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日本血吸虫病无损伤性免疫学诊断方法的研究：唾液中特异性抗体的检测

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Chinese Medical Journal 2002年第10期115卷 1460-1464页

作者：王兆军薛纯良娄文娴张湘燕张恩英吴维铎沈光金上海第二医科大学寄生虫学教研室上海200025 安徽省血吸虫病防治研究所芜湖241000

目的研究唾液作为日本血吸虫病诊断与筛查标本的可行性.方法建立日本血吸虫兔感染模型,收集兔和慢性血吸虫病人成对的唾液与血清标本,以间接ELIS A检测唾液、血清标本中的抗血吸虫特异性抗体.结果①兔唾液与血清样本抗体检测的特异性分... 详细信息

目的研究唾液作为日本血吸虫病诊断与筛查标本的可行性.方法建立日本血吸虫兔感染模型,收集兔和慢性血吸虫病人成对的唾液与血清标本,以间接ELIS A检测唾液、血清标本中的抗血吸虫特异性抗体.结果①兔唾液与血清样本抗体检测的特异性分别为93.33%(28/30)和96.67% (29/30),感染兔血清与唾液样本的抗体检测敏感性分别为100%(24/24)和87.5% (21/24).血清与唾液中的抗SEA (可溶性虫卵抗原) IgG水平具显著相关性(r=0.5307, P=0.0038日本血吸虫特异性抗体的检测可作为非损伤性的血吸虫病免疫诊断和筛查方法.

关键词：免疫学诊断日本血吸虫病特异性抗体唾液

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日本血吸虫病的诊治——湘鄂赣专家共识

中国血吸虫病防治杂志 2015年第5期27卷 451-456页

作者：邓维成杨镇谢慧群李雍龙刘佳新丁国建朱永辉荆群山孔国庆林丹丹刘建兵任光辉湖南省血吸虫病防治所附属湘岳医院岳阳414000 华中科技大学同济医学院附属同济医院江西省寄生虫病防治研究所湖北省血吸虫病防治所

为进一步规范日本血吸虫病的诊断与治疗,湖南、湖北、江西3省部分专家以循证医学为基础,参考《血吸虫病诊断标准》(WS261-2006),并结合我国血吸虫病诊疗进展与现状,对日本血吸虫病的诊断与治疗进行了归纳和总结,旨在为制定我国血吸虫病... 详细信息

为进一步规范日本血吸虫病的诊断与治疗,湖南、湖北、江西3省部分专家以循证医学为基础,参考《血吸虫病诊断标准》(WS261-2006),并结合我国血吸虫病诊疗进展与现状,对日本血吸虫病的诊断与治疗进行了归纳和总结,旨在为制定我国血吸虫病的诊疗标准或指南提供参考。

关键词：日本血吸虫病急性血吸虫病慢性血吸虫病晚期血吸虫病异位血吸虫病诊断治疗共识

IL-33/ST2与ICOSL/ICOS信号调节ILC2s活化介导日本血吸虫病免疫病理的分子机制研究

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IL-33/ST2与ICOSL/ICOS信号调节ILC2s活化介导日本血吸虫病免疫病...

作者：谢士奇苏州大学

学位级别：硕士

血吸虫病是一种全世界范围内广泛流行的人畜共患病,日本血吸虫病是我国重要的寄生虫病之一。日本血吸虫感染宿主后,成虫主要寄生在宿主的门静脉系统。其虫卵可以分泌可溶性虫卵抗原(Solubleeggantigen,SEA),所引起的肝脏虫卵肉芽肿和继... 详细信息

