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异欧前胡素靶向抑制YWHAZ激活自噬治疗肺腺癌的实验研究

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异欧前胡素靶向抑制YWHAZ激活自噬治疗肺腺癌的实验研究

作者：王小文遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:本实验研究拟探讨一种小分子药物异欧前胡素(Isoimperatorin,ISO)靶向抑制YWHAZ(酪氨酸3单加氧酶/色氨酸5单加氧酶激活蛋白zeta)对肺腺癌生物学功能的作用,以期为肺腺癌的靶向治疗提供新思路和新方案。方法:1.YWHAZ在肿瘤中的作用... 详细信息

目的:本实验研究拟探讨一种小分子药物异欧前胡素(Isoimperatorin,ISO)靶向抑制YWHAZ(酪氨酸3单加氧酶/色氨酸5单加氧酶激活蛋白zeta)对肺腺癌生物学功能的作用,以期为肺腺癌的靶向治疗提供新思路和新方案。方法:1.YWHAZ在肿瘤中的作用以及在肺腺癌中的功能验证采用免疫组织化学方法检测137例包含多种类型恶性肿瘤组织中YWHAZ的表达;检测73例非小细胞肺癌组织及36例癌旁肺组织中YWHAZ的表达情况;分析非小细胞肺癌组织中YWHAZ的表达与患者临床病理特征的关系。Western-blot检测YWHAZ在正常支气管上皮细胞系、肺癌细胞系中的表达情况;筛选表达量相对较高的细胞系作为实验细胞,采用慢病毒HBLV-YWHAZ sh RNA-Zs Green-PURO构建YWHAZ低表达的稳转细胞株,以Western-blot和RT-q PCR评估敲低效果;用A549-sh NC和A549-sh YWHAZ细胞构建严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency disease,SCID)小鼠异种移植瘤模型探究YWHAZ在体内的生物学功能。2.筛选靶向抑制YWHAZ的小分子药物通过高通量双荧光素酶报告系统,在A549细胞中建立针对YWHAZ启动子的双荧光素酶,在包含有1000个中药小分子的单体药物库中筛选能有效降低YWHAZ启动子荧光信号的小分子药物。采用CCK8、Western-blot实验评估药物对YWHAZ的靶向抑制作用。3.ISO靶向抑制YWHAZ在体内体外对肺腺癌生物学功能的作用采用CCK8、克隆形成、细胞划痕、Transwell、TUNEL染色等方法观察ISO对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。Western-blot检测经ISO处理肺腺癌细胞后细胞中YWHAZ、自噬相关蛋白Beclin1、LC3B,凋亡相关蛋白Bax、Caspase3以及p-PI3K、p-AKT的蛋白表达。利用A549细胞构建SCID小鼠异种移植瘤模型,探究ISO在体内对肺腺癌作用效果,小鼠肝肾采用HE染色评估药物毒性作用,免疫组化和Western-blot检测移植瘤组织中YWHAZ、Ki-67、Beclin1、LC3B,Bax、Cleaved-caspase3的蛋白表达。结果:1.YWHAZ在肿瘤中的作用以及在肺腺癌中的功能验证1.1 YWHAZ在多种癌症组织中的阳性表达率为94.2%,YWHAZ在肺癌中的阳性表达率为96.2%;与癌旁肺组织相比,YWHAZ在肺腺癌和肺鳞癌中的表达上调(p异。1.2肺腺癌细胞系A549、H1299中YWHAZ表达量相对较高;用A549细胞构建YWHAZ低表达稳转株,与A549-sh NC相比,A549-sh YWHAZ细胞中YWHAZ明显下调。1.3动物实验中,与对照组相比,sh-YWHAZ组小鼠移植瘤体积和重量均明显减小;检测移植瘤相关蛋白的表达,与对照组相比,sh-YWHAZ组移植瘤中YWHAZ、Ki-67下调,Beclin1、LC3B、Bax、Cleaved-caspase3上调。2.筛选靶向抑制YWHAZ的小分子药物筛选出能够有效降低YWHAZ启动子荧光信号的小分子药物异欧前胡素(Isoimperatorin,ISO);ISO处理A549-sh NC和A549-sh YWHAZ细胞后检测细胞活力,发现sh-YWHAZ组细胞活力明显高于sh-NC组;Western-blot显示ISO以浓度依赖的方式下调A549和H1299细胞中p-YWHAZ的表达。3.ISO靶向抑制YWHAZ在体内体外对肺腺癌生物学功能的作用3.1 CCK8实验:ISO以时间依赖和浓度依赖的方式抑制了A549(p异种移植瘤模型中,与对照组相比,ISO治疗组移植瘤体积和重量明显减小;各组小鼠肝、肾的HE染色未见明显的细胞毒性损害;检测移植瘤相关蛋白的表达,与对照组相比,ISO治疗组移植瘤中YWHAZ、Ki-67下调,Beclin1、LC3B、Bax、Cleaved-caspase3上调。结论:IS

