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孔雀石绿降解菌群多样性及高效降解菌的降解特性分析

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生物技术通报 2019年第9期35卷 150-155页

作者：王亚妮宋金龙韩刚穆迎春江旭王金耀阮志勇李乐上海海洋大学上海201306 中国水产科学研究院北京100141 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所北京100081 巴彦淖尔市第一中学巴彦淖尔015002

以三苯甲烷类染料孔雀石绿为唯一碳源,通过连续传代驯化,拟获得能够降解孔雀石绿的富集培养物。运用高通量测序对富集培养物进行了微生物群落区系变化分析,获得了与降解相关的微生物信息,进一步分离纯化到了 1 株孔雀石绿高效降解菌株... 详细信息

以三苯甲烷类染料孔雀石绿为唯一碳源,通过连续传代驯化,拟获得能够降解孔雀石绿的富集培养物。运用高通量测序对富集培养物进行了微生物群落区系变化分析,获得了与降解相关的微生物信息,进一步分离纯化到了 1 株孔雀石绿高效降解菌株。该菌 7 d 内对 50 mg/L 孔雀石绿降解效率达 91.2%。经初步鉴定,该菌为 Pseudomonas 菌属菌株,并命名为 Pseudomonasveronii JW3-6。对该菌进行了降解条件优化,结果表明菌株最适降解温度为 30℃,pH 为 7,接种浓度为 1×10^7 CFU/mL。

关键词：孔雀石绿高通量测序微生物降解假单胞菌

响应面法优化壳聚糖/聚氨酯泡沫吸附孔雀石绿的工艺

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中国食品学报 2014年第12期14卷 100-105页

作者：李娇李秀霞田鑫励建荣李敏镇渤海大学化学化工与食品安全学院辽宁省食品安全重点实验室辽宁省高校重大科技平台"食品贮藏加工及质量安全控制工程技术研究中心" 辽宁锦州121013 鞍山嘉鲜农业发展有限公司辽宁鞍山114100

将壳聚糖、聚醚多元醇、二苯基甲烷二异氰酸酯混合发泡制备壳聚糖/聚氨酯复合泡沫并作为吸附剂。以孔雀石绿去除率为响应值,采用响应面法对水中孔雀石绿的吸附条件进行优化,结果表明:试验中各因素影响的主次顺序为p H>吸附时间>溶液温度... 详细信息

将壳聚糖、聚醚多元醇、二苯基甲烷二异氰酸酯混合发泡制备壳聚糖/聚氨酯复合泡沫并作为吸附剂。以孔雀石绿去除率为响应值,采用响应面法对水中孔雀石绿的吸附条件进行优化,结果表明:试验中各因素影响的主次顺序为p H>吸附时间>溶液温度>壳聚糖添加量,壳聚糖/聚氨酯复合泡沫吸附水中MG的最佳条件为p H9.5、壳聚糖添加量20.2%、溶液温度31℃、吸附时间12.8 h。该条件下水中MG的去除率为95.22%,与预测结果相符。

关键词：壳聚糖/聚氨酯泡沫吸附孔雀石绿工艺

孔雀石绿对Fas/Fas-L诱导的小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

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生殖与避孕 2006年第12期26卷 707-711,721页

作者：侯瑜琼朱伟杰暨南大学生殖免疫研究中心广州510632

目的:探讨孔雀石绿对小鼠睾丸生精细胞由Fas/Fas-L所诱导凋亡的影响。方法:32只雄性成年BALB/c小鼠随机均分为4组,按照孔雀石绿浓度设为:对照组(A组,0mg/L)、低剂量组(B组,100mg/L)、中剂量组(C组,400mg/L)、高剂量组(D组,800mg/L)。实... 详细信息

