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杂交种“金虎石斑鱼”与棕点石斑鱼卵巢发育及性类固醇激素水平比较

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中国水产科学 2023年第4期30卷 457-467页

作者：邱弈树丁小雨李振通段鹏飞王心怡黎琳琳王林娜刘阳马文辉庞尊方李胜忠田永胜新疆农业大学生命科学学院中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室上海海洋大学水产与生命学院莱州明波水产有限公司

为了探究杂交种“金虎石斑鱼”(Epinephelus fuscoguttatus ♀×Epinephelus tukula ♂)和母本棕点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)的卵巢发育和血清中性类固醇激素水平的变化,对10、18、24、36月龄的金虎石斑鱼和棕点石斑鱼进行了... 详细信息

为了探究杂交种“金虎石斑鱼”(Epinephelus fuscoguttatus ♀×Epinephelus tukula ♂)和母本棕点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)的卵巢发育和血清中性类固醇激素水平的变化,对10、18、24、36月龄的金虎石斑鱼和棕点石斑鱼进行了卵巢组织切片,并采用酶联免疫吸附法测定其血清中的雌二醇(E2)、11-酮基睾酮(11-KT)、睾酮(T)、孕酮(P)含量。结果显示,杂交种金虎石斑鱼卵巢正常发育,没有出现卵母细胞萎缩、退化的现象,且36月龄时金虎石斑鱼卵巢发育至Ⅲ期早期,卵母细胞进入大生长期体积明显增大,核仁多位于核膜外侧。棕点石斑鱼卵巢发育较快,36月龄时卵巢已发育至Ⅲ期末期,卵母细胞与核体积进一步增大。卵膜外又形成了一层滤泡膜,形成双层滤泡膜结构。金虎石斑鱼与棕点石斑鱼血清中E2、11-KT、P的水平变化趋势相似,呈现先升后降的趋势,且在24月龄时达到最大,但棕点石斑鱼高于金虎石斑鱼。金虎石斑鱼血清中T的水平与其他性类固醇激素变化一致:在24月龄时达到最大,在36月龄时显著下降,而棕点石斑鱼血清中T在36月龄时依然维持和24月龄相似的高水平。棕点石斑鱼血清中E2、T、P的水平在24月龄时显著高于金虎石斑鱼(P性基础,可为石斑鱼杂交种性腺发育及可育性研究提供细胞和血清学基础。

关键词：金虎石斑鱼棕点石斑鱼杂交卵巢发育性类固醇激素

性类固醇激素诱导雌性日本鳗鲡性腺发育过程中钙和脂肪的动员

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中山大学学报（自然科学版） 2001年第2期40卷 86-88页

作者：张利红张为民林浩然陈鑛安中山大学生命科学学院广东广州510275 香港大学动物系

7次埋植雄烯二酮 (ADSD)或甲基睾酮 (MT)后雌鳗的性腺成熟系数 (GSI)显著升高 ,分别达到 ( 2 4 94±7 2 4 ) %和 ( 1 8 67± 7 56) % ,其肝体系数 (HSI)也显著高于对照组 ;雌鳗卵巢中钙和脂肪含量明显提高 ,水分含量显著降低 ,灰分含... 详细信息

7次埋植雄烯二酮 (ADSD)或甲基睾酮 (MT)后雌鳗的性腺成熟系数 (GSI)显著升高 ,分别达到 ( 2 4 94±7 2 4 ) %和 ( 1 8 67± 7 56) % ,其肝体系数 (HSI)也显著高于对照组 ;雌鳗卵巢中钙和脂肪含量明显提高 ,水分含量显著降低 ,灰分含量没有明显变化 ;肝脏中钙和脂肪含量也明显提高 ,水分和灰分含量明显降低 ;红肌和白肌中脂肪和灰分的含量则明显降低 ,水分和钙含量无明显变化 ;骨骼中钙含量明显降低 ,水分含量显著增加 ,脂肪和灰分的含量没有明显变化 .表明ADSD和MT促进了钙从骨骼中和脂肪从肌肉组织中的动员 ,从而为雌性日本鳗鲡 (Anguillajaponica)的卵巢发育提供了物质基础 .

