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植物提取物功效成分分析及抗氧化活性评价

植物提取物功效成分分析及抗氧化活性评价

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作者：熊陈思慧湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的:建立超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱方法快速检测22种功效成分,对16批积雪草提取物和9批大花红景天根提取物进行质量评价和对13批积雪草提取物和9批大花红景天根提取物抗氧化活性的鉴定,为化妆品中功效成分的... 详细信息

目的:建立超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱方法快速检测22种功效成分,对16批积雪草提取物和9批大花红景天根提取物进行质量评价和对13批积雪草提取物和9批大花红景天根提取物抗氧化活性的鉴定,为化妆品中功效成分的检测提供技术支持以及为化妆品中的功效研究提供依据。方法:1.运用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱方法,通过全扫模式下待测物的一级精确分子量和二级碎片离子,建立乳、霜、液态水基类化妆品中22种功效成分的检测方法。2.依据化妆品积雪草提取物和红景天提取物的现有标准提供的检测方法,对16批积雪草提取物和9批大花红景天根提取物进行质量评价。3.建立UPLC-UV-DPPH/ABTS在线分析方法,快速检测积雪草提取物和大花根红景天提取物中的抗氧化成分,评价2种化妆品原料的抗氧化活性。结果:1.建立了超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱法同时测定化妆品中的22种功效成分。样品采用甲醇超声提取,C色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8μm）分离,以0.1%（v/v）甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱。在正离子模式下,以保留时间和一级母离子精确质量数进行定量分析,以高能碰撞诱导解离获得的二级碎片离子精确质量数进行确证。结果表明,该方法线性关系良好,检出限（LOD）为0.003～2.01 mg/kg;定量限（LOQ）为0.015～4.36 mg/kg;水、乳、霜3种基质3个添加水平的回收率范围为63.2%～125.1%,相对标准偏差为0.18%～10.9%。对标示含有烟酰胺、抗坏血酸葡糖苷、咖啡因、泛醇及甘草类（光果甘草根茎叶、甘草根、胀果甘草根）、麦冬根、人参根、黄芪根、虎杖根、苦参根、地黄根、积雪草、茶叶提取物的54批样品进行检测,标示单体功效成分的样品均有检出,标示不同植物提取物的46批样品中,24批检出植物提取物的功效成分。2.依据化妆品积雪草提取物的团体标准（T/CAFFCI 17—2019）规定:总苷（积雪草苷和羟基积雪草苷的总和）≥2.5mg/m L,对不同生产企业提供的16批原料（11批液体和5批粉末）进行质量评价,鉴于现有标准为液体样品的检测方法,11批液体样品含量检测结果在0.0004-8.92mg/m L,其中仅有2批符合标准规定。依据化妆品大花红景天根提取物的团体标准（T/CAFFCI 14—2018）规定:红景天苷≥0.25 mg/m L,对不同生产企业提供的9批原料进行质量评价,9批样品检测结果在0.01-0.62mg/m L,其中仅有2批符合标准规定。3.基于前期研究已建立的UPLC-UV-DPPH/ABTS在线分析方法,建立13批化妆品积雪草提取物和9批大花红景天根提取物的色谱指纹图谱和抗氧化活性图谱,评价2种化妆品原料的抗氧化活性。研究结果表明,积雪草提取物（液体）中未发现抗氧化活性物质,积雪草提取物（粉末）来源于山西生产企业的几批原料中发现多种强抗氧化活性成分,而其他生产企业原料未发现抗氧化活性成分,可见不同生产企业的化妆品原料抗氧化成分差异较大,积雪草苷和羟基积雪草苷在此方法中未检测到抗氧化活性。大花红景天根提取物检测结果发现多种抗氧化活性成分,9批原料和红景天苷均具有较好的ABTS和DPPH·清除活性,但不同生产企业提供的大花红景天根提取物指纹图谱和抗氧化活性图谱存在差异,表明不同来源的原料抗氧化活性成分不一致。结论:本实验建立22种功效成分的快速分析方法稳定性和重现性良好,为化妆品中功效成分的检测提供技术支持;通过对16批积雪草提取物和9批大花红景天根提取物化妆品原料的质量评价;13批积雪草提取物和9批大花红景天根提取物化妆品原料进行抗氧化活性研究。结果表明,不同厂家原料质量及抗氧化成分差异较大,反映了化妆品原料目前的一些现状为后期化妆品植物提取物标准及功效成分研究提供参考依据和评价方法。

关键词：超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱法功效成分化妆品积雪草提取物大花红景天根提取物质量评价抗氧化

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