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天门冬氨酸氨基转移酶（AST）参考方法的建立及临床应用

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天门冬氨酸氨基转移酶（AST）参考方法的建立及临床应用

作者：罗晓旭山西医科大学

学位级别：硕士

目的:建立37℃天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的改良参考方法（不含磷酸吡哆醛）,优化实验条件并对其最佳测定模式进行探讨,对最终建立的参考方法进行方法学评价,探讨AST改良参考方法在室间质评靶值中的应用。方法:根据国际临床化学与检... 详细信息

目的:建立37℃天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的改良参考方法（不含磷酸吡哆醛）,优化实验条件并对其最佳测定模式进行探讨,对最终建立的参考方法进行方法学评价,探讨AST改良参考方法在室间质评靶值中的应用。方法:根据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）公布的第五部分参考测量程序,即AST参考测量程序,建立我室的37℃ AST改良参考方法并对其实验条件进行优化;依据读点时间周期及延迟期混匀时间对以上建立的AST参考方法设计A～I共9种不同的测定模式,检测时间段均选取延迟反应时间90 s后连续读点180 s,对样本进行测定,每种模式每天重复测定2次,连续测定20天,分别计算不同测定模式下的AST测量结果总不精密度;按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）文件对上述建立的我室AST改良参考方法进行精密度、准确度、线性范围的方法学性能评价,其中精密度评价参考NCCLS EP-5A文件、准确度评价参照NCCLS EP-15A文件、线性范围评价参考NCCLS EP-6A文件,判断是否符合方法学要求;在建立的参考方法符合方法学评价要求的基础上,用建立的参考方法对2017年山西省临床检验中心的10个样本及2019年卫生部临床检验中心的5个样本的AST进行测定,将所得值与EQA公议靶值进行直线相关回归分析,计算偏倚,判断结果是否在卫生部临床检验中心规定的1/2允许总误差（TEa）范围内。结果:1.岛津紫外分光光度计、高精密度分析天平、雷磁pH计均被山西省质量监督局检定合格。对改良参考方法反应条件的优化:（1）比色杯内温度最接近37℃时的分光光度计温控器所示温度为37.5℃,且稳定性好;（2）比色杯内温度达37℃所需升温时间为360 s;各个量称移液器的测量结果均在各自允许误差范围内。2.9种不同测定模式测量AST的总不精密度:A-I共9种不同测定模式的AST测量总不精密度分别为 0.80%、0.69%、1.31%、1.21%、0.7 9%、1.55%、1.30%、0.74%、1.41%。3.对上述建立的AST改良参考方法进行方法学评价,两个高低浓度质控品的批内精密度（CV批内）均＜1%,总精密度（CV.总）均＜2%;与罗氏c.f.a.s校准液的靶值进行比较,偏倚在不确定度要求范围内;在4-340 U/L范围内呈线性。***的EQA公议靶值与建立的参考方法测定值具有良好的相关性,2017、2019年室间质评样本的AST项目的回归方程分别为Y2017=1.0106X+1.1078,R2=0.9988、Y2019=1.0219X—0.7828,R2=0.9999。所有批号的相对偏倚均在卫生部临床检验中心规定的1/2 TEa内。结论:测定模式的差异对AST测量结果有明显的影响,读点时间周期为15 s、延迟期混匀时间为45 s的测定模式B的AST测量精密度最好;参考方法各性能指标参数（准确度、精密度、线性范围）均符合方法学要求,本室的AST改良参考方法成功建立;参考方法与EQA公议靶值的相关性满足临床需要,EQA公议靶值现阶段在一定程度上可用于我国EQA计划。

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶参考方法测定模式方法学评价室间质量评价

天门冬氨酸氨基转移酶“改良参考方法”的建立及其用于测定结果的可比性研究

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检验医学 2011年第10期26卷 662-666页

作者：庄俊华郑松柏王建兵黄宪章马艳徐宁周华友陈茶广东省中医院检验医学部广东广州510120

目的应用不含磷酸吡哆醛的参考方法评价不同实验室间天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定结果的可比性。方法参照国际检验医学溯源联合会(JCTLM)推荐的参考方法及日本临床化学会相关文件,建立不含磷酸吡哆醛的AST参考方法。根据美国临床实验... 详细信息

