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常用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究

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中华医院感染学杂志 2017年第5期27卷 969-971,991页

作者：简雪峰程国平王媛媛白娇红孙灵云河南科技大学一附院检验科河南洛阳471003

目的探讨常用抗菌药物对产青霉烯-2(KPC-2)酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,为肺炎克雷伯菌临床治疗提供参考。方法收集2012年1月-2015年12月确诊肺炎克雷伯菌感染患者标本中分离20株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌,测定菌株对头孢吡肟(FEP)... 详细信息

目的探讨常用抗菌药物对产青霉烯-2(KPC-2)酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,为肺炎克雷伯菌临床治疗提供参考。方法收集2012年1月-2015年12月确诊肺炎克雷伯菌感染患者标本中分离20株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌,测定菌株对头孢吡肟(FEP)、头孢西丁(FOX)、阿莫西林/克拉维酸(AMC)、头孢他啶(CAZ)、亚胺培南(IPM)、美洛培南(MEM)、环丙沙星(CIP)及米诺环素(MI)的最低抑菌浓度(MIC),分析FEP+CIP、FEP+AMC、IPM+MI、IPM+CIP、CAZ+AMC联合作用(PIC指数)。结果 20株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对AMC、CAZ完全耐药,耐药率为100.00%,对FOX、CIP耐药率为75.00%,对FEP、IPM、MEM耐药率分别为30.00%、25.00%、30.00%,对MI完全敏感,耐药率为0.00%;FEP+CIP时2株出现协同、12株出现相加、40株出现无关、2株出现拮抗,构成比分别为10.00%、60.00%、20.00%、10.00%,FEP+AMC时17株出现协同、2株出现相加、1株出现拮抗,构成比分别为85.00%、10.00%、5.00%,IPM+MI时10株出现相加、4株出现无关、6株出现拮抗,构成比分别为50.00%、20.00%、30.00%,IPM+CIP时2株出现协同、8株出现相加、7株出现无关、3株出现拮抗,构成比分别为10.00%、40.00%、35.00%、15.00%,CAZ+AMC时12株出现协同、6株出现相加、2株出现拮抗,构成比分别为60.00%、30.00%、10.00%;对FEP+CIP、FEP+AMC、IPM+MI、IPM+CIP、CAZ+AMC的耐药率分别为20.00%、20.00%、90.00%、50.00%、80.00%。结论产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对MI敏感,对AMC、CAZ完全耐药,FEP+AMC、CAZ+AMC在体外效应以协同作用为主,其机制值得进一步研究。

关键词： KPC-2酶肺炎克雷伯菌抗菌药物体外抗菌效应

新型抗弧菌剂-葡甘聚糖纳米银溶胶的制备及抗菌效应研究

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新型抗弧菌剂-葡甘聚糖纳米银溶胶的制备及抗菌效应研究

作者：侯梦然集美大学

学位级别：硕士

海洋弧菌是水产养殖中的主要致病菌,日益严重的弧菌病不仅给水产养殖者造成巨大的经济损失,而且对环境及人类健康也构成巨大的威胁。目前传统的抗弧菌药物因不同程度地在杀菌性、安全性、耐药性及兼容性等方面存在一定的缺陷,而无法满... 详细信息

