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上调微小rna-148a对胰腺癌AsPC-1细胞抑癌基因前脑啡肽原、p16和Ras相关区域家族1A基因表达的影响

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中华实验外科杂志 2018年第1期35卷 96-99页

作者：肖卫东敖建黄祯彭龙肖建刘战赢李勇南昌大学第一附属医院普外科 330006 广州医科大学附属第五医院普外科 510799 南华大学附属第一医院普外科衡阳421001

目的观察上调微小rna-148a（miR-148a）表达对胰腺癌AsPC-1细胞抑癌基因前脑啡肽原（ppENK）、p16和Ras相关区域家族1A基因（RASSF1A）甲基化、蛋白表达及细胞增殖的影响。方法利用Lipofectamine？2000转染miR-148a模拟物（miR-148a mim... 详细信息

目的观察上调微小rna-148a（miR-148a）表达对胰腺癌AsPC-1细胞抑癌基因前脑啡肽原（ppENK）、p16和Ras相关区域家族1A基因（RASSF1A）甲基化、蛋白表达及细胞增殖的影响。方法利用Lipofectamine？2000转染miR-148a模拟物（miR-148a mimics）至胰腺癌AsPC-1细胞。实验细胞分为3组：空白对照组（转染脂质体）、阴性对照组（转染阴性对照序列）、实验组（转染miR-148a mimics）。转染后72 h，采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测细胞中miR-148a表达水平；甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测ppENK、p16和RASSF1A基因启动子甲基化；Western blot法检测DNA甲基转移酶1（DNMT1）及ppENK、p16和RASSF1A蛋白表达水平；噻唑蓝（MTT）法检测细胞体外增殖活力。结果实验组miR-148a的表达量显著高于空白对照组及阴性对照组（4.63±1.32比1.00±0.30比0.93±0.37，P＝0.002），而DNMT1蛋白表达量则显著降低（1.00±0.00比1.04±0.19比0.27±0.15，P＝0.001）。空白对照组和阴性对照组ppENK、p16和RASSF1A基因甲基化阳性，而实验组ppENK和p16基因甲基化阴性，RASSF1A基因部分甲基化。实验组ppENK、p16和RASSF1A蛋白表达量均显著高于两个对照组（ppENK：2.06±0.32比1.00±0.00比1.01±0.21，P＝0.002；p16：2.02±0.12比1.00±0.00比0.96±0.12，P＝0.000；RASSF1A：1.95±0.37比1.00±0.00比1.09±0.12，P＝0.002）。实验组细胞体外增殖活力显著减慢（P＝0.026）。结论上调胰腺癌AsPC-1细胞miR-148a的表达后，抑癌基因ppENK、p16和RASSF1A发生去甲基化，蛋白质重新表达，并抑制癌细胞增殖，其作用机制与miR-148a靶向抑制DNMT1表达有关。

关键词：胰腺癌微小rna-148a DNA甲基转移酶1 抑癌基因甲基化细胞增殖

病毒性心肌炎儿童112例血浆外泌体微小rna-148a水平的观察

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安徽医药 2022年第9期26卷 1786-1789页

作者：郑瑞利冯迎军杨慧敏王芳洁何坤郑州大学附属儿童医院、河南省儿童医院、郑州儿童医院心血管内科河南郑州450000

目的观察病毒性心肌炎(VMC)病儿血浆外泌体微小rna(miR)-148a的水平并分析其意义。方法选择2017年9月至2019年6月郑州大学附属儿童医院收治的VMC病儿112例纳入研究组,另选取同期门诊健康体检正常儿童112例为对照组,实时荧光定量PCR(RT-q... 详细信息

