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奶样无乳链球菌PCR检测敏感性研究

黑龙江畜牧兽医 2008年第2期 73-74页

作者：陈雪梅宋慧郝葆青吴润秦天莺西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041

在引起牛乳腺炎的病原菌中,牛无乳链球菌(多为Ⅲ型无乳链球菌)是最主要的病原菌之一.该病原菌的传染性高、扩散性强.实验室鉴别牛无乳链球菌主要采用血平板培养和各种细菌学检测方法.近年来,国内外都较普遍地采用易操作、快速的PCR病原... 详细信息

在引起牛乳腺炎的病原菌中,牛无乳链球菌(多为Ⅲ型无乳链球菌)是最主要的病原菌之一.该病原菌的传染性高、扩散性强.实验室鉴别牛无乳链球菌主要采用血平板培养和各种细菌学检测方法.近年来,国内外都较普遍地采用易操作、快速的PCR病原菌培养检测方法.本研究基于无乳链球菌16S rRNA亚基的DNA序列的特异性,探索PCR扩增直接检测奶样无乳链球菌方法的敏感性.

关键词：无乳链球菌 PCR检测敏感性奶样平板培养细菌学检测 DNA序列 PCR扩增

一个大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)奶样的成分和营养分析

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北京大学学报（自然科学版） 1998年第2期34卷 350-351页

作者：潘文石朱小健王大军北京大学生命科学学院

一个大熊猫（Ａｉｌｕｒｏｐｏｄａｍｅｌａｎｏｌｅｕｃａ）奶样的成分和营养分析潘文石２，３）ＯｌａｖＴ．Ｏｆｔｅｄａｌ３）朱小健２）ＳａｒａＣｈｉｌｄｓ３）王大军２）ＤｅｖｒａＧ．Ｋｌｅｉｍａｎ３，２）（２）北京大学生... 详细信息

一个大熊猫（Ａｉｌｕｒｏｐｏｄａｍｅｌａｎｏｌｅｕｃａ）奶样的成分和营养分析潘文石２，３）ＯｌａｖＴ．Ｏｆｔｅｄａｌ３）朱小健２）ＳａｒａＣｈｉｌｄｓ３）王大军２）ＤｅｖｒａＧ．Ｋｌｅｉｍａｎ３，２）（２）北京大学生命科学学院，北京，１００８７１；３...

关键词：大熊猫奶样营养化学成分

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基于大缸奶样检测两病的应用及挑战

中国动物传染病学报 2022年第2期30卷 203-207页

作者：陈颖钰李翔郭爱珍国家动物结核病专业实验室(武汉) 武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070

牛结核病和布鲁菌病在民间俗称“两病”,不仅是影响奶牛业发展的重要疫病,还给公共卫生也带来巨大威胁。随着“两病”控制及净化力度的不断加大,对两病的安全高效检测及监测手段也提出了更高的要求。奶样检测具有无应激、适合监测、降... 详细信息

牛结核病和布鲁菌病在民间俗称“两病”,不仅是影响奶牛业发展的重要疫病,还给公共卫生也带来巨大威胁。随着“两病”控制及净化力度的不断加大,对两病的安全高效检测及监测手段也提出了更高的要求。奶样检测具有无应激、适合监测、降低成本等天然的优势;基于大缸奶样的检测方法作为群体监测的重要方法在国外很早就有应用,不仅用作常规的监测,还能够作为预警,对新发传染病的传入做出快速反应。我国基于大缸奶样的牛病检测刚刚起步,很多养殖企业或相关单位对该方法还不甚了解。本文从大缸奶样检测的优势、可行性及应用现状等方面进行了介绍,以期为基于大缸奶样检测的临床实践提供指导。

关键词：牛结核病牛布鲁菌病奶样检测

表面光引发聚合制备功能化磁性微球及选择性萃取奶样中兽药残留 ——Candidate: Zhang Jing Supervisor: Prof. Lv Yun-kaiacademic Degree Applied For: Master's Degree

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表面光引发聚合制备功能化磁性微球及选择性萃取奶样中兽药残留 ...

