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心肌缺血小鼠体表穴位敏化与垂体腺苷酸环化酶激活多肽的关系研究

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针刺研究 2024年

作者：胡瑞斌刘永斌杨雪左燕吴宇蔚薛思梦乔海法刁志君陕西省中医药管理局针灸神经生物学重点实验室陕西中医药大学针灸推拿学院陕西省针药结合重点实验室

目的：从分子生物学的角度，研究在内脏疼痛动物模型中，体表穴位敏化与垂体腺苷酸环化酶激活多肽（PACAP）表达的关系、效应及机制。方法：C57BL/6J小鼠随机分为对照组和模型组，每组28只。模型组小鼠腹腔注射160 mg/kg的异丙肾上腺素... 详细信息

目的：从分子生物学的角度，研究在内脏疼痛动物模型中，体表穴位敏化与垂体腺苷酸环化酶激活多肽（PACAP）表达的关系、效应及机制。方法：C57BL/6J小鼠随机分为对照组和模型组，每组28只。模型组小鼠腹腔注射160 mg/kg的异丙肾上腺素（ISO）构建心肌缺血（MI）的内脏疼痛模型，对照组注射相同剂量的0.9%氯化钠溶液。造模后6 d，各组小鼠尾静脉注射EB染料，观察体表渗出点数量及分布规律；机械痛觉阈值测量评估小鼠左侧前、后足及体表敏化区的痛敏变化水平；HE染色法评估小鼠心脏组织形态病理改变；Western blot和免疫荧光染色法检测体表穴位敏化后相应脊髓节段、背根神经节（DRG）和皮肤中PACAP的表达。结果：与对照组相比，模型组小鼠心脏组织肥厚增大，心肌细胞有明显炎性细胞浸润和纤维化表现；体表EB渗出点数量显著增多（P<0.01），且主要集中分布在脊髓T1～T5节段支配区域，且该区域EB渗出点痛觉阈值较非渗出点显著降低（P<0.01）；同时，模型组小鼠T1～T5节段脊髓、及其中DRG神经元和体表支配区皮肤中PACAP蛋白水平和阳性表达显著增多（P<0.05，P<0.001）。结论：通过腹腔注射ISO构建小鼠MI模型，可导致小鼠心脏组织病变并在体表出现心源性牵涉痛敏现象。其脊髓T1～T5节段、及该节段所对应的体表支配区域和DRG神经元中PACAP表达显著增高，可能是导致中枢和外周敏化的原因之一，进而促进体表局部产生神经源性炎性反应，介导穴位敏化发生。

关键词：心肌缺血穴位敏化垂体腺苷酸环化酶激活多肽

基于网络药理学和斑马鱼模型的心可舒片抗心肌缺血活性成分及作用机制研究

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 964-974页

作者：侯林华张华铮高硕张云何秋霞刘可春孙晨李建恒夏青河北大学药学院河北保定071002 齐鲁工业大学(山东省科学院) 山东省科学院生物研究所山东济南250103 山东省中医药研究院山东济南250014

目的基于网络药理学和斑马鱼模型研究心可舒片抗心肌缺血活性成分及作用机制。方法利用盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的斑马鱼心肌缺血模型和过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤模型,评价心可舒片抗心肌缺血... 详细信息

目的基于网络药理学和斑马鱼模型研究心可舒片抗心肌缺血活性成分及作用机制。方法利用盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的斑马鱼心肌缺血模型和过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤模型,评价心可舒片抗心肌缺血活性。利用TCMSP等数据库检索心可舒片的活性成分;利用PharmMapper数据库预测潜在作用靶点;利用OMIM数据库检索心肌缺血疾病靶点;分析心可舒片抗心肌缺血的潜在治疗靶点;对核心靶点进行GO和KEGG富集分析。利用斑马鱼和细胞模型对活性成分进行验证;利用qRT-PCR检测心可舒片对关键靶点表达的影响。结果心可舒片可以明显缓解ISO诱导的斑马鱼心包水肿、心动过缓、静脉窦-动脉球(SV-BA)距离增大,提高细胞存活率。心可舒片的30个潜在活性成分主要作用于ALB、AKT1、MAPK1等30个核心靶点;通过调节蛋白质磷酸化、负调控凋亡、正调控PI3K信号转导等627个GO条目,调控PI3K/Akt、FOXO、Ras等117条信号通路发挥抗心肌缺血作用。丹酚酸A、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸D、丹酚酸B、人参皂苷Rg2、金丝桃苷、3′-甲氧基葛根素、3′-羟基葛根素和人参皂苷Rg1能够缓解ISO引起的斑马鱼心肌缺血、提高缺氧细胞存活率。心可舒片能够上调ras、akt1等基因的表达,下调mapk1、mapk8等基因的表达。结论心可舒片中的丹酚酸A、紫草酸等活性成分通过靶向AKT1、MAPK1等靶点,调控PI3K/Akt、MAPK、Ras等信号通路发挥抗心肌缺血作用。