关键词：日本鳗鲡雄激素钙脂肪性腺发育性类固醇激素成熟系数肝体系数

斑鳢叉头框转录因子基因Foxl2的克隆表达及性类固醇激素刺激下的表达响应

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大连海洋大学学报 2022年第1期37卷 49-60页

作者：吴燕铎欧密高丹丹陈昆慈罗青刘海洋赵建中国水产科学研究院珠江水产研究所农业农村部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室广东广州510380 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

为探究叉头框转录因子Foxl2基因(forkhead transcription factor gene 2)在斑鳢Channa maculata性腺发育过程中的作用,采用RT-PCR和RACE技术克隆出斑鳢Foxl2基因,利用qRT-PCR解析Foxl2基因在雌雄斑鳢1龄成鱼组织、不同发育时期性腺中的... 详细信息

为探究叉头框转录因子Foxl2基因(forkhead transcription factor gene 2)在斑鳢Channa maculata性腺发育过程中的作用,采用RT-PCR和RACE技术克隆出斑鳢Foxl2基因,利用qRT-PCR解析Foxl2基因在雌雄斑鳢1龄成鱼组织、不同发育时期性腺中的表达情况,以及外源性激素诱导后雌雄斑鳢性腺中Foxl2的表达变化,通过酶联免疫法测定性腺不同发育时期雌雄斑鳢血清中的雌性激素(estrogen,E)总含量,并利用免疫组化技术检测性腺中Foxl2蛋白表达的细胞类型。结果表明:克隆获得斑鳢Foxl2 cDNA序列全长为1939 bp,开放阅读框(ORF)为921 bp,共编码306个氨基酸;组织表达分析显示,Foxl2在卵巢中表达量最高且极显著高于精巢(P性腺发育时期表达分析显示,Foxl2在卵巢中表达量高于精巢,且在孵化出膜后105 d时,卵巢中表达量达到最高,精巢中表达量最低,两者表达量存在极显著性差异(P激素总含量变化与之相似;免疫组织化学检测显示,Foxl2蛋白表达于斑鳢卵巢成熟卵母细胞周围的颗粒细胞,精巢中未检测到Foxl2表达信号;经外源性类固醇激素17α-乙炔基雌二醇(17α-ethynylestradio,EE2)和17α-甲睾酮(17α-methyltestosterone,MT)处理后,卵巢中Foxl2的表达均受到抑制,但精巢中表达水平被EE2上调,被MT下调。研究表明,Foxl2基因在斑鳢性腺中呈现明显的性别二态性表达,推测其参与卵巢的发育和维持,通过外源激素诱导,Foxl2可能响应性类固醇激素的调节,本研究从mRNA和蛋白层面初步揭示了Foxl2在斑鳢性腺发育中的重要作用,为深入研究其性别分化机制及性别控制技术提供了科学参考。

关键词：斑鳢 Foxl2基因克隆性类固醇激素 mRNA表达分析

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性类固醇激素在近江牡蛎性腺发育周期的分布特征

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鲁东大学学报（自然科学版） 2023年第2期39卷 107-114页

作者：朱妍王文静夏苏东刘志鸿孙秀俊周丽青张秀梅吴彪天津农学院天津市水产生态及养殖重点实验室天津300384 中国水产科学研究院黄海水产研究所山东青岛266071 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266273 烟台市海洋经济研究院山东烟台264003

性类固醇激素在脊椎动物的性别分化、生长发育、生殖代谢等过程中发挥着重要的生理作用,但是目前对软体动物性类固醇激素的了解还十分有限。本研究结合组织学方法根据性腺发育状态将近江牡蛎性腺划分为三个组别,即前期(Ⅰ期)、中期(Ⅱ期... 详细信息

