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微小rna-218-5p靶向TLR2基因对LpS所致人牙周膜干细胞炎症反应的影响

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口腔医学研究 2020年第12期36卷 1108-1112页

作者：周洋西安雁塔欢乐口腔医院陕西西安710000

目的:研究微小rna(microrna,miR)-218-5p对脂多糖(LpS)诱导的牙周膜干细胞(pDLSCs)增殖、凋亡和炎症的影响及作用机制。方法:分离培养pDLSCs,用LpS处理pDLSCs细胞建立炎症模型,MTT法和流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率,qRT-pCR和We... 详细信息

目的:研究微小rna(microrna,miR)-218-5p对脂多糖(LpS)诱导的牙周膜干细胞(pDLSCs)增殖、凋亡和炎症的影响及作用机制。方法:分离培养pDLSCs,用LpS处理pDLSCs细胞建立炎症模型,MTT法和流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率,qRT-pCR和Western blot分别检测miR-218-5p和Toll样受体2(TLR2)蛋白的表达,检测细胞中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)的含量,双荧光素酶报告系统检测miR-218-5p和TLR2的靶向关系。结果:LpS处理人pDLSCs 0、12、24和48 h,pDLSCs细胞中miR-218-5p表达下调,TLR2表达上调,细胞存活率下降,凋亡率升高,炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量升高,呈时间依赖趋势,差异均有统计学意义(p5);miR-218-5p靶向调控TLR2表达;过表达miR-218-5p或沉默TLR2均可提高细胞存活率,降低细胞凋亡率和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量;过表达TLR2可逆转miR-218-5p过表达对LpS诱导的pDLSCs细胞炎症和细胞增殖的作用。结论:miR-218-5p通过靶向TLR2调控LpS诱导的pDLSCs细胞增殖、凋亡和炎症反应。

关键词：微小rna-218-5p 脂多糖 Toll样受体2 牙周膜干细胞炎症存活率凋亡

微小rna-218-5p靶向Jagged 1调控人牙周膜干细胞的活性和骨向分化

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安徽医药 2021年第12期25卷 2503-2508,I0003页

作者：马文贤黄琼董振耀西宁市口腔医院口腔外科青海西宁810000 西宁市口腔医院牙周科青海西宁810000 青海省第五人民医院口腔科青海西宁810007

目的研究微小rna-218-5p(miR-218-5p)对人牙周膜干细胞(hpDLSCs)活性和骨向分化的影响并探讨其机制,为牙周炎的治疗提供研究基础。方法将anti-miR-218-5p组(转染anti-miR-218-5p)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-JAG1组(转染pcDNA-JAG1)、anti-miR-218-5p+si-NC组(共转染anti-miR-218-5p和si-NC)、anti-miR-218-5p+si-JAG1组(共转染anti-miR-218-5p和si-JAG1),用脂质体法转染至hpDLSCs细胞;运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-pCR)法检测细胞中miR-218-5p、Ⅰ型胶原蛋白(Col-1)、骨钙素、Runt相关转录因子2(Runx2)的表达;蛋白质印迹法(Westrn blotting)检测细胞中Jagged 1(JAG1)的蛋白表达;MTT法检测细胞活性;茜素红染色实验检测细胞的矿化结节;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果与anti-miR-NC组相比,anti-miR-218-5p组hpDLSCs细胞培养48、72 h时,细胞活性升高[48 h:(0.44±0.04)比(0.62±0.06);72 h:(0.53±0.05)比(0.83±0.08);p54±0.05)]、Runx-2[(0.29±0.03)比(0.61±0.06)]蛋白相对表达量均显著升高(均ppcDNA组相比,pcDNA-JAG1组hpDLSCs细胞培养48、72 h时,细胞活性显著升高[48 h:(0.42±0.04)比(0.59±0.05);72 h:(0.55±0.05)比(0.81±0.08);p5±0.03)比(0.56±0.05)]蛋白表达量均显著升高(均p218-5p可靶向调控JAG1的表达。抑制JAG1可逆转抑制miR-218-5p对hpDLSCs的活性和骨向分化作用。结论抑制miR-218-5p可促进人牙周膜干细胞活性和骨向分化,其机制与靶向JAG1有关。