海洋弧菌是水产养殖中的主要致病菌,日益严重的弧菌病不仅给水产养殖者造成巨大的经济损失,而且对环境及人类健康也构成巨大的威胁。目前传统的抗弧菌药物因不同程度地在杀菌性、安全性、耐药性及兼容性等方面存在一定的缺陷,而无法满足要求。多糖纳米银溶胶(AgNC)是利用现代纳米技术,使用天然多糖制造的新型杀菌剂,因具有广谱、强效及不产耐药性的抗菌活性、较高的生物安全性和环境友好性,而具有取代传统化学合成杀菌剂成为新型抗菌药物的潜力,在水产养殖领域受到广泛的关注。本研究采用0、8、10、20、50、100kGy剂量的60Coγ-射线辐照降解魔芋葡甘聚糖(KGM),得到6种KGM,采用这6种KGM作为还原剂和稳定剂,以硝酸银作为反应银源,通过紫外辐照法在不加其它还原剂的前提下,利用纳米银的光催化特性,实现银离子的全部还原,从而制备得到6种葡甘聚糖纳米银溶胶(KGM-AgNPs)。本研究同时对合成的6种KGM-AgNPs进行表征分析、分散稳定性测试及对水产常见致病弧菌(副溶血弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌)、常见指示菌种(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)和肠道益生菌(鼠李糖乳杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌)进行抑菌试验,分析其杀菌能力,以期为多糖纳米银在水产常见弧菌病的防治方面奠定理论基础和技术指导。本研究的内容和结果如下:(1)本研究首先利用未经过60Coγ-射线辐照的0kGy-KGM作为还原剂与稳定剂,以硝酸银作为反应银源,初步摸索紫外辐照时间、硝酸银浓度、0kGy-KGM浓度对合成KGM-AgNPs的影响,并同时探究最佳反应浓度在常温25℃避光搅拌条件下,0kGy-KGM对银离子的还原能力。实验结果表明,设置紫外反应器的柜温为15℃,湿度为72%,辐照总功率为196W,当0kGy-KGM浓度为10mg/mL,硝酸银浓度为0.8mM,在254nm波长下紫外辐照510min后,可制备出银离子反应率达到99.9%以上,且没有明显团聚现象的纳米银溶胶;对照实验同时发现,254nm波长下紫外辐照单一的0.8mM硝酸银溶液(不加0kGy-KGM),不能使溶液中的银离子被还原生成纳米银粒子。(2)根据上述制备KGM-AgNPs最优的0kGy-KGM实验浓度,采用不同剂量60Coγ-射线辐照降解得到的 8kGy-KGM、10kGy-KGM、20kGy-KGM、50kGy-KGM、100kGy-KGM 及未经辐照处理的0kGy-KGM分别与硝酸银溶液在同等浓度条件下(不同KGM的浓度为10mg/mL,硝酸银浓度为0.8mM),紫外辐照制备不同的KGM-AgNPs(100KGM-AgNPs、50KGM-AgNPs、20KGM-AgNPs、10KGM-AgNPs、8KGM-AgNPs、0KGM-AgNPs),同时探究制备不同KGM-AgNPs过程中反应液的温度变化、辐照时间对KGM-AgNPs的影响。采用多重光散射仪对制备的6种纳米银的稳定性进行分析,并利用X射线衍射(XRD)、X射线光电子能谱(XPS)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)、透射电子显微镜(TEM)对6种纳米银的物理特性进行进一步的表征。实验结果显示,制备 100KGM-AgNPs、50KGM-AgNPs、20KGM-AgNPs、10KGM-AgNPs、8KGM-AgNPs、0KGM-AgNPs 分别辐照到 300min、360min、420min、450min、480min和510min时,银离子反应率达到99.9%以上,制备过程中各反应液温度在20～21℃之间;紫外可见吸收光谱(UV-ViS)检测结果显示,采用100kGy-KGM制备的100KGM-AgNPs的紫外吸收峰强度最大;动态光散射(DLS)测量的6种KGM-AgNPs的流体力学半径随紫外辐照时间未呈现一定的减小或增大的趋势;多重光散射测量结果显示,稳定性大小依次为100KGM-AgNPs>50KGM-AgNPs>0KGM-AgNPs>10KGM-AgNPs>20KGM-AgNPs>8KGM-AgNPs;XRD和XPS结果显示,6种不同KGM-AgNPs中存在Ag0且生成的纳米银粒子外层被不同KGM包裹;FTIR结果表明,6种不同KGM移动吸收峰对应的官能团-OH、-CH、C=O、C-O-C等,参与了不同KGM-AgNPs的合成与稳定过程;用TEM对6种不同KGM-AgNPs的形貌进行观察,合成的100KGM-AgNPs、20KGM-AgNPs、1 0KGM-AgNPs、8KGM-AgNPs和0KGM-AgNPs粒子为球形,粒径分别分布在9～28nm、20～32nm、12～30nm、25～30nm和42～54nm,制备的50KGM-AgNPs粒子形状不规则,平均粒径在72～87nm;对制备的6种

关键词：水产病原弧菌葡甘聚糖纳米银溶胶紫外辐照抗菌效应

以肺炎链球菌WalK酶HATPase-c结构域为靶点的新型咪唑类化合物的抗菌效应研究

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以肺炎链球菌WalK酶HATPase-c结构域为靶点的新型咪唑类化合物的...

