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中国现代医学杂志 2011年第30期21卷 3734-3737页

作者：蒋奕红于俊芳姚新宇林高翔岳毅刚桂林医学院附属医院麻醉科广西桂林541001 桂林医学院研究生院广西桂林541001 桂林医学院附属医院小儿外科广西桂林541001

目的研究在胎儿大脑快速发育期接受不同剂量氯胺酮暴露后新生鼠认知功能的改变。方法 24只孕鼠随机分为对照组(K0)、小剂量(K1)、临床剂量(K2)、大剂量氯胺酮(K3)组,在孕10 d经生理盐水或不同剂量氯胺酮暴露后,排外流产、死产、畸形新... 详细信息

目的研究在胎儿大脑快速发育期接受不同剂量氯胺酮暴露后新生鼠认知功能的改变。方法 24只孕鼠随机分为对照组(K0)、小剂量(K1)、临床剂量(K2)、大剂量氯胺酮(K3)组,在孕10 d经生理盐水或不同剂量氯胺酮暴露后,排外流产、死产、畸形新生鼠等情况,于新生鼠产出20 d时每组随机抽取2只分别进行旷场试验、洞板试验、悬崖逃避实验。结果 42只新生鼠进入实验。与K0(n=12)相比,旷场试验K2组(n=8)及K3组(n=10)新生鼠穿越格子数减少(P期均延长(P大脑快速发育期接受氯胺酮暴露对新生鼠探索学习认知能力、对抗伤害防御反应能力及空间认知能力有剂量相关性抑制作用。

关键词：氯胺酮大脑快速发育期认知功能

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幼鼠七氟醚暴露抑制发育期海马锥体神经元Ca2+通道活性

幼鼠七氟醚暴露抑制发育期海马锥体神经元Ca2+通道活性

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作者：刘爱丽天津医科大学

学位级别：硕士

研究目的：七氟醚（Sevoflurane, Sevo）是一种吸入性全身麻醉药,婴幼儿期七氟醚暴露对发育期学习记忆的影响是麻醉临床关注的热点。电压门控性钙离子通道（Voltage-gated Ca2+channels, VGCCs）参与调节神经元兴奋性,对大脑发育起... 详细信息

研究目的：七氟醚（Sevoflurane, Sevo）是一种吸入性全身麻醉药,婴幼儿期七氟醚暴露对发育期学习记忆的影响是麻醉临床关注的热点。电压门控性钙离子通道（Voltage-gated Ca2+channels, VGCCs）参与调节神经元兴奋性,对大脑发育起至关重要作用。本论文应用膜片钳技术检测正常大鼠大脑快速发育期（1-5周）内海马CA1区VGCCs特性的变化,研究大鼠海马VGCCs的发育关键期;研究1周龄大鼠七氟醚暴露对发育期海马CA1区锥体神经元VGCCs活性的影响,探索七氟醚对大鼠快速发育期（1-5周）海马VGCCs活性的抑制作用,探讨不同浓度七氟醚对VGCCs的不同程度的抑制作用,为七氟醚的临床应用提供实验研究支持。研究方法： 1.实验动物分组 1周龄SD大鼠45只随机分为正常组（Control, Con）、2.1%七氟醚组（2.1%Sevoflurane, Sevo1）和3%七氟醚组（3%Sevoflurane, Sevo2）。每组均按照出生后的周龄分为5组：1周龄（1w）组、2周龄（2w）组、3周龄（3w）组、4周龄（4w）组、5周龄（5w）组。 2.七氟醚暴露模型鼠的制备将1周龄Sprague-Dawley （SD）大鼠放置于自制的麻醉诱导箱内进行气体暴露,正常组大鼠自主吸入100%氧气,2.1%七氟醚组和3%七氟醚组分别吸入浓度为2.1%和3%的七氟醚,每组均持续暴露6小时。 3.大鼠海马CA1区锥体神经元的急性分离将大鼠快速断头取脑,分离出海马,手工切成400-600um的脑片置于32℃人工脑脊液中孵育1小时,然后分离出海马脑片CA1区,将其酶解20-40分钟,吹打组织片制成细胞悬液,取其上清液贴壁30分钟。 4.数据记录及统计分析采用膜片钳全细胞记录技术,分别记录以上5个周龄组大鼠海马CA1区锥体神经元的VGCCs电流,利用软件Clampfit10.3、Origin6.0和SPSS18进行数据处理（电流密度、稳态激活特性、稳态失活特性）和统计学分析。研究结果： 1.正常组大鼠快速发育期海马CA1区锥体神经元VGCCs特性 1-5w正常组大鼠海马CA1区锥体神经元VGCCs最大电流密度（pA/pF）分别为：Con1w,9.56±0.63;Con2w,10.84±0.24;Con3w,14.08±0.93;Con4w,15.00±0.84:Con5w,17.22±0.59.随着鼠龄的增加,VGCCs的最大电流密度逐步增大。其中,Con2w与Con3w组之间VGCCs最大电流密度的增幅最大,为（29.89±0.58）%（P＜0.01）。随着鼠龄的增加,VGCCs急态激活曲线向超极化方向移动,Con1w与Con2w组之间VGCCs的半数激活电压（mV）逐渐减小,分别为-7.89±0.48和-10.84±0.44（P＜0.05）,Con2w与Con3w组、Con3w与Con4w组、Con4w与Con5w组之间半数激活电压无显著性变化（P＞0.05）;1-5w大鼠海马VGCCs的稳态激活斜率因子（k）无显著性变化（P＞0.05）。随着鼠龄的增加,VGCCs急态失活曲线向超极化方向移动,大鼠海马VGCCs的半数失活电压（mV）和斜率因子（k）均无显著性变化（P＞0.05）。 2.七氟醚组大鼠快速发育期海马CA1区锥体神经元VGCCs特性与Con组相比,***21w组与***22w组电流密度均有所降低（P＜0.01）,且Sevo12w与Sevo22w组最大电流密度均低于Con1w组。1w时,Sevo1和Sevo2组最大电流密度的降低幅度分别为28%（P＜0.01）,62%（P＜0.01）;2w时,Sevo1和Sevo2组最大电流密度的降低幅度分别为22%（P＜0.01）,43%（P＜0.01）。在3w、4w与5w时没有显著性差异（P＞0.05）。 Sevo21w与Sevo22w组VGCCs稳态激活曲线向去极化方向移动,半数激活电压和斜率因子增大（P＜0.01）:Sevo23w、Sevo24w与Sevo25w组没有显著性差异（P＞0.05）.Sevo1组VGCCs稳态激活曲线没有显著性变化（P＞0.05）。 Sevo21w、Sevo22w与Sevo23w组VGCCs稳态失活曲线向去极化方向移动,半数失活电压和斜率因子增大（P＜0.01）;Sevo24w与Sevo25w组半数失活电压和斜率因子没有显著性变化（P＞0.05）。Sevo11w与Sevo12w组VGCCs稳态失活曲线向去极化方向移动,半数失活电压增大（P＜0.01）,斜率因子没有显著性差异（P＞0.0