关键词：肺腺癌 YWHAZ 异欧前胡素自噬

异欧前胡素抑制LPS诱导的小胶质细胞激活的作用和机制

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异欧前胡素抑制LPS诱导的小胶质细胞激活的作用和机制

作者：丰肖新乡医学院

学位级别：硕士

背景当今社会,人口老龄化问题的日益严重,神经退行性疾病的发病机制尚未完全明确,但是大量研究结果表明神经炎症在神经退行性疾病发病进程中发挥着不可或缺的作用。神经退行性疾病发生时,往往伴随着神经炎症的发生,受损的多巴胺(DA)能... 详细信息

背景当今社会,人口老龄化问题的日益严重,神经退行性疾病的发病机制尚未完全明确,但是大量研究结果表明神经炎症在神经退行性疾病发病进程中发挥着不可或缺的作用。神经退行性疾病发生时,往往伴随着神经炎症的发生,受损的多巴胺(DA)能神经元激活小胶质细胞,再由小胶质细胞介导一系列的血脑屏障损伤,T淋巴细胞浸润中枢神经系统,促炎因子和趋化因子释放以及氧化应激反应发生。异欧前胡素(Isoimperatorin,ISO),一种天然呋喃香豆素类化合物,广泛存在于伞形科等药用植物中,具有抗炎、镇痛、抗菌、抗病毒和抗癌等生物活性。因此在本研究中,我们利用LPS作为免疫激活诱导剂,对小胶质细胞BV进行适当浓度的刺激,以此构建神经炎症模型,探讨异欧前胡素抑制小胶质细胞激活的作用和机制,为异欧前胡素用于治疗神经退行性疾病的潜在应用提供一定的理论依据。目的1.明确异欧前胡素抑制小胶质细胞激活的作用。2.阐明异欧前胡素通过哪些信号通路抑制小胶质细胞激活的机制。方法1.研究异欧前胡素抑制小胶质细胞激活的作用。1.1构建小胶质细胞激活的神经炎症模型。采用不同浓度的LPS对小胶质细胞BV进行不同时间段的刺激,通过实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞激活状态,选取合适的浓度和时间。1.2检测异欧前胡素对BV细胞活力的影响。采用对照组,即添加二甲基亚砜(DMSO)组和不同浓度的异欧前胡素组分别对BV细胞进行处理,然后利用噻唑蓝(MTT)检测不同浓度的异欧前胡素对细胞活力的影响。1.3探究异欧前胡素对神经炎症的作用,筛选异欧前胡素发挥作用的有效浓度。(1)对BV细胞进行不同的处理,对照组:普通培养基+DMSO;LPS激活模型组:一定浓度的LPS诱导BV细胞,普通培养基+DMSO+LPS;实验组:不同浓度的异欧前胡素预处理细胞,再加入一定浓度的LPS共处理;(2)使用qPCR法及酶联免疫吸附法(ELISA)检测小胶质细胞激活后产生的炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA和蛋白表达水平的变化;(3)采用qPCR法和Western blot检测炎症介质炎症酶i NOS、COX-2的mRNA和蛋白表达水平的变化,试剂盒检测一氧化氮(NO)的释放;(4)试剂盒检测活性氧(ROS)的释放。2.研究异欧前胡素通过信号通路NF-κB抑制小胶质细胞激活的机制。2.1通过Western blot检测炎症相关信号通路NF-κB,及其相关蛋白IκBα、IKKα、p65的降解和磷酸化表达情况。2.2提取核蛋白,通过Western blot检测p65的入核情况。结果1.当异欧前胡素浓度为0-80μM时,对BV细胞的活力无显著影响;2.异欧前胡素能够显著降低LPS诱导的炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA及蛋白的表达水平;3.异欧前胡素可以降低LPS诱导的炎症介质炎症酶i NOS、COX-2的mRNA及蛋白水平表达;4.异欧前胡素可有效减少NO和ROS的释放;5.异欧前胡素能够抑制IκBα的降解、IKKβ的磷酸化以及p65的磷酸化和核易位。结论异欧前胡素能够明显抑制由LPS诱导的小胶质细胞BV的激活,降低炎症因子、炎症酶以及氧化应激反应的发生。其作用机制可能是通过NF-κB信号通路,抑制小胶质细胞炎症因子、炎症介质的释放,减弱有毒物质NO和活性氧ROS的释放。其结果为异欧前胡素在治疗神经退行性疾病中的潜在应用提供了一定的理论依据。

