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高粱BTx623幼胚遗传转化及再生体系的建立

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分子植物育种 2021年第9期19卷 2949-2955页

作者：程云伟邓为韩少鹏吕阳陆业磊曾弓剑周超张德春沈祥陵三峡大学三峡大学生物技术研究中心三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室宜昌443002

高粱是世界上仅次于小麦、水稻、玉米和大麦的重要作物之一,虽然高粱基因组已经完成了测序,但是针对高粱测序品种BTx623,高效、稳定的遗传转化和再生体系的缺乏,阻碍了高粱遗传育种和功能基因组研究发展。本研究以高粱基因组测序品种BTx... 详细信息

高粱是世界上仅次于小麦、水稻、玉米和大麦的重要作物之一,虽然高粱基因组已经完成了测序,但是针对高粱测序品种BTx623,高效、稳定的遗传转化和再生体系的缺乏,阻碍了高粱遗传育种和功能基因组研究发展。本研究以高粱基因组测序品种BTx623幼胚为外植体材料,利用农杆菌介导的方法以抗草铵膦的Bar基因为筛选标记进行高粱遗传转化。通过筛选愈伤组织对不同浓度草铵膦的适应性,确定了高粱品种BTx623遗传转化中合适的草铵膦浓度为2.5 mg/L。以BTx623幼胚为外植体转化材料,通过农杆菌遗传转化方法,获得抗性愈伤组织。通过在分化培养中添加浓度为0.0067 mg/L的ZNC,建立了高粱品种BTx623的植株再生体系,获得了再生植株。因此,本研究成功获得了抗性愈伤组织和再生植株,建立了高粱品种BTx623遗传转化及再生体系,这对高粱功能基因组研究和遗传育种技术发展具有重要意义。

关键词：高粱 BTx623 幼胚农杆菌转化再生体系

农杆菌介导的2mG_2-epsps基因转化玉米自交系18-599R幼胚的研究

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四川农业大学学报 2015年第3期33卷 245-250页

作者：贾艾敏张玲蒋琴胡冲刘坚四川农业大学玉米研究所四川温江611130

【目的】对农杆菌介导的抗草甘膦新基因2 mG2-epsps转化玉米18-599R幼胚的体系进行优化,以获得具有明显草甘膦抗性的转基因植株。【方法】以玉米18-599R幼胚为受体,采用农杆菌介导法,对转化时的预处理条件、菌液浓度×浸染时间、草甘膦... 详细信息

【目的】对农杆菌介导的抗草甘膦新基因2 mG2-epsps转化玉米18-599R幼胚的体系进行优化,以获得具有明显草甘膦抗性的转基因植株。【方法】以玉米18-599R幼胚为受体,采用农杆菌介导法,对转化时的预处理条件、菌液浓度×浸染时间、草甘膦筛选浓度设置处理,以优化转化体系;并用PCR、实时荧光定量PCR和喷洒草甘膦鉴定外源基因在转基因植株中的表达情况。【结果】热激处理对抗性愈伤率没有明显的提高作用,离心处理会降低抗性愈伤率;菌液浓度为OD600=0.6,浸染时间为10 min时,平均抗性愈伤率最高,为37.33%;草甘膦浓度为2.0mmol/L是比较理想的筛选浓度;实验共得到46株再生植株,5株PCR检测呈阳性,阳性率为10.87%;实时荧光定量PCR表明外源基因在T2代植株的根、茎、叶中均有表达;对T2代转基因植株喷洒1.5g/L的草甘膦,表现出耐受性。【结论】实验成功将2 mG2-epsps导入18-599R基因组,并获得了明显的草甘膦抗性。

关键词： 2 mG2-epsps 18-599R 农杆菌介导法幼胚

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玉米骨干自交系幼胚再生体系的建立

甘肃农业大学学报 2009年第6期44卷 57-62页

作者：杨如涛王汉宁孔维萍温睿婷贾小霞马怀义甘肃农业大学农学院甘肃兰州730070

以玉米骨干自交系‘87-1’、‘综3’、‘137’和‘K12’的幼胚为外植体,研究了影响玉米幼胚再生体系建立的相关因素.结果表明:87-1幼胚在附加500 mg.L-1L-Pro5、00 mg.L-1L-Asn和2.5 mg.L-12,4-D的N6B5基本培养基上愈伤组织诱导率最高,... 详细信息