目的:探讨孔雀石绿对小鼠睾丸生精细胞由Fas/Fas-L所诱导凋亡的影响。方法:32只雄性成年BALB/c小鼠随机均分为4组,按照孔雀石绿浓度设为:对照组(A组,0mg/L)、低剂量组(B组,100mg/L)、中剂量组(C组,400mg/L)、高剂量组(D组,800mg/L)。实验组连续灌胃给药30d,对照组以等量生理盐水代替孔雀石绿。HE染色后观察睾丸组织结构的变化,免疫组化法检测Fas及Fas-L蛋白的表达及改变。结果:B组显示与对照组相似的组织学结构。C组和D组的生精上皮细胞层数减少,少数管腔内可见脱落生精细胞,病理变化随剂量增大而加重。Fas和Fas-L在间质细胞和精子的表达呈强阳性,Fas集中于精子细胞核及周围残余胞浆,管腔中的絮状精子尾明显见Fas-L表达。Fas和Fas-L在支持细胞表达较弱,在A、B组表达位于靠近基底膜处的胞浆,在C、D组还表达于伸向管腔的胞浆。Fas在C、D组精子及支持细胞的表达均比对照组显著增强,Fas-L在3个实验组支持细胞的表达均显著强于对照组(P孔雀石绿可以导致小鼠睾丸生精上皮损伤和支持细胞的Fas/Fas-L表达上调,表明孔雀石绿可能通过Fas/Fas-L通路使生精细胞凋亡增加。

关键词：孔雀石绿凋亡小鼠精子睾丸

基于混合抗体的酶联免疫分析方法同时检测孔雀石绿和隐孔雀石绿

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现代食品科技 2015年第12期31卷 325-330页

作者：谢焕龙王宇徐振林杨金易肖治理王弘雷红涛孙远明沈玉栋华南农业大学食品学院广东省食品质量安全重点实验室广东广州510642

孔雀石绿是'三致'物质,常被非法使用于渔业生产。水产品和环境中常以孔雀石绿和隐孔雀石绿两种形式同时存在,均具有强致癌性。但由于二者结构差异较大,现有的单克隆抗体只能分别检测样品中单一药物的残留量,难以客观地反映出孔雀石绿和... 详细信息

孔雀石绿是'三致'物质,常被非法使用于渔业生产。水产品和环境中常以孔雀石绿和隐孔雀石绿两种形式同时存在,均具有强致癌性。但由于二者结构差异较大,现有的单克隆抗体只能分别检测样品中单一药物的残留量,难以客观地反映出孔雀石绿和隐孔雀石绿的总残留量。目前同时检测两种结构的免疫分析方法鲜有报道,本文分别制备了针对孔雀石绿和隐孔雀石绿的高特异性单克隆抗体,通过研究混合抗体模式建立了可以同时检测两种物质的酶联免疫分析方法,该方法对孔雀石绿和隐孔雀石绿混合物的半抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50)为3.27 ng/m L,检测线LOD(IC10)为0.24 ng/m L,线性范围为0.62~17.25 ng/m L。本方法的建立对保障水产品安全具有重要意义,也为混合抗体法同时检测两种或多种残留药物提供了方法借鉴。

关键词：孔雀石绿隐孔雀石绿单克隆抗体混合抗体

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孔雀石绿电极催化电位法测定水样中亚硝酸根

环境科学 1994年第3期15卷 77-79页

作者：李贵荣王永生衡阳医学院基础化学教研室

根据稀磷酸介质中，亚硝酸根催化溴酸钾氧化孔雀石绿的反应，对用孔雀石绿选择性电极催化电位法测定痕量亚硝酸根进行了研究。实验表明该方法灵敏度高，选择性好，由于室温下进行操作尤为方便。测定线性范围为０－６μｇＮＯ２－／５０... 详细信息

根据稀磷酸介质中，亚硝酸根催化溴酸钾氧化孔雀石绿的反应，对用孔雀石绿选择性电极催化电位法测定痕量亚硝酸根进行了研究。实验表明该方法灵敏度高，选择性好，由于室温下进行操作尤为方便。测定线性范围为０－６μｇＮＯ２－／５０ｍｌ。方法检出限为１．９×－９ｇ／ｍｌＮＯ２－。应用该方法测定几种环境水样中亚硝酸根含量，结果满意。本法测得值与标准法测得值对照基本一致。变异系数ＲＳＤ＜４．３％。样品加标平均回收率为９９．７％。