目的观察病毒性心肌炎(VMC)病儿血浆外泌体微小rna(miR)-148a的水平并分析其意义。方法选择2017年9月至2019年6月郑州大学附属儿童医院收治的VMC病儿112例纳入研究组,另选取同期门诊健康体检正常儿童112例为对照组,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测血浆外泌体miR-148a水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆外泌体心肌肌钙蛋白I(cTnI),采用自动化生化仪检测血浆外泌体肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。采用Pearson相关性分析检验VMC病儿血浆外泌体miR-148a与cTnI、CK-MB、hs-CRP水平的相关性。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆外泌体miR-148a对VMC的诊断价值。结果血浆外泌体在透射电镜下呈大小不等、直径约100 nm典型圆形或椭圆形囊泡结构。与对照组比较,研究组血浆外泌体miR-148a水平[(1.01±0.12)比(5.34±1.06)]、血浆cTnI、CK-MB、hs-CRP水平均增加(均P148a与血浆cTnI、CK-MB、hs-CRP水平均呈正相关(r=0.62、0.64、0.49,均P148a及血浆cTnI、CK-MB、hs-CRP诊断早期VMC的曲线下面积(AUC)分别为0.94、0.94、0.83、0.86,截断值分别为1.87、0.19μg/L、56.45 U/L、2.06 mg/L,灵敏度分别为94.60%、92.90%、84.80%、83.90%,特异度分别为92.90%、94.60%、83.90%、83.90%。血浆外泌体miR-148a与血浆cTnI诊断早期VMC的效能一致,均优于血浆CK-MB、hs-CRP。结论VMC病儿血浆外泌体miR-148a水平上调,可能对VMC有一定诊断价值。

关键词：心肌炎血浆外泌体微小rna-148a 儿童

采用miR-148a低表达人绒毛膜滋养细胞构建的子痫前期模型细胞活力、焦亡、炎性和氧化应激反应观察

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山东医药 2024年第18期64卷 1-5页

作者：郭艳萍栾媛媛周巾蒋天从唐山市妇幼保健院妇产科河北唐山063000

目的观察采用微小rna-148a(miR-148a)低表达人绒毛膜滋养细胞系HTR-8/SVneo构建的子痫前期(Preeclampsia,PE)模型细胞的细胞活力、焦亡、炎症和氧化应激反应。方法取对数生长期人绒毛膜滋养细胞系HTR-8/SVneo,分为甲、乙、丙、丁组:甲... 详细信息

目的观察采用微小rna-148a(miR-148a)低表达人绒毛膜滋养细胞系HTR-8/SVneo构建的子痫前期(Preeclampsia,PE)模型细胞的细胞活力、焦亡、炎症和氧化应激反应。方法取对数生长期人绒毛膜滋养细胞系HTR-8/SVneo,分为甲、乙、丙、丁组:甲组细胞用抑制miR-148a表达的miR-148a inhibitor转染24 h,加入100 ng/L的LPS培养24 h(建立PE模型);乙组细胞用空白对照NC-inhibitor转染24 h,加入100 ng/L的LPS培养24 h;丙组加入100 ng/L的LPS培养24 h;丁组不做任何处理。培养48 h时,采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-148a,采用CCK8法检测各组细胞活力,采用TUNEL法测算各组细胞焦亡率,采用Western Blotting法检测各组细胞焦亡相关蛋白Caspase-1、GSDMD,采用ELISA法检测各组上清液炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6]及氧化应激指标[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]。结果与丁组相比,丙组细胞miR-148a相对表达量高,培养24、48、72 h时OD值低,细胞焦亡率高,细胞Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量高(P均148a相对表达量低,培养24、48、72 h时OD值高,细胞焦亡率低,细胞Caspase-1、GSDMD和NLRP3蛋白相对表达量低(P均148a低表达HTR-8/SVneo细胞构建的PE模型细胞活力高,细胞焦亡程度、炎性反应及氧化应激反应低。miR-148a可能是PE的治疗靶点之一。

关键词：微小rna 微小rna-148a 子痫前期人绒毛膜滋养细胞细胞活力细胞焦亡炎性反应氧化应激

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MiR-148a对氟伐他汀人体药代动力学特征的影响

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中国临床药理学杂志 2022年第2期38卷 151-154页

