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液质联用同时测定大鼠尿液中6种苯二氮卓类药物

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应用化学 2022年第2期39卷 340-348页

作者：易小翠易伟雷霖曾皓蒋一峰李维理陈春林宜春学院化学与生物工程学院宜春336000 宜春市公安局刑事科学技术研究所宜春336000

建立高效液相色谱串联质谱法同时测定大鼠尿液中的6种苯二氮卓类药物(BZDs)。以乙酸乙酯为萃取溶剂,经液-液萃取前处理后检测。以地西泮为内标,流动相为甲醇-0.01%甲酸+5 mmol/L甲酸铵,梯度洗脱,柱温为40℃;流速为0.3 mL/min;进样量为2... 详细信息

建立高效液相色谱串联质谱法同时测定大鼠尿液中的6种苯二氮卓类药物(BZDs)。以乙酸乙酯为萃取溶剂,经液-液萃取前处理后检测。以地西泮为内标,流动相为甲醇-0.01%甲酸+5 mmol/L甲酸铵,梯度洗脱,柱温为40℃;流速为0.3 mL/min;进样量为2μL,质谱采用电喷雾离子源正离子模式(ESI^(+))。8-溴-1-甲基-6-吡啶-2-基-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a]-1,4苯并二氮杂卓(Pyrazolam)、氯硝西泮(5-[2-氯苯基]-l,3-二氢-7-硝基-2H-1,4-苯二氮卓-2-酮,Clonazepam)、8-溴-6-[2-氟苯基]-1-甲基-4H-[1,2,4]三唑[4,3a][1,4]苯并二氮杂卓(Flubromazolam)、甲氯西泮((S)-5-[2-氯苯基]-1,3-二氢-3-甲基-7-硝基-2H-1,4-苯并二氮杂卓-2-酮,Meclonazepam)、7-溴-5-[2-氟苯基]-1,3-二氢-2H-1,4-苯并二氮杂-2-酮(Flubromazepam)和2′-氯地西泮(7-氯-5-[2-氯苯基]-1,3-二氢-1-甲基-2H-1,4-苯并二氮杂卓-2-酮,Diclazepam)共6种BZDs在20~2000 ng/mL范围内均有良好的线性,日内和日间精密度均在0.70%~5.60%之间,准确度均在87.00%~103.00%,提取回收率基本均>80.00%,稳定性良好。该方法快速、简便、灵敏和准确,适用于大鼠尿液中6种BZDs的同时测定。

关键词：苯二氮卓类药物大鼠尿液高效液相串联质谱

大鼠尿液中蝶呤类化合物及氨基酸分析新方法的研究

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大鼠尿液中蝶呤类化合物及氨基酸分析新方法的研究

作者：孙玄南昌大学

学位级别：硕士

国内外文献表明,蝶呤类化合物及氨基酸对生物体新陈代谢有着重要的意义,人体体液中蝶呤类化合物或氨基酸含量的变化,有可能为癌症的早期诊断提供重要的参考价值。本文从生物体中蝶呤类化合物和氨基酸的分析技术、样品前处理以及两者与... 详细信息

国内外文献表明,蝶呤类化合物及氨基酸对生物体新陈代谢有着重要的意义,人体体液中蝶呤类化合物或氨基酸含量的变化,有可能为癌症的早期诊断提供重要的参考价值。本文从生物体中蝶呤类化合物和氨基酸的分析技术、样品前处理以及两者与疾病相关性研究等方面进行了综述。在此基础上,建立了同时测定蝶呤类化合物和氨基酸的离子色谱荧光法和高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法,然后采用离子色谱荧光法对大鼠膀胱癌模型组和对照组进行尿液分析,寻找可能的膀胱癌肿瘤标志物。其主要研究成果如下:1.建立了大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的离子色谱荧光分析法。大鼠尿液利用三氯乙酸除蛋白后,采用MCX固相萃取小柱进行净化,然后用离子色谱荧光法进行测定。3种物质的仪器检出限分别为0.08,0.3和0.002μmol/L,加标回收率在71.2%~121.7%之间,RSD小于11.7%。2.建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、蝶呤-6-羧酸、酪氨酸和色氨酸的高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（HPLC-MS/MS）的分析方法。大鼠尿液除去蛋白后,稀释50倍直接进样分析,采用基质标准曲线法消除基质的影响。5种物质的仪器检出限分别为1.6,1.5,2.2,0.9和1.0 ng/m L,加标回收率在89.0%~107.0%之间,RSD在0.30%~5.19%之间。3.将离子色谱荧光法应用于对照组和膀胱癌模型组大鼠尿液中色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的同时测定。测定结果显示3种物质在膀胱癌发生发展过程中呈现出不同的发展趋势,其中色氨酸和蝶呤-6-羧酸有可能成为膀胱癌潜在的标志物。