关键词：微小rna-218-5p Jagged 1 牙周韧带人牙周膜干细胞骨向分化

乳腺癌组织微小rna-218-5p的表达及其临床意义

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临床肿瘤学杂志 2018年第12期23卷 1074-1078页

作者：刘倩金红艳何为葛四平田勇赵能刚武汉市普仁医院肿瘤科武汉430081

目的探讨微小rna-218-5p(miR-218-5p)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集本院2013年1月至2015年12月女性乳腺癌患者手术切除的92对癌组织和癌旁组织,采用实时定量pCR(QpCR)检测以上组织中miR-218-5p的表达并比较miR-218-5p在癌... 详细信息

目的探讨微小rna-218-5p(miR-218-5p)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集本院2013年1月至2015年12月女性乳腺癌患者手术切除的92对癌组织和癌旁组织,采用实时定量pCR(QpCR)检测以上组织中miR-218-5p的表达并比较miR-218-5p在癌组织和癌旁组织中的表达差异,进一步分析miR-218-5p表达与乳腺癌临床病理特征(年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、绝经、组织学分级、ER、pR、HER-2和Ki-67表达)的关系,采用门诊或电话随访并比较miR-218-5p低表达组(pCR检测结果显示,乳腺癌组织的miR-218-5p为0. 315±0. 150,低于癌旁组织的1. 010±0. 298,差异有统计学意义(p5)。乳腺癌患者miR-218-5p水平与年龄、淋巴结转移、绝经、ER和pR表达均无关,而与肿瘤大小、TNM分期、组织学分级、HER-2和Ki-67表达有关(p5)。全组随访14～60个月,中位随访45. 0个月,中位总生存期(OS)为57. 0个月,其中miR-218-5p高表达组的中位OS>60. 0个月,高于低表达组的51. 0个月,差异有统计学意义(p5)。单因素分析发现,乳腺癌患者预后还与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、组织学分级和HER-2表达有关,差异有统计学意义(p5)。结论 MiR-218-5p在乳腺癌中低表达且与肿瘤的发生发展和预后有一定关系,miR-218-5p低表达者的预后较差,该指标在乳腺癌筛查及预后预测上有一定潜在价值。

关键词：乳腺癌微小rna-218-5p 临床意义预后

血清miR-218-5p、Lncrna OIp5-AS1在急性呼吸窘迫综合征患儿中表达及临床预后预测效能分析

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临床和实验医学杂志 2024年第7期23卷 706-710页

作者：李书秀闫梦洋杜志云秦皇岛市第一医院儿科ICU 河北秦皇岛066600 秦皇岛市第二医院手足外科河北秦皇岛066600 秦皇岛市第一医院新生儿科河北秦皇岛066600

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清长链非编码rna OIp5-AS1(Lncrna OIp5-AS1)、微小rna-218-5p(miR-218-5p)表达情况及二者在临床预后预测中的价值。方法回顾性选择2020年7月至2022年2月秦皇岛市第一医院收治的104例ARDS患儿为A... 详细信息

