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山楂原花青素下调Traf6/NF-κB信号通路诱导肝癌细胞凋亡

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食品科学 2023年第5期44卷 96-102页

作者：宓伟尹淑英高丽霞李宁石塔拉滨州医学院公共卫生与管理学院山东烟台264003 滨州医学院附属医院肿瘤科山东滨州256603

目的:探讨山楂原花青素(hawthorn procyanidins,HPC)诱导肝癌细胞Huh-7增殖和促进其凋亡的机制。方法:体外常规培养Huh-7细胞株和过表达Traf6基因Huh-7细胞株,配制0、5、10、20、40、80μg/mL不同质量浓度的HPC,采用细胞计数8(cell coun... 详细信息

目的:探讨山楂原花青素(hawthorn procyanidins,HPC)诱导肝癌细胞Huh-7增殖和促进其凋亡的机制。方法:体外常规培养Huh-7细胞株和过表达Traf6基因Huh-7细胞株,配制0、5、10、20、40、80μg/mL不同质量浓度的HPC,采用细胞计数8(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒检测HPC对Huh-7细胞和过表达Traf6基因Huh-7细胞增殖的抑制作用,并选40μg/mL作为HPC实验质量浓度;利用实时定量聚合酶链反应检测Huh-7细胞中Traf6、NF-κB?p65、Bax和Caspase-3的mRNA表达水平;利用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测Huh-7细胞中Traf6、NF-κB p65、Bax和Caspase-3蛋白表达水平;利用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测HPC对Huh-7细胞凋亡的影响。结果:HPC质量浓度大于20μg/mL时可以明显抑制Huh-7细胞增殖,并随HPC质量浓度升高Huh-7细胞的相对存活率显著降低(P<0.05);Traf6蛋白过表达可以促进Huh-7细胞的增殖。与空白对照组比较,40μg/mL的HPC可以显著抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,Traf 6)和核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB) p65 mRNA和蛋白表达(P<0.05),显著增强Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达(P<0.05),显著促进Huh-7细胞的凋亡(P<0.05)。结论:HPC可以通过下调Traf6/NF-κB信号通路诱导肝癌细胞凋亡。

关键词：山楂原花青素肝细胞肝癌肿瘤坏死因子受体相关因子6 核转录因子-κB 细胞凋亡

山楂原花青素调节环氧合酶-2表达诱导Eca109食管癌细胞凋亡

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食品科学 2016年第1期37卷 176-181页

作者：宓伟练武尹淑英衣卫杰石塔拉韩文婷滨州医学院公共卫生与管理学院山东烟台264003

探讨山楂原花青素(hawthorn procyanidins,HPC)通过磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol 3-kinase/serine threonine protein kinase,PI3K/Akt)信号通路调节环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达,诱导Eca109食管癌细胞凋亡的分子机制。体外常规培养食管癌细胞株,配制25、50、100、200、300、400μg/m L不同质量浓度的HPC,CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测并计算不同质量浓度HPC在72 h内对Eca109食管癌细胞的抑制率,选取IC_(50)=250μg/m L作为HPC处理组剂量,并设对照组。Western blotting法检测Eca109细胞PI3K和Akt磷酸化程度、Caspase-3和COX-2蛋白表达水平,反转录聚合酶链式反应(reverse transcript polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Eca109细胞COX-2 m RNA表达水平,Annexin V-FITC/PI法检测0、12、24、36、48、72 h时HPC对Eca109食管癌细胞凋亡率的影响。结果表明:HPC处理组Eca109食管癌细胞PI3K、Akt磷酸化程度随着处理时间延长逐渐降低(P<0.01),在48 h时活性最低,HPC处理组Eca109食管癌细胞COX-2 m RNA的表达量与对照组比较明显降低(P<0.01)。在HPC的作用下,Eca109食管癌细胞Caspase-3蛋白表达量在48、72 h时最强(P<0.01),COX-2蛋白表达量在72 h时最低(P<0.01)。Eca109食管癌细胞凋亡率随着时间的延长越来越高,在72 h时达到63.54%(P<0.01)。HPC可通过PI3K/Akt途径下调COX-2表达,从而诱导Eca109食管癌细胞凋亡。

关键词：山楂原花青素环氧合酶-2 食管癌细胞凋亡

山楂原花青素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

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食品科学 2019年第5期40卷 189-196页

作者：孙思明徐宏伟郭凯元郭梦冉崔胜男崔同檀建新河北农业大学食品科技学院河北省农产品加工工程技术研究中心河北保定071001

目的:探讨山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B2对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养SMMC-7721细胞,噻唑蓝法检测不同质量浓度山楂原花青素对细胞增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色法观察细胞凋亡,Western... 详细信息