关键词：幼鼠七氟醚暴露大脑快速发育期海马锥体神经元抑制钙离子通道活性

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七氟烷抑制1-4周龄大鼠海马CA1区锥体神经元Na+通道活性的实验研究

七氟烷抑制1-4周龄大鼠海马CA1区锥体神经元Na+通道活性的实验研究

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作者：乔嘉琪天津医科大学

学位级别：硕士

目的：电压门控性钠离子通道(voltage-gated sodium channel,VGSC)是调节大脑神经元发育过程的关键。本论文通过研究0-4周龄5组正常大鼠海马CA1区锥体神经元VGSC特性的变化特征,探索VGSC在出生后早期发育的关键期,为研究大脑快速发育... 详细信息

目的：电压门控性钠离子通道(voltage-gated sodium channel,VGSC)是调节大脑神经元发育过程的关键。本论文通过研究0-4周龄5组正常大鼠海马CA1区锥体神经元VGSC特性的变化特征,探索VGSC在出生后早期发育的关键期,为研究大脑快速发育的机制提供支持。在以上研究的基础上研究1周龄大鼠七氟烷暴露后海马CA1区VGSC动力学特性在1-4周龄的变化,探索幼鼠在发育早期七氟烷暴露对大脑发育的影响,为临床婴幼儿七氟烷麻醉提供实验支持。方法：实验动物分组：SD大鼠分为正常组和七氟烷模型组。正常组按照出生后的周龄分为5组即出生后0周龄组(Ct0)、1周龄组(Ct1)、2周龄组(Ct2)、3周龄组(Ct3)、4周龄组(Ct4)。七氟烷模型组也按照出生后的周龄分为4组即出生后1周龄组(七氟烷暴露后0周,Sp1)、2周龄组(七氟烷暴露后1周,Sp2)、3周龄组(七氟烷暴露后2周,Sp3)、4周龄组(七氟烷暴露后3周,Sp4)。 1周龄七氟烷暴露模型大鼠的制备：将1周龄的SD大鼠置于七氟烷浓度为3%的麻醉预处理箱内,持续暴露6小时。大鼠海马CA1区单个锥体神经元的急性分离：将大鼠吸入乙醚麻醉后迅速断头取脑,分离海马,手工切成400-500μm的组织片,32℃孵育1小时,酶消化30-40分钟后,将组织片轻轻吹打成细胞悬液,室温下贴壁半小时。数据记录及分析：应用全细胞膜片钳技术分别记录正常5个组与七氟烷4个组大鼠海马CA1区VGSC电流,应用软件Clampfit10.2及Origin6.0处理分析VGSC动力学特性(电流密度、稳态激活特性、稳态失活特性、失活后恢复特性)。结果： 1.正常0-4周龄组(n=10)大鼠海马CA1区VGSC动力学特性的变化随着鼠龄的增大,VGSC的最大电流密度逐渐增大,Ct1、Ct2、Ct3、Ct4相对于Ct0的最大电流密度的增幅分别为(42.76±4.91)%、(146.80±7.63)%、(208.79±5.28)%、(253.72±5.74)%(P发育最快,此期间VGSC电流密度显著增加,半数激活电压下降,失活速度变快,失活后恢复的时间延长。 2.1周龄大鼠暴露于3%七氟烷6小时后,七氟烷对VGSC的动力学特性具有显著的抑制作用。2-4周龄时VGSC的电流密度、稳态激活特性及稳态失活特性恢复正常。1-3周龄七氟烷对失活后恢复特性有持续的抑制作用,抑制作用随鼠龄的增大而下降,在4周龄时恢复正常。

关键词：七氟烷大脑快速发育期海马CA1区锥体神经元电压门控性钠离子通道特性

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