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整合素α5的表达下调抑制肝癌Bel-7404细胞的增殖、侵袭及转移

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南方医科大学学报 2020年第6期40卷 893-898页

作者：郭亚妹徐广贤闪明海杨少奇宁夏医科大学总医院消化内科宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院临床医学院医学检验系宁夏银川750004

目的分析整合素α5(ITGA5)与肝癌分级及肝癌患者总体生存率之间的关系,进一步研究整合素ITGA5基因沉默后对人肝癌Bel-7404细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其作用机制探讨。方法(1)利用UALCAN分析ITGA5在肝癌组织及正常组织中的表达,以... 详细信息

目的分析整合素α5(ITGA5)与肝癌分级及肝癌患者总体生存率之间的关系,进一步研究整合素ITGA5基因沉默后对人肝癌Bel-7404细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其作用机制探讨。方法(1)利用UALCAN分析ITGA5在肝癌组织及正常组织中的表达,以及在不同分级肝癌组织中的表达及其差异统计;通过GEPIA在线分析ITGA5表达量与肝癌患者生存情况的关系。(2)培养前期已经构建的ITGA5沉默细胞系,采用Western blot方法检测ITGA5蛋白水平的表达,以鉴定ITGA5基因沉默的效果。(3)采用平板克隆形成实验、Transwell等实验方法检测ITGA5基因沉默后Bel-7404细胞的增殖、侵袭迁移能力的变化。(4)通过Oncomine癌标本数据库分析肝癌组织及对照组织中ITGA5与PI3K表达及分析其相关性。结果(1)ITGA5在肝癌中的表达显著高于正常组,差异有统计学意义(P5);在不同肝癌分级中,Grade 1的ITGA5表达量显著低于Grade 2,Grade 2的ITGA5表达量显著低于Grade 3,差异均有统计学意义(P5)。ITGA5高表达组的总体生存率(OS)显著低于低表达组,差异有统计学意义(P5)。(2)Western blot鉴定ITGA5基因沉默组的蛋白质表达水平比空白、阴性对照组明显降低,差异具有统计学意义(P5)。(3)平板克隆形成实验结果显示,基因沉默组比空白、阴性对照组的克隆形成率降低,差异具有统计学意义(P5);Transwell结果显示,基因沉默组细胞穿膜数均比空白及阴性对照组显著降低,差异具有统计学意义(P5)。(4)ITGA5和PI3K在肝癌组织中高表达且呈正相关,差异具有统计学意义(P5)。结论ITGA5与肝癌进展及肝癌患者预后密切相关,其表达下调抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移;ITGA5可能通过调控PI3K信号通路促进促进肝癌增殖及转移。

关键词：肝癌整合素α5 转移

整合素α5和肌动蛋白在周期性压力下椎间盘细胞中的表达

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中华外科杂志 2005年第24期43卷 1605-1608页

作者：于胜吉邱贵兴 Yang Burton Roth Sandra Whyne Cari Yee Albert 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院骨科 The SpineProgram Division of Orthpaedic SurgerySunnybrook & Women's College HSCUniversity of TorontoCanada

目的探讨整合素α5和肌动蛋白在周期性压力下椎间盘细胞中的表达。方法对猪椎间盘组织进行体外细胞的分离和培养,对细胞施加周期性液压,通过对细胞的形态学观察、Western免疫印迹和免疫组化染色,分别检测整合素α5和肌动蛋白在周期性压... 详细信息

目的探讨整合素α5和肌动蛋白在周期性压力下椎间盘细胞中的表达。方法对猪椎间盘组织进行体外细胞的分离和培养,对细胞施加周期性液压,通过对细胞的形态学观察、Western免疫印迹和免疫组化染色,分别检测整合素α5和肌动蛋白在周期性压力下椎间盘细胞中的表达。结果经加压后,纤维环细胞和髓核细胞均可见体积缩小,由多角形转变为细长形,整合素α5和肌动蛋白在纤维环细胞和髓核细胞中的表达均明显减少。结论体外培养的单层椎间盘细胞在受力状态下,整合素α5的表达减少,整合素α5将力信号转换到细胞内时,进一步影响到与其关系密切的肌动蛋白。这可能是椎间盘细胞力学传导的重要机制。