关键词：异欧前胡素神经炎症小胶质细胞 NF-κB

异欧前胡素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

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中国医院药学杂志 2018年第13期38卷 1358-1362页

作者：杨兴鑫梁丽王曦董金材李凤娇顾雯俞捷云南中医学院中药学院云南昆明650500 昆明市代谢性疾病中医药防治重点实验室云南昆明650500

目的:研究异欧前胡素对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:60只昆明种小鼠随机分为正常对照(生理盐水)组、模型(生理盐水)组、水飞蓟宾(阳性对照,16mg·kg^(-1))组和异欧前胡素低、中、高剂量(8,16,32mg·kg^(-1))组... 详细信息

目的:研究异欧前胡素对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:60只昆明种小鼠随机分为正常对照(生理盐水)组、模型(生理盐水)组、水飞蓟宾(阳性对照,16mg·kg^(-1))组和异欧前胡素低、中、高剂量(8,16,32mg·kg^(-1))组,连续灌胃给药7d,每天1次。末次给药1h后,除正常对照组外其余各组小鼠腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液诱发小鼠急性肝损伤。16h后摘眼球取血并处死小鼠,测定肝脏指数,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH)水平;检测肝脏线粒体中MDA水平、ATP酶活性及线粒体膜电位。结果:CCl4诱导小鼠肝脏指数及血清ALT和AST水平显著升高,肝细胞肿胀、变性、坏死,出现明显炎性损伤;使肝组织及肝线粒体中MDA水平显著升高,SOD与GSH水平显著降低;同时导致肝线粒体中ATP酶活性显著降低,线粒体膜电位下降。而水飞蓟宾及异欧前胡素均可显著逆转CCl4引发的这些效应。结论:异欧前胡素对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与清除氧化应激产物MDA,增加细胞内抗氧化酶SOD与GSH活性及改善线粒体功能有关。

关键词：异欧前胡素四氯化碳肝损伤保护作用氧化应激线粒体

异欧前胡素通过NF-κB和JAK1/STAT1信号通路抑制巨噬细胞M1极化发挥抗炎镇痛作用

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中南药学 2023年第8期21卷 1985-1990页

作者：王绍展朱青霞陈井霞王学彬王卓杨云云海军军医大学第一附属医院药剂科上海200433 上海交通大学医学院附属第九人民医院药剂科上海201999

目的探讨异欧前胡素抗炎镇痛作用的潜在药理作用机制。方法通过醋酸致小鼠扭体模型观察异欧前胡素的镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型观察抗炎作用;通过脂多糖(LPS,100 ng·mL^(-1))+干扰素-γ(IFN-γ,20 ng·mL^(-1))诱导小鼠巨噬... 详细信息