关键词：黄蝶呤异黄蝶呤蝶呤-6-羧酸酪氨酸色氨酸大鼠尿液膀胱癌模型离子色谱高效液相色谱-串联质谱法

藏药仁青常觉中砷在大鼠尿液中的HPLC-ICP-MS研究

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药物分析杂志 2019年第2期39卷 263-271页

作者：王英锋李中锋热增才旦张兰首都师范大学分析测试中心北京100048 青海大学医学院中藏药研究中心西宁810001

目的:采用HPLC-ICP-MS法对藏药仁青常觉中砷(As)在大鼠体内代谢产物—尿液中的形态进行研究。方法:采用Dionex Ion Pac AS 19阴离子色谱柱,以2 mmol·L^(-1)磷酸二氢钠-0.2 mmol·L^(-1)乙二胺四乙酸二钠-10 mmol·L^(-1)无水乙酸钠-3 m... 详细信息

目的:采用HPLC-ICP-MS法对藏药仁青常觉中砷(As)在大鼠体内代谢产物—尿液中的形态进行研究。方法:采用Dionex Ion Pac AS 19阴离子色谱柱,以2 mmol·L^(-1)磷酸二氢钠-0.2 mmol·L^(-1)乙二胺四乙酸二钠-10 mmol·L^(-1)无水乙酸钠-3 mmol·L^(-1)硝酸钾(pH=10.5～11.3)-无水乙醇为流动相;流速1.0 mL·min^(-1);进样量10μL,柱温为室温。结果:实验表明,该方法不受^(40)Ar^(35)Cl+干扰,常见的5种As形态化合物的线性范围为0.5～100μg·L-1,甜菜碱(As B)、二甲基胂(DMA)、三价砷[As(Ⅲ)]、一甲基胂(MMA)及五价砷[As(Ⅴ)]的定量下限分别为0.07、0.34、0.135、0.13、0.2μg·L-1,相关系数(R^2)均大于0.999。通过对尿液中As总量及As形态进行分析,结果 As总量在给药第15天达到最大值,主要As形态化合物为As B、DMA、As(Ⅲ)和As(Ⅴ);在第26天即停药后第11天As总量降到最低,主要As形态化合物为As B、DMA和As(Ⅴ)。仁青常觉中As在大鼠体内的代谢研究表明:As(Ⅲ)通过大鼠给药吸收进入体内,后在大鼠体内被部分氧化为As(Ⅴ),经过生物甲基化反应,转化为DMA,最终通过尿液排出体外。4种As形态在大鼠尿液中的排泄速度以DMA最快。结论:藏药仁青常觉中As在大鼠体内代谢产物—尿液中的形态分析的研究,为藏药中As的毒理学研究提供了依据。

关键词：高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法仁青常觉代谢产物大鼠尿液砷(As)形态分析

高效液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠尿液中五种可能的癌症标志物

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分析科学学报 2015年第5期31卷 611-615页

作者：郭岚孙玄鄢爱平柳英霞肖石妹万益群南昌大学化学学院江西南昌330047

建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、蝶呤-6-羧酸、酪氨酸和色氨酸5种可能的癌症标志物的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）分析方法。大鼠尿液除去蛋白后,稀释50倍直接进样分析,采用基质标准曲线法消除基质的影响。上述5种物质的仪... 详细信息

建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、蝶呤-6-羧酸、酪氨酸和色氨酸5种可能的癌症标志物的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）分析方法。大鼠尿液除去蛋白后,稀释50倍直接进样分析,采用基质标准曲线法消除基质的影响。上述5种物质的仪器检出限分别为1.6、1.5、2.2、0.9和1.0ng/mL,加标回收率在89.0%~107.0%之间,相对标准偏差（RSD）在0.30%~5.19%之间。