关键词：整合素α5 肌动蛋白椎间盘细胞压力

整合素α5和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3在肝细胞癌中的表达及其临床意义

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中华消化杂志 2017年第1期37卷 45-48页

作者：何彩霞王亚婷李鹏郭亚妹杨少奇宁夏医科大学总医院消化内科吴忠市人民医院消化内科

肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其临床治疗方法有限,预后差。肝脏部分切除术被认为是肝细胞癌的首选治疗方法,但由于术后复发转移率居高不下,故其远期疗效并不理想,因此有必要制定新的治疗策略;。深入了解肝细胞癌转移的复杂网络是... 详细信息

肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其临床治疗方法有限,预后差。肝脏部分切除术被认为是肝细胞癌的首选治疗方法,但由于术后复发转移率居高不下,故其远期疗效并不理想,因此有必要制定新的治疗策略;。深入了解肝细胞癌转移的复杂网络是制定有效治疗方法的先决条件。肿瘤细胞在体循环中存活并移至远处靶器官是肿瘤转移的关键生物过程。失巢凋亡是一种分离诱导的细胞凋

关键词：整合素α5 含半胱氨酸肝细胞癌

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整合素α5在子宫颈癌中的表达及其意义

肿瘤研究与临床 2019年第10期31卷 658-661页

作者：杜维民张裕民谭雪莹徐晓娜张萍青岛大学附属青岛市市立医院妇科 266011 山东省菏泽市食品药品检验检测研究院 274000 青岛大学附属青岛市市立医院卫生部细胞移植重点实验室 266011 青岛大学附属青岛市市立医院中心试验室 266011

目的研究整合素α5在子宫颈癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测青岛市市立医院2014年1月至2017年12月60例子宫颈癌石蜡包埋组织及20例因子宫良性病变行全子宫切除术的正常子宫颈石蜡包埋组织中整... 详细信息

目的研究整合素α5在子宫颈癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测青岛市市立医院2014年1月至2017年12月60例子宫颈癌石蜡包埋组织及20例因子宫良性病变行全子宫切除术的正常子宫颈石蜡包埋组织中整合素α5蛋白的表达水平。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测青岛市市立医院2018年1月至7月20例新鲜子宫颈癌组织及20例良性子宫病变的正常子宫颈组织中整合素α5 mRNA的表达水平。分析整合素α5的表达与子宫颈癌患者临床病理特征的关系。结果整合素α5蛋白在子宫颈癌及正常子宫颈组织中的阳性表达率分别为63.3%(38/60)、35.0%(7/20),差异有统计学意义(χ2=4.893,P5)。整合素α5 mRNA在子宫颈癌中相对于正常子宫颈组织的表达量(2-△△Ct)为1.6±0.4(t=5.529,P整合素α5蛋白的阳性表达与子宫颈癌的淋巴结转移有关(Z=-2.636,P=0.008)。结论整合素α5在子宫颈癌组织中高表达,且与淋巴结转移有关,有望成为子宫颈癌治疗的新靶点。

关键词：宫颈肿瘤整合素α5 淋巴结转移

牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1表达的影响

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中华口腔医学杂志 2013年第11期48卷 653-659页

作者：张剑英付云宋祥晨梁敏中山大学光华口腔医学院-附属口腔医院牙周科-广东省口腔医学重点实验室广州510055

目的探讨牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1的调节机制，为牙周炎发病机制的研究提供理论依据。方法标准厌氧环境下培养牙龈卟啉单胞菌W83，分离提纯牙龈蛋白酶。用8．348U／L牙龈蛋白酶处理小鼠成骨细胞MC3T3-E148h... 详细信息