关键词：心可舒片网络药理学斑马鱼 H9c2 心肌缺血盐酸异丙肾上腺素

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人参不定根调节NLRP3炎症小体通路改善心肌缺血损伤作用

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中草药 2024年第12期55卷 4065-4074页

作者：王秦玺曲雪峰谢泽眯陈一豪卓胜男吴月金王茵杭州医学院药学院(食品科学与工程学院) 浙江杭州310013

目的探讨人参不定根对心肌缺血(myocardial ischemia,MI)诱导的心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响及作用机制。方法采用高效液相色谱法和电感耦合等离子体质谱法检测人参不定根的主要成分。雄性C57BL/6小鼠sc异丙肾上腺素建立心肌缺血模型... 详细信息

目的探讨人参不定根对心肌缺血(myocardial ischemia,MI)诱导的心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响及作用机制。方法采用高效液相色谱法和电感耦合等离子体质谱法检测人参不定根的主要成分。雄性C57BL/6小鼠sc异丙肾上腺素建立心肌缺血模型,心电图用于心肌缺血的诊断;采用苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色评估心脏组织病理变化;ELISA检测血清中炎症因子水平;qRT-PCR和Western blotting检测心脏组织凋亡、纤维化和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)炎症小体、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)相关因子表达。结果人参不定根能明显缓解心肌缺血导致的心肌形态的病理变化,减少心肌纤维化面积,改善ST段抬高,抑制过度炎症。此外,人参不定根能明显抑制转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、NF-κB和NLRP3炎症小体通路相关蛋白的表达水平(P心肌缺血诱发的损伤。人参不定根具有缓解心肌缺血损伤的潜力。

关键词：心肌缺血人参不定根核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 核因子-κB 转化生长因子-β1 凋亡纤维化

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS和网络药理学的芪参益气滴丸治疗心肌缺血的配伍机制研究

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中国中药杂志 2024年第14期49卷 3769-3783页

作者：刘洋贾孟晓赵婷吴灿孙晶董玲河南中医药大学药学院河南郑州450046 北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488

芪参益气滴丸(QSYQ)的临床疗效及作用机制已有较好研究基础,但发挥治疗作用的配伍机制还有待深入解析,该文旨在探究QSYQ治疗心肌缺血的配伍机制。采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术获得该方吸收入血成分;利用TCMSP、TCMIP和SwissTarg... 详细信息

芪参益气滴丸(QSYQ)的临床疗效及作用机制已有较好研究基础,但发挥治疗作用的配伍机制还有待深入解析,该文旨在探究QSYQ治疗心肌缺血的配伍机制。采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术获得该方吸收入血成分;利用TCMSP、TCMIP和SwissTargetPrediction数据库收集并筛选入血成分的靶标蛋白;通过GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库获得心肌缺血相关的疾病蛋白;利用在线绘图软件Venny 2.1.0、STRING和Cytoscape 3.9.1得到核心靶点与核心成分;通过DAVID数据库对核心靶点进行GO功能注释及KEGG通路富集,获得该方治疗心肌缺血的主要作用通路并绘制可视化网络图;基于“成分-靶点”“药材-通路”及“PI3K-AKT”特征通路分析配伍机制,并采用分子对接进行验证。该文获得QSYQ吸收入血成分42个,成分靶点556个,疾病靶点1980个,核心靶点69个,核心成分15个;该方可通过调控MAPK1、RELA、SRC、JUN、STAT3等蛋白,作用于HIF-1、PI3K-AKT、Toll-like、MAPK、VEGF等信号通路来发挥心肌缺血治疗功效;“成分-靶点”与“药材-通路”互作网络图在靶点与通路层面初步阐释了该方4味中药的协同情况;PI3K-AKT特征通路表明,君药黄芪与臣药丹参可调控该途径中的大部分靶点,佐药三七在IL6、AKT蛋白协同黄芪与丹参,使药降香在AKT、RXRA蛋白起调和作用,诸药共同作用于AKT、RXRA、NFKB等蛋白协同调控细胞的存活,进而起到促血管新生的作用。分子对接表明氢键和疏水作用可能是其主要作用形式,也验证了PI3K-AKT信号通路的结合能分布情况。该文从药材、成分、靶点、通路多维度解析该方的配伍内涵,为QSYQ作用机制及配伍规律的研究提供了参考依据。

关键词：芪参益气滴丸心肌缺血网络药理学分子对接配伍机制 PI3K-AKT信号通路

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归脾汤对心肌缺血大鼠ERK1/2和p38 MAPK表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 1-8页

