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孔雀石绿与牛血清白蛋白的相互作用

物理化学学报 2008年第4期24卷 715-719页

作者：曹团武杨季冬长江师范学院化学及环境科学系重庆408100

运用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱研究了在缓冲溶液中不同温度下孔雀石绿(MG)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.实验结果表明,MG对BSA的内源荧光猝灭为静态猝灭过程.测定了该反应在不同温度下的结合常数KA,KA分别为7.69×104L·mol-1... 详细信息

运用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱研究了在缓冲溶液中不同温度下孔雀石绿(MG)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.实验结果表明,MG对BSA的内源荧光猝灭为静态猝灭过程.测定了该反应在不同温度下的结合常数KA,KA分别为7.69×104L·mol-1(10℃)、5.31×104L·mol-1(20℃)和4.85×104L·mol-1(37℃),MG与BSA以摩尔比1∶1结合.根据F’rster非辐射能量转移理论,求出了37℃时给体(MG)和受体(BSA)之间能量转移效率和结合距离分别为E=0.1635和r=2.30nm.计算出的热力学参数表明,MG和BSA之间的作用力主要是通过氢键和范德华力相互作用.

关键词：孔雀石绿牛血清白蛋白荧光猝灭相互作用

基于核酸适配体及胶体金可视化检测水中孔雀石绿

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光谱学与光谱分析 2020年第3期40卷 831-836页

作者：赵晨洪诚毅林郑忠黄志勇集美大学食品与生物工程学院

孔雀石绿(MG)是一种有毒的三苯甲烷类物质,由于其价格低廉,抑菌效果好,曾在水产养殖中被作为抑菌剂广泛使用。但是长期大量的使用孔雀石绿将会对人体产生致癌、致畸、致突变的危害。传统检测水中孔雀石绿的方法需要复杂的前处理,花费大... 详细信息

孔雀石绿(MG)是一种有毒的三苯甲烷类物质,由于其价格低廉,抑菌效果好,曾在水产养殖中被作为抑菌剂广泛使用。但是长期大量的使用孔雀石绿将会对人体产生致癌、致畸、致突变的危害。传统检测水中孔雀石绿的方法需要复杂的前处理,花费大量时间,且需要昂贵的仪器设备,技术难度高,因此发展一种快速简便的MG检测方法十分必要。核酸适配体是一种能与靶标分子特异性结合的DNA或RNA片段,它具有高特异性、高亲和力、易于化学合成和修饰、稳定性高等特点,是比抗体更为有潜力的靶标识别元素,目前被广泛应用于传感检测中。胶体金(AuNPs)具有高消光系数和表面等离子体共振现象,可用于可视化检测体系中。研究了一种基于胶体金和RNA适配体的可视化快速检测孔雀石绿的方法。当有盐(NaCl)存在时,AuNPs会受到盐的作用而发生团聚,其吸收光谱峰由520 nm处移到690 nm处,溶液颜色由红色变成蓝色。由于RNA适配体可以通过静电作用吸附在AuNPs表面,对AuNPs起到保护作用,可使AuNPs在盐溶液中不发生聚集而呈红色;而当体系中有MG存在时,由于MG与RNA适配体的特异性结合,使得RNA适配体从AuNPs表面脱离,游离的AuNPs遇盐发生聚集呈蓝色。随着MG浓度的升高,520 nm处吸光度值逐渐降低,690 nm处吸光度值逐渐升高,且溶液颜色逐渐由红色变为蓝色。因此,目标物MG的含量可通过肉眼观察溶液颜色或通过可见吸收光谱来确定,整个检测过程不超过1小时。以有或无MG时AuNPs于520及690 nm处吸光度比值的差值Δ(A690/A520)作为检测信号,发现在NaCl浓度为0.2 mol·L^-1、RNA浓度为10μmol·L^-1及AuNPs的浓度为7 nmol·L^-1时,MG浓度的线性范围为0.6~12.5μmol·L^-1[线性方程为Δ(A690/A520)=0.06c-0.01,R2为0.993],检出限为0.04μmol·L^-1(3α/κ,n=9)。该方法对MG检测具有良好的选择性,将此方法应用于养殖水样中孔雀石绿的检测,加标回收率为92%~108%,说明该方法能够准确、灵敏、快速检测水产养殖中的孔雀石绿。