作者：靳高凤李西张红夏春华熊玉卿南昌大学临床药理研究所江西南昌330006

目的研究人血浆中miR-148a的表达水平对人体内氟伐他汀药代动力学特征的影响。方法建立人血浆中氟伐他汀LC-MS/MS检测方法,比较miR-148a高表达组和低表达组间氟伐他汀人体药代动力学特征的差异。结果MiR-148a高表达组AUC_(0-12)、AUC_(0... 详细信息

目的研究人血浆中miR-148a的表达水平对人体内氟伐他汀药代动力学特征的影响。方法建立人血浆中氟伐他汀LC-MS/MS检测方法,比较miR-148a高表达组和低表达组间氟伐他汀人体药代动力学特征的差异。结果MiR-148a高表达组AUC_(0-12)、AUC_(0-∞)、C_(max)、V_(d)、CL分别为(775.61±136.59)ng·h·mL^(-1),(779.88±137.90)ng·h·mL^(-1),(727.56±150.61)ng·mL^(-1),(185.29±70.06)L,(52.81±9.92)L·h^(-1);miR-148a低表达组AUC_(0-12)、AUC_(0-∞)、C_(max)、V_(d)、CL分别为(520.53±122.11)ng·h·mL^(-1),(524.43±121.64)ng·h·mL^(-1),(457.86±103.56)ng·mL^(-1),(317.12±93.08)L,(79.48±16.25)L·h^(-1);miR-148a高表达组的AUC_(0-12)、AUC_(0-∞)、C_(max)明显高于低表达组,而CL、V_(d)低于低表达组。结论人血浆中miR-148a的表达水平与氟伐他汀药代动力学过程存在相关性。

关键词：微小rna-148a 表达水平健康受试者氟伐他汀药代动力学

miR-148a靶向STAT3对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的增强作用

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肿瘤防治研究 2021年第8期48卷 762-768页

作者：汤良君孙艳张晓红盛少琴浙江省中医药大学研究生学院杭州310000 宣城市中心医院妇产科宣城242000 浙江中医药大学附属新华医院妇产科杭州310000

目的探究miR-148a对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的影响及相关机制。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,设置顺铂浓度梯度检测IC20值;设置对照组、mimic对照组、miR-148a mimic组、inhibitor对照组和miR-148a inhibitor组,转染后使用qRT-PCR... 详细信息

目的探究miR-148a对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的影响及相关机制。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,设置顺铂浓度梯度检测IC20值;设置对照组、mimic对照组、miR-148a mimic组、inhibitor对照组和miR-148a inhibitor组,转染后使用qRT-PCR法检测miR-148a和STAT3 mrna表达;4μmol/L顺铂处理后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布,Western blot法检测p-STAT3/STAT3、CyclinD1、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达。结果HeLa细胞的顺铂IC20约为4μmol/L。与mimic对照组相比,miR-148a mimic组HeLa细胞中miR-148a水平显著升高,STAT3 mrna水平显著降低(P148a inhibitor组HeLa细胞中miR-148a水平显著降低,STAT3 mrna水平显著升高(P148a mimic组HeLa细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高,OD值、S期和G2/M期细胞比例及p-STAT3/STAT3、Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平显著降低(P148a inhibitor组HeLa细胞上述指标均朝相反的趋势显著变化(P148a可通过靶向抑制STAT3增强宫颈癌HeLa细胞的顺铂化疗敏感度。

关键词：微小rna-148a 信号转导和转录激活因子3 宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度

肝癌组织miR-148a表达变化及其与患者临床病理参数和术后早期复发的关系

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山东医药 2017年第36期57卷 9-12页

作者：周兴芹陈钟常仁安南通大学附属医院江苏南通226001

目的观察原发性肝癌(HCC)组织微小rna-148a(miR-148a)mrna表达变化,并分析其与患者临床病理参数和术后早期复发的关系。方法选择HCC组织及其配对的癌旁正常组织各142例份,采用qRT-PCR法检测miR-148a mrna表达。分析HCC组织miR-148a mRN... 详细信息