目的探讨异欧前胡素抗炎镇痛作用的潜在药理作用机制。方法通过醋酸致小鼠扭体模型观察异欧前胡素的镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型观察抗炎作用;通过脂多糖(LPS,100 ng·mL^(-1))+干扰素-γ(IFN-γ,20 ng·mL^(-1))诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7构建M1极化模型,分别采用CCK8法、Real-time PCR法、ELISA法测定异欧前胡素对RAW264.7细胞增殖、M1极化标志蛋白(CD86和iNOS)的mRNA水平及白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的调控作用;通过Western blot法检测NF-κB和JAK1/STAT1信号途径相关蛋白表达水平。结果异欧前胡素(30和60 mg·kg^(-1))能有效减少醋酸致扭体次数,抑制小鼠耳郭肿胀。异欧前胡素(20和40μmol·L^(-1))能抵抗LPS/IFN-γ诱导的RAW264.7细胞M1极化,抑制细胞增殖,降低IL-6和TNF-α的表达,并能有效地降低NF-κB和JAK1/STAT1信号途径相关蛋白磷酸化和转录。结论异欧前胡素可通过调节NF-κB和JAK1/STAT1信号通路抑制巨噬细胞M1极化,发挥抗炎镇痛作用。

关键词：抗炎镇痛异欧前胡素 M1极化 NF-κB信号通路 JAK1/STAT1信号通路

异欧前胡素对体外人表皮黑素细胞酪氨酸酶和β-肌动蛋白表达的调节作用

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癌变．畸变．突变 2017年第5期29卷 364-369页

作者：詹标孙贝蕾罗思聪庄鸿凯黄鹏洲曾懿陈玮芳陈玮莹汕头大学医学院广东汕头515041 汕头大学医学院基础医学实验教学中心广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院广东汕头515041

目的:研究异欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞酪氨酸酶和β-actin蛋白表达的影响。方法:体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞,随机分为对照组和异欧前胡素实验组。对照组用M-254培养基培养,实验组加入含25μmol/L异欧前胡素的M-254培养... 详细信息

目的:研究异欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞酪氨酸酶和β-actin蛋白表达的影响。方法:体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞,随机分为对照组和异欧前胡素实验组。对照组用M-254培养基培养,实验组加入含25μmol/L异欧前胡素的M-254培养基,培养48 h。倒置显微镜下观察人表皮黑素细胞形态,Na OH裂解法检测黑素含量的变化,采用实时荧光定量PCR方法、Western blot方法、免疫荧光法检测酪氨酸酶和β-actin在黑素细胞中的表达及其变化。结果:异欧前胡素作用48 h后,与对照组黑素细胞比较,实验组黑素细胞的树状突起变长,黑素含量减少(P素细胞酪氨酸酶m RNA及其蛋白的表达降低(P均异欧前胡素抑制体外培养人表皮黑素细胞酪氨酸酶m RNA及其蛋白的表达,促进β-actin m RNA及其蛋白的表达,从而降低体外人表皮黑素细胞黑素的含量。

关键词：黑素细胞异欧前胡素酪氨酸酶 β-肌动蛋白

异欧前胡素对人表皮黑素细胞酪氨酸酶和Rab27a的调节作用

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癌变．畸变．突变 2018年第1期30卷 37-41页

作者：孙贝蕾郑宇琼林玲陈玮莹蔡尔慧陈玮芳汕头大学医学院基础医学实验教学中心广东汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院广东汕头515041

目的:探讨异欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞酪氨酸酶和Rab27a的凋节作用。方法:体外分离人表皮黑素细胞并纯化培养,随机分为对照组和实验组。对照组加入M-254培养基,实验组加入含25μmol/L异欧前胡素的M-254培养基,培养48h后倒置... 详细信息

目的:探讨异欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞酪氨酸酶和Rab27a的凋节作用。方法:体外分离人表皮黑素细胞并纯化培养,随机分为对照组和实验组。对照组加入M-254培养基,实验组加入含25μmol/L异欧前胡素的M-254培养基,培养48h后倒置显微镜下观察黑素细胞的形态;MTT法检测黑素细胞活力;Western blot法检测黑素细胞酪氨酸酶和转运相关蛋白Rab27a的表达;L-多巴氧化法和NaOH法测定黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素含量。结果:与对照组比较,实验组人表皮黑素细胞的树状突起变长,黑素细胞活力降低17.2%(P素细胞酪氨酸酶表达下降30.3%(P素含量降低30.9%(P异欧前胡素使黑素细胞的树状突起变长,抑制黑素细胞活力,抑制黑素细胞酪氨酸酶的表达和活性,促进黑素转运相关蛋白Rab27a的表达,降低黑素细胞中黑素的含量。