血吸虫病是一种全世界范围内广泛流行的人畜共患病,日本血吸虫病是我国重要的寄生虫病之一。日本血吸虫感染宿主后,成虫主要寄生在宿主的门静脉系统。其虫卵可以分泌可溶性虫卵抗原(Solubleeggantigen,SEA),所引起的肝脏虫卵肉芽肿和继发性肝纤维化是日本血吸虫病主要致病阶段,其主要致病机制是Th2优势应答介导的免疫病理反应。课题组前期研究结果表明,共刺激信号ICOSL/ICOS可以调节Th2细胞极化,在日本血吸虫病所引起的肝纤维化过程中发挥重要作用。研究发现,在日本血吸虫感染引起肝脏纤维化过程中,白介素33(Interleukin33,IL-33)明显升高。IL-33通过肿瘤抑制因子2(Suppressionoftumorigenicity2,ST2)受体可以诱导2 型固有淋巴细胞(Group 2 innate lymphoid cells,ILC2s)活化产生 IL-5、IL-13等Th2型细胞因子,介导Th2型免疫反应。在日本血吸虫肝纤维化中可能发挥重要作用。本课题应用ICOS转基因(ICOSTransgenosis,ICOS-Tg)小鼠及其野生型FVB/NJ(FVB Wild Type,FVB-WT)小鼠构建日本血吸虫感染动物模型。动物实验和细胞实验相结合,观察IL-33/ST2与ICOSL/ICOS信号对ILC2s活化以及肝脏纤维化的影响;深入探讨IL-33/ST2与ICOSL/ICOS信号调节ILC2s活化的分子机制,进一步阐明固有免疫应答及其对日本血吸虫病免疫病理的影响,为寻找调控日本血吸虫病肝纤维化的新途径提供科学依据。一、日本血吸虫感染小鼠不同病期肝脏免疫病理中IL-33与ILC2s表达动态及其相关性目的:探讨日本血吸虫感染小鼠不同感染病期体内IL-33表达水平与ILC2s活化水平以及肝脏免疫病理的相关性。方法:1.经小鼠腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴,建立FVB-WT小鼠感染模型。在感染不同病期,使用H&E与Masson两种染色方法,观察小鼠肝脏内虫卵肉芽肿和肝纤维化的病理动态变化。2.使用ELISA法检测小鼠感染不同病期血清中IL-33细胞因子、平滑肌肌动蛋白(α-Smoothmuscleactin,α-SMA)与透明质酸(Hyaluronicacid,HA)表达水平的动态变化。3.应用流式细胞术检测小鼠感染不同病期肝脏、脾脏以及肠系膜淋巴结中ILC2s的动态变化,并分析ILC2s活化与IL-33表达水平的相关性。结果:1.H&E染色结果显示,在小鼠感染的早期,肝脏中可见少量虫卵沉积,少量炎性细胞浸润;在感染急性期,小鼠肝脏内有大量虫卵肉芽肿形成,肉芽肿周围有大量炎性细胞浸润,并且此时肉芽肿面积最大(5.919±0.359)×104μm2。随着感染的发展,肉芽肿的面积逐渐缩小。Masson染色结果显示,在小鼠感染的早期,肝脏中仅可见极少的胶原纤维沉积;自感染急性期开始,胶原纤维沉积面积逐渐增大,至感染慢性期,胶原纤维沉积面积达到最大(9.521±1.138)×104μm2。***结果显示,感染小鼠血清中IL-33表达水平在感染早期开始升高;感染急性期表达量最高(39.967±3.663)pg/mL;感染慢性期逐渐下降;血清α-SMA表达水平在感染急性期显著升高(8.165±0.425)ng/mL,感染慢性期逐渐下降;血清HA表达水平在感染急性期显著升高,感染慢性期达到峰值(71.058±6.896)ng/mL。3.流式细胞术结果显示,随着感染进程发展,感染小鼠的肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结中ILC2s活化水平逐渐升高,在感染慢性期达到峰值,感染晚期显著下降。结论:在日本血吸虫感染小鼠致病过程中,感染早期至急性期,血清IL-33的动态变化水平与ILC2s的早期活化水平呈正相关(r=0.8724,P日本血吸虫病的肝脏免疫病理进程。二、共刺激信号ICOSL/ICOS调节ILC2s活化对日本血吸虫感染小鼠肝脏免疫病理的影响目的:探讨ICOS转基因(ICOS-Tg)小鼠感染模型中的ILC2s的活化水平以及肝脏免疫病理的严重程度。方法:1.经小鼠腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴,建立ICOS-Tg小鼠的感染模型。通过在感染不同病期,使用H&E和Masson两种染色方法,观察小鼠肝脏内虫卵肉芽肿和肝纤维化的动态病理变化,与同病期FVB-WT小鼠比较肝脏病理变化差异。2.通过ELISA法检测日本血吸虫感染ICOS-Tg小鼠感染不同病期血清中α-SMA与HA表达水平的动态变化,与同病期