目的观察原发性肝癌(HCC)组织微小rna-148a(miR-148a)mrna表达变化,并分析其与患者临床病理参数和术后早期复发的关系。方法选择HCC组织及其配对的癌旁正常组织各142例份,采用qRT-PCR法检测miR-148a mrna表达。分析HCC组织miR-148a mrna表达与患者临床病理参数及术后早期复发的关系。结果 HCC组织miR-148a mrna相对表达量明显低于癌旁正常组织(P148a mrna相对表达量的均数为截断值,将患者分为miR-148a mrna高表达者65例和miR-148a mrna低表达者77例。miR-148a mrna表达与肿瘤大小、微血管侵犯及TNM分期有关(P均0.05)。142例HCC患者中,早期复发88例、未复发54例。早期复发者miR-148a mrna相对表达量明显低于未复发者(P148a mrna低表达者55例、miR-148a mrna高表达者33例,miR-148a mrna低表达者早期复发率明显高于miR-148a mrna高表达者(P148a mrna预测HCC术后早期复发的价值,结果显示,miR-148a mrna预测HCC术后早期复发的ROC曲线下面积为0.710(95%CI:0.660~0.769,P148a mrna预测HCC术后早期复发的敏感性、特异性分别77.1%、71.8%。结论 HCC组织中miR-148a mrna低表达,其表达变化与肿瘤进展有关。miR-148a mrna可作为HCC患者术后早期复发的预测因子之一。

关键词：原发性肝癌微小rna-148a 临床病理参数复发

miR-148a靶向STAT3对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的增强作用

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miR-148a靶向STAT3对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的增强作用

作者：汤良君浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的探究miR-148a对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的影响及相关机制。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,设置顺铂浓度梯度检测IC20值;设置对照组、mimic 对照组、miR-148amimic 组、inhibitor 对照组和 miR-148a inhibitor 组,转染后使用qR... 详细信息

目的探究miR-148a对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的影响及相关机制。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,设置顺铂浓度梯度检测IC20值;设置对照组、mimic 对照组、miR-148amimic 组、inhibitor 对照组和 miR-148a inhibitor 组,转染后使用qRT-PCR法检测miR-148a和STAT3mrna表达;4 μmol/L顺铂处理后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布,Western blot法检测p-STAT3/STAT3、CyclinD1、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3 蛋白表达。结果 HeLa细胞的顺铂IC20约为4 μmol/L。与mimic对照组相比,miR-148a mimic组HeLa细胞中miR-148a水平显著升高,STAT3 mrna水平显著降低（P＜0.05）;与inhibitor对照组相比,miR-148a inhibitor组HeLa细胞中miR-148a水平显著降低,STAT3 mrna水平显著升高（P＜0.05）。顺铂处理后,与mimic对照组相比,miR-148a mimic组HeLa细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高,OD值、S期和G2/M期细胞比例及p-STAT3/STAT3、Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平显著降低（P＜0.05）;与inhibitor对照组相比,miR-148a inhibitor组HeLa细胞上述指标均朝相反的趋势显著变化（P＜0.05）。结论miR-148a可通过靶向抑制STAT3增强宫颈癌HeLa细胞的顺铂化疗敏感度。

关键词：微小rna-148a 信号转导和转录激活因子3 宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度

miR-148a靶向Wnt1通路对结直肠癌细胞侵袭、迁移能力的影响

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山东医药 2020年第26期60卷 24-28页

作者：蒋学军杨勇庹磊吉祖进雷新益湖北省十堰市国药东风总医院湖北十堰442001

目的观察微小rna-148a(miR-148a)对结直肠癌(CRC)细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其作用机制与Wnt1信号通路的关系。方法取人正常结直肠黏膜细胞FHC及人CRC细胞HCT116、SW620,采用qRT-PCR法检测Wnt1 mrna、miR-148a表达。取HCT116细胞... 详细信息