作者：韩道宾遵义医学院

学位级别：硕士

目的:本课题组前期采用分子对接的方法,筛选出以肺炎链球菌Wal K酶HATPase-c结构域为作用靶点的咪唑类化合物6,其在体外展示出较好的抗菌活性,但其体内保护效果不理想,且细胞毒性较高。本研究拟以肺炎链球菌Wal K酶HATPase-c结构域(CA... 详细信息

目的:本课题组前期采用分子对接的方法,筛选出以肺炎链球菌Wal K酶HATPase-c结构域为作用靶点的咪唑类化合物6,其在体外展示出较好的抗菌活性,但其体内保护效果不理想,且细胞毒性较高。本研究拟以肺炎链球菌Wal K酶HATPase-c结构域(CA结构域)三维结构中氨基酸功能残基为药物作用靶点,采用化合物6为先导结构模板,设计并合成一系列新型咪唑类抗菌化合物。通过化合物和三种不同的Wal K蛋白相互作用,验证新型化合物抗菌靶点位于肺炎链球菌Wal K酶CA结构域;通过体外实验考查化合物抗菌活性及毒性反应;通过建立小鼠肺炎链球菌感染模型,检测其体内抗菌效应。本研究拟最终获得毒性小、体内抗菌活性高、可能具有广谱抗革兰阳性菌的新型抗菌药物。方法:本课题拟通过分子设计—合成—生物活性测试模式,采用活性基团拼接法和取代法,合成一系列新型咪唑类抗菌药物;再对合成的咪唑类抗菌药物进行元素、1H NMR、13C NMR、MS(ESI)、熔点、远红外光谱等表征分析。利用PCR法扩增3种不同肺炎链球菌Wal K基因序列(全长、缺陷CA结构域、仅含有CA结构域),并构建3种Wal K基因序列的重组pp SUMO质粒,再将其转化到*** BL21中,依靠IPTG诱导表达及Ni-NTA亲和层析,得到纯度较高的可溶性目的蛋白;利用该蛋白免疫BALB/C小鼠获取多克隆抗体,经ELISA法检测其特异性Ig G抗体效价,经Western Blot鉴定Wal K全长蛋白在4种***血清型菌株中的保守性。利用ATP激酶发光检测试剂盒检测以上三种蛋白的激酶活性,检测蛋白与新型咪唑类化合物作用后的激酶活性变化(IC50)。通过最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)及细胞毒性试验(MTT法)等实验评价化合物的体外抗菌效应以及细胞毒性作用。构建BALB/C小鼠的腹腔***感染模型,通过尾静脉注射途径给药,观察小鼠的生存时间和生存率。结果:本课题组前期已经成功合成以原始化合物6为母体的15种新型咪唑类化合物,并对其中的6种化合物进行了1H NMR、13C NMR、高分辨质谱、红外光谱、熔点等结构和组成表征分析,结果提示为预期目标分子。成功构建和表达Wal K(全长、缺陷CA结构域、仅含有CA结构域)重组蛋白;以全长Wal K蛋白免疫小鼠后获得高滴度的多克隆抗体,Western Blot分析证实,CMCC(B)31207、CMCC(B)31203、CMCC(B)31693、NTCC7466(D39)等4种***菌株均能稳定的表达Wal K全长蛋白。随着新型咪唑类化合物(2号、4号及5号)药物浓度的逐渐增高,Wal K全长组和仅含有CA结构域组ATP激酶活性均持续降低(均P0.05)。通过最小抑菌浓度、最小杀菌浓度等体外实验证实,新合成咪唑类化合物2号、4号、5号均具有较好的抑菌及杀菌效应,其中4号化合物抑菌及杀菌效果最为明显(P0.05);2号化合物与阳性对照组间比较其保护效果明显降低(P效应;最小抑菌浓度和最小杀菌浓度试验均证实4号化合物在体外具有极佳的抗菌及杀菌效应;细胞毒性实验证实以2号、4号、5号化合物细胞毒性均显著低于原始化合物;体内抗菌效应试验提示新合成的咪唑类化合物4号、5号均能够明显延长腹腔感染肺炎链球菌D39小鼠的生存时间。本研究首次证实新合成的4号咪唑类化合物可能是未来治疗肺炎链球菌感染的新型药物,后续实验将着重其药物代谢学、药物动力学方面的深入研究,以期筛选出抗革兰氏阳性细菌感染的广谱新型咪唑类化合物。

关键词：肺炎链球菌催化ATP酶结构域化合物抗菌效应

基于肺炎链球菌WalK酶为靶点的3种咪唑类化合物的抗菌效应研究

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基于肺炎链球菌WalK酶为靶点的3种咪唑类化合物的抗菌效应研究

作者：徐梅遵义医学院

学位级别：硕士

目的:本课题组以肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,***)组氨酸激酶WalK为作用靶点,设计合成了3种新型咪唑类化合物(A、B、C),本研究将对新合成的咪唑类化合物进行药物作用靶点、体内外抗菌活性及毒性的研究,以期筛选出细胞毒性低且... 详细信息

