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玉米幼胚胚性愈伤组织再生能力相关性状遗传研究

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遗传 2017年第2期39卷 143-155页

作者：张晓玲龙芸葛飞管中荣张晓祥王艳丽沈亚欧潘光堂四川农业大学玉米研究所成都611130

本文对来源于美国、墨西哥和中国的144份不同玉米自交系幼胚胚性愈伤组织的再生能力相关性状进行了研究,发现其再生能力受到环境、基因型及环境与基因型互作三方面的影响。其中各性状之间的相关性表现为:绿点率(green embryonic callus ... 详细信息

本文对来源于美国、墨西哥和中国的144份不同玉米自交系幼胚胚性愈伤组织的再生能力相关性状进行了研究,发现其再生能力受到环境、基因型及环境与基因型互作三方面的影响。其中各性状之间的相关性表现为:绿点率(green embryonic callus rate,GCR)、分化率(embryonic callus differentiating rate,CDR)及再生绿苗数(the plantlet number of embryonic callus regeneration,CPN)之间呈极显著正相关,且这三者与褐化率(embryonic callus browning rate,CBR)呈极显著负相关;两次继代的克隆指数(embryonic callus cloning index for the first subculture,CCI1;embryonic callus cloning index for the second subculture,CCI2)呈显著正相关,且CCI2与GCR有一定的正相关关系,与CBR呈负相关关系;生根率(embryonic callus rooting rate,CRR)则与GCR、CDR及CPN呈一定正相关。经过广义遗传力计算发现:胚性愈伤组织的两次继代克隆指数CCI1、CCI2和CRR的遗传力较低,其他性状的遗传力较高。此外,经Ward法双向聚类分析,共发现了11个具有高再生能力的自交系材料,且通过生根培养发现其再生绿苗的生根情况良好,因而可将它们作为玉米转基因受体的骨干自交系。

关键词：幼胚胚性愈伤组织再生能力环境基因型

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影响玉米幼胚愈伤组织再生率的因素分析

核农学报 2009年第3期23卷 385-390页

作者：张桂玲张素芝荣廷昭四川农业大学玉米研究所/作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室四川雅安625014

为探讨影响玉米幼胚愈伤组织再生率的因素,本试验以3个优良玉米自交系为材料,对影响幼胚的胚性愈伤组织诱导率、克隆指数和分化率的因素进行了研究。结果表明,3个玉米自交系幼胚的愈伤诱导率差异极显著。生长环境对975-12影响显著,对18-... 详细信息

为探讨影响玉米幼胚愈伤组织再生率的因素,本试验以3个优良玉米自交系为材料,对影响幼胚的胚性愈伤组织诱导率、克隆指数和分化率的因素进行了研究。结果表明,3个玉米自交系幼胚的愈伤诱导率差异极显著。生长环境对975-12影响显著,对18-599和416051影响不显著。18-599和416051的胚大小为2mm时Ⅱ型胚性愈伤组织的诱导率最高,而975-12在胚大小为2.5mm时Ⅱ型胚性愈伤诱导率最高。3个自交系的克隆指数和分化率一般在第3或第4代时达到最大值。综合分析表明,18-599和416051这2个自交系具有愈伤组织诱导率高、克隆能力强、易分化的优点,是玉米转基因研究中具有潜在利用价值的优良自交系。

关键词：玉米幼胚愈伤组织再生率

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优良大麦品种花30幼胚遗传转化体系的优化

植物遗传资源学报 2012年第5期13卷 901-906页

作者：高润红杜志钊郭桂梅邹磊何婷陈志伟李梁陆瑞菊黄剑华上海市农业科学院生物技术研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室上海201106 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

以大麦花培基因型花30的幼胚为外植体,设置不同的培养基类型、不同激素配比及碳源,研究其对幼胚愈伤组织诱导及绿苗分化的影响,以此建立和优化一个适于优良大麦品种遗传转化的高效组织培养体系。结果表明:在N6、MS和B5的组合改良培养基... 详细信息

以大麦花培基因型花30的幼胚为外植体,设置不同的培养基类型、不同激素配比及碳源,研究其对幼胚愈伤组织诱导及绿苗分化的影响,以此建立和优化一个适于优良大麦品种遗传转化的高效组织培养体系。结果表明:在N6、MS和B5的组合改良培养基下,以蔗糖为碳源,附加2mg/L 2,4-D、1mg/L ABA时,有最高的愈伤组织诱导率,且愈伤质量最好。Cu2+的添加具有抑制幼胚直接发芽成苗和改善愈伤组织质量的双重功效。添加2mg/L 6-BA对愈伤组织的分化效果比较理想。为了提高农杆菌介导转化大麦外源基因的瞬时表达率和优化遗传转化体系,利用花30幼胚产生的愈伤组织为受体材料,通过检测GUS基因的瞬时表达情况,研究了农杆菌介导的大麦遗传转化中菌液的浓度、侵染时间以及共培养天数对遗传转化的影响,结果表明:当菌液浓度OD600=0.5的条件下,侵染15min,共培养2d表现出最佳的GUS瞬时表达率。