目的探讨牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1的调节机制，为牙周炎发病机制的研究提供理论依据。方法标准厌氧环境下培养牙龈卟啉单胞菌W83，分离提纯牙龈蛋白酶。用8．348U／L牙龈蛋白酶处理小鼠成骨细胞MC3T3-E148h，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法4’，6-二脒基．2一苯基吲哚[transferase—mediateddeoxyuridinetriphosphate—biotinnickendlabeling-（4-Amidinophenyl）-6-indolecarbamidinedihydrochloride，TUNEL—DAPI]双染色法检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测整合素α5、β1蛋白的表达水平。结果精氨酸．蛋白酶活性为（41．74±2．11）U／L，赖氨酸一蛋白酶活性为（1．02±0．25）U／L。TUNEL—DAPI染色显示牙龈蛋白酶作用于MC3T3一E1细胞48h后诱导细胞发生凋亡。在短时间内（≤72h）牙龈蛋白酶呈时间依赖性下调整合素α5、β1的表达水平，48h时整合素α5、β1相对表达量分别为（0．485±0．039）、（0．504±0．002），72h时分别为（0．398±0．058）、（0．179±0．001），与对照组（蛋白相对表达量分别为1．000±0．000、1．000±0．000）相比差异均有统计学意义（P〈0．05）；72h后，整合素α5表达水平与对照组相比差异无统计学意义，但整合素B1仍持续下调（96、120h时相对表达量分别为0．604±0．003、0．357±0．002），均显著低于对照组（1．000±0．000）（P〈0．05）。牙龈蛋白酶特异性抑制剂甲苯磺酰．L．赖氨酰．氯甲基酮（***—clysine-chloromethyl—ketone，TLCK）可有效抑制蛋白酶活性，使整合素α5、β1蛋白表达量分别从（0．398士0．058）、（0．179±0．001）显著上升至（0．7814-0．012）、（0．857±0．060）（P〈0．05），但TLCK本身不改变整合素α5、β1的表达水平（P〉0．05）。同时牙龈蛋白酶还呈剂量依赖性下调整合索α5、β1的表达水平，20．8700U／L牙龈蛋白酶作用下整合素α5、B1相对表达量达最低值（0．105±0．004、0．0204-0．000），与对照组（1．000±0．000）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。牙龈蛋白酶直接处理成骨细胞膜蛋白提取物，与对照组相比各组间整合素α5 β1相对表达量差异无统计学意义（P〉0．05），提示牙龈蛋白酶不直接降解整合素α5、β1结论牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中呈时间和剂量依赖下调整合素α5、β1的表达，下调途径不是通过该蛋白酶的直接蛋白水解发挥作用。

关键词：细胞凋亡整合素α5 整合素β1 牙龈蛋白酶

整合素α_5及其配体在大鼠角膜创伤愈合中表达的研究

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眼外伤职业眼病杂志 2001年第4期23卷 372-374页

作者：马轶群王传富青岛大学医学院附属医院眼科研究生266003

目的　观察创伤愈合中大鼠角膜整合素 (integrin)α5及其配体—纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)表达的变化 ,探讨二者对角膜创伤愈合的影响。方法　大白鼠 2 7只 ,随机分实验组和对照组。依左右眼手术不同又分左眼和右眼组。右眼刮除中... 详细信息

目的　观察创伤愈合中大鼠角膜整合素 (integrin)α5及其配体—纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)表达的变化 ,探讨二者对角膜创伤愈合的影响。方法　大白鼠 2 7只 ,随机分实验组和对照组。依左右眼手术不同又分左眼和右眼组。右眼刮除中央 3mm直径区域内角膜上皮 ,保持前弹力膜完整 ;左眼同上操作后 ,用RK刀作长 3mm ,深 10 0 μm的非穿透切口。术后即刻、3、6、12、2 4、72h、1w、2w分别处死每组大鼠 ,取双眼角膜 ,用免疫荧光染色法观察角膜整合素α5及FN分布的改变。对照组不手术 ,处死后角膜标本按实验组同样步骤处理。结果　与对照组相比 ,术后 3h双眼角膜创缘上皮表层及左眼基质切口处出现α5和FN荧光 ,之后荧光亮度升高 ,72h后下降 ,术后 2w恢复至术前水平。α5与FN的表达相对应。结论　角膜创伤愈合早期整合素α5及其配体FN表达增多并相协调。

关键词：整合素α5 纤维连接蛋白角膜创伤愈合配体

卵巢上皮性癌组织中转移抑制基因ME491/CD_(63)与整合素α5蛋白和mRNA的表达及其意义

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中华妇产科杂志 2005年第11期40卷 765-769页

作者：夏志军张淑兰周卓中国医科大学第二临床学院妇产科沈阳110003 中国医科大学第二临床学院中心实验室沈阳110003

目的探讨转移抑制基因ME491/CD63、整合素(integrin)α5蛋白和mRNA在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织中的表达及其意义。方法应用RT-PCR技术和原位杂交方法检测正常卵巢组织(Ⅰ组,30份)、卵巢良性上皮性肿瘤组织(Ⅱ组,10份)、卵巢交界性上皮... 详细信息