作者：吴江立贾玉涛代成王晓影李睿嘉孙佳欢周伟伟李爱英河北中医药大学科研中心石家庄050091 石家庄学院化工学院石家庄050035 河北省心脑血管病中医药防治研究重点实验室石家庄050091

目的:探究归脾汤对心肌缺血大鼠的治疗作用及机制。方法:50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、归脾汤低、高剂量组(7.52、15.04 g·kg^(-1))、曲美他嗪组(0.002 g·kg^(-1))。通过灌胃维生素D3、高脂饮食和注射异丙肾上腺素的方法建立心... 详细信息

目的:探究归脾汤对心肌缺血大鼠的治疗作用及机制。方法:50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、归脾汤低、高剂量组(7.52、15.04 g·kg^(-1))、曲美他嗪组(0.002 g·kg^(-1))。通过灌胃维生素D3、高脂饮食和注射异丙肾上腺素的方法建立心肌缺血大鼠模型,药物治疗15 d后,心电图分析其心肌损伤程度;全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的变化;苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察心肌组织病理改变;原位末端标记(TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心脏中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、剪切胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心电图S-T段下降、血清中TC、TG和LDL-C水平明显升高(P心肌组织排列紊乱,心肌细胞凋亡比例增多,心脏中cleaved Caspase-3、Bax、p-p38 MAPK蛋白明显升高(P心肌组织损伤程度减轻,心肌细胞凋亡比例减少。归脾汤低剂量组Bcl-2表达明显升高(P心肌细胞凋亡,减轻大鼠心肌缺血损伤。

关键词：归脾汤心肌缺血细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2) p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK) 细胞凋亡

基于FoxO信号通路探究鲜参对心肌缺血保护作用机制

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中国中药杂志 2024年

作者：朱雨欣亓云鹏杨洁罗闽孙艺璇李思远徐文娟董玲北京中医药大学生命科学学院北京中医药大学中药学院

基于鲜参及其炮制品对心肌缺血小鼠保护作用药效差异，明确鲜参优势作用环节，并利用网络药理学结合细胞模型验证，初步揭示鲜参调控FoxO信号通路的分子机制。采用腹腔注射盐酸异丙肾上腺素（ISO）制备小鼠心肌缺血模型，比较鲜参及其... 详细信息

基于鲜参及其炮制品对心肌缺血小鼠保护作用药效差异，明确鲜参优势作用环节，并利用网络药理学结合细胞模型验证，初步揭示鲜参调控FoxO信号通路的分子机制。采用腹腔注射盐酸异丙肾上腺素（ISO）制备小鼠心肌缺血模型，比较鲜参及其炮制品对心肌缺血的保护作用，鲜参在抗脂质过氧化减轻小鼠心肌缺血方面更具有优势。以此为基础开展网络药理学研究，结果表明鲜参含有19个优势活性成分及38个关键靶点，包括白蛋白（ALB）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT（AKT1）、表皮生长因子受体（EGFR）、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、丝裂原活化蛋白激酶（P38）等。鲜参可通过Ras信号通路、FoxO信号通路、IL-17信号通路、Rap1信号通路等调节机体的细胞增殖和凋亡、炎症反应、氧化应激反应等多种生物功能，进而达到保护心肌细胞的作用。其中FoxO信号通路为鲜参的特征通路，并进一步发现人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、β-榄香烯等鲜参优势活性成分可以通过AKT、JNK、EGFR、P38等靶点调控此通路。生物学验证结果表明人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、β-榄香烯能增强细胞生存活力、降低细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）含量及活性氧（ROS）水平。靶点验证结果表明人参皂苷Rg1、β-榄香烯能显著下调FoxO信号通路中EGFR蛋白表达，人参皂苷Re、β-榄香烯能显著下调ERK1/2、P38表达。该研究揭示了鲜参对心肌缺血保护作用的优势环节，为鲜参及相关产品的深度开发提供了一定的理论依据。

关键词：鲜参心肌缺血网络药理学 FoxO信号通路分子机制

空气二氧化氮短期个体暴露对中老年人心肌缺血影响的多中心研究

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科学通报 2024年

作者：姜云星雷磊兰阳王凯房小红邓芙蓉汤乃军王艳郭新彪吴少伟西安交通大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系环境与疾病相关基因教育部重点实验室西安交通大学第一附属医院心内科心电图室北京大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系天津医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系上海交通大学医学院附属第九人民医院

大气二氧化氮（NO2）短期暴露与缺血性心脏病的发病、死亡风险增加有关,而ST段压低事件是心肌缺血的敏感性指标.探索NO2短期个体暴露与ST段压低事件发生风险之间的关联有助于进一步阐明大气NO2短期个体暴露与缺血性心脏病关联的潜在生... 详细信息