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清长链非编码rna OIp5-AS1(Lncrna OIp5-AS1)、微小rna-218-5p(miR-218-5p)表达情况及二者在临床预后预测中的价值。方法回顾性选择2020年7月至2022年2月秦皇岛市第一医院收治的104例ARDS患儿为ARDS组。根据氧合指数(paO_(2)/FiO_(2))将ARDS患儿分为重度亚组(paO_(2)/FiO_(2)≤100 mmHg,n=32)、中度亚组(100 mmHgpaO_(2)/FiO_(2)≤200 mmHg,n=38)、轻度亚组(200 mmHgpaO_(2)/FiO_(2)≤300 mmHg,n=34)。根据ARDS患儿28 d院内死亡情况将其分为存活亚组(n=74)和死亡亚组(n=30)。另选择同期于本院进行健康体检的98例儿童作为对照组。比较各组血清Lncrna OIp5-AS1、miR-218-5p表达水平;收集患儿性别、年龄、气道峰值压、通气时间、入住ICU时间、动脉血二氧化碳分压(paCO_(2))、动脉血氧分压(paO_(2))、入院急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(ApACHEⅡ)评分、入院序贯器官功能衰竭评分(SOFA)、平均气道压、潮气量、白蛋白等资料。采用pearson相关分析ARDS死亡患儿中血清Lncrna OIp5-AS1与miR-218-5p表达水平的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Lncrna OIp5-AS1、miR-218-5p表达水平对ARDS患儿预后的预测价值;采用Logistic回归分析影响ARDS患儿死亡的因素。结果ARDS组血清Lncrna OIp5-AS1为2.04±0.38,显著高于对照组(1.01±0.21),miR-218-5p为0.45±0.16,显著低于对照组(1.02±0.20),差异均有统计学意义(p5)。对照组、轻度亚组、中度亚组、重度亚组ARDS患儿血清Lncrna OIp5-AS1表达水平依次升高,miR-218-5p表达水平依次降低,差异均有统计学意义(p5)。死亡亚组血清Lncrna OIp5-AS1表达水平及入院ApACHEⅡ评分、入院SOFA、平均气道压、潮气量均高于存活亚组,miR-218-5p表达水平及paO_(2)、白蛋白均低于存活亚组,差异均有统计学意义(p5)。ARDS死亡患儿中血清Lncrna OIp5-AS1与miR-218-5p表达水平呈负相关(r=-0.503,p5)。血清Lncrna OIp5-AS1、miR-218-5p及二者联合预测ARDS患儿死亡的曲线下面积分别为0.852、0.812、0.904。Lncrna OIp5-AS1是ARDS患儿死亡的独立危险因素(p5),miR-218-5p是ARDS患儿死亡的保护因素(p5)。结论ARDS患儿血清Lncrna OIp5-AS1>2.04,miR-218-5p<0.39,均与病情严重程度及预后不良有关。

关键词：急性呼吸窘迫综合征长链非编码rna OIp5-AS1 微小rna-218-5p 预后

微小218-5p调控Wnt家族成员2B抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和侵袭

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安徽医药 2021年第1期25卷 13-16,I0002页

作者：韦杰合韦仁杰周业修河池市人民医院创伤骨科广西河池547000

目的探讨微小rna-218-5p(miR-218-5p)对骨肉瘤细胞增殖,侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法2016年1月至2019年1月,实时荧光定量pCR检测miR-218-5p在骨肉瘤与正常骨组织及正常成骨细胞株与骨肉瘤细胞株的表达差异。应用CCK-8法检测... 详细信息