目的应用不含磷酸吡哆醛的参考方法评价不同实验室间天门冬氨酸氨基转移酶(AST)测定结果的可比性。方法参照国际检验医学溯源联合会(JCTLM)推荐的参考方法及日本临床化学会相关文件,建立不含磷酸吡哆醛的AST参考方法。根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)系列文件对该方法的精密度、正确度、线性范围等性能进行评价。应用该参考方法对新鲜血清进行赋值作为校准品校准广州地区10家实验室的常规检测系统,比较校准前、后新鲜血清、能力验证样本以及市售制备物质测定结果间的偏倚,进行检验结果的可比性评价。结果改良参考方法的批内不精密度酶参考品结果均在其不确定度允许范围内,参加参考实验室网络赋值计划测定结果与均值比较在等效限内。改良AST参考方法分析测量范围上限为413.6 U/L。校准前新鲜血清测定结果与参考方法测定结果之间偏倚>20%的所有11个测定结果中,有10个测定结果来源于用理论K值计算酶活性的检测系统;校准前新鲜血清组最大偏倚为-25.0%,平均偏倚为9.3%;使用改良参考方法定值的酶校准品校准后,最大偏倚降为12.3%,平均偏倚降为2.1%。而能力验证样本和市售制备物中AST测定结果的平均偏倚在校准前后则变化不大,市售制备物组平均偏倚反而略有升高。结论应用参考方法定值的新鲜血清作为校准品进行校准是实现不同检测系统检验结果一致性和可比性的有效途径,非新鲜血清样本存在不同程度的基质效应。

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶磷酸吡哆醛校准参考方法

天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）37℃参考测定程序的建立及其临床应用

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天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）37℃参考...

作者：齐志宏中国协和医科大学

学位级别：硕士

背景和目的测定血清或其他组织中一些酶的水平对很多疾病的诊断、预防及病情的监测具有重要意义。酶的测定方法目前有两种，一种利用免疫方法测定酶的质量，另一种用生化方法测定酶的催化活性。测定酶的催化活性是最为常用方法，... 详细信息

背景和目的测定血清或其他组织中一些酶的水平对很多疾病的诊断、预防及病情的监测具有重要意义。酶的测定方法目前有两种，一种利用免疫方法测定酶的质量，另一种用生化方法测定酶的催化活性。测定酶的催化活性是最为常用方法，它具有迅速、灵敏、成本低等特点。但由于酶的催化活性不仅决定于酶的含量，还受多种因素的影响，如所用底物的性质及浓度、反应介质的PH、温度、离子强度、激活或抑制因子等，因此对同一酶测定存在多种参考范围，各实验室间的结果缺乏可比性，甚至有时会引起临床上的误诊。国内各临床实验室间测定酶活性结果的差异较大，明显高于一般小分子化合物的测定结果。为了提高酶测定实验的准确性和精密度，使酶测定结果在方法上，实验室间有可比性，消除参考范围的多重混乱，以利于临床应用，开展酶测定的标准化工作势在必行。近20年来，国内外主要从三个方面开展了酶测定的标准化活动：一是提出使用参考测定程序(参考方法);二是用参考方法定值的酶参考物去校准常规方法;三是建立参考实验室网络。ALT和AST是临床化验中常规项目，测定结果的准确与否对临床诊断有很大影响。本研究的目的是依据IFCC推荐的AST和ALT(37℃)参考测定程序来建立这两种酶活性(37℃)测定的参考方法，并探讨在常规试剂中加入磷酸吡哆醛(PPA)的测定方法的可行性。研究对象与方法 1．研究对象：分为四组：肝脏病组363例：急性肝炎77例(男39女38)、慢性肝炎118例(男60女58)、肝硬化87例(男45女42)、肝癌78例(男40女38);心脏病组180例：急性心肌梗死(AMI)102例(男50女52)、心绞痛78例(男40女38);透析组78例(男40女38)及其表观健康人群223例(男120女103)。

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶参考方法方法学评价 PPA 常规方法

孕早期白细胞计数、丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶水平与妊娠期糖尿病的相关性

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中国医学科学院学报 2016年第3期38卷 283-287页

作者：赵丽丽李伟平凡马良坤聂敏中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院内分泌科国家卫生和计划生育委员会重点实验室北京100730 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科北京100730