目的:本课题组以肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,***)组氨酸激酶WalK为作用靶点,设计合成了3种新型咪唑类化合物(A、B、C),本研究将对新合成的咪唑类化合物进行药物作用靶点、体内外抗菌活性及毒性的研究,以期筛选出细胞毒性低且抗菌活性强的抗***先导化合物。方法:截短表达***组氨酸激酶WalK蛋白,利用Kinase-Glo化学发光试剂盒检测WalK截短蛋白的活性以及咪唑类化合物(A、B、C)抑制WalK截短蛋白活性的情况;通过最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)实验,研究化合物的体外抗菌活性;构建BALB/c小鼠***肺炎模型,以灌胃方式给予咪唑类化合物,观察BALB/c小鼠生存时间、肺组织及血液中细菌载量、IL-6和IFN-γ细胞因子及肺组织病理的变化,研究药物的体内抗菌活性;通过咪唑类化合物对肺癌A细胞的存活率影响实验及兔红细胞溶血实验,对咪唑类化合物的安全性进行评价。结果:本研究成功构建和表达了具有生物学活性的***组氨酸激酶WalK截短蛋白,经Kinase-Glo化学发光试剂盒检测,咪唑类化合物(A、B、C)对WalK截短蛋白的活性具有一定的抑制作用,三者的IC分别为353.7 mM、58.77 mM及97.99 mM;体外抗菌实验结果表明,咪唑类化合物A和B均具有显著的抑菌及杀菌活性,前者MIC及MBC分别为2.5 mg/mL和5.0 mg/mL,后者MIC及MBC分别为5.0 mg/mL和10mg/mL,且随着化合物A和B浓度的增加,抗菌活性增强,当化合物浓度达MBC值时,***的生长完全受到抑制,而化合物C的抑菌及杀菌效果不明显,其MIC及MBC均大于10 mg/mL;小鼠体内实验结果表明,在延长小鼠的生存时间上,化合物A和B与溶剂对照组相比均没有统计学差异,P>0.05,但两种化合物均能显著降低小鼠血液及肺组织中的细菌载量,化合物A组血液及肺组织中细菌载量分别为3.03±0.76 log0 CFU/mL,6.37±0.68 logCFU/mL,化合物B组血液及肺组织中细菌载量分别为3.45±0.57 logCFU/mL,6.7±0.39 logCFU/m L;另外,两种化合物能显著降低小鼠血清中细胞因子IL-6和IFN-γ的浓度,化合物A组细胞因子IL-6和IFN-γ分别为443.98±39.24 pg/mL,97.79±11.52 pg/mL,化合物B组IL-6和IFN-γ分别为483.97±45.77 pg/mL,105.81±14.13 pg/mL;除此之外,小鼠肺组织的病理切片结果表明,与溶剂对照组相比,给药组肺泡腔内炎症细胞渗出及细支气管上皮细胞变性坏死的现象不明显,肺炎和组织充血的症状较轻,两种化合物对***引起的肺损伤具有一定的保护作用;咪唑类化合物A和B的安全性评价的实验结果表明,二者对肺癌A细胞的IC分别为240.3 mM和411.4 mM,在2倍MIC及4倍MIC浓度下,二者对兔红细胞的溶血率均低于5%,表明两种化合物的体外细胞毒性及溶血活性低。结论:1、成功表达了具有活性的WalK截短蛋白,新合成咪唑类化合物(A、B、C)是WalK截短蛋白的抑制剂;2、对咪唑类化合物进行体内外抗菌活性研究及安全性评价,最后结果显示咪唑类化合物A和B具有一定的体内外抗菌效果,化合物的毒性较低。

关键词：肺炎链球菌组氨酸激酶WalK 咪唑类化合物抗菌效应

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金属纳米团簇的合成及抗菌效应的研究进展

生物加工过程 2022年第1期20卷 81-87页

作者：王玉先张红漫朱丽英江凌黄和南京工业大学生物与制药工程学院江苏南京211800 南京工业大学化学与分子工程学院江苏南京211800 南京工业大学食品与轻工学院江苏南京211800 南京工业大学药学院江苏南京211800

金属纳米团簇(M NCs)是近年来出现的一类由几个至数百个原子组成的具有超小尺寸结构(<3 nm)的新型功能材料,因其有独特的物理化学性质以及良好的生物相容性,被广泛应用于生物分析、药物输送、医学成像以及肿瘤治疗等领域。最近,利用M NC... 详细信息