关键词：可视化检测孔雀石绿胶体金 RNA核酸适配体

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孔雀石绿的磁性免疫层析快速检测方法研究

分析试验室 2022年第2期41卷 180-186页

作者：孙虹戴晓娜蔡杨杨陆亦宽卢瑛谢晶上海海洋大学食品学院农业农村部水产品贮藏保险质量安全风险评估实验室上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海201306

开发了一种适用于现场快速检测孔雀石绿(MG)的免疫层析试纸条,在超顺磁性纳米微球上偶联MG单克隆抗体作为检测探针,分别将孔雀石绿完全抗原(MG-BSA)和羊抗鼠IgG喷涂于NC膜的T线和C线。结果发现,T线最佳喷涂量为0.25 mg/mL,抗体最佳偶联... 详细信息

开发了一种适用于现场快速检测孔雀石绿(MG)的免疫层析试纸条,在超顺磁性纳米微球上偶联MG单克隆抗体作为检测探针,分别将孔雀石绿完全抗原(MG-BSA)和羊抗鼠IgG喷涂于NC膜的T线和C线。结果发现,T线最佳喷涂量为0.25 mg/mL,抗体最佳偶联量为20μg,构建的试纸条可在25 min内实现养殖用水及鱼肉组织的定性与定量分析,检出限为1μg/mL,定量限分别为0.60,0.97 ng/mL,对无色孔雀石绿无交叉反应,批内、批间相对标准偏差均孔雀石绿磁性免疫层析条适用于现场快速检测鱼肉或水体中的残留孔雀石绿。

关键词：孔雀石绿磁纳米探针免疫层析快速检测

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孔雀石绿分子印迹电化学传感器的制备与应用

分析化学 2020年第1期48卷 145-152页

作者：韦寿莲吴嘉喻黄象金谢春生肇庆学院环境与化学工程学院

以孔雀石绿(MG)为模板分子,通过电聚合邻苯二胺,在多孔碳纳米纤维(PCNF)修饰的玻碳电极表面制备了可特异性识别MG的分子印迹传感器。采用差分脉冲伏安法(DPV)、循环伏安法(CV)和电化学阻抗法(EIS)表征了传感器的电化学性能,优化了PCNF... 详细信息

以孔雀石绿(MG)为模板分子,通过电聚合邻苯二胺,在多孔碳纳米纤维(PCNF)修饰的玻碳电极表面制备了可特异性识别MG的分子印迹传感器。采用差分脉冲伏安法(DPV)、循环伏安法(CV)和电化学阻抗法(EIS)表征了传感器的电化学性能,优化了PCNF的滴涂量、模板分子与功能单体的摩尔比、CV扫描圈数、洗脱剂、洗脱时间、样品溶液pH值及孵化时间等实验参数。在最佳条件下,DPV峰电流强度与MG浓度在0.10～10.0 nmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.042 nmol/L(3S/k)。此传感器具有良好的选择性、重现性和稳定性。将本方法应用于市售新鲜草鱼及养殖水样品中MG的含量测定,加标回收率为82.0%～96.5%。

关键词：分子印迹电化学传感器电聚合多孔碳纳米纤维孔雀石绿

稀土配合物分子印迹荧光探针的制备及检测孔雀石绿的残留

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光谱学与光谱分析 2022年第3期42卷 808-813页

作者：邵可满傅桂瑜陈素艳洪诚毅林郑忠黄志勇集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021

孔雀石绿是一种人工合成的三苯甲烷类化合物。孔雀石绿的常规检测方法前期处理复杂、耗时长、需要使用大型仪器等缺点导致不能及时的对其进行检测。所以研究出一种能够高效、便捷、快速的检测孔雀石绿残留的方法具有十分重要的意义。分... 详细信息