关键词：高效液相色谱-串联质谱法大鼠尿液癌症标志物蝶呤类化合物氨基酸

同步荧光法测定大鼠尿液中色氨酸、异黄蝶呤和黄蝶呤

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分析科学学报 2014年第1期30卷 67-70页

作者：黄玲玲郭岚潘萍萍万益群南昌大学分析测试中心江西南昌330047

本文建立了大鼠尿液中色氨酸、异黄蝶呤和黄蝶呤的同步荧光分析方法，在KH2PO4-NaOH缓冲溶液（pH=8．O）中，波长差（△λ）为70nm的条件下进行同步荧光扫描，分别在275nm、325nm和400nm处测定色氨酸、异黄蝶呤和黄蝶呤。三种物质的仪... 详细信息

本文建立了大鼠尿液中色氨酸、异黄蝶呤和黄蝶呤的同步荧光分析方法，在KH2PO4-NaOH缓冲溶液（pH=8．O）中，波长差（△λ）为70nm的条件下进行同步荧光扫描，分别在275nm、325nm和400nm处测定色氨酸、异黄蝶呤和黄蝶呤。三种物质的仪器检出限分别为2．73ng／mL、0．52ng／mL和0．94ng／mL，对膀胱癌模型组和对照组的大鼠尿样进行了加标回收实验，平均回收率在80．5％～98．0％之间，相对标准偏差为0．62％～2．489／6。方法已应用于大鼠尿样中色氨酸、异黄蝶呤和黄蝶呤的测定。

关键词：色氨酸异黄蝶呤黄蝶呤同步荧光法大鼠尿液

UPLC-DAD测定大鼠尿液中的黄蝶呤、异黄蝶呤、酪氨酸和色氨酸

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分析试验室 2013年第7期32卷 6-9页

作者：郭岚潘萍萍鄢爱平柳英霞万益群南昌大学分析测试中心南昌330047

建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、酪氨酸和色氨酸的超高效液相色谱-二极管阵列检测器检测(UPLC-DAD)分析方法,选择肌酐作为内标物来减少个体差异的影响。大鼠尿液利用甲醇除蛋白后,采取C18固相萃取小柱进行净化,然后用UPLC-DAD法进... 详细信息

建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、酪氨酸和色氨酸的超高效液相色谱-二极管阵列检测器检测(UPLC-DAD)分析方法,选择肌酐作为内标物来减少个体差异的影响。大鼠尿液利用甲醇除蛋白后,采取C18固相萃取小柱进行净化,然后用UPLC-DAD法进行测定,5种物质的仪器检出限分别为0.011,0.007,0.030,0.025和0.003 mg/L,加标回收率除黄蝶呤在60.8%～80.7%之间,其余各物质回收率均在96.3%～106.3%之间,RSD小于9.9%。

关键词： UPLC-DAD 大鼠尿液黄蝶呤异黄蝶呤酪氨酸色氨酸

基于UPLC-MS技术的阿尔茨海默病模型大鼠尿液代谢组学

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沈阳药科大学学报 2018年第3期35卷 199-206页

作者：张翠台晶杰崔文静金艺徐海燕袁波沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016

目的基于代谢组学研究策略,研究大鼠尿液中内源性代谢物的变化,探寻与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)相关的潜在生物标志物,为AD的临床诊断提供新的思路。方法大鼠双侧海马注射凝聚态β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)建立AD模型,采用... 详细信息

目的基于代谢组学研究策略,研究大鼠尿液中内源性代谢物的变化,探寻与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)相关的潜在生物标志物,为AD的临床诊断提供新的思路。方法大鼠双侧海马注射凝聚态β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)建立AD模型,采用超高效液相色谱质谱联用(UPLCMS)技术对模型组和假手术组大鼠尿液代谢物谱进行分析测定,以OPLS(orthogonal partial least squares)方法对得到的数据进行统计学分析,研究2组之间内源性代谢产物的差异。结果经OPLS分析,2组大鼠尿液的代谢特征存在明显差异,发现了8个与AD相关的潜在生物标志物(含有2个未知化合物)。与假手术组相比,AD模型组大鼠尿液中苯丙氨酸、苯乙酰甘氨酸、N2-琥珀酰-L-鸟氨酸、高香草酸的含量明显升高(P大鼠与假手术组大鼠在尿液代谢水平上具有明显差异,具有明显变化的代谢物(苯丙氨酸、苯乙酰甘氨酸、N2-琥珀酰-L-鸟氨酸、高香草酸、肌酸酐、异戊酰丙氨酸)有可能作为AD潜在的尿液生物标志物,为AD的早期临床诊断和治疗提供参考。

