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基于多倍体肿瘤巨细胞的抗肿瘤研究进展

癌变．畸变．突变 2024年第4期36卷 325-327,F0003页

作者：李子烜孙震晓北京中医药大学生命科学学院北京102488

肿瘤研究的不断深入揭示了肿瘤细胞的多样性和复杂性。研究表明,当肿瘤细胞受到放疗、化疗或缺氧等刺激后,可以形成多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)以抵抗外界生存胁迫,PGCC在一段时期的休眠后,可重新恢复增殖。相较于正常二倍体肿瘤细胞,PGCC... 详细信息

肿瘤研究的不断深入揭示了肿瘤细胞的多样性和复杂性。研究表明,当肿瘤细胞受到放疗、化疗或缺氧等刺激后,可以形成多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)以抵抗外界生存胁迫,PGCC在一段时期的休眠后,可重新恢复增殖。相较于正常二倍体肿瘤细胞,PGCC具有更强的成瘤能力、侵袭转移能力和耐药性,可以促进肿瘤的发生发展、侵袭转移,驱动肿瘤复发,是肿瘤获得异质性的重要来源,是一种十分恶性的肿瘤细胞亚群。近年来基于对PGCC在肿瘤发生发展及治疗中重要作用的认识,有研究者提出一些具有潜力的抗肿瘤治疗方案。本文就PGCC的生物学特征、形成机制,其对微环境的高耐受性、对肿瘤发展的影响,以及针对PGCC的治疗方案等方面的研究作一综述。

关键词：多倍体肿瘤巨细胞抗肿瘤癌症干细胞耐药

多倍体肿瘤巨细胞与肝内胆管细胞癌临床病理学特征及预后研究

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中国实用外科杂志 2023年第9期43卷 1041-1045,1055页

作者：邓城旗耿长宇朱康伟田馨迪韩濡郁陈平宋天强齐丽莎陈璐天津医科大学肿瘤医院国家恶性肿瘤临床医学研究中心、天津市恶性肿瘤临床医学研究中心、天津市肿瘤防治重点实验室天津300060

目的探讨多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)阳性肝内胆管细胞癌(ICC)病人的临床病理特征及其对预后的影响。方法回顾性分析2005年6月至2019年6月在天津医科大学肿瘤医院接受手术的72例ICC病人的临床病理学资料,应用HE染色组织病理学分析ICC中PGC... 详细信息

目的探讨多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)阳性肝内胆管细胞癌(ICC)病人的临床病理特征及其对预后的影响。方法回顾性分析2005年6月至2019年6月在天津医科大学肿瘤医院接受手术的72例ICC病人的临床病理学资料,应用HE染色组织病理学分析ICC中PGCC的分布和比例,通过多变量回归分析探索PGCC与ICC临床病理学特征及术后总生存期(OS)和无复发生存期(DFS)的关系。结果在72例ICC中,血管侵犯和术前总胆红素水平是影响ICC预后OS的独立危险因素;PGCC是影响ICC预后DFS的独立危险因素,手术切除样本中PGCC阳性ICC病人的DFS劣于PGCC阴性的病人(P肿瘤的分化程度密切相关。Ⅱ~Ⅲ期病人较Ⅰ期病人具有更高的PGCC比例(P=0.006);同时低分化的ICC较中-高分化的ICC具有更高的PGCC比例(P=0.032)。结论 PGCC与ICC病人预后不良密切相关,是影响胆管癌病人DFS的独立危险因素,有望成为评估胆管癌预后生存及指导临床诊疗的新指标。

关键词：肝内胆管细胞癌多倍体肿瘤巨细胞分化分期预后

多倍体肿瘤巨细胞数量及其上皮间质转化相关蛋白表达与人乳腺癌侵...