关键词：大麦幼胚愈伤诱导分化再生遗传转化

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小麦幼胚生长点转化的研究初报

分子植物育种 2015年第4期13卷 781-786页

作者：崔明珠李云玲田保明李瑞郝志达位芳郑州大学生命科学学院郑州450001

本研究以日龄1~3 d及7 d的小麦幼胚为受体，利用携带GUS基因的农杆菌LBA4404侵染，恢复培养至3~5叶期时，取第三叶进行GUS组织化学染色分析；并做两个优化对比处理：（1）抽真空处理：在侵染过程中，0.1 MPa抽真空2 min；（2）干燥处理... 详细信息

本研究以日龄1~3 d及7 d的小麦幼胚为受体，利用携带GUS基因的农杆菌LBA4404侵染，恢复培养至3~5叶期时，取第三叶进行GUS组织化学染色分析；并做两个优化对比处理：（1）抽真空处理：在侵染过程中，0.1 MPa抽真空2 min；（2）干燥处理：在共培养阶段，将幼胚转入铺有干燥无菌滤纸的平皿中。结果表明：GUS瞬时表达率随日龄增加而降低，以2~3 d龄的幼胚为最高；抽真空和干燥处理均能显著提高GUS瞬时表达率。最终，在优化处理条件下，获得77株转化苗中，40株第三叶GUS染色显示阳性，高达57.14%。进一步提取GUS阳性小麦叶片基因组DNA，进行PCR扩增，有6株转化苗扩增出目的条带，转化率为7.79%。初步说明以小麦幼胚的生长点作为转化受体是可行的。

关键词：小麦幼胚生长点转化抽真空干燥

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糜子幼胚愈伤组织的诱导及植株再生

西北农业学报 2020年第8期29卷 1177-1185页

作者：吴会琴王娜黄梦迪刘蓓蓓杨璞高小丽西北农林科技大学农学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100

为研究影响糜子幼胚愈伤组织诱导分化的因素,优化培养条件,提高糜子幼胚培养效率。以‘陕糜1号’和‘陕糜2号’为材料,研究低温预处理时间、激素种类及质量浓度对糜子幼胚愈伤组织诱导、分化和再生的影响。结果表明,4℃低温预处理3 d能... 详细信息

为研究影响糜子幼胚愈伤组织诱导分化的因素,优化培养条件,提高糜子幼胚培养效率。以‘陕糜1号’和‘陕糜2号’为材料,研究低温预处理时间、激素种类及质量浓度对糜子幼胚愈伤组织诱导、分化和再生的影响。结果表明,4℃低温预处理3 d能显著提高糜子的幼胚愈伤组织诱导率;2种糜子最适宜的诱导培养基均为MS+3.0 mg/L 2,4-D。添加一定质量浓度的KT,可以改善愈伤组织质量,但是2种糜子的愈伤组织诱导率有显著的基因型差异。可见,2种糜子最适宜的分化培养基均为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,且绿点率均在80%以上。

关键词：糜子幼胚愈伤组织诱导再生体系

玉米幼胚和成熟胚愈伤组织诱导过程中内源激素的比较

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核农学报 2009年第4期23卷 555-560,616页

作者：贾小霞王汉宁孔维萍梁慧光张金文甘肃农业大学农学院甘肃兰州730070 甘肃省农业科学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学理学院甘肃兰州730070

以玉米自交系87—1的幼胚和成熟胚为材料，用酶联免疫法测定了不同培养时间诱导的幼胚及成熟胚愈伤组织内源脱落酸（ABA）、吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA3）和细胞分裂素（ZR）含量的动态变化。结果表明，在0～7d时，幼胚及成熟胚的IAA... 详细信息

以玉米自交系87—1的幼胚和成熟胚为材料，用酶联免疫法测定了不同培养时间诱导的幼胚及成熟胚愈伤组织内源脱落酸（ABA）、吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA3）和细胞分裂素（ZR）含量的动态变化。结果表明，在0～7d时，幼胚及成熟胚的IAA和GA3含量均急剧下降，说明在胚萌发阶段IAA和GA3需求量较大。在幼胚胚性愈伤组织发生初期（14d左右），2种激素含量出现峰值，反映出幼胚较高水平的IAA和GA3含量，有利于胚性愈伤组织的诱导。在胚萌发后的愈伤诱导阶段，成熟胚愈伤中队A、GA3和ABA含量以及IAA／ABA和GA3／ABA比值明显高于幼胚愈伤，且IAA／ABA和GA3／ABA比值均大幅度上升；而幼胚愈伤组织中IAA／ABA和GA3／ABA比值则稳定地维持在较低的水平上。可以认为，成熟胚愈伤组织中过高水平的IAA、GA3和ABA含量及IAA／ABA和GA3／ABA比值大幅度上升可能是导致其难以形成胚性愈伤组织的主要生理原因之一。