目的观察微小rna-148a(miR-148a)对结直肠癌(CRC)细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其作用机制与Wnt1信号通路的关系。方法取人正常结直肠黏膜细胞FHC及人CRC细胞HCT116、SW620,采用qRT-PCR法检测Wnt1 mrna、miR-148a表达。取HCT116细胞,分为Control组、miR-148a mimic组、miR-148a NC组。转染后48 h,用Transwell法检测HCT116细胞侵袭、迁移情况;通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞miR-148a、Wnt1 mrna表达;Western blotting法检测各组细胞Wnt1蛋白及通路蛋白相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、侵袭和迁移相关蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达;采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a与Wnt1的靶向关系。结果与FHC细胞相比,HCT116、SW620细胞中Wnt1 mrna表达升高,miR-148a表达降低(P均0.05)。与Control组和miR-148a NC组相比,miR-148a mimic组Wnt1 mrna表达水平、细胞侵袭、迁移能力及Wnt1、β-catenin、MMP-2、N-cadherin蛋白均表达降低,miR-148a表达水平升高(P均148a NC组相比,上述指标差异均无统计学意义(P均>0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,与miR-148a NC+Wnt1-3′UTR-WT组比较,miR-148a mimic+Wnt1-3′UTR-WT组荧光素酶活性降低(P148a能够靶向抑制Wnt1/β-catenin通路激活,降低N-cadherin、MMP-2蛋白表达,从而抑制CRC细胞的侵袭、迁移能力。

关键词：微小rna-148a 结直肠癌 Wnt1通路细胞迁移细胞侵袭 N-钙黏蛋白基质金属蛋白酶2

肝癌患者术后复发不同miR-148a mrna相对表达量观察

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肝脏 2023年第10期28卷 1191-1194,1198页

作者：陈琰张建华陈坚杨扬淮安市肿瘤医院(淮安市淮安医院)肿瘤内科江苏223200 淮安市肿瘤医院(淮安市淮安医院)肿瘤外科江苏223200

目的探讨原发性肝癌患者微小rna-148a(miR-148a)mrna相对表达量对预测术后早期肝癌复发的价值。方法纳入2018年3月—2021年6月淮安市淮安医院肿瘤内科收治的115例原发性肝癌,患者均接受肝癌根治术治疗,随访时间为12个月,依据预后将其分... 详细信息

目的探讨原发性肝癌患者微小rna-148a(miR-148a)mrna相对表达量对预测术后早期肝癌复发的价值。方法纳入2018年3月—2021年6月淮安市淮安医院肿瘤内科收治的115例原发性肝癌,患者均接受肝癌根治术治疗,随访时间为12个月,依据预后将其分为复发组(24例)和未复发组(91例)。比较两组性别、年龄、合并症(高血压、高血脂、糖尿病)、肿瘤情况(部位、数量、直径)、肝功能child分级、手术时间、术中出血量、有无血管侵犯、肿瘤包膜是否完整、血清学指标;术后采用qRT-PCR法检测肝癌组织miR-148a mrna相对表达量。结果复发组与未复发组多发肿瘤分别有10例(41.67%)、16例(17.58%),血管侵犯分别有17例(70.83%)、36例(39.56%),肿瘤包膜不完整分别有16例(66.67%)、39例(42.86%),两组miR-148a mrna相对表达量分别为(0.23±0.05)、(0.52±0.11),与未复发组相比,复发组肿瘤数目为多发、有血管侵犯、肿瘤包膜不完整的患者比例较高,并且复发组miR-148a mrna相对表达量较低(P148a mrna相对表达量预测肝癌患者肝癌根治术后复发的最佳截断值为0.329,曲线下面积为0.821(95%CI:0.732~0.910),敏感度和特异度分别为0.742、0.707(P148a mrna是肝癌患者肝癌根治术后复发的危险因素(P148a mrna相对表达量在复发患者肝癌组织中明显降低,可作为肝癌根治术后复发的预测指标。

关键词：原发性肝癌肝癌根治术复发微小rna-148a 危险因素

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