目的探讨转移抑制基因ME491/CD63、整合素(integrin)α5蛋白和mRNA在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织中的表达及其意义。方法应用RT-PCR技术和原位杂交方法检测正常卵巢组织(Ⅰ组,30份)、卵巢良性上皮性肿瘤组织(Ⅱ组,10份)、卵巢交界性上皮性肿瘤组织(Ⅲ组,6份)和卵巢癌组织(Ⅳ组,48份)中ME491/CD63及integrinα5蛋白和mRNA的表达,并分析其与患者各临床病理指标的关系。结果(1)ME491/CD63与integrinα5mRNA表达水平Ⅰ组均为1.7±0.3,Ⅱ组均为1.5±0.3,Ⅲ组均为1.1±0.5,Ⅳ组均为0.6±0.4。各组间分别比较,差异均有统计学意义(P5mRNA表达水平,不同年龄、病理类型间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而不同病理分化程度、手术病理分期及有无淋巴结转移间比较,差异均有统计学意义(P5蛋白表达阳性率Ⅰ组和Ⅱ组均为100%,Ⅲ组均为50%;Ⅳ组均为31%,其中手术病理分期为Ⅰ期者均为7/7,Ⅱ期均为6/9,Ⅲ～Ⅳ期均为6%。Ⅰ、Ⅱ组分别与Ⅲ、Ⅳ组比较,差异均有统计学意义(P5,P5蛋白表达阳性率,不同年龄、病理类型间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而不同病理分化程度、手术病理分期及有无淋巴结转移间比较,差异均有统计学意义(P5)。结论ME491/CD63和integrinα5蛋白和mRNA在卵巢癌组织中呈低表达,其表达缺失与病理分化程度、手术病理分期及淋巴结转移有关。

关键词：卵巢肿瘤抗原,表面整合素α5 肿瘤转移

下颌骨骨折愈合过程中整合素α_5表达的免疫组化研究

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华西口腔医学杂志 2003年第2期21卷 101-103页

作者：刘少华李声伟程刚田卫东刘磊魏世成陈伟辉山东大学齐鲁医院口腔外科 250012 四川大学华西口腔医学院浙江省人民医院口腔科

目的　探讨下颌骨骨折愈合过程中整合素α5表达水平的改变。方法　用兔作下颌骨骨折的动物模型 ,分别于骨折前 1天及骨折后第 1、3、5、7、14、30、6 0、90天取骨断端组织标本作成石蜡切片并用LsAB法进行免疫组织化学实验 ,以探讨整合素... 详细信息

目的　探讨下颌骨骨折愈合过程中整合素α5表达水平的改变。方法　用兔作下颌骨骨折的动物模型 ,分别于骨折前 1天及骨折后第 1、3、5、7、14、30、6 0、90天取骨断端组织标本作成石蜡切片并用LsAB法进行免疫组织化学实验 ,以探讨整合素α5在骨组织 ,特别是在成骨细胞和破骨细胞中的表达。结果　整合素α5在骨组织及其周围软组织中广泛表达 ;从骨折后第 7天出现增强 ,第 14天到第 30天表达最强 ,第 6 0～第 90天后接近正常。结论　在下颌骨骨折的愈合过程中 ,整合素α5在骨组织细胞上的表达增强 ,整合素α5对骨折的愈合过程具有重要作用。

关键词：下颌骨骨折愈合过程中整合素α5 表达免疫组化研究

补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR及整合素α_5、β_3蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2009年第7期29卷 628-631页

作者：周惠芳李爱萍谈勇南京中医药大学南京210029 南京医科大学

目的观察补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜细胞雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及整合素α5、β3蛋白表达的影响,以阐明该方改善黄体功能不全性不孕症的机制。方法将SD雌性大鼠随机分成空白组、模型组、西药组和中药补肾助孕方低、... 详细信息

目的观察补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜细胞雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及整合素α5、β3蛋白表达的影响,以阐明该方改善黄体功能不全性不孕症的机制。方法将SD雌性大鼠随机分成空白组、模型组、西药组和中药补肾助孕方低、中、高剂量组,分别对各组大鼠由妊娠至胚胎着床期处死,取子宫中段组织(约1cm),采用Western blot技术分析各组大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR及整合素α5、β3的蛋白表达等。结果模型组子宫内膜ER、PR的蛋白表达明显高于空白组,补肾助孕方低、中剂量组明显低于模型组(P5);模型组子宫内膜整合素α5、β3的蛋白表达明显低于空白组,补肾助孕方中、高剂量组明显高于模型组(P5)。结论补肾助孕方可下调胚胎着床期子宫内膜ER、PR的水平,提高整合素α5、β3水平的表达,改善黄体功能不全状态子宫内膜的容受性,从而创造了良好的受孕环境。

关键词：补肾助孕方胚胎着床期雌激素受体孕激素受体整合素α5 整合素β3 子宫内膜容受性受孕率