关键词：日本血吸虫病 ILC2s IL-33/ST2 ICOSL/ICOS STAT5

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日本血吸虫病及其综合防治措施

山东畜牧兽医 2023年第4期44卷 36-38页

作者：童飞安徽省无为市农业综合行政执法大队安徽无为238300

日本血吸虫病是一种严重危害我国人畜健康和农业发展的寄生虫病,曾经一度给人民的生命安全和“三农”工作带来严重损害。虽此病目前已经得到了有效控制,但在长江流域仍有人畜感染的报道。本文综述了日本血吸虫的形态特征、生活史、主要... 详细信息

日本血吸虫病是一种严重危害我国人畜健康和农业发展的寄生虫病,曾经一度给人民的生命安全和“三农”工作带来严重损害。虽此病目前已经得到了有效控制,但在长江流域仍有人畜感染的报道。本文综述了日本血吸虫的形态特征、生活史、主要危害、传播途径、防治措施和牲畜常规检查方法等,可为有效预防日本血吸虫病的发生和保障农牧业的健康发展提供参考。

关键词：日本血吸虫病生活史临床症状传播途径防治措施

抗日本血吸虫病重组腺病毒***-GST-Sj23LHD的构建和免疫保护效果评估

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抗日本血吸虫病重组腺病毒***-GST-Sj23LHD的构建和免疫保护效果...

作者：郑明政中国农业科学院

学位级别：硕士

日本血吸虫病（Schistosomiasis japonica）是由日本血吸虫（Schistosoma japonicum,Sj）尾蚴感染终末宿主引起的、危害严重的人畜共患寄生虫病。目前没有针对血吸虫病的疫苗产品。复制缺陷型人5型腺病毒（Ad5）是目前应用最广泛的腺病... 详细信息