关键词：亚硝酸根催化电位法孔雀石绿

孔雀石绿降解菌Enterobacter sp.B-20的分离、鉴定和降解特性研究

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南方水产科学 2018年第1期14卷 50-59页

作者：刘单单李春生杨贤庆陈胜军邓建朝王悦齐李来好大连海洋大学辽宁大连116023 中国水产科学研究院南海水产研究所、农业部水产品加工重点实验室广东广州510300

从受孔雀石绿污染的淡水鱼养殖池塘底泥中,筛选到一株孔雀石绿(C23H25Cl N2,malachite green,MG)高效降解菌,经16S r RNA基因序列及系统进化树分析,初步鉴定为Enterobacter sp.B-20。采用硼氢化钾(KBH4)还原-高效液相色谱法对Enterobact... 详细信息

从受孔雀石绿污染的淡水鱼养殖池塘底泥中,筛选到一株孔雀石绿(C23H25Cl N2,malachite green,MG)高效降解菌,经16S r RNA基因序列及系统进化树分析,初步鉴定为Enterobacter sp.B-20。采用硼氢化钾(KBH4)还原-高效液相色谱法对Enterobacter sp.B-20的孔雀石绿降解特性进行研究。结果显示,孔雀石绿对菌株的生长有一定抑制作用,24 h内菌株对5~20 mg·L^(-1)孔雀石绿降解率超过97%,12 h内对1~40 mg·L^(-1)孔雀石绿降解率超过82%。菌株的孔雀石绿降解能力随着p H的增加而显著提高,最适降解p H为9。Enterobacter sp.B-20具有较强的耐盐性,在10~40 g·L^(-1)的氯化钠(Na Cl)质量浓度下具有稳定的孔雀石绿降解特性。在高浓度金属离子条件下,Enterobacter sp.B-20表现出较强的耐性及稳定的孔雀石绿降解能力,0.1~1 mmol·L^(-1)铁离子(Fe3+)、0.1~0.5 mmol·L^(-1)铜离子(Cu2+)、0.1 mmol·L^(-1)锰离子(Mn2+)、0.1~1 mmol·L^(-1)铅离子(Pb2+)均能显著提高菌株的孔雀石绿降解率。结果表明,Enterobacter sp.B-20具有在复杂养殖水环境下降解孔雀石绿的应用潜力。

关键词：孔雀石绿 Enterobacter sp. 降解特性高效液相色谱系统进化树

孔雀石绿磁性印迹聚合物的制备及其分离应用研究

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分析试验室 2017年第10期36卷 1178-1183页

作者：李永贤古小莉王旭峰王强黎智广李刘冬中国水产科学研究院南海水产研究所农业部水产品加工重点实验室农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室广州510300

以Fe3O4作为磁性载体包覆二氧化硅,并通过表面修饰引入碳碳双键,然后采用分子印迹技术,以孔雀石绿为模板分子,α-甲基丙烯酸和4-乙烯基吡啶作为双功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸脂为交联剂,通过偶氮二异丁腈引发制备孔雀石绿的磁性印迹聚... 详细信息

以Fe3O4作为磁性载体包覆二氧化硅,并通过表面修饰引入碳碳双键,然后采用分子印迹技术,以孔雀石绿为模板分子,α-甲基丙烯酸和4-乙烯基吡啶作为双功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸脂为交联剂,通过偶氮二异丁腈引发制备孔雀石绿的磁性印迹聚合物(MMIPs)并对单体和模板分子比例进行优化;分别采用红外光谱(FTIR)、振动样品磁强计(VSM)和透射电子显微镜(TEM)等仪器分析手段,对MMIPs的物理性质及结构进行表征;采用平衡吸附、动力学吸附和选择性吸附实验考察了材料对孔雀石绿的特异性识别能力;运用Scatchard分析,模拟得出磁性印迹聚合物具有两类不同的结合位点,其解离常数分别为1.469 mg/L和8.518 mg/L,对孔雀石绿的最大表观吸附量分别为2.97 mg/g和6.02 mg/g;将该材料应用在鱼肉样品中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿的分离富集,经过对提取液的磁性固相萃取,在低浓度下(2,5,10μg/kg),孔雀石绿和隐色孔雀石绿的样品加标回收率都在合理范围内。