目的探讨微小rna-218-5p(miR-218-5p)对骨肉瘤细胞增殖,侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法2016年1月至2019年1月,实时荧光定量pCR检测miR-218-5p在骨肉瘤与正常骨组织及正常成骨细胞株与骨肉瘤细胞株的表达差异。应用CCK-8法检测过表达miR-218-5p对人骨肉瘤细胞株143B增殖的影响;细胞划痕实验检测和Transwell小室实验检测过表达miR-218-5p对骨肉瘤细胞143B迁移能力的影响。同时,应用在线mirna靶基因预测软件预测miR-218-5p的靶基因,并应用荧光素酶报告实验进行结合位点验证。蛋白质印迹法验证靶基因的蛋白表达水平。结果miR-218-5p在骨肉瘤组织中的表达水平(0.59±0.21)%明显低于正常骨组织,骨肉瘤细胞系中的表达水平(0.712±0.015)%、(0.685±0.016)%、(0.542±0.021)%、(0.524±0.011)%明显低于正常成骨细胞,p5。同时,与对照组相比,过表达miR-218-5p(miR-218-5p mimic)的骨肉瘤细胞143B的细胞活力t6h(0.274±0.011),t24h(0.514±0.04),t48h(0.828±0.16),t72h(1.212±0.013),侵袭(164±12)个和迁移距离(26±2.4)%明显减弱,p5。应用TargetScan网站进行预测,结果显示Wnt家族成员2B(WNT2B)为miR-218-5p的潜在靶基因之一;荧光素酶报告实验结果表明miR-218-5p直接靶向WNT2B;蛋白质印迹法证实miR-218-5p过表达组细胞中WNT2B蛋白的表达水平较对照组明显减少。结论miR-218-5p在人骨肉瘤组织和癌细胞中低表达,其可能通过靶向WNT2B抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和侵袭。

关键词：骨肉瘤微小rna-218-5p Wnt蛋白质类s 增殖侵袭

mirna-218-5p通过HMGB1信号通路抑制RAW264.7细胞源性泡沫细胞炎症反应

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中国病理生理杂志 2022年第8期38卷 1370-1375页

作者：李海涛蔡飞胡国富滕云飞华中科技大学同济医学院附属协和医院湖北武汉430000

目的:探讨微小rna-218-5p(mirna-218-5p)通过调节高迁移率族盒蛋白1(HMGB1)信号通路对RAW264.7细胞源性泡沫细胞炎症反应的影响。方法:将RAW264.7细胞分为对照组、模型组、mirna mimics组及mirna NC组。对照组细胞正常培养;模型组细胞采... 详细信息

目的:探讨微小rna-218-5p(mirna-218-5p)通过调节高迁移率族盒蛋白1(HMGB1)信号通路对RAW264.7细胞源性泡沫细胞炎症反应的影响。方法:将RAW264.7细胞分为对照组、模型组、mirna mimics组及mirna NC组。对照组细胞正常培养;模型组细胞采用80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导24 h建立泡沫细胞模型;mirna mimics组及mirna NC组分别转染mirna-218-5p mimics及mirna mimics control 24 h后再用80mg/L ox-LDL诱导24 h建立泡沫细胞模型。应用油红O染色检测各组细胞内脂质变化;试剂盒检测各组细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达量;qpCR检测各组细胞中mirna-218-5p表达量;Western Blot检测各组细胞中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)p65及p-NF-κB p65蛋白水平;通过双萤光素酶报告基因实验检测mirna-218-5p对HMGB1的靶向作用。结果:与对照组比较,模型组细胞的泡沫化程度增加,细胞中mirna-218-5p表达量显著下降(p5),细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、HMGB1、TLR4和p-NF-κB p65水平显著上升(p5);与模型组细胞相比,mirna mimics组细胞的泡沫化程度降低,细胞中mirna-218-5p表达量显著上升(p5),细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、HMGB1、TLR4和p-NF-κB p65水平显著下降(p5)。双萤光素酶报告基因实验结果表明,mirna-218-5p能与HMGB1 mrna的3’端非翻译区(3’UTR)结合,抑制萤光素酶的活性。结论:mirna-218-5p能抑制ox-LDL诱导的RAW264.7细胞泡沫化,还可通过调节HMGB1信号通路抑制RAW264.7细胞源性泡沫细胞的炎症反应。

关键词：动脉粥样硬化微小rna-218-5p RAW264.7细胞高迁移率族盒蛋白1 炎症

miR-218-5p下调SD大鼠成骨细胞骨硬化蛋白的表达

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中国病理生理杂志 2019年第4期35卷 749-752页