作者：张静河北大学

学位级别：硕士

光引发自由基聚合法能够连续引发单体聚合,制备新的嵌段聚合物。本文采用光引发自由基聚合法制备了可以快速净化样品基质和选择性富集分析物的功能化磁性微球,并建立了利用磁分散固相萃取-高效液相色谱法检测奶样中氟喹诺酮类和氯霉素... 详细信息

光引发自由基聚合法能够连续引发单体聚合,制备新的嵌段聚合物。本文采用光引发自由基聚合法制备了可以快速净化样品基质和选择性富集分析物的功能化磁性微球,并建立了利用磁分散固相萃取-高效液相色谱法检测奶样中氟喹诺酮类和氯霉素类药物残留的方法。第一章:本文简述了磁性微球的制备方法和分子印迹磁性微球的制备方法及应用,介绍了功能化磁性微球及磁分散固相萃取技术的研究进展。第二章:本文采用光引发自由基聚合的方法,制备了金属配位印迹磁性微球。首先用溶剂热法制备了Fe3O4磁性纳米粒子,然后在Fe3O4粒子表面包覆硅胶,使Fe3O4微球表面硅烷化,接着在微球表面接枝氨基硅氧烷;通过氨基微球的表面氨基与对氯甲基苯甲酰氯(CMBC)酰氯基团发生取代反应,将CMBC接到氨基微球表面;再通过CMBC上的氯甲基与二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDCT)反应,获得了表面带有引发剂的磁性微球(iniferter-M);再以恩诺沙星-Co(II)为模板分子,衣康酸(ITA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,在紫外光辐射下,经表面引发剂引发聚合,生成磁性微球表面印迹层。通过透射电镜、红外和热重分析表征了微球的形貌特征和接枝率,以及通过静态吸附和竞争吸附实验考察了磁性微球作为吸附剂的吸附容量和选择性。结果表明,该吸附剂具有较好的分散性、选择性和较大的吸附容量。在最佳的萃取条件下,采用磁分散固相萃取-高效液相色谱法测定奶样中氟喹诺酮类药物残留,其平均回收率为89.6-100.8%,检出限和定量限分别是1.18-2.05μg kg-1和3.94-6.82μg kg-1。第三章:采用表面光引发自由基聚合法制备了系列磁性复合微球。采用不同性质的功能单体,即丙烯酰胺(AM)、甲基丙烯酸(MAA)、衣康酸(ITA)和甲基丙烯酸甲酯(MMA),经表面引发剂的光引发聚合,分别合成了磁性复合微球(Fe3O4/PAM、Fe3O4/PITA、Fe3O4/PMAA、Fe3O4/PMMA)。Fe3O4/PMMA磁性微球同衣康酸单体继续光引发聚合,制备了表面嵌段聚合层的磁性复合微球(Fe3O4/P(MMA-co-ITA))。经透射电镜、红外、热重和粉末X射线衍射分析,结果表明聚合物层成功地包覆在Fe3O4纳米粒子表面,呈现明显核-壳结构特征的微球,其粒径在230 nm左右,聚合物层厚度为15-20nm;Fe3O4/PMMA的接触角为108度左右,而Fe3O4/P(MMA-co-ITA)的接触角为82度,表明磁性复合微球表面具有较好的亲水性且内层具有一定的疏水性,这是一种典型限进材料特性。研究结果表明表面光引发自由基聚合法是在磁性微球表面制备不同性质的嵌段型聚合物层的有效方法。第四章:基于光引发转移终止剂技术,制备了粒径可控的限进介质-分子印迹磁性微球(RAM-MIMMs)。以Fe3O4磁性纳米粒子为内核,在其表面包覆硅胶,再接枝氨基、氯甲基及铜试剂制备iniferter;再以氟苯尼考(FF)为模板分子,ITA为功能单体,EDMA为交联剂,无水乙醇为溶剂,在125 W紫外辐射下,iniferter引发聚合制备了分子印迹磁性微球;再同甲基丙烯酸缩水甘油酯聚合,开环后,获得一种选择性吸附分析物,排阻生物大分子的外表面亲水的限进介质-分子印迹磁性微球。通过透射电镜、红外、热重与吸附实验对其形貌及选择性进行表征。结果表明,Fe3O4粒子的平均粒径是230 nm左右,其包覆的厚度在20-30nm范围内。该微球表现出高的选择性(1.68)且其亲水性外层具有水溶性和排阻蛋白特性。将微球应用于磁分散萃取-高效液相色谱法测定检测牛奶中氯霉素类药物的残留,其三种氯霉素类药物(甲砜霉素、氟苯尼考和氯霉素)的平均回收率为85.4-94.7%,相对标准偏差为2.95-4.97%。检出限和定量限分别为4.4-18.31μg kg-1和14.66-61.02μg kg-1。该方法成功应用于快速净化和选择性富集奶样中的氟苯尼考。