性类固醇激素在脊椎动物的性别分化、生长发育、生殖代谢等过程中发挥着重要的生理作用,但是目前对软体动物性类固醇激素的了解还十分有限。本研究结合组织学方法根据性腺发育状态将近江牡蛎性腺划分为三个组别,即前期(Ⅰ期)、中期(Ⅱ期)和后期(Ⅲ期),并利用酶联免疫吸附测定(ELISA)分析了孕酮、睾酮、雌二醇三种重要的性类固醇激素在性腺三个时期的变化特征。结果表明:性腺中孕酮、睾酮和雌二醇含量范围分别是22.2~346.6 pg·g^(-1)、1.9~28.7 pg·g^(-1)和23.2~258.1 pg·g^(-1);且平均含量雌二醇>孕酮>睾酮,分别为所测激素总含量的57%、40%和3%。近江牡蛎卵巢中孕酮含量在Ⅰ期和Ⅲ期显著高于精巢,精巢中睾酮含量在Ⅰ期显著高于卵巢,卵巢中雌二醇含量在Ⅱ期和Ⅲ期显著高于精巢。三种激素含量的变化在雌雄间和不同发育阶段都具有明显差异,表明性类固醇激素在近江牡蛎性别分化以及性腺发育过程中发挥了重要作用。该研究结果丰富了性类固醇激素在双壳贝类中的研究资料,可为制定近江牡蛎苗种繁育策略提供参考。

关键词：近江牡蛎性类固醇激素性腺发育

性类固醇激素雌二醇、睾酮对半滑舌鳎雌、雄、伪雄鱼生长性能的影响

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南方水产科学 2021年第4期17卷 27-34页

作者：王佳林杨英明杨倩王娜陈松林中国水产科学研究院黄海水产研究所/青岛海洋科学与技术国家实验室/海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266071 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室山东青岛266071

多种鱼类包括半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)都存在性别大小异形现象,这种生长二态性可能与性类固醇激素和生长轴相关基因的相互作用有关。笔者课题组前期已通过转录组学分析发现性类固醇激素可能参与半滑舌鳎性别大小异形调控过程... 详细信息

多种鱼类包括半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)都存在性别大小异形现象,这种生长二态性可能与性类固醇激素和生长轴相关基因的相互作用有关。笔者课题组前期已通过转录组学分析发现性类固醇激素可能参与半滑舌鳎性别大小异形调控过程。为探究性类固醇激素对半滑舌鳎不同性别生长差异的影响,该研究对16月龄雌、雄、伪雄鱼进行了雌二醇、睾酮激素注射处理,并对其生长数据进行统计,且对半滑舌鳎生长激素1(Growth hormone 1, gh1)、胰岛素样生长因子1 (Insulin-like growth factor 1, igf1)和细胞因子信号转导抑制因子(Suppressor of cytokine signaling 3, socs3) 3个基因进行了定量分析。结果表明,两种性类固醇激素对半滑舌鳎不同性别个体的生长均具有抑制作用。激素处理后,gh1、igf1在脑、肝脏中的表达量总体呈下降趋势,socs3在肌肉和肝脏中的表达量显著上升。该研究探讨了性类固醇激素对半滑舌鳎不同性别生长性能的影响,为深入研究性固醇激素调控鱼类性别大小异形现象提供了参考。

关键词：半滑舌鳎性类固醇激素性别大小异形 gh1 igf1 socs3

魁蚶性类固醇激素及相关基因对性腺发育的影响

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魁蚶性类固醇激素及相关基因对性腺发育的影响

作者：王文静上海海洋大学

学位级别：硕士

魁蚶(Scapharca broughtonii)是我国黄渤海区重要的大型底栖贝类,也是我国北方重要的经济养殖贝类。对魁蚶性腺发育特征进行深入研究,能够为顺利开展人工苗种繁育提供支撑。贝类性腺发育受内因和外因共同调控,其中内因是相关的遗传物质... 详细信息