大气二氧化氮（NO2）短期暴露与缺血性心脏病的发病、死亡风险增加有关,而ST段压低事件是心肌缺血的敏感性指标.探索NO2短期个体暴露与ST段压低事件发生风险之间的关联有助于进一步阐明大气NO2短期个体暴露与缺血性心脏病关联的潜在生物学机制.本研究基于一项在天津、上海和西安开展的定组研究（90人）以及一项在北京开展的随机双盲对照干预性研究（102人）探索NO2短期个体暴露与ST段压低事件发生风险之间的关联,并在干预研究中评估补充L-精氨酸潜在的保护作用.定组研究结果显示, NO224 h个体暴露浓度每增加1个四分位间距（18.1 ppb, parts per billion）与前导联、下导联以及总导联的ST段压低事件发生次数分别显著增加26.77%（8.61%,47.97%）、51.29%（26.79%, 80.53%）和13.39%（4.31%, 23.26%）有关;干预研究中, NO24 h个体暴露与所有导联的ST段压低事件发生次数显著增加有关, NO28 h个体暴露与前导联、前外侧导联和总导联的ST段压低事件次数显著增加有关.干预研究显示口服L-精氨酸补充剂对NO2短期个体暴露引起的前导联和前外侧导联的ST段压低事件发生风险起到拮抗作用.本研究显示NO2短期个体暴露与心肌缺血发生风险有关,未来需要更大样本量的研究进一步验证研究结果的稳定性.

关键词：空气污染二氧化氮心肌缺血 ST段压低缺血性心脏病

腺苷负荷心肌灌注显像评估川崎病心肌缺血的价值

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中国医学影像学杂志 2024年第6期32卷 587-590,598页

作者：李益卫赵瑞芳沈燕丽施磊峻徐丽特张碧颖上海市儿童医院上海交通大学医学院附属儿童医院核医学科上海200062 国家儿童医学中心复旦大学附属儿科医院核医学科上海201102

目的探讨腺苷负荷心肌灌注显像(MPI)评估儿童川崎病心肌缺血的安全性及临床价值。资料与方法前瞻性收集2019年8月—2021年2月复旦大学附属儿科医院有川崎病病史且经超声心动图和冠状动脉造影明确有冠状动脉瘤者78例,行腺苷负荷MPI,分... 详细信息

目的探讨腺苷负荷心肌灌注显像(MPI)评估儿童川崎病心肌缺血的安全性及临床价值。资料与方法前瞻性收集2019年8月—2021年2月复旦大学附属儿科医院有川崎病病史且经超声心动图和冠状动脉造影明确有冠状动脉瘤者78例,行腺苷负荷MPI,分析腺苷负荷试验的安全性,并检测冠状动脉明显狭窄(≥75%)的敏感度和特异度,比较不同冠状动脉狭窄程度组腺苷负荷MPI阳性率的差异。结果 78例患儿均完成腺苷负荷试验,无严重副作用发生。其中44例负荷试验阴性者未行静息显像,减少了56.4%(44/78)的辐射暴露。腺苷负荷MPI检测冠状动脉明显狭窄的敏感度为66.7%,特异度为60.6%(40/66)。冠状动脉无狭窄组40.3%(21/52)、轻中度狭窄组35.7%、明显狭窄组66.7%的患儿负荷试验阳性,阳性率差异无统计学意义(χ^(2)=3.169,P=0.205)。结论腺苷负荷试验在儿童中安全可行,负荷优先成像策略可减少辐射暴露,腺苷负荷MPI对评估、监测川崎病患儿心肌缺血具有重要价值。

关键词：黏膜皮肤淋巴结综合征冠状动脉病变心肌缺血心肌灌注显像儿童

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CT血流储备分数在冠心病心肌缺血评估中的应用

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放射学实践 2024年第7期39卷 977-980页

作者：李逸雯李晶晶王照谦大连医科大学附属第一医院心血管放射科辽宁大连116000

近十年来,随着CT血流储备分数(CT-FFR)计算技术及其临床应用取得进展,其在冠心病心肌缺血评估中的应用有逐年增多的趋势。鉴于CT-FFR对冠状动脉狭窄病变特异性缺血的诊断效能较高,尤其在诊断的特异度方面对单纯冠状动脉CT血管成像(CCTA... 详细信息

近十年来,随着CT血流储备分数(CT-FFR)计算技术及其临床应用取得进展,其在冠心病心肌缺血评估中的应用有逐年增多的趋势。鉴于CT-FFR对冠状动脉狭窄病变特异性缺血的诊断效能较高,尤其在诊断的特异度方面对单纯冠状动脉CT血管成像(CCTA)具有增量价值,减少了CCTA假阳性病例,避免了非必要的侵入性冠状动脉造影(ICA)。总之,CT-FFR有望成为ICA的“看门人”。

关键词：冠状动脉疾病体层摄影术,X线计算机冠状动脉CT血管成像心肌缺血血流储备分数