作者：方钦正徐芳叶林菅永志王维山史晨辉石河子大学医学院第一附属医院骨科中心新疆石河子832000 石河子市人民医院眼科新疆石河子832000

目的:探讨SD大鼠成骨细胞中微小rna-218-5p(miR-218-5p)对骨硬化蛋白(SOST)表达的影响及其作用机制。方法:用生物信息学数据库rnahybrid和TargetScan预测miR-218-5p靶向SOST基因;构建携带靶基因野生型及突变型3’-非翻译区的双萤光素酶... 详细信息

目的:探讨SD大鼠成骨细胞中微小rna-218-5p(miR-218-5p)对骨硬化蛋白(SOST)表达的影响及其作用机制。方法:用生物信息学数据库rnahybrid和TargetScan预测miR-218-5p靶向SOST基因;构建携带靶基因野生型及突变型3’-非翻译区的双萤光素酶报告基因质粒,采用脂质体Lipofectamine 2000包裹双萤光素酶重组质粒及miR-218-5p模拟物(mimic)或抑制剂(inhibitor),共转染293T细胞,应用双萤光素酶报告基因检测试剂盒测定萤光素酶活性;分离并培养SD大鼠成骨细胞,茜素红染色鉴定,设miR-218-5p mimic组、miR-218-5p inhibitor组及空白和阴性对照组,转染SD大鼠成骨细胞,RT-pCR检测SOST的mrna表达,Western blot法检测SOST的蛋白表达水平。结果:双萤光素酶报告基因实验验证SOST是miR-218-5p的潜在靶基因;RT-pCR和Western blot实验结果示,SD大鼠成骨细胞转染miR-218-5p mimic后,SOST mrna及蛋白表达均明显下调,转染miR-218-5p inhibitor后均明显上调,与空白及阴性对照组比较差异有统计学意义(p5)。结论:miR-218-5p靶向SOST基因,从而下调SD大鼠成骨细胞SOST蛋白的表达。

关键词：骨硬化蛋白成骨细胞微小rna-218-5p

miR-218-5p靶向B细胞淋巴瘤因子3表达影响白血病K562细胞的增殖和凋亡

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安徽医药 2022年第4期26卷 660-665页

作者：高娟邢海洲郑州大学第一附属医院血液病实验室河南郑州450052

目的探讨微小rna-218-5p(miR-218-5p)靶向B细胞淋巴瘤因子3(BCL3)基因对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法反转录及荧光定量pCR(RT-qpCR)和蛋白质印迹法(Westernblotting)检测正常人骨髓细胞和白血病骨髓细胞中miR-218-5p和BCL3的表达... 详细信息

目的探讨微小rna-218-5p(miR-218-5p)靶向B细胞淋巴瘤因子3(BCL3)基因对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法反转录及荧光定量pCR(RT-qpCR)和蛋白质印迹法(Westernblotting)检测正常人骨髓细胞和白血病骨髓细胞中miR-218-5p和BCL3的表达水平。以白血病细胞K562为研究对象,分别构建过表达miR-218-5p或沉默BCL3的K562细胞株,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Westernblotting检测细胞增殖抗原(Ki67)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(CleavedCaspase-3)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Westernblotting验证miR-218-5p和BCL3的靶向调控关系。结果与正常人骨髓细胞相比,白血病骨髓细胞中miR-218-5p的表达水平(1.00±0.13)比(0.44±0.18)显著降低,BCL3的表达水平(1.04±0.32)比(4.76±1.38)、(0.26±0.05)比(0.78±0.13)显著升高。过表达miR-218-5p或沉默BCL3均可显著抑制K562细胞CyclinD1(0.69±0.08)比(0.34±0.05)、(0.65±0.07)比(0.18±0.04)和Ki67表达(0.68±0.07)比(0.23±0.04)、(0.54±0.06)比(0.24±0.04),促进Cleaved-Caspase-3表达(0.38±0.04)比(0.89±0.11)、(0.17±0.04)比(0.56±0.07),抑制细胞增殖[(98.72±12.38)%比(69.79±7.62)%]、[(97.48±11.49)%比(65.73±6.86)%],促进细胞凋亡[(7.26±0.85)%比(24.46±2.67)%]、[(6.63±0.85)%比(26.46±2.81)%]。BCL3是miR-218-5p的靶基因,miR-218-5p可负性调控BCL3的表达。过表达BCL3可部分逆转miR-218-5p对K562细胞增殖和凋亡的影响。结论miR-218-5p通过靶向BCL3抑制白血病细胞增殖,促进细胞凋亡。