关键词：孔雀石绿磁性分子印迹聚合物磁性固相萃取高效液相色谱

孔雀石绿脱色菌恶臭假单胞菌菌株M6的分离、鉴定及其生长特性研究

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微生物学通报 2009年第1期36卷 57-63页

作者：李怡何珊曹海鹏杨先乐上海海洋大学农业部渔业动植物病原库上海200090

从养殖池污泥中分离了6株对孔雀石绿具有脱色能力的菌株,经过进一步在孔雀石绿营养肉汤中富集培养及其脱色率的比较,筛选出对孔雀石绿具有较强脱色能力的优良菌株M6。菌株M6在30°C、150r/min条件下对孔雀石绿的脱色率为97.14%,通过革... 详细信息

从养殖池污泥中分离了6株对孔雀石绿具有脱色能力的菌株,经过进一步在孔雀石绿营养肉汤中富集培养及其脱色率的比较,筛选出对孔雀石绿具有较强脱色能力的优良菌株M6。菌株M6在30°C、150r/min条件下对孔雀石绿的脱色率为97.14%,通过革兰氏染色、电镜对其形态进行了观察,用ATB细菌鉴定仪对其进行了生理生化鉴定;通过对其16SrDNA序列进行PCR扩增和测序,与NCBI中收录的与其同源性较高的菌株进行了聚类分析并构建了系统发育树。此外,对其生长特性也进行了研究。实验结果表明,菌株M6革兰氏染色阴性,杆形,端生一根鞭毛,大小约为0.45μm×0.84μm,在孔雀石绿营养琼脂平板上形成的菌落特征为圆形、浅蓝色、粘稠、不易挑取;菌株M6的16SrDNA序列与GenBank基因库中假单胞菌属的细菌菌株的16SrDNA序列有98%~99%的高度同源性,菌株M6与恶臭假单胞菌OW-16(登录号:DQ112328.1)的亲缘关系最近。结合传统的形态与生理生化特性鉴定以及16SrDNA序列分析鉴定的结果,判定菌株M6为恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida)(登录号:EU348741.1)。此外,菌株M6在30°C、150r/min条件下摇床振荡培养的生长曲线为:0h^4h为生长延迟期,4h^64h为对数生长期,64h^80h为稳定期,80h以后为衰亡期;其最适生长pH值为7,最适生长温度为30°C,在转速为50r/min^250r/min条件下,其浓度随转速的增加而增大。

关键词：孔雀石绿恶臭假单胞菌鉴定生长特性

新型竹活性炭对水体违禁药物孔雀石绿吸附性能的影响

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中南大学学报（自然科学版） 2010年第4期41卷 1287-1291页

作者：谭艳芝王秀芳钟国英广东药学院药科学院广东广州510006

为去除水体残留的违禁药物孔雀石绿,采用自制竹活性炭以及3种市售竹炭为吸附剂,将孔雀石绿溶液作为吸附体系,研究27,35和40℃时孔雀石绿在活性炭上的吸附平衡与动力学,检测违禁药物孔雀石绿的残留量,并对自制和市售吸附剂的吸附性能进... 详细信息

为去除水体残留的违禁药物孔雀石绿,采用自制竹活性炭以及3种市售竹炭为吸附剂,将孔雀石绿溶液作为吸附体系,研究27,35和40℃时孔雀石绿在活性炭上的吸附平衡与动力学,检测违禁药物孔雀石绿的残留量,并对自制和市售吸附剂的吸附性能进行对比。研究结果表明:高比表面积活性炭对废水中残留孔雀石绿去除效果明显;Freundlich吸附等温线模型可较好地用于描述孔雀石绿在活性炭上的吸附平衡,Freundlich常数KF随比表面积和孔容的增大而增大,自制竹活性炭性能更佳;准二级方程可用于描述孔雀石绿在活性炭上吸附的最佳动力学模型,并可得到相应动力学参数;对同一种吸附剂,温度对吸附动力学速率常数有较大的影响,在35℃时,速率常数最小。

关键词：活性炭孔雀石绿吸附平衡动力学