日本血吸虫病（Schistosomiasis japonica）是由日本血吸虫（Schistosoma japonicum,Sj）尾蚴感染终末宿主引起的、危害严重的人畜共患寄生虫病。目前没有针对血吸虫病的疫苗产品。复制缺陷型人5型腺病毒（Ad5）是目前应用最广泛的腺病毒载体。本文以Ad5型腺病毒为载体,构建携带日本血吸虫谷胱甘肽S转移酶（GST）和23 k Da蛋白大亲水区编码片段的重组腺病毒,在小鼠模型中评估其免疫保护效果和机制,尝试研制抗日本血吸虫病重组病毒疫苗。本研究将人组织型纤溶酶原激活物信号肽（tPA）、日本血吸虫GST和日本血吸虫23 k Da抗原大亲水区（Sj23LHD）编码基因片段重组连接到腺病毒载体p AV[Exp]-EGFP-CMV上构建穿梭载体,酶切分析和测序结果表明其构建成功。将穿梭载体和腺病毒骨架在HEK293A细胞中包装成重组腺病毒***-GST-Sj23LHD,纯化后重组病毒滴度为6.24x10IFU/m L,对照病毒***的滴度为5.77×10IFU/m L。用重组病毒感染A549和HEK293T细胞后,可观察到EGFP绿色荧光信号。荧光定量PCR和Western blot检测到靶标基因在感染的A549和HEK293T细胞中均可转录和表达。将重组腺病毒***-GST-Sj23LHD和对照病毒***分别以5x10～7IFU/鼠/次的剂量肌肉注射免疫小鼠,3周后以相同剂量加强免疫,并以相同体积PBS注射BALB/c鼠作为空白对照,进行小鼠日本血吸虫病免疫保护试验。结果显示加强免疫后2周在小鼠注射部位的肌肉组织切片中观察到EGFP绿色荧光信号。采集各组各时期的血清样本进行间接ELISA检测,结果表明重组腺病毒***-GST-Sj23LHD免疫小鼠产生了较高水平的血清特异性抗体IgG;重组病毒组小鼠血清特异性抗体亚型IgG2a/IgG1比值极显著地高于载体对照病毒***组和PBS组（P日本血吸虫病免疫保护试验结果为:与PBS组相比,重组病毒免疫诱导了28.26%的减虫率（P=0.052）和27.06%的肝脏减卵率（P=0.0843）;与对照病毒组相比,重组病毒诱导了36.05%的减虫率（P=0.0037）和34.24%的肝脏减卵率（P=0.0479）。综上,本文成功构建了重组腺病毒***-GST-Sj23LHD,感染细胞后能表达目的蛋白,能诱导小鼠产生体液免疫应答和细胞免疫应答,并对小鼠日本血吸虫感染具有一定的免疫保护效果。本文初步验证了应用腺病毒载体研制日本血吸虫病疫苗的可行性,为日本血吸虫病重组腺病毒疫苗研究提供了基础。

关键词：日本血吸虫病 Ad.tPA-GST-Sj23LHD 重组腺病毒疫苗免疫保护效果

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日本血吸虫病宿主肿瘤坏死因子活性的研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1992年第1期10卷 11-13页

作者：张立煌孙永良蔡卫民王明海何南祥浙江医科大学传染病研究所杭州310006

采用L929细胞杀伤法,对晚期日本血吸虫病(晚血)患者和感染日本血吸虫尾蚴8wk、16wk及杀虫后8wk的新西兰兔,进行了外周血单核细胞(PBMC)的肿瘤坏死因子(TNF)诱生能力和血清TNF活性测定。晚血患者PBMC的TNF诱生能力明显低于正常人,而血清... 详细信息

采用L929细胞杀伤法,对晚期日本血吸虫病(晚血)患者和感染日本血吸虫尾蚴8wk、16wk及杀虫后8wk的新西兰兔,进行了外周血单核细胞(PBMC)的肿瘤坏死因子(TNF)诱生能力和血清TNF活性测定。晚血患者PBMC的TNF诱生能力明显低于正常人,而血清中TNF活性明显增高(P<0.01)。感染8wk和16wk兔PBMC的TNF诱生能力较正常兔显著增高,尤以感染8wk时为甚,血清TNF活性亦相应增高(P<0.01);在杀虫治疗后8wk,其PBMC的TNF诱生能力和血清TNF活性均降至正常。晚血患者血清TNF活性的增高可能参与肝纤维化过程。

关键词：日本血吸虫病肿瘤坏死因子宿主

日本血吸虫病常用诊断方法现场查病效果的评估

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第3期25卷 175-179页

作者：许静陈年高冯婷王恩木吴晓华陈红根汪天平周晓农郑江中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所上海200025 江西省寄生虫病防治研究所南昌330046 安徽省血吸虫病防治研究所芜湖241000

目的评估几种常用血吸虫病诊断方法现场查病的效果。方法2005年11月,选取江西省鄱阳湖沿岸3个血吸虫病流行村的6～65岁居民为调查对象,用改良加藤厚涂片法(Kato-Katz法,3张涂片)和尼龙绢集卵孵化法进行病原学检测的同时,分别用胶体染料... 详细信息