关键词：黑素细胞异欧前胡素酪氨酸酶 Rab27a 黑素

异欧前胡素激活LXRα/β介导HMGB1-NLRP3炎症信号通路改善肝纤维化进程的研究

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异欧前胡素激活LXRα/β介导HMGB1-NLRP3炎症信号通路改善肝纤维...

作者：朱悦延边大学

学位级别：硕士

目的:异欧前胡素(Isoimperatorin,ISOIM)是白芷的有效活性成分之一,具有良好的镇痛、抗炎、肝保护等药理作用。因此本研究结合体内外实验,意在探讨ISOIM通过激活LXRα/β介导HMGB1-NLRP3炎症信号通路改善肝纤维化的作用机制。方法:在体... 详细信息

目的:异欧前胡素(Isoimperatorin,ISOIM)是白芷的有效活性成分之一,具有良好的镇痛、抗炎、肝保护等药理作用。因此本研究结合体内外实验,意在探讨ISOIM通过激活LXRα/β介导HMGB1-NLRP3炎症信号通路改善肝纤维化的作用机制。方法:在体外实验中,给予0-100μM的ISOIM孵育24 h,通过MTT法检测ISOIM对HSCs的细胞存活率的影响;利用TGF-β刺激HSCs 2 h,给予不同浓度(0、0.78、1.56、3.125μM)的ISOIM处理,或者给予ISOIM、GW3965和SR9243处理,6 h后,提取细胞总蛋白或m RNA,分析HSCs中LXRα/β、HMGB1、NLRP3炎性小体等蛋白的表达水平,以及通过免疫荧光染色进一步验证;并用si LXRβ处理LX-2细胞,提取细胞总蛋白,通过蛋白印迹更进一步验证实验结果;利用LPS诱导小鼠骨髓巨噬细胞,收集上清液,作为条件培养基孵育HSCs24 h,给予ISOIM处理,6 h后,提取细胞总蛋白,分析NLRP3炎症小体、ASC等相关炎性因子的表达,以及通过免疫荧光分析加以印证。在体内实验中,将小鼠随机分为6组(n=5),即:正常组、TAA模型组、ISOIM给药组(5 mg/kg、8 mg/kg)、姜黄素(10 mg/kg)阳性对照组和ISOIM单独(8 mg/kg)给药组。实验周期为5周,建立小鼠肝纤维化模型,在末次给药6h后,收集小鼠血清和肝脏,分析小鼠血清中ALT、AST水平;肝脏组织通过石蜡切片,利用H&E染色、Sirius red染色及免疫组化染色,观察肝脏病理学变化;并利用蛋白印迹法和组织免疫荧光染色,分析肝脏中LXRα/β、HMGB1、NLRP3炎性小体等的表达水平。结果:在体外实验中,MTT结果显示,0-3.125μM的ISOIM对HSCs的细胞存活率无明显影响;给予ISOIM处理后,能显著降低HSCs中肝纤维化指标的表达;并通过激活LXRα/β的表达,抑制HMGB1的表达,进而抑制NLRP3、ASC、caspase-1等多种炎症因子的释放,最终达到改善肝纤维化的目的;并通过si RNA实验,进一步验证实验结果;ISOIM还可降低因LPS诱导小鼠骨髓巨噬细胞孵育HSCs引起的NLRP3炎症小体、ASC等相关炎性因子的释放。在体内实验中,ISOIM能够降低TAA诱导肝纤维化小鼠血清中ALT、AST水平;通过H&E染色、Sirius red染色和免疫组化染色可观察,ISOIM可减轻小鼠肝脏的病理学病变;同时ISOIM还抑制小鼠肝纤维化标志物α-SMA、Collagen-Ι,TIMP-1的蛋白及m RNA表达水平;并且还激活LXRα/β的表达,抑制HMGB1的表达,进而阻止NLRP3、ASC、caspase-1等一系列的炎症反应。结论:异欧前胡素通过下调肝纤维化指标,抑制炎症因子的释放,改善肝纤维化的进程,其调控肝纤维化机制可能通过激活LXRα/β介导HMGB1-NLRP3炎症信号通路,提示异欧前胡素可能是抗肝纤维化一种有效候选物,同时为肝纤维化治疗提供新思路。