目的:探讨山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B2对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养SMMC-7721细胞,噻唑蓝法检测不同质量浓度山楂原花青素对细胞增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色法观察细胞凋亡,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达;检测每组细胞中过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、Na^+K^+-ATP酶活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果:山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B_2呈时间和质量浓度依赖性地显著抑制SMMC-7721细胞的增殖(P山楂原花青素可通过影响抗氧化酶活力和细胞凋亡相关蛋白来抑制SMMC-7721细胞增殖,促进细胞凋亡。

关键词：山楂原花青素抗氧化活性人肝癌SMMC-7721细胞细胞增殖细胞凋亡

山楂原花青素及维生素C联合应用对胰岛素抵抗大鼠肾脏保护作用

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中草药 2017年第21期48卷 4479-4484页

作者：宓伟王淇李小真张丽孙璐璐李朋朋王芮滨州医学院公共卫生与管理学院山东烟台264003 滨州医学院临床医学院山东烟台264003

目的研究山楂原花青素(HPC)和维生素C(VC)联合应用对胰岛素抵抗(IR)大鼠肾脏损伤的保护作用。方法采用高脂膳食法诱导IR大鼠,造模后继续高脂喂养2周,制备IR肾病大鼠模型,并检测空腹血糖、血清胰岛素以及尿液各项指标、微量白蛋白(mAlb)... 详细信息

目的研究山楂原花青素(HPC)和维生素C(VC)联合应用对胰岛素抵抗(IR)大鼠肾脏损伤的保护作用。方法采用高脂膳食法诱导IR大鼠,造模后继续高脂喂养2周,制备IR肾病大鼠模型,并检测空腹血糖、血清胰岛素以及尿液各项指标、微量白蛋白(mAlb)水平;将造模后的50只IR肾病大鼠分为模型组、HPC(56 mg/kg)组、VC(180 mg/kg)组、HPC(56 mg/kg)+VC(180 mg/kg)组和罗格列酮(2 mg/kg)组,另取10只正常大鼠作为对照组,各组均ig给药,持续20周,测定大鼠空腹血糖、胰岛素、尿糖水平,检测尿液中肌酐(Cr)、尿素氮(UN)、尿酸(UA)、总蛋白水平以及mAlb、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)24 h排泄量,光镜下观察肾脏组织病理学改变。结果与对照组比较,模型组大鼠空腹血糖、血清胰岛素以及尿糖水平显著升高(P<0.01),尿中UN、UA、Cr水平显著升高(P<0.01),尿总蛋白、mAlb水平以及尿NAG排泄量均显著升高(P<0.01)。而HPC和VC联合应用后以上指标均显著下降(P<0.01),较HPC组和VC组作用显著(P<0.01),与罗格列酮组效果相近。HPC+VC组大鼠肾脏组织显微结构有明显改善。结论 HPC与VC联合应用可改善IR大鼠肾脏功能,对肾脏有一定的保护作用。

关键词：山楂原花青素维生素C 胰岛素抵抗肾脏保护 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶

山楂原花青素及维生素C对胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激的影响

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中草药 2016年第4期47卷 625-629页

作者：宓伟练武尹淑英赵倩杨晓慧张爱萍华蕾滨州医学院公共卫生与管理学院山东烟台264003 滨州医学院临床医学院山东烟台264003

目的探讨山楂原花青素(HPC)和维生素C(VC)联合应用对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏氧化应激的影响。方法高脂饮食法制备IR大鼠模型,检测大鼠造模后体质量、空腹血糖、血清胰岛素水平,试剂盒法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)... 详细信息

目的探讨山楂原花青素(HPC)和维生素C(VC)联合应用对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏氧化应激的影响。方法高脂饮食法制备IR大鼠模型,检测大鼠造模后体质量、空腹血糖、血清胰岛素水平,试剂盒法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性;将IR大鼠分为模型组、HPC(56 g/kg)组、VC(180 g/kg)组、HPC(56 g/kg)+VC(180 g/kg)组和罗格列酮(122 g/kg)组,连续给药12周,测定各组大鼠肝匀浆中葡萄糖、胰岛素、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平和肝线粒体中SOD、GSH-Px、Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶及MDA水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)m RNA表达;Western blotting法检测PPAR-γ蛋白表达情况。结果与对照组比较,造模后大鼠体质量显著下降(P素水平、ALT、AST和ALP活性均显著升高(P素、MDA水平显著升高(P<0.01),肝线粒体中SOD、GSH-Px、Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性均显著降低(P<0.01),MDA水平显著升高(P<0.01);肝组织PPAR-γm RNA、蛋白表达明显下降(P<0.01)。HPC、VC、HPC+VC和罗格列酮对上述指标均有改善作用,HPC+VC组作用优于HPC组和VC组,与罗格列酮组效果相当。结论 HPC和VC联合作用可改善IR大鼠肝脏氧化应激状态。