以玉米骨干自交系‘87-1’、‘综3’、‘137’和‘K12’的幼胚为外植体,研究了影响玉米幼胚再生体系建立的相关因素.结果表明:87-1幼胚在附加500 mg.L-1L-Pro5、00 mg.L-1L-Asn和2.5 mg.L-12,4-D的N6B5基本培养基上愈伤组织诱导率最高,平均可高达98.1%;初级愈伤组织在附加500 mg.L-1L-Pro5、00 mg.L-1L-Asn和1.25 mg.L-12,4-D的N6B5继代培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,平均可高达65.6%.在相同诱导、继代培养基和相同培养条件下,4个不同基因型玉米骨干自交系的愈伤组织诱导率无显著性差异,而其胚性愈伤组织诱导率具有显著性差异.继代培养次数对绿苗分化率也产生重要影响,具有显著性差异,其中,1次继代分化率最高;1/2MS培养基附加0.2 mg.L-1KT更有利于分化苗生根.

关键词：玉米愈伤组织幼胚培养基再生

离体培养下小麦幼胚愈伤组织诱导率与分化率的研究

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江苏农业科学 2010年第5期38卷 86-87页

作者：姬玉梅鹤壁职业技术学院河南鹤壁458030

以5个小麦品种的幼胚为外植体,采用MS诱导培养基和分化培养基,研究不同基因型间愈伤组织诱导的差异,以及2,4-D浓度和不同的光照条件对愈伤组织的影响。随2,4-D浓度的增大,小麦幼胚分化率呈单峰曲线变化,且品种间差异很大,对多数品种而言... 详细信息

以5个小麦品种的幼胚为外植体,采用MS诱导培养基和分化培养基,研究不同基因型间愈伤组织诱导的差异,以及2,4-D浓度和不同的光照条件对愈伤组织的影响。随2,4-D浓度的增大,小麦幼胚分化率呈单峰曲线变化,且品种间差异很大,对多数品种而言,适宜的2,4-D浓度为1~5 mg/L。

关键词：小麦幼胚愈伤组织分化散射光

粳稻品系“超2-10”幼胚在不同温度下的诱导和再生研究

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上海农业学报 2009年第1期25卷 96-100页

作者：石少华周永国潘忠浩李建粤上海师范大学生命与环境科学学院上海200234 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所上海200032 上海市实验学校西校上海201102

以粳型高产水稻品系"超2-10"幼胚为外植体,在26、36、38℃和40℃下进行愈伤组织诱导和继代培养,并完成整个再生过程。结果显示,"超2-10"水稻幼胚在26、36、38℃和40℃环境中均能成功诱导愈伤组织,诱导率达到90%以上,4种温度条件下幼胚... 详细信息

以粳型高产水稻品系"超2-10"幼胚为外植体,在26、36、38℃和40℃下进行愈伤组织诱导和继代培养,并完成整个再生过程。结果显示,"超2-10"水稻幼胚在26、36、38℃和40℃环境中均能成功诱导愈伤组织,诱导率达到90%以上,4种温度条件下幼胚愈伤组织诱导率无显著差异;26℃和36℃环境诱导和继代培养的愈伤组织都能够正常生长、分化和再生,而38℃和40℃环境诱导和继代培养的愈伤组织能够生长,但分化和再生都受到影响;尽管36℃环境生长的愈伤组织在继代培养中重量增幅明显低于26℃继代培养的愈伤组织,但36℃诱导和继代培养的愈伤组织再生率明显高于26℃环境培养的愈伤组织,再生率提高40.81%。

关键词：水稻幼胚温度愈伤组织分化率再生率

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基因枪介导超甜玉米幼胚转化研究

玉米科学 2005年第4期13卷 24-26页

作者：胡建广李余良祁喜涛刘建华广东省遗传改良重点实验室广州510640 广东省农业科学院作物研究所广州510640

以超甜玉米自交系S1及其杂交种粤甜3号的幼胚为材料,通过优化基因枪转化条件,获得18个可育的转基因超甜玉米株系。研究结果显示,金粉直径、氦气压力和轰击距离等均影响基因枪的转化效率,用1.0μL金粉,轰击距离为12cm,压力为1100Pa时,转... 详细信息

以超甜玉米自交系S1及其杂交种粤甜3号的幼胚为材料,通过优化基因枪转化条件,获得18个可育的转基因超甜玉米株系。研究结果显示,金粉直径、氦气压力和轰击距离等均影响基因枪的转化效率,用1.0μL金粉,轰击距离为12cm,压力为1100Pa时,转化效率最高。