金属纳米团簇(M NCs)是近年来出现的一类由几个至数百个原子组成的具有超小尺寸结构(抗菌材料解决细菌感染方面的研究成为热点,已经在抗生素耐药、致病菌的检测和治疗等方面得到了应用,为解决抗感染问题提供了新思路。本文首先介绍了不同M NCs的合成及性质的研究进展,然后根据近几年来国内外的相关研究,综述了单一M NCs及其复合物抗菌效应的应用现状及其作用机制,并对其作为一种新型纳米抗菌材料在实际应用过程中的稳定性、多功能性以及协同抗菌作用存在的问题进行了展望。

关键词：金属纳米团簇纳米抗菌材料抗生素耐药抗菌效应细菌感染抗感染

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有机酸的抗菌效应及其机制的研究进展

饲料工业 2006年第11期27卷 35-41页

作者：李成良周安国王之盛四川农业大学动物营养研究所

有机酸添加到日粮中能够抑制胃肠道细菌对可利用养分的竞争作用和减少可能的细菌代谢产物的毒性作用,有机酸还能够抑制饲料和胃肠道中潜在病原菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的定植和繁殖,从而有益于动物的健康。文中就有机酸的抗菌作用作一综... 详细信息

有机酸添加到日粮中能够抑制胃肠道细菌对可利用养分的竞争作用和减少可能的细菌代谢产物的毒性作用,有机酸还能够抑制饲料和胃肠道中潜在病原菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的定植和繁殖,从而有益于动物的健康。文中就有机酸的抗菌作用作一综述,并分析其作用机制和微生物对有机酸的耐受性。

关键词：有机酸抗菌效应机制毒性作用

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抗菌药物药效学与中兽药抗菌效应研究

兽医导刊 2007年第4期 38-39页

作者：罗超应胡振英郑继方中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃兰州730050

抗菌中兽药筛选与中兽药抗菌效应研究是中兽药现代化研究的一个重要方面，历来倍受人们重视。然而，根据抗菌药物药效学的有关知识与当前的一些研究结果来看，其中存在着许多误区，十分不利于中兽药学的健康发展。为此，笔者谈一点肤浅... 详细信息

抗菌中兽药筛选与中兽药抗菌效应研究是中兽药现代化研究的一个重要方面，历来倍受人们重视。然而，根据抗菌药物药效学的有关知识与当前的一些研究结果来看，其中存在着许多误区，十分不利于中兽药学的健康发展。为此，笔者谈一点肤浅认识，不妥之处还望不吝赐教。

关键词：抗菌效应抗菌药物中兽药药效学现代化兽药学

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泰能对腹腔细菌性感染的抗菌效应

药学与临床研究 1996年第4期11卷 35-36页

作者：梁鸿发吴绍饮井清源南京医科大学附属第一医院南京210006

对48例腹腔严重细菌性感染患者进行了疗效试验。结果表明:治疗组总有效率95.8％,治愈显效率91.7％,明显高于对照组的70.8％和62.5％,治愈显效率统计学检验有显著差异(P<0.05)。

关键词：泰能腹腔细菌感染抗菌效应

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纳米银对小麦条锈菌的抗菌效应研究

植物医生 2017年第10期30卷 58-60页

作者：邓仕良张丕文杨宇衡陕西省汉中中学陕西汉中723000 重庆市潼南区农业局重庆潼南402660 西南大学植物保护学院重庆北碚400716

以小麦条锈病感病品种"铭贤169"幼苗为材料,在接种小麦条锈菌(Puccinia striiformis ***)CYR32前后不同时间点对小麦叶面进行不同浓度的纳米银(AgNPs)药剂处理,以接种13d后的产孢率和产孢抑制率考查纳米银对小麦条锈菌的抗菌效应。结果... 详细信息

以小麦条锈病感病品种"铭贤169"幼苗为材料,在接种小麦条锈菌(Puccinia striiformis ***)CYR32前后不同时间点对小麦叶面进行不同浓度的纳米银(AgNPs)药剂处理,以接种13d后的产孢率和产孢抑制率考查纳米银对小麦条锈菌的抗菌效应。结果表明,纳米银可显著抑制小麦条锈菌CYR32在小麦幼苗叶片上产孢。在0.5~4μg/mL的4个浓度水平中,0.5μg/mL AgNPs对小麦条锈菌的抑制率最高;在接种前1 d,接种后4 d、8 d和12 d的4个喷药时间中,接种后第4 d喷药对小麦条锈菌的抑制作用整体上最好。总的来说,纳米银试剂有良好的抑菌防病效果,具有开发成新型杀菌剂的良好潜力。

关键词：纳米银(AgNPs) 小麦条锈菌CYR32 抗菌效应