孔雀石绿是一种人工合成的三苯甲烷类化合物。孔雀石绿的常规检测方法前期处理复杂、耗时长、需要使用大型仪器等缺点导致不能及时的对其进行检测。所以研究出一种能够高效、便捷、快速的检测孔雀石绿残留的方法具有十分重要的意义。分子印迹聚合物(MIPs)是一种多孔隙材料,具有特定的识别位点,可以对特定的目标分子进行识别和吸附。稀土配合物在618 nm处发射荧光,孔雀石绿的最大吸收波长是618 nm,二者重合产生荧光猝灭效应,由此研究出了一种稀土配合物分子印迹荧光探针来检测水产品中的孔雀石绿的方法。利用分子印迹技术固定稀土配合物并吸附水产品中的孔雀石绿,通过在618 nm处检测其荧光猝灭程度来计算水产品中孔雀石绿的具体含量。采用沉淀聚合法,以隐性孔雀石绿为模板,甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,改性二氧化硅为核,稀土荧光配合物Eu(MAA)_(3)Phen为荧光物质,在模板∶单体∶交联剂=1∶4∶10,稀土配合物为15 mg,乙腈60 mL的条件下,制备了一种孔雀石绿分子印迹聚合物,通过对其进行TEM和FTIR的扫描分析验证了已经成功合成稀土配合物分子印迹,检测荧光寿命时发现在未加入孔雀石绿前荧光寿命为1094.11μs,而加入孔雀石绿后的荧光寿命为587.49μs,荧光寿命的减少说明孔雀石绿对MIPs的猝灭属于荧光共振能量转移FRET。在验证MIPs的选择性和吸附性能以后,对孔雀石绿进行检测。结果表明,优化条件下聚合物对孔雀石绿的线性范围为0~20μmol·L^(-1),荧光猝灭系数F_(0)/F与孔雀石绿浓度呈现良好的线性关系,线性方程为F_(0)/F=1.008c+0.344(0.1~1μmol·L^(-1),R^(2)=0.991),F_(0)/F=0.587 c+0.570(1~20μmol·L^(-1),R^(2)=0.999),检出限为0.037μmol·L^(-1)(3σ/S,n=9),将其作为荧光探针成功应用于鱼肉中孔雀石绿的检测,加标回收率在95.61%~102.51%范围。说明研究出的稀土配合物分子印迹荧光探针可以便捷、快速、准确地检测出孔雀石绿的残留量。

关键词：孔雀石绿稀土配合物分子印迹荧光猝灭

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孔雀石绿多克隆抗体的制备与筛选

现代食品科技 2013年第11期29卷 2712-2716,2579页

作者：孙晶玮胡章立深圳大学生命科学学院海洋生物资源与生态环境重点实验室广东深圳518060

设计并成功合成了三种孔雀石绿半抗原,所有半抗原均采用活化酯法分别与血匙兰蛋白(KLH)偶联制备成免疫抗原,与卵清蛋白(OVA)偶联制备成包被抗原。利用所制备的三种免疫原免疫新西兰大耳白兔都获得了高效价的抗孔雀石绿抗体,并将每一种... 详细信息

设计并成功合成了三种孔雀石绿半抗原,所有半抗原均采用活化酯法分别与血匙兰蛋白(KLH)偶联制备成免疫抗原,与卵清蛋白(OVA)偶联制备成包被抗原。利用所制备的三种免疫原免疫新西兰大耳白兔都获得了高效价的抗孔雀石绿抗体,并将每一种抗体都与三种包被抗原进行组合配对,通过间接竞争酶联免疫吸附检测(ELISA)方法筛选出最佳的抗体-包被抗原组合,筛选出的抗体采用Sepharose FF-ProteinA亲和层析柱纯化,采用间接ELISA法测定效价及鉴定特异性。经测定筛选出的抗体效价达到1:12000,IC50值为0.65 ng/mL,交叉反应表明该抗体有较好的特异性,与结构类似物结晶紫的交叉反应率为18.73%,与隐性孔雀石绿及隐性结晶紫的交叉反应率低于10%。本研究为建立快速检测食品中孔雀石绿残留的免疫分析方法奠定了基础。

关键词：孔雀石绿半抗原多克隆抗体酶联免疫吸附检测

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孔雀石绿电化学传感器修饰材料研究进展

分析试验室 2022年第8期41卷 977-983页

作者：谢春生唐青卢婕婕韦寿莲肇庆学院环境与化学工程学院肇庆526061 广东省环境健康与资源利用重点实验室肇庆学院肇庆526061

孔雀石绿(MG)残留的检测对控制兽药MG的使用,促进水产养殖等行业的健康发展具有重要的意义。电化学分析方法因具有可自动化、成本低、仪器组成简单、便于携带与操作简便等优势,广泛应用于水体环境以及水产品中MG残留量的常规分析检测。... 详细信息