关键词：阿尔茨海默病代谢组学生物标志物大鼠尿液超高效液相色谱质谱联用

RP-LC/ESI-MS和HILIC/ESI-MS相结合的大鼠尿液成分检测方法的建立

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中国实验方剂学杂志 2012年第20期18卷 119-121页

作者：高晓燕白玉静北京中医药大学科研实验中心北京100029

目的:建立反相液相色谱-电喷雾质谱(RP-LC/ESI-MS)和亲水作用液相色谱-电喷雾质谱(HILIC/ESI-MS)相结合的尿液尽量多化学成分检测数据采集方法。方法:RP-LC最佳色谱条件为Prevail C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25℃,流动相A 10 m... 详细信息

目的:建立反相液相色谱-电喷雾质谱(RP-LC/ESI-MS)和亲水作用液相色谱-电喷雾质谱(HILIC/ESI-MS)相结合的尿液尽量多化学成分检测数据采集方法。方法:RP-LC最佳色谱条件为Prevail C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25℃,流动相A 10 mmol.L-1甲酸铵缓冲液(甲酸调pH 4.0),B 0.1%甲酸乙腈,A与B梯度洗脱;HILIC最佳色谱条件为Alltima HP HILIC色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm),柱温25℃,流动相A 10 mmol.L-1甲酸铵缓冲液(甲酸调pH 4.0),B0.1%甲酸乙腈,A与B梯度洗脱;质谱条件为ESI离子源,离子源温度350℃,毛细管电压3.5 kV,雾化压力50.0 psi,干燥气流速11.0 ***-1,质谱扫描范围m/z 15～2 200,正、负离子检出模式。结果:RP-LC/ESI-MS和HILIC/ESI-MS两种色谱系统同时应用对大鼠尿液中极性不同的内源性物质实现了较为全面的检测。结论:该方法可为代谢组学研究中数据采集的全面性提供参考。

关键词：反相液相色谱-电喷雾质谱亲水作用液相色谱-电喷雾质谱大鼠尿液全成分检测

细脚拟青霉总多糖对大鼠尿液主要生化指标的影响

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科技通报 2002年第1期18卷 10-13页

作者：金丽琴吕建新袁谦李安乐温州医学院生化教研室浙江温州325027 温州医学院检验医学与公共卫生学院浙江温州325027 温州医学院实验动物中心浙江温州325027

为探讨细脚拟青霉总多糖 (Pt P)对大鼠体内物质代谢的调节作用 ,采用日立 7170全自动生化分析仪测定尿液微蛋白 (Pro)、尿素氮 (UN)、肌酐 (Cr)、尿酸 (UA)、钙 (Ca)、镁 (Mg)、磷 (P)、钾 (K)、钠 (Na)、氯化物 (Cl-)、γ-谷氨酰基转移... 详细信息

为探讨细脚拟青霉总多糖 (Pt P)对大鼠体内物质代谢的调节作用 ,采用日立 7170全自动生化分析仪测定尿液微蛋白 (Pro)、尿素氮 (UN)、肌酐 (Cr)、尿酸 (UA)、钙 (Ca)、镁 (Mg)、磷 (P)、钾 (K)、钠 (Na)、氯化物 (Cl-)、γ-谷氨酰基转移酶 (GGT)等含量 .实验组与对照组相比 ,大鼠尿液中 UN、Cr、UA、P、GGT含量均有显著性差异 .结果表明 ,Pt P使大鼠尿液中 UN、Cr含量升高 ;U A、P、GGT含量下降 .

关键词：细脚拟青霉总多糖大鼠尿液生化指标物质代谢