魁蚶(Scapharca broughtonii)是我国黄渤海区重要的大型底栖贝类,也是我国北方重要的经济养殖贝类。对魁蚶性腺发育特征进行深入研究,能够为顺利开展人工苗种繁育提供支撑。贝类性腺发育受内因和外因共同调控,其中内因是相关的遗传物质,而外因则包括温度、盐度、p H和光照周期等环境因子。性类固醇激素作为水生生物中性别维持和性腺发育的关键物质,在贝类性腺发育调控等方面发挥重要作用,但在魁蚶中的相关研究相对匮乏。本研究建立了魁蚶性类固醇激素(孕酮、睾酮和雌二醇)的检测方法,测定并分析了魁蚶不同性腺发育时期精卵巢中性类固醇激素含量及比例的变化规律;对魁蚶三个发育时期的卵巢进行了全转录组测序,分析了m RNA及非编码RNA对性腺发育的调控作用;进一步鉴定并分析了类固醇生成因子1(Steroidgenic factor 1,SF-1)、类固醇激素合成急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein,St AR)、17β-羟基类固醇脱氢酶14(17β-hydroxysteroid dehydrogenase 14,17β-HSD14)、细胞色素P45017(Cytochrome P450 17,CYP17)四个性类固醇激素合成相关基因,以及脑和肌肉芳香烃受体核转运样蛋白1(Brain and muscle ARNT-like protein 1,Bmal1)、隐花色素生物钟基因(Cryptochrome,Cry)和周期基因(Period,Per)三个生物钟基因的序列特点及时空表达。主要研究内容及结果如下:1.性类固醇激素在魁蚶性腺发育周期的分布特征通过组织学方法将魁蚶性腺发育划分为五个时期,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测了孕酮、睾酮、雌二醇三种重要的性类固醇激素在魁蚶性腺发育周期中的含量。结果表明,卵巢中孕酮、睾酮、雌二醇和总含量含量范围分别是157.04～759.01 pg/g、18.86～56.03 pg/g、14.80～57.90 pg/g和190.70～872.94pg/g,精巢中孕酮、睾酮、雌二醇和总含量含量范围分别是211.81～470.99 pg/g、23.22～65.17 pg/g、17.52～38.00 pg/g和252.55～574.16 pg/g。魁蚶性腺中孕酮、睾酮和雌二醇三种激素分别约占激素总含量的80%、10%和10%。魁蚶卵巢和精巢中Ⅱ期孕酮、睾酮和雌二醇的含量均高于其他四个时期,Ⅱ期激素总含量也均高于其他四个时期。除Ⅴ期外卵巢中孕酮的含量均高于精巢,精巢中睾酮的含量均高于卵巢,Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期卵巢中雌二醇的含量高于精巢,且除Ⅴ期外卵巢中激素总含量高于精巢,且部分雌雄间激素含量差异具有显著性。2.魁蚶卵巢全转录组基因调控网络构建利用RNA-seq和small RNA-seq技术进行了魁蚶卵巢9个样品的全转录组测序,探讨了m RNA和nc RNA在魁蚶卵巢不同发育时期的表达模式,在全转录组水平上筛选了影响魁蚶繁殖的关键基因和非编码RNA。结果表明,RNA文库测序后共获得了172.84 Gb的Clean reads,Q30碱基率均大于92.06%;小RNA文库测序后共得到了103.32 M Clean Reads,Q30碱基率均大于94.57%。9个样本中鉴定出45,453个m RNAs、69,768个lnc RNAs、3810个circRNAs和1239个mi RNAs,三组中检测到11,342个差异基因、6897个差异表达lnc RNAs、135个差异表达circRNAs和164个差异表达mi RNAs。构建了魁蚶性腺发育相关的lnc RNA/circRNA-mi RNA-m RNA调控网络,包括10个与性腺发育相关的基因,为了解非编码RNA对贝类卵巢发育影响的分子机制提供了新的见解。3.性类固醇激素合成相关基因的生物信息学分析及与性腺发育的相关性从魁蚶的全转录组中筛选获得SF-1、St AR、17β-HSD14和CYP17基因的c DNA序列,对基因的CDS区进行测序验证。SF-1基因的CDS序列1671 bp,编码556个氨基酸;St AR基因的CDS序列为1446 bp,编码481个氨基酸;17β-HSD14基因的CDS序列为822 bp,编码273个氨基酸;CYP17基因的CDS序列为1527 bp,编码508个氨基酸。四个性类固醇激素合成相关基因在魁蚶卵巢中相对表达量均在Ⅱ期最高,与孕酮、睾酮、雌二醇和三种激素的总含量的最高值一致。且表达量趋势从Ⅰ期到Ⅱ期的卵巢发育过程中呈上升趋势,在Ⅱ期达到最高值,然后在从Ⅱ期到Ⅴ期的性腺发育过程中呈下降趋势,并在Ⅴ期达到最低值,与三种激素的含量及总含量在性腺发育过程中的趋势一致。原位杂交结果表明,St