孔雀石绿(MG)残留的检测对控制兽药MG的使用,促进水产养殖等行业的健康发展具有重要的意义。电化学分析方法因具有可自动化、成本低、仪器组成简单、便于携带与操作简便等优势,广泛应用于水体环境以及水产品中MG残留量的常规分析检测。通过电极修饰材料构建MG电化学传感器对电化学分析法检测环境或水产品中孔雀石绿残留量具有重要的影响。本文介绍了近年来用纳米材料、分子印迹聚合物材料、抗原与抗体、表面活性剂和金属有机框架(MOFs)材料修饰电极构建孔雀石绿电化学传感器的研究、应用及进展。

关键词：孔雀石绿电化学传感器修饰电极

孔雀石绿单克隆抗体制备和酶联免疫检测方法的建立

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分析化学 2016年第9期44卷 1385-1393页

作者：王宇杨金易徐振林戚平沈玉栋广州市食品检验所华南农业大学食品学院

针对孔雀石绿三苯环特征结构,设计合成1种高质量半抗原。通过偶联载体蛋白、动物免疫和细胞融合,制备出一株高质量的单克隆抗体MG-DA4-C7,亚类为Ig G1,轻链为κ型。通过对包被原浓度、抗体浓度、二抗浓度的优化,建立了孔雀石绿间接竞争... 详细信息

针对孔雀石绿三苯环特征结构,设计合成1种高质量半抗原。通过偶联载体蛋白、动物免疫和细胞融合,制备出一株高质量的单克隆抗体MG-DA4-C7,亚类为Ig G1,轻链为κ型。通过对包被原浓度、抗体浓度、二抗浓度的优化,建立了孔雀石绿间接竞争酶联免疫分析方法。方法半抑制浓度(IC;)为0.96μg/L,线性检测范围(IC;)为0.1;.1μg/L,LOD(IC;)为0.05μg/L,回归方程y=-0.3274lgx+0.4698（R;=0.9891）。本方法特异性高,与代谢物隐孔雀石绿交叉反应小于0.1%,与结晶紫、灿烂绿交叉反应率分别为18.1%和26.5%;实际样品添加回收率为87.3%;07.3%。本方法测定结果经HPLC-MS/MS方法确证,二者相关系数达0.999。本方法可用于鱼类等水产品中孔雀石绿残留的实际检测。

关键词：孔雀石绿半抗原单克隆抗体抗原识别酶联免疫分析

Fe_3O_4-β-环糊精聚合物固相萃取紫外可见光谱法分离分析孔雀石绿

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光谱学与光谱分析 2016年第2期36卷 436-441页

作者：冯刚平文卉朱霞石扬州大学化学化工学院江苏扬州225002 江苏省扬州商务高等职业学校江苏扬州225002

合成并以元素分析、红外及电镜等方法表征Fe_3O_4/羟丙基-β-环糊精聚合物磁性纳米材料(CM-HP-β-CDCP-MNPs),以此作为固相萃取剂,建立磁性固相萃取-紫外可见光谱法分离分析孔雀石绿的新方法。考察影响吸附和洗脱的条件(pH,萃取剂用量,... 详细信息

合成并以元素分析、红外及电镜等方法表征Fe_3O_4/羟丙基-β-环糊精聚合物磁性纳米材料(CM-HP-β-CDCP-MNPs),以此作为固相萃取剂,建立磁性固相萃取-紫外可见光谱法分离分析孔雀石绿的新方法。考察影响吸附和洗脱的条件(pH,萃取剂用量,洗脱剂类型用量,萃取用洗脱时间等)。结果表明:室温下,pH 7.0时,CM-HP-β-CDCP-MNPs能快速定量吸附孔雀石绿(吸附率92%);乙醇在30min内可脱附孔雀石绿(脱附率90%);CM-HP-β-CDCP-MNPs可重复使用5次。在最佳实验条件下,该方法的富集倍数为7.5,检出限为5.6ng·mL^(-1),线性范围为0.08~8.00μg·mL^(-1),测定样品中的孔雀石绿结果令人满意。利用红外光谱初步讨论Fe_3O_4/羟丙基-β-环糊精聚合物纳米材料吸附机理。

关键词：孔雀石绿 Fe_3O_4-β-环糊精聚合物固相萃取光谱法