目的探讨孕早期白细胞（WBC）计数、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平与妊娠期糖尿病（GDM）发生的相关性。方法纳入GDM孕妇725人,糖耐量正常（NGT）孕妇935人,详细记录受试者孕前体重、身高,于孕8～12周检测... 详细信息

目的探讨孕早期白细胞（WBC）计数、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平与妊娠期糖尿病（GDM）发生的相关性。方法纳入GDM孕妇725人,糖耐量正常（NGT）孕妇935人,详细记录受试者孕前体重、身高,于孕8～12周检测WBC、ALT和AST水平,孕24～28周检测血糖、胰岛素水平。比较两组孕妇孕早期WBC计数、ALT和AST水平,回顾性分析孕早期WBC、ALT和AST水平与孕中期血糖和胰岛素水平及GDM发生的相关性。结果 GDM组受试者的WBC计数[9.41（8.15,10.84）×10^9/L比9.04（7.64,10.37）×10^9/L,P=1.0×10^-5]和ALT水平[18.00（12.00,30.00）U/L比16.00（11.00,26.00）U/L,P=0.004]明显高于NGT组,两组受试者的AST水平差异无统计学意义[41.00（26.00,43.00）U/L比41.00（23.00,43.00）U/L,P=0.588]。Logistic回归分析结果显示,校正年龄、孕前BMI、血压和糖尿病家族史后,WBC计数升高能明显增加GDM的发病风险（OR=1.119,P=0.001）,根据ROC曲线得出患GDM的WBC计数最佳临界值为7.965×10^9/L（AUC 0.566,P=1×10^-5）,敏感性为79.4%,特异性为31.3%。多元线性回归分析结果显示,稳态胰岛素评估模型胰岛素抵抗指数与WBC计数成正相关（B=0.051,P=0.022,R2=0.083）;口服50 g糖后1 h血糖（B=0.044,P=0.001,R2=0.044）和空腹真胰岛素（B=0.214,P=0.032,R2=0.066）与孕早期WBC计数成正相关;100 g口服葡萄糖耐量试验（OGTT）后1 h真胰岛素与孕早期AST成正相关（B=0.616,P=1.85×10^-5,R2=0.052）;100 g OGTT后2 h真胰岛素与ALT（B=0.148,P=0.027）和AST（B=0.936,P=3.71×10^-8）成正相关（R2=0.077）;100 g OGTT后3 h真胰岛素与孕早期ALT（B=0.189,P=0.002）和AST（B=0.688,P=7.25×10^-6）成正相关（R2=0.067）。结论孕早期WBC计数升高能明显增加GDM的发病风险,有望成为GDM发病的预测指标之一。

关键词：妊娠期糖尿病白细胞计数丙氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶

天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶的应用价值与研究进展

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国际检验医学杂志 2006年第12期27卷 1102-1103,1106页

作者：魏晨玲张淑兰石家庄市中医院检验科 050051

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)线粒体同工酶自1950年被发现以来,在检测、临床应用等各方面经历了一系列的发展更新,其测定方法可达到精确、微量、定量分析。现就m-AST的生物学特性、实验室检测以及在肝脏、心脏及肾脏疾病等临床应用中的最... 详细信息

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)线粒体同工酶自1950年被发现以来,在检测、临床应用等各方面经历了一系列的发展更新,其测定方法可达到精确、微量、定量分析。现就m-AST的生物学特性、实验室检测以及在肝脏、心脏及肾脏疾病等临床应用中的最新进展进行综述,使AST线粒体同工酶项目能为临床应用提供更多有价值的参考信息。

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶类肝疾病

线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶测定及其应用价值

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中国实验诊断学 2005年第5期9卷 770-772页

作者：孙步彤盛传伦关勇孙淑艳荣墨克吉林大学中日联谊医院吉林长春130033 吉林大学第一医院

目的建立免疫抑制法测定各类心脏和肝脏疾病的m-AST,观察其应用价值.方法提取纯化心肌细胞质型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶(s-AST)酶蛋白,免疫羊制备抗人s-AST抗体,应用免疫抑制原理抑制标本中的s-AST活性,测定m-AST活性.结果血清m-AST... 详细信息