目的评估几种常用血吸虫病诊断方法现场查病的效果。方法2005年11月,选取江西省鄱阳湖沿岸3个血吸虫病流行村的6～65岁居民为调查对象,用改良加藤厚涂片法(Kato-Katz法,3张涂片)和尼龙绢集卵孵化法进行病原学检测的同时,分别用胶体染料试纸条法(DDIA)、快速酶联免疫吸附试验(F-ELISA)及2种间接红细胞凝集试验(IHA-A和IHA-B)进行血清学检测,以评价该几种检测方法的效果。结果3村共检测居民1864人,平均粪检阳性率为9.7%。改良加藤法在血吸虫病中度、重度流行区的漏检率相对稳定,为20.0%～27.8%;尼龙绢集卵孵化法的漏检率在每克粪便虫卵数(EPG)>100时相对稳定(约25%)。DDIA、F-ELISA、IHA-A和IHA-B的平均阳性率分别为47.8%、50.0%、66.3%和40.1%。以病原学检测结果为金标准,DDIA、F-ELISA、IHA-A和IHA-B的敏感性分别为75.3%、65.8%、85.6%和76.0%;特异性为55.1%、51.7%、35.7%和63.6%。与其他几种免疫血清学诊断方法相比,IHA-B试剂的特异性、Youden指数、阳性似然比及粪检符合率最高。DDIA法与IHA-B法的符合率最高(77.3%),而F-ELISA和IHA-A的符合率最低(61.5%)。结论在血吸虫病中、重度流行区,改良加藤法虫卵检出率和稳定性均优于尼龙绢集卵孵化法;IHA-A的敏感性最高,IHA-B的4个指标最高,具有较高的现场使用价值,但需进一步提高其敏感性。

关键词：日本血吸虫病改良加藤厚涂片法尼龙绢集卵孵化法胶体染料试纸条法(DDIA) F-ELISA 间接红细胞凝集试验(IHA)

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日本血吸虫病治疗后血清抗体消长观察

中国血吸虫病防治杂志 2018年第1期30卷 22-25页

作者：胡合华张瑕张纯彬姚义斌崔彩霞李霞文晓红刘军肖传云刘雄曹淳力湖北省江陵县血吸虫病预防控制所中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所湖沼型血吸虫病流行区血防实验基地江陵434100 湖北省江陵县卫生计生局中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所

目的分析人群日本血吸虫病治疗后抗体滴度变化,为制订监测巩固方案提供科学依据。方法采用定群前瞻性研究法,以江陵县2014年检出的粪检阳性病人及血检阳性滴度1∶80以上(含1∶80)者为对象,先用吡喹酮2日疗法治疗,于治疗后半年、1年、2... 详细信息

目的分析人群日本血吸虫病治疗后抗体滴度变化,为制订监测巩固方案提供科学依据。方法采用定群前瞻性研究法,以江陵县2014年检出的粪检阳性病人及血检阳性滴度1∶80以上(含1∶80)者为对象,先用吡喹酮2日疗法治疗,于治疗后半年、1年、2年分别采集血样、粪样,进行IHA抗体检测和集卵孵化法检测。结果 2014年粪检阳性病例251人,年龄以41岁以上为主,占93.23%(234/251);IHA法检测抗体高滴度病例581人,年龄以41岁以上为主,占89.16%(518/581)。粪检阳性人群治疗后半年、1年、2年粪检转阴率分别为99.60%(250/251)、100%(239/239)、100%(234/234),IHA法检测抗体转阴率分别是21.91%(55/251)、64.11%(156/239)和76.89%(193/234);IHA法检测抗体高滴度人群治疗后半年、1年、2年转阴率分别为38.04%(221/581)、64.11%(359/560)、77.86%(429/551);抗体转阴率进行χ~2检验,差异均有统计学意义(χ~2=77.538、183.412、25.469,P值均0.01)。结论日本血吸虫病治疗后人群血清中抗体水平消退缓慢,尚需开发特异的诊断技术以满足监测需求。

关键词：日本血吸虫病湖沼型流行区抗体滴度疗效考核