关键词：超甜玉米基因枪幼胚转基因

^(60)Co-γ射线对小麦幼胚离体后的诱变效应

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西南农业学报 2015年第6期28卷 2355-2359页

作者：杜文平宋军徐利远陈谦张莲余桂容四川省农业科学院生物技术核技术研究所四川成都610066

为了促进四川高产小麦的发展,拓宽种质资源,用四川小麦川麦58等与北方小麦济麦22等杂交的F1代幼胚为材料,利用辐射诱变产生突变体,探讨4、6、8、12 Gy等不同辐射剂量对小麦幼胚离体培养的影响。结果表明,任何剂量的^(60)Co-γ射线对小... 详细信息

为了促进四川高产小麦的发展,拓宽种质资源,用四川小麦川麦58等与北方小麦济麦22等杂交的F1代幼胚为材料,利用辐射诱变产生突变体,探讨4、6、8、12 Gy等不同辐射剂量对小麦幼胚离体培养的影响。结果表明,任何剂量的^(60)Co-γ射线对小麦幼胚离体后胚状体诱导率、愈伤组织的增值倍数及植株的再生率都有显著影响,所有处理随辐照剂量的增大而显著下降,其中愈伤组织诱导率从0 Gy 96.04%降到12 Gy 74.74%,愈伤组织增值倍数从3.22倍降到1.41倍,增值后绿点率从54.44%降到33.36%,剂量4和6 Gy的绿点率显著低于对照,而二者无显著差异。剂量6 Gy的植株再生率为19.76%,约为对照一半左右,当剂量达到8 Gy后,植株再生率大幅度下降,由此得出6 Gy的剂量是小麦幼胚辐射适宜的诱变剂量。

关键词：小麦幼胚辐射诱变离体培养

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小麦幼胚愈伤组织的遗传转化

广东农业科学 2013年第18期40卷 1-2,15页

作者：程高峰关占良河北农业大学教学实验农场河北保定071001

将从水稻中提取的抗性调节转录因子OsDREB2.2基因,通过农杆菌介导进入小麦组织细胞内的方法,培育筛选稳定遗传的植株,使小麦中的一系列抗性基因得以表达,从而培育出抗逆性强的小麦新品种。采用河北农业大学自主培育的小麦新品种河农825... 详细信息

将从水稻中提取的抗性调节转录因子OsDREB2.2基因,通过农杆菌介导进入小麦组织细胞内的方法,培育筛选稳定遗传的植株,使小麦中的一系列抗性基因得以表达,从而培育出抗逆性强的小麦新品种。采用河北农业大学自主培育的小麦新品种河农825、河农827、河农831等为试验材料,以各自幼胚为外植体,诱导的愈伤侵染农杆菌后,获得的抗性愈伤组织数平均为170.44、分化愈伤数平均为24.56、抗性芽与转化幼胚总数的比例平均为0.96%。表明本研究中采用的愈伤组织诱导、农杆菌侵染和植株再生条件是适宜的。

关键词：小麦愈伤组织幼胚

胚龄、NAA浓度、基因型对杂交小麦及其亲本幼胚培养的影响

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河南农业科学 2007年第6期36卷 31-34页

作者：栗现芳马守才张改生牛娜西北农林科技大学陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室陕西杨凌712100

以杂交小麦西杂一号、西杂五号及其亲本Fp1,Mp1,Fp2,Mp2为试材,采用幼胚培养一步成苗法研究了胚龄、NAA浓度、基因型对小麦幼胚培养成苗率及生长情况的影响。结果表明,幼胚培养最适宜的胚龄为16 d;最适宜的NAA浓度为0.13 mg/L;杂交小麦... 详细信息

以杂交小麦西杂一号、西杂五号及其亲本Fp1,Mp1,Fp2,Mp2为试材,采用幼胚培养一步成苗法研究了胚龄、NAA浓度、基因型对小麦幼胚培养成苗率及生长情况的影响。结果表明,幼胚培养最适宜的胚龄为16 d;最适宜的NAA浓度为0.13 mg/L;杂交小麦幼胚出苗率明显高于自交小麦幼胚,自交小麦品种中Fp2培养成苗效果较佳。因此,胚龄、NAA浓度及基因型对小麦幼胚组织培养具有明显的调节作用。在实践中应协调这些因素的作用,提高组织培养效率,从而缩短育种年限,加速育种进程。

关键词：小麦胚龄 NAA 幼胚组织培养