关键词：魁蚶性腺发育性类固醇激素非编码RNA 生物钟基因

金虎杂交斑卵巢发育和性类固醇激素水平变化及生殖轴组织转录组研究

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金虎杂交斑卵巢发育和性类固醇激素水平变化及生殖轴组织转录组研...

作者：邱弈树新疆农业大学

学位级别：硕士

石斑鱼类是国内外重要经济鱼类之一,具有肉质鲜美、营养丰富、食用方便、养殖效益高等特点。目前自然海域石斑鱼种质资源严重退化,苗种的数量已经严重不足。杂交是育种广泛采用的一种手段,能够丰富遗传结构,使不同类型的亲本优良性状得... 详细信息

石斑鱼类是国内外重要经济鱼类之一,具有肉质鲜美、营养丰富、食用方便、养殖效益高等特点。目前自然海域石斑鱼种质资源严重退化,苗种的数量已经严重不足。杂交是育种广泛采用的一种手段,能够丰富遗传结构,使不同类型的亲本优良性状得以结合,获得杂种优势。利用蓝身大斑石斑鱼(Epinephelus tukula)冷冻精子与棕点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)卵子进行杂交育种实验,获得了具有高受精率、高孵化率、低畸形率和生长快等优势的杂交子代“金虎杂交斑”(又名金虎石斑鱼)。本研究以金虎杂交斑为研究对象,从组织学、生理生化和分子遗传三个方面出发,对金虎杂交斑的卵巢组织形态结构、血清性类固醇激素水平以及生殖轴组织转录组数据进行研究,分析其与母本棕点石斑鱼在卵巢发育上的差异。主要结果如下:(1)对10、18、24、36月龄的金虎杂交斑和棕点石斑鱼进行了卵巢组织切片,发现杂交种金虎杂交斑36月龄前卵巢正常发育,没有出现卵母细胞萎缩、退化的现象。36月龄时金虎杂交斑卵巢发育至Ⅲ期早期,卵母细胞进入大生长期体积明显增大,核仁多位于核膜外侧。棕点石斑鱼卵巢发育较快,36月龄时卵巢已发育至Ⅲ期末,卵母细胞与核体积进一步增大。卵膜外又形成了一层滤泡膜,形成双层滤泡膜结构。(2)采用酶联免疫吸附法测定10、18、24、36月龄的金虎杂交斑和棕点石斑鱼血清中性类固醇激素水平。金虎杂交斑与棕点石斑鱼血清中雌二醇(E2)、11-酮基睾酮(11-KT)、孕酮(P)的水平变化趋势相似,呈现先升后降的趋势,且在24月龄时达到最大,但棕点石斑鱼高于金虎杂交斑。金虎杂交斑血清中睾酮(T)的水平与其他性类固醇激素变化一致:在24月龄时达到最大,在36月龄时显著下降,而棕点石斑鱼血清中T在36月龄时依然维持和24月龄相似的高水平。棕点石斑鱼血清中E2、T、P的水平在24月龄时显著高于金虎杂交斑(P性腺组织共18个样本进行测序,测序共获得875,456,562条raw reads,过滤后得到871,779,422条clean reads,总计121.22 Gb的clean data。在测序质量评估方面,经过过滤后Q30所占比例大于90%,样本GC含量为45.76%-51.19%。对金虎杂交斑与棕点石斑鱼生殖轴组织转录组进行比较分析,分别在脑、垂体、性腺中获得771个、1630个、1175个差异表达基因。对差异基因进行KEGG富集分析,发现细胞粘附分子、卵巢类固醇合成、NF-κB信号通路、卵母细胞减数分裂、胆固醇代谢、ECM受体相互作用、代谢途径、雌激素信号通路等与细胞生长和卵巢发育相关的信号通路。推测nr4a1、pgr、dmrta2、tbx19、cyp19a1与金虎杂交斑性腺发育迟缓相关。进一步通过WGCNA分析得到与卵巢发育相关的三个模块,筛选到一些相关性较高的基因,如cdh6、col18a1、hat1。研究结果表明金虎杂交斑36月龄前卵巢发育正常,但性成熟水平显著低于母本。金虎杂交斑在细胞学上具有良好的育性基础,同时为石斑鱼杂交种性腺发育及可育性研究提供了细胞学、血清学以及分子遗传基础。杂交种金虎杂交斑是否具有繁育能力,还需长时间和深入的跟踪研究。