关键词：光引发自由基聚合功能化磁性微球磁分散固相萃取奶样氟喹诺酮类药物氯霉素类药物

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奶样不同处理方式对DHI结果的影响

中国奶牛 2014年第23期 60-61页

作者：伍佰鑫雷虹张翠永李昊帮孙鏖刘海林燕海峰易康乐湖南省畜牧兽医研究所长沙410131

为检验奶样不同处理方式对DHI结果的影响,将奶样分为直接测定、只摇匀、只预热、预热摇匀四组,进行乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和体细胞数测定,发现减少部分处理环节虽然对乳蛋白率和乳糖率无影响,但对乳脂率和体细胞数的影响极大。测定... 详细信息

为检验奶样不同处理方式对DHI结果的影响,将奶样分为直接测定、只摇匀、只预热、预热摇匀四组,进行乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和体细胞数测定,发现减少部分处理环节虽然对乳蛋白率和乳糖率无影响,但对乳脂率和体细胞数的影响极大。测定乳成分时,奶样必须预热摇匀;测定体细胞数时,奶样不要预热,但需摇匀。由此可见,目前奶样的测定方法(预热、摇匀之后既测乳成分又测体细胞数)会导致体细胞数偏低(低于实际数)。应在奶样未预热之前先摇匀测体细胞数,然后再预热、摇匀测乳成分。

关键词： DHI 奶样处理方式

磁性微球表面光引发聚合制备金属配位印迹层及选择性富集奶样中氟喹诺酮类药物残留

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食品安全质量检测学报 2016年第1期7卷 276-284页

作者：张静吕运开于丽青河北大学化学与环境科学学院保定071002

目的发展一种金属配位印迹磁性微球的制备方法,并用于奶样中氟喹诺酮类药物残留的选择性富集。方法采用简便的溶剂热法合成磁性纳米粒子,再采用溶胶-凝胶法制备磁性硅胶微球,然后在磁性硅胶微球表面接枝光引发剂,在125 W紫外灯辐射下合... 详细信息

目的发展一种金属配位印迹磁性微球的制备方法,并用于奶样中氟喹诺酮类药物残留的选择性富集。方法采用简便的溶剂热法合成磁性纳米粒子,再采用溶胶-凝胶法制备磁性硅胶微球,然后在磁性硅胶微球表面接枝光引发剂,在125 W紫外灯辐射下合成恩诺沙星-Co（Ⅱ）配位印迹层,并用于磁分散萃取奶样中恩诺沙星、环丙沙星和洛美沙星。结果该方法的加标回收率为89.6%~100.8%,相对标准偏差为1.4%~5.5%,其中环丙沙星的检出限和定量限分别为1.72μg/kg和5.74μg/kg,洛美沙星的检出限和定量限分别为2.05μg/kg和6.82μg/kg,恩诺沙星的检出限和定量限分别为1.18μg/kg和3.94μg/kg。结论该样品处理方法是一种选择性好、简单快速的分离检测奶样中氟喹诺酮类药物残留的方法。

关键词：分子印迹磁性微球金属配位磁分散萃取奶样氟喹诺酮类药物

一种检测奶样中布鲁氏菌抗体免疫层析方法的建立

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中国动物检疫 2019年第5期36卷 68-73页

作者：肖妍李蓉蓉霍蕾董志珍张俊哲赵丹杨若松郭鹏天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心天津300461 北京维德维康生物技术有限公司北京100095

通过制备脂多糖(LPS)并将其作为检测抗原,建立了一种检测奶样中布鲁氏菌抗体的酶联免疫层析方法。通过对处理方法和反应条件的优化,制备出敏感性高、特异性强的布鲁氏菌抗体检测试纸条。该试纸条敏感性为98.0%,抗体滴度为1:2~1:8,特异性... 详细信息

通过制备脂多糖(LPS)并将其作为检测抗原,建立了一种检测奶样中布鲁氏菌抗体的酶联免疫层析方法。通过对处理方法和反应条件的优化,制备出敏感性高、特异性强的布鲁氏菌抗体检测试纸条。该试纸条敏感性为98.0%,抗体滴度为1:2~1:8,特异性为96.0%,且与其他常见病原无交叉反应,批内、批间重复性良好。保存期加速试验显示,该试纸条在2~30℃下可保存12个月;符合率验证显示,该方法与标准奶样的符合率达94.9%。上述结果表明,该检测方法具有敏感性高、特异性强以及方便、快捷等优点,适用于现场大批量检测,因而可应用于奶牛场布鲁氏菌病的快速诊断。

关键词：布鲁氏菌免疫层析抗体奶样