关键词：白血病微小rna-218-5p B细胞淋巴瘤因子3 细胞增殖凋亡

血清miR-210、miR-218-5p和KIM-1水平对妊娠期高血压疾病患者肾损伤的诊断价值

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检验医学与临床 2023年第5期20卷 650-654,659页

作者：居蕾曹雨辰樊莉萍复旦大学附属妇产科医院产科上海200090 上海市第一妇婴保健院产科上海200120

目的评估血清微小rna(miR)-210、miR-218-5p和肾损伤分子(KIM)-1水平对妊娠期高血压疾病患者肾损伤的诊断价值。方法选择2019年1月至2020年12月复旦大学附属妇产科医院诊断为妊娠期高血压疾病的患者106例为研究组,选择同期健康产检孕妇7... 详细信息

目的评估血清微小rna(miR)-210、miR-218-5p和肾损伤分子(KIM)-1水平对妊娠期高血压疾病患者肾损伤的诊断价值。方法选择2019年1月至2020年12月复旦大学附属妇产科医院诊断为妊娠期高血压疾病的患者106例为研究组,选择同期健康产检孕妇75例为对照组。比较研究组与对照组血清miR-210、miR-218-5p、KIM-1和β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)水平;分析血清miR-210、miR-218-5p、KIM-1和β_(2)-MG水平与妊娠期高血压疾病严重程度及肾功能的关系;评估血清miR-21、miR-218-5p、KIM-1和β_(2)-MG水平对妊娠期高血压疾病患者肾损伤的诊断效能;分析妊娠期高血压疾病患者血清miR-210、miR-218-5p和KIM-1水平间的相关性。结果研究组血清miR-210、KIM-1和β_(2)-MG水平明显高于对照组,血清miR-218-5p水平明显低于对照组,差异有统计学意义(p5)。重度子痫前期组血清miR-210、KIM-1和β_(2)-MG水平明显高于轻度子痫前期组和妊娠期高血压组,血清miR-218-5p水平明显低于轻度子痫前期组和妊娠期高血压组,差异有统计学意义(p5);轻度子痫前期组血清miR-210、KIM-1和β_(2)-MG水平明显高于妊娠期高血压组,血清miR-218-5p水平明显低于妊娠期高血压组,差异有统计学意义(p5)。肾功能异常组血清miR-210、KIM-1和β_(2)-MG水平明显高于肾功能正常组,血清miR-218-5p水平明显低于肾功能正常组,差异有统计学意义(p5)。血清miR-210、KIM-1、miR-218-5p联合检测诊断妊娠期高血压疾病患者肾损伤的灵敏度为84.6%,特异度为95.5%,曲线下面积为0.957,明显优于各指标单独检测(p5)。妊娠期高血压疾病患者血清miR-210和KIM-1水平与miR-218-5p水平均呈负相关(r=-0.555、-0.542,p5),而血清miR-210与KIM-1水平呈正相关(r=0.575,p5)。结论血清miR-210、miR-218-5p和KIM-1水平与妊娠期高血压疾病的发生、发展有关,且对患者肾损伤具有较高的诊断价值,联合检测的诊断价值优于各指标单独检测。

关键词：妊娠期高血压疾病肾损伤微小rna-210 微小rna-218-5p 肾损伤分子-1

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