目的建立免疫抑制法测定各类心脏和肝脏疾病的m-AST,观察其应用价值.方法提取纯化心肌细胞质型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶(s-AST)酶蛋白,免疫羊制备抗人s-AST抗体,应用免疫抑制原理抑制标本中的s-AST活性,测定m-AST活性.结果血清m-AST参考值4～15u/L,急性心肌梗死60～310、陈旧心肌梗死10～20、无梗死冠心病7～15、无心衰7～18、心衰8～25、心包炎10～16、心肌炎18～30 u/L;急性肝炎56～410、慢迁肝炎12～17、慢活肝炎18～90、有腹水肝硬化18～50、无腹水肝硬化12～30、原发性肝癌11～64、继发性肝癌16～95、肝脓肿15～21 u/L.有坏死的心、肝病m-AST明显升高.非心肝性恶性肿瘤和其他疾病基本在参考值范围内.结论测定m-AST可协助判定心、肝疾病的严重性和有无坏死.

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶线粒体天门冬氨酸氨基转移酶同工酶酶蛋白酶免疫抑制法

血清天门冬氨酸氨基转移酶测定在精神科的临床应用价值探讨

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预防医学论坛 2006年第2期12卷 202-203页

作者：于桂芝何敬平姬玉平山东省济宁市市中区卫生防疫站山东济宁272035 山东省济宁市精神病防治院山东济宁272051

[目的]探讨天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定在精神科的临床应用价值。[方法]对2004年4～7月住院精神病人的ALT、AST、心电图（EKG）进行检测分析。[结果]检测322例住院精神病人，治疗期间血清AST的异常率为40．68％，丙氨酸氨基转移酶... 详细信息

[目的]探讨天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定在精神科的临床应用价值。[方法]对2004年4～7月住院精神病人的ALT、AST、心电图（EKG）进行检测分析。[结果]检测322例住院精神病人，治疗期间血清AST的异常率为40．68％，丙氨酸氨基转移酶（ALT）的异常率为13．35％，EKG的异常率为23．6％。AST异常率，不同疗程之间的差异有统计学意义；使用传统的抗精神病药物者为61．65％，使用新一代抗精神病药者为25．93％；联合用药者为48．97％，单独用药者为28．13％。[结论]AST测定可早期反映心肌受损的程度，可以作为判断精神科药物毒性对心脏．功能影响的敏感指标。

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶精神病

心脏病患者血清天门冬氨酸氨基转移酶及其同工酶检测的临床意义

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中国实用医药 2016年第4期11卷 21-22页

作者：许浩生佛山市顺德区大良医院检验科 528300

目的探讨心脏病患者血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及其线粒体同工酶(m-AST)检测的临床意义。方法 80例心脏病患者作为观察组,80例健康查体者作为对照组,测定两组血清AST及m-AST水平,计算m-AST/AST值,行组间统计学对比并分析其临床意义... 详细信息

目的探讨心脏病患者血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及其线粒体同工酶(m-AST)检测的临床意义。方法 80例心脏病患者作为观察组,80例健康查体者作为对照组,测定两组血清AST及m-AST水平,计算m-AST/AST值,行组间统计学对比并分析其临床意义。结果观察组患者血清AST、m-AST水平高于对照组,m-AST/AST值亦高于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论心脏病患者血清AST、m-AST水平及m-AST/AST值与心肌细胞的损伤程度有关,可作为心脏疾病诊断以及检验治疗效果的辅助指标。

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶同工酶心脏病

血清天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶检测对酒精性肝病的诊断价值

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中国实验诊断学 2005年第6期9卷 990-991页

作者：荆成宝赵斌沈锋程晓军安康市中心医院检验科陕西安康725000

近年来,随着人们生活水平的提高,酒精性肝病(ALD)的发病率逐年增加.过去诊断ALD常用的生化指标如г-谷氨酰基转移酶(GGT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等缺乏特异性.近来国内外对天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工... 详细信息

近年来,随着人们生活水平的提高,酒精性肝病(ALD)的发病率逐年增加.过去诊断ALD常用的生化指标如г-谷氨酰基转移酶(GGT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等缺乏特异性.近来国内外对天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶(m-AST)的研究较多.本研究用免疫抑制法对ALT患者血清中m-AST进行了检测,并与GGT、AST、ALT、TBA等指标进行了比较,评价其对ALD的诊断价值.

关键词：天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶酒精性肝病同工酶检测诊断价值丙氨酸氨基转移酶(ALT) 血清 r-谷氨酰基转移酶 m-AST 免疫抑制法