关键词：山楂原花青素维生素C 胰岛素抵抗肝脏氧化应激过氧化物酶体增殖物激活受体γ

基于AMPK/SREBP-1c分子通路的山楂原花青素调控脂质代谢机制

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食品科学 2023年第15期44卷 129-136页

作者：宓伟于敏李宁石塔拉陈彩云滨州医学院公共卫生与管理学院山东烟台264003 滨州医学院药学院山东烟台264003

目的:探讨山楂原花青素(hawthorn procyanidins,HPC)调节腺苷酸激活蛋白激酶/固醇调节元件结合蛋白(AMP-activated protein kinase/sterol regulatory element binding protein-1c,AMPK/SREBP-1c)信号通路对脂质代谢的影响及其机制。方法:采用随机数字表法将大鼠分为空白对照组(blank control group,BCG),高脂血症模型组(hyperlipidemia model group,HMG),HPC低、中、高剂量组(HPC-low-, medium-and high-dose groups,HPC-LDG、HPC-MDG、HPC-HDG),非诺贝特阳性对照组(fenofibrate positive control group,FPG),每组10只。按试剂盒方法检测大鼠血清和肝匀浆中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoproteincholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(highdensity lipoproteincholesterol,HDL-C)浓度;苏木精-伊红(hematoxylineosin,HE)染色观察各组大鼠肝脏组织病理学变化;实时定量聚合酶链式反应检测各组大鼠肝脏中AMPK、SREBP-1c、甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase-1,GPAT1)、乙酰辅酶羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthese,FAS)、肉毒碱棕榈酰基转移酶(carnitine palmitoyltransterase-1,CPT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子1α(peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator-1α,PGC-1α)mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝脏中p-AMPK、SREBP-1c、GPAT1、ACC、FAS、CPT1和PGC-1α蛋白表达水平。结果:造模7周后,与BCG比较,HMG大鼠体质量、肝质量和肝脏指数均显著或极显著升高(P<0.05、P<0.01)。与HMG比较,HPC-HDG和FPG大鼠血清和肝匀浆TG、TC和LDL-C浓度极显著下降,HDL-C浓度极显著升高(P<0.01),且HPC对大鼠血清和肝匀浆中脂质浓度影响有剂量依赖性。采用各剂量HPC预防性干预后,随HPC剂量增加,大鼠肝细胞脂肪变性逐渐改善。与HMG比较,HPC-HDG和FPG大鼠肝脏AMPK mRNA和p-AMPK蛋白相对表达量均极显著上升(P<0.01),大鼠肝脏SREBP-1c、GPAT1、ACC、FAS mRNA和蛋白相对表达量均极显著下降(P<0.01),大鼠肝脏CPT1、PGC-1α mRNA和蛋白相对表达量均极显著升高(P<0.01)。结论:HPC可以改善高脂血症大鼠脂质代谢,其作用机制可能与AMPK/SREBP-1c分子信号通路有关。

关键词：山楂原花青素高脂血症腺苷酸激活蛋白激酶固醇调节元件结合蛋白

山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制研究

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营养学报 2015年第4期37卷 389-392,398页

作者：宓伟赵倩练武石塔拉韩文婷衣卫杰滨州医学院营养与食品卫生学教研室烟台264003

目的探讨山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制。方法常规培养食管癌Eca109细胞系并分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和不同浓度的山楂原花青素实验组;细胞活性(cell counting kit-8,CCK-8)法检测山楂原花青素对Eca109细胞的抑制... 详细信息

目的探讨山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制。方法常规培养食管癌Eca109细胞系并分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和不同浓度的山楂原花青素实验组;细胞活性(cell counting kit-8,CCK-8)法检测山楂原花青素对Eca109细胞的抑制率;荧光共振能量转移(FRET)法观察山楂原花青素与细胞表面受体形成的异源二聚体的数量;Western blot法分别检测ERK5磷酸化程度和Bax、caspase-3蛋白表达水平;Annexin V-FITC/PI法检测食管癌细胞凋亡率。结果不同浓度的山楂原花青素培养Eca109细胞72h时,IC50约为275μg/ml,因此选用275μg/ml作为实验剂量;山楂原花青素与细胞表面受体形成的异源二聚体的数量呈时间依赖性,24h数量明显增多(P山楂原花青素的作用下,于48h表达最强(P山楂原花青素可促进食管癌Eca109细胞的凋亡进程。