关键词：玉米幼胚成熟胚愈伤组织诱导内源激素

小麦幼胚愈伤组织分化和继代分化特性的影响因素

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麦类作物学报 2015年第6期35卷 731-736页

作者：王晶晶陈耀锋张月琴朱浩西北农林科技大学农学院陕西杨凌712100

为建立稳定、高效的小麦幼胚愈伤组织继代分化体系,以4个小麦品种为材料,对影响普通小麦幼胚愈伤组织分化和继代分化特性的因素进行了研究。结果表明,碳源、有机添加物、诱导和继代间隔时间及基因型对小麦幼胚愈伤组织的分化和继代分化... 详细信息

为建立稳定、高效的小麦幼胚愈伤组织继代分化体系,以4个小麦品种为材料,对影响普通小麦幼胚愈伤组织分化和继代分化特性的因素进行了研究。结果表明,碳源、有机添加物、诱导和继代间隔时间及基因型对小麦幼胚愈伤组织的分化和继代分化特性有显著影响。1.5%蔗糖和1.5%麦芽糖配合使用,小麦幼胚愈伤组织分化和继代分化效率显著高于3%蔗糖和3%麦芽糖单独使用的分化效率;4种有机添加物对小麦幼胚愈伤组织分化和继代分化特性均有正向增加效应,其中,诱导培养基中分别添加500mg·L-1酸水解酪蛋白、250mg·L-1 L-谷氨酰胺和250mg·L-1 L-天门冬酰胺的正向效应显著,愈伤组织分化率分别比对照提高17.5%、15.2%和14.2%,继代3次后的愈伤组织分化率比对照显著提高了93.9%、73.6%和52.8%;诱导分化和继代诱导分化的时间是小麦幼胚愈伤组织分化和继代分化特性重要的影响因素之一,诱导15d和继代间隔15d的愈伤组织分化和继代分化率显著高于20d和25d,且随诱导和继代间隔时间的延长,愈伤组织分化率迅速下降;供试4种基因型材料的愈伤组织分化和继代分化特性有显著差异,供试品种千斤早和小偃22愈伤组织分化特性较好,扬麦12和扬麦18继代愈伤分化特性较好,愈伤组织分化和继代分化特性的表现无相关性。

关键词：小麦幼胚愈伤组织继代分化

丁香(Syringa L.)种间杂交幼胚离体培养研究

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应用生态学报 2003年第3期14卷 382-386页

作者：周莉罗凤霞代力民中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳110016 北京市农林科学研究院植保环保研究所北京110089

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗 ,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究 .结果表明 ,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为 5 0 g·L-1;幼胚在 5 0～ 6 0d胚龄时培养最容易成功 ;加... 详细信息

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗 ,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究 .结果表明 ,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为 5 0 g·L-1;幼胚在 5 0～ 6 0d胚龄时培养最容易成功 ;加入适量的椰乳、谷氨酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长 .低浓度 (0 .0 1mg·L-1)BA的加入可以提高幼胚的萌发率 ;NAA浓度以 0 .0

关键词：丁香幼胚离体培养

玉米幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段愈伤诱导及其植株再生的比较

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中国农业科学 2011年第17期44卷 3676-3682页

作者：陈靖董浩马海珍孙全喜刘江亓宝秀李新征董树亭山东农业大学作物生物学国家重点实验室

【目的】以育种上常用自交系的幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段为外植体,研究它们在愈伤诱导及植株再生之间的区别与联系,为建立以叶段为外植体的另一高效稳定的玉米组培体系提供技术参考。【方法】选用6个育种上常用自交系,以幼胚和幼嫩叶段... 详细信息

【目的】以育种上常用自交系的幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段为外植体,研究它们在愈伤诱导及植株再生之间的区别与联系,为建立以叶段为外植体的另一高效稳定的玉米组培体系提供技术参考。【方法】选用6个育种上常用自交系,以幼胚和幼嫩叶段为外植体分别进行愈伤诱导及植株再生,研究2,4-D对不同外植体初级愈伤组织诱导的影响,对不同来源的6个自交系分别统计诱导率及分化率,并观察愈伤组织的形态。【结果】不同外植体对2,4-D浓度的要求不同,且幼嫩叶段相对幼胚较难诱导愈伤且需要的2,4-D浓度更高。同一基因型的幼胚和幼嫩叶段形成的愈伤形态基本无区别,不同基因型之间愈伤形态有差异。不同来源的6个基因型的愈伤诱导率、分化率也存在差异。【结论】通过再生过程中幼胚和叶段多方面的比较,筛选到3个诱导率较高且愈伤形态优良的基因型齐319、Mo17和鲁原92。

关键词：玉米(ZeamaysL.) 幼胚幼嫩叶段愈伤组织诱导分化