关键词：金虎杂交斑棕点石斑鱼卵巢发育性类固醇激素转录组

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性类固醇激素在盆底功能障碍性疾病的应用

妇产与遗传(电子版) 2023年第4期 26-30页

作者：高祯蔚刘萍南方医科大学南方医院妇产科

盆底功能障碍性疾病（pelvic floor dysfunction,PFD）目前尚缺全球公认的安全有效的药物治疗，而雌激素降低、绝经被认为是其病因之一，雄激素常常被视作具有增强肌肉力量的功能。雌激素具有抗氧化和促胶原、血管生成作用，在维护盆底... 详细信息

盆底功能障碍性疾病（pelvic floor dysfunction,PFD）目前尚缺全球公认的安全有效的药物治疗，而雌激素降低、绝经被认为是其病因之一，雄激素常常被视作具有增强肌肉力量的功能。雌激素具有抗氧化和促胶原、血管生成作用，在维护盆底支持结构的力学特性上起到了重要作用。而雄激素可诱导肌纤维肥大、与肌肉力量正相关，但作用可能因性别而存在差异，仍需进一步证实其在女性肌肉力量维持中的作用。目前雌激素和雄激素的替代治疗尚存争议，体外实验大多显示有效，而体内实验则显示矛盾的结果，且激素的补充常常伴随其他靶器官的变化，存在一定风险，仍需设计基础实验和前瞻性实验来作进一步讨论。本文就性类固醇激素对肌肉功能的影响以及可能机制、替代治疗的前景和文献评价进行综述。

关键词：盆底功能障碍性疾病性类固醇激素雌激素雄激素

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性类固醇激素在虾夷扇贝成体组织中的分布

水产科学 2021年第4期40卷 523-529页

作者：郭振义谢欣冉李亚娟刘亮洁张丽靖吴绍轩张玲玲王师中国海洋大学海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室山东青岛2660003 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266237

性类固醇激素在动物性别分化、生殖、发育等过程中发挥着重要作用,但关于性类固醇激素在软体动物中是否存在合成、转化、运输等过程,目前所知甚少。本试验利用酶联免疫吸附法(ELISA)分析孕酮、睾酮和雌二醇在雌性和雄性虾夷扇贝成体组... 详细信息

性类固醇激素在动物性别分化、生殖、发育等过程中发挥着重要作用,但关于性类固醇激素在软体动物中是否存在合成、转化、运输等过程,目前所知甚少。本试验利用酶联免疫吸附法(ELISA)分析孕酮、睾酮和雌二醇在雌性和雄性虾夷扇贝成体组织中的分布情况。结果表明,肝胰腺中孕酮占比(80%)明显高于其他组织,提示孕酮可能在肝胰腺合成或吸收;血淋巴中性类固醇激素含量最高,暗示性类固醇激素可能在血淋巴中积累;3种激素含量之间均呈显著正相关,表明在扇贝体内存在激素的转化。3种激素含量在雌、雄个体的大部分组织之间无明显差异,但雌贝性腺和肝胰腺中的雌二醇/睾酮显著高于雄贝,表明雌性个体的性腺和肝胰腺中存在较高雌二醇转化能力。本试验结果将为深入了解性类固醇激素在软体动物中的合成与转化提供重要参考。

关键词：虾夷扇贝成体组织性类固醇激素孕酮睾酮雌二醇