关键词：异欧前胡素肝纤维化 LXRα/β HMGB1 NLRP3

中药白芷中欧前胡素、异欧前胡素体外经皮渗透特性的串联质谱研究

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质谱学报 2017年第1期38卷 37-44页

作者：张琳皮子凤孙云霞刘志强宋凤瑞胡秀丽韩红祥吉林大学药学院吉林长春130021 中国科学院长春应用化学研究所长春质谱中心吉林省中药化学与质谱重点实验室吉林长春130022 吉林农业大学吉林长春130118 吉林省现代中药及生物制药基地建设办公室吉林长春130041

欧前胡素和异欧前胡素属于6,7-呋喃香豆素类化合物,是中药白芷的主要药效成分。为了考察二者的经皮渗透特性,采用改进型的Franz扩散池,以大鼠离体皮肤作为渗透屏障,以高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定白芷提取液的经皮渗透液中... 详细信息

欧前胡素和异欧前胡素属于6,7-呋喃香豆素类化合物,是中药白芷的主要药效成分。为了考察二者的经皮渗透特性,采用改进型的Franz扩散池,以大鼠离体皮肤作为渗透屏障,以高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定白芷提取液的经皮渗透液中欧前胡素和异欧前胡素的含量,据此来考察白芷提取液中欧前胡素和异欧前胡素的经皮渗透特性。实验结果表明,欧前胡素和异欧前胡素在48h内,单位面积的累积渗透量分别为116.11μg/cm^2和140.84μg/cm^2,累积渗透百分率分别为37.75%和71.86%。欧前胡素的稳态渗透速率为26.5μg/h·cm^2,其体外经皮渗透符合Higuchi方程。本研究阐明了欧前胡素的体外经皮渗透机制,可为白芷作为外用经皮给药制剂的发展提供实验依据和理论基础。

关键词：高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS) 白芷欧前胡素异欧前胡素体外经皮渗透 Higuchi方程

异欧前胡素在大鼠体内代谢产物的UHPLC-HRMS鉴定分析

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中国现代应用药学 2023年第19期40卷 2677-2686页

作者：王红崔议方徐静李亚男林永强李启艳张加余滨州医学院药学院山东滨州264003 山东中医药大学药学院济南250300 山东省食品药品检验研究院济南250101

目的分析鉴定异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢产物。方法大鼠灌胃给药后,收集正常组和给药组大鼠的血浆、尿液和粪便样本,并以固相萃取柱提纯生物样品。采用UHPLC-HRMS(Q-Exactive Orbitrap MS)高分辨质谱对生物样品进行分析,并对代谢... 详细信息

目的分析鉴定异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢产物。方法大鼠灌胃给药后,收集正常组和给药组大鼠的血浆、尿液和粪便样本,并以固相萃取柱提纯生物样品。采用UHPLC-HRMS(Q-Exactive Orbitrap MS)高分辨质谱对生物样品进行分析,并对代谢产物筛选鉴定。结果在正、负离子模式下,根据所获得的精确分子质量、色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及文献报道,最终分析鉴定了32个代谢产物。其代谢途径主要包括呋喃环开环、内酯水解、氧化、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化以及它们的复合反应。其中,葡萄糖醛酸化产物为首次发现。结论本研究较为全面地阐明了异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢转化情况,可为其进一步的药效学研究提供依据,并为呋喃香豆素类物质的代谢产物分析提供借鉴。

关键词：异欧前胡素体内代谢 UHPLC-HRMS(Q-Exactive Orbitrap MS) 代谢产物