关键词：山楂原花青素食管癌Eca109细胞凋亡

山楂原花青素及维生素C对胰岛素抵抗大鼠肝脏炎症反应的影响

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中国老年学杂志 2022年第22期42卷 5598-5603页

作者：李西栋纪雨含韩富磊梁亚楠宓伟临沂市人民医院心血管内科山东临沂276000 滨州医学院公共卫生与管理学院

目的探讨山楂原花青素(HPC)及维生素C(VC)联合应用对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏炎症反应的影响。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(10只)和高脂饮食组(80只),采用高脂饮食法制备IR大鼠模型,喂养6个月末测定空腹血糖≥7.0 mmol/L者... 详细信息

目的探讨山楂原花青素(HPC)及维生素C(VC)联合应用对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏炎症反应的影响。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(10只)和高脂饮食组(80只),采用高脂饮食法制备IR大鼠模型,喂养6个月末测定空腹血糖≥7.0 mmol/L者为造模成功,共造模成功58只大鼠,检测大鼠造模后体重、空腹血糖、血清胰岛素水平,试剂盒法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性;随机选取50只造模成功的IR大鼠分为模型组、HPC(56 mg/kg)组、VC(180 mg/kg)组、HPC(56 mg/kg)+VC(180 mg/kg)组和罗格列酮(2 mg/kg)组各10只。持续灌胃给药20 w后,按照酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清促炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8和抗炎症因子IL-4、IL-10浓度;测定血清和肝脏游离脂肪酸(FFA)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色并在光学显微镜下观察肝组织病理改变;采用Western印迹检测磷脂酰肌酸-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)磷酸化程度和C-核转录因子(NF)-κB、N-NF-κB蛋白表达量;采用反转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测肝组织炎症因子mRNA表达。结果与对照组比较,造模后大鼠体重显著升高(P素、ALT、AST和ALP活性均显著升高(P素抵抗大鼠肝脏炎症反应的作用。

关键词：山楂原花青素维生素C 胰岛素抵抗肝脏炎症反应核转录因子-κB

山楂原花青素联合维生素C通过Wnt β-catenin分子通路对动脉粥样硬化大鼠的氧化应激反应的影响及其机制研究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第6期 70-73页

作者：苗诗颖长沙医学院第一临床学院湖南长沙410219

探究山楂原花青素联合维生素C通过Wnt/β-catenin分子通路调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达改善大鼠动脉粥样硬化的研究机制;方法通过高脂饲料给予维生素D3诱导建立动脉粥样硬化大鼠模型,观察和分析空白对照组、动脉粥样硬化模型... 详细信息

探究山楂原花青素联合维生素C通过Wnt/β-catenin分子通路调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达改善大鼠动脉粥样硬化的研究机制;方法通过高脂饲料给予维生素D3诱导建立动脉粥样硬化大鼠模型,观察和分析空白对照组、动脉粥样硬化模型组、阿托伐他汀阳性对照组、山楂原花青素和维生素C联合组的数据,比较大鼠血浆中Wnt1、β-catenin和PPARγ蛋白的表达水平,氧化应激指标超氧化物歧化酶SOD和丙二醇MDA。结果相较于空白对照组,模型组大鼠中的MDA含量显著升高(P山楂原花青素联合维生素C组和阿托伐他汀阳性对照组大鼠血液匀浆中MDA和SOD指标均有显著差异(P山楂原花青素联合维生素C组对血液匀浆MDA和SOD指标干预效果优于阿托伐他汀阳性对照组(P山楂原花青素联合维生素C组大鼠的Wnt1和β-catenin蛋白相对表达水平显著降低(P山楂原花青素联合维生素C组对大鼠Wnt1、β-catenin和PPARγ蛋白的表达水平干预效果优于阿托伐他汀阳性对照组。结论山楂原花青素联合维生素C通过Wnt/β-catenin分子通路调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达,从而抑制氧化应激和炎症反应而改善动脉粥样硬化程度,为临床上动脉粥样硬化的干预、治疗及新药的开发提供新思路,具有一定的经济效应和社会效应。

关键词：山楂原花青素维生素C Wntβ-catenin分子通路动脉粥样硬化氧化应激反应