpn10)高度同源,是Cpn10在细胞外发挥的效应,对温度、酸碱度的耐受性较强,无动物及品种特异性。其生物学特性主要体现在抑制免疫和生长调节两方面:①EPF具有抑制母体的免疫反应而使精子、胚胎免受免疫排斥的作用,也是目前最早确认妊娠的生化标志之一;②EPF能促进肿瘤细胞的生长,也能促进烧伤、溃疡等伤口的愈合。由于EPF能增强抗淋巴细胞血清抑制T细胞花环的形成,因此,玫瑰花环抑制试验是检测EPF活性的经典方法。EPF在动物繁殖领域可用于动物的早期、超早期妊娠诊断,妊娠中断的检测,胚胎移植后的成活情况检测,在评价雄性繁殖力和繁殖免疫疾病的治疗等方面有着重要价值。

关键词：早孕因子伴侣蛋白10 玫瑰花环抑制试验

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早孕因子的体内来源和临床检测的应用前景

国外医学（计划生育分册） 1991年第2期10卷 65-67页

作者：胡承阅吴健力安徽省计划生育科研所

着床后早孕因子(early pregnancy factor,EPF)是胎盘绒毛组织的分泌产物,参与胎盘内的局部免疫调节。现已建立针对着床后血清EPF 的抗体检测技术,作为临床滋养叶功能的检查。着床前血清EPF可能为受精卵释放的某些脂溶性成份对血细胞作... 详细信息

着床后早孕因子(early pregnancy factor,EPF)是胎盘绒毛组织的分泌产物,参与胎盘内的局部免疫调节。现已建立针对着床后血清EPF 的抗体检测技术,作为临床滋养叶功能的检查。着床前血清EPF可能为受精卵释放的某些脂溶性成份对血细胞作用的结果,或仅为某种血清固有蛋白数量的增加。着床前血清EPF 检测在计划生育和不孕症临床方面有一定的应用前景,但不能十分准确地诊断着床前妊娠。

关键词：早孕因子胎盘绒毛组织临床检测

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早孕因子研究进展

甘肃畜牧兽医 1992年第5期22卷 26-29页

作者：田允波云南农业大学

早孕因子(Early Pregnancy Factor,EPF)是存在于妊娠早期母体血清中的一种免疫抑制因子。它的发现给超早期妊娠诊断和受精检查提供了可能,倍受畜牧兽医乃至医学界学者重视。本文就EPF 来源、特性、检测研究进展及其在家畜繁殖中的应用... 详细信息

早孕因子(Early Pregnancy Factor,EPF)是存在于妊娠早期母体血清中的一种免疫抑制因子。它的发现给超早期妊娠诊断和受精检查提供了可能,倍受畜牧兽医乃至医学界学者重视。本文就EPF 来源、特性、检测研究进展及其在家畜繁殖中的应用作一综述。

关键词：畜禽早孕因子

早孕因子在绵羊生殖器官表达与妊娠早期检测技术的研究

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早孕因子在绵羊生殖器官表达与妊娠早期检测技术的研究

作者：赵洛冰吉林农业大学

学位级别：硕士

早孕因子(EPF)是哺乳动物受精后血清中最早检测出的一种生长因子,在雌性哺乳动物早期妊娠诊断、胚胎质量监控等方面均有应用。随着养羊业规模化和产业化的快速发展,应用早期妊娠诊断技术评估家畜尤其是产羔率相对较低的反刍家畜的妊娠... 详细信息

早孕因子(EPF)是哺乳动物受精后血清中最早检测出的一种生长因子,在雌性哺乳动物早期妊娠诊断、胚胎质量监控等方面均有应用。随着养羊业规模化和产业化的快速发展,应用早期妊娠诊断技术评估家畜尤其是产羔率相对较低的反刍家畜的妊娠效率对提高繁殖效率和经济收益至关重要。选择身体健康、体况良好的3月龄(性成熟前)、6月龄(性成熟)和12月龄(性成熟后)的小尾寒羊母羊各5只,通过免疫组化法和实时荧光定量研究EPF在卵巢、输卵管、子宫角蛋白定位和m RNA水平表达的差异,以期揭示其在调控绵羊繁殖过程中所发挥的作用;本试验以授精后小尾寒羊的血液、阴道采集物和宫颈粘液为研究对象,采用酶联免疫吸附法,在授精后第0 d、第5 d、第10 d、第15 d、第20 d、第25 d和第30 d选择判断出的妊娠母羊5只,检测其血液、阴道采集物和宫颈粘液中早孕因子浓度,并对比配种一个月各个时期各个体液中孕酮和早孕因子检测量差异,以期找到以早孕因子为妊娠检测指标的最佳临床诊断时间和最佳采集部位,以表明早孕因子是否比传统检测方法更便捷。通过上述研究,获得如下研究结果:1.利用免疫组化法研究EPF蛋白在绵羊不同月龄三个主要生殖器官上的表达定位。结果表明,EPF蛋白在3月龄、6月龄和12月龄绵羊的子宫角、卵巢和输卵管中均表达。利用实时荧光定量PCR法研究EPF m RNA在绵羊不同月龄的子宫角、卵巢和输卵管中的表达量。结果表明,EPF m RNA在绵羊不同月龄的三个主要生殖器官中均有表达,且表达量均有差异。(1)EPF基因m RNA在相同月龄不同生殖器官绵羊中均有表达差异。EPF基因m RNA在3月龄绵羊的卵巢及子宫角与输卵管相比表达量差异极显著(P0.05);EPF基因m RNA在6月龄绵羊的三个生殖器官间的表达量差异均不显著(P>0.05);EPF基因m RNA在12月龄绵羊的卵巢及子宫角与输卵管相比表达量差异极显著(P0.05)。(2)EPF基因m RNA在相同生殖器官不同月龄中均有表达差异。EPF基因m RNA在3月龄及6月龄与12月龄相比子宫角上表达量均差异显著(P0.05);EPF基因m RNA在3月龄与6月龄及12月龄相比输卵管上表达量均差异极显著(P0.05);EPF基因m RNA在3月龄与6月龄及12月龄相比卵巢上表达量差异显著(P0.05)。2.利用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)研究早孕因子和孕酮在授精后第0 d、第5 d、第10 d、第15 d、第20 d、第25 d和第30 d绵羊的血液、宫颈粘液和阴道采集物中检测量的差异性研究。结果表明,从同一体液不同配种天数来看,孕酮和早孕因子在绵羊的血液、阴道采集物和宫颈粘液中均在配种第10 d检测量差异极显著(P早孕因子在同一配种天数绵羊的血液、阴道采集物和宫颈粘液中检测量差异均不显著(P>0.05)。配种1个月内各个时期各个体液中孕酮与早孕因子检测量相关性极显著(P<0.01)。

关键词：早孕因子孕酮基因表达绵羊