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作者：费飞安徽医科大学

学位级别：硕士

目的：我们前期的研究结果显示,多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells, PGCCs)经氯化钴(cobalt chloride, CoCl2)诱导后可通过不对称分裂方式产生具有较强迁移和侵袭能力的子代细胞。本次研究旨在比较上皮间质转化(epithelial... 详细信息

目的：我们前期的研究结果显示,多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells, PGCCs)经氯化钴(cobalt chloride, CoCl2)诱导后可通过不对称分裂方式产生具有较强迁移和侵袭能力的子代细胞。本次研究旨在比较上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白E-cadherin, N-cadherin和vimentin在乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中PGCCs及其子代细胞和与之相应的对照乳腺癌细胞中的表达情况;观察上皮间质转化相关蛋白在人乳腺癌组织中表达及其与PGCCs的关系,探讨其临床病理意义。方法：(1)利用蛋白质印迹法(western blot, WB)检测E-cadherin, N-cadherin和vimentin三种蛋白在乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中PGCCs及其子代细胞和相应对照乳腺癌细胞中的表达水平;划痕和侵袭实验比较上述细胞系中两组细胞之间的迁移和侵袭能力。(2)收集104例乳腺癌和11例良性乳腺肿瘤(纤维腺瘤)石蜡包埋组织,将肿瘤组织分为四组：52例伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅰ组)和与之相对应的淋巴结转移灶(Ⅱ组),52例不伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅲ组),11例良性乳腺肿瘤病灶(Ⅳ组)。检测并分析比较上述三种蛋白在各组乳腺肿瘤组织中的表达情况,计数并比较各组中PGCCs的数量差异。结果：(1)与对照组乳腺癌细胞相比,乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231 PGCCs及其子代细胞低表达E-cadherin,而高表达N-cadherin和vimentin;且具有更强的迁移和侵袭能力。(2)四组乳腺肿瘤组织中,E-cadherin在良性乳腺肿瘤病灶(Ⅳ组)、不伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅲ组)、伴淋巴结转移的乳腺癌原发灶(Ⅰ组)和淋巴结转移灶(Ⅱ组)中的表达强度依次递减,结果具有统计学意义(P=0.000),与此同时N-cadherin和vimentin在上述四组中的表达强度依次递增,结果具有统计学差异(P值均=0.000)。此外,上述四组中多倍体肿瘤巨细胞的数量逐渐增多,差异具有统计学意义(P=0.000)。结论：多倍体肿瘤巨细胞的数量和上皮间质转化相关蛋白E-cadherin,N-cadherin和vimentin可作为评估乳腺癌病人淋巴结转移有价值的潜在生物标记。

关键词：多倍体肿瘤巨细胞乳腺肿瘤上皮间质转化转移

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多倍体肿瘤巨细胞研究进展

世界肿瘤研究 2019年第1期9卷 45-59页

作者：于娟张仁亚王卫济宁医学院附属医院病理科山东济宁

多倍体肿瘤巨细胞(PGCCs)是一种特殊类型的癌细胞亚群,常含有单个巨大的细胞核或多个细胞核,且细胞核通常不规则。与普通二倍体肿瘤细胞相比,PGCCs细胞周期、增殖方式、分化能力、形态、大小、染色体异常、致瘤性、抵抗放化疗等方面均... 详细信息

多倍体肿瘤巨细胞(PGCCs)是一种特殊类型的癌细胞亚群,常含有单个巨大的细胞核或多个细胞核,且细胞核通常不规则。与普通二倍体肿瘤细胞相比,PGCCs细胞周期、增殖方式、分化能力、形态、大小、染色体异常、致瘤性、抵抗放化疗等方面均不相同。过去常认为PGCCs处于有丝分裂的阻滞期并且处于细胞凋亡的边缘,是无法存活的,因此不被重视。但是最近研究发现,PGCCs不仅是可生存的,而且具备胚胎干细胞样特性,通过不对称分裂产生子代细胞,进行多向分化,且在肿瘤耐药、上皮间质转化和侵袭转移中发挥重要作用。本文就PGCCs近年来的研究进展进行综述,为临床治疗提供一种新的方向和思路。

关键词：多倍体肿瘤巨细胞多向分化耐药上皮间质转化侵袭转移

多烯紫杉醇诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性研究

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现代肿瘤医学 2021年第16期29卷 2759-2764页

作者：欧阳明玥王丽丽赵松邢思宁于卉影北部战区总医院基础医学实验室辽宁沈阳110016

目的:探讨多烯紫杉醇(Docetaxel,Doc)诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性。方法:0.8μmol/L Doc处理SK-OV-3细胞16 h,更换为完全培养液继续培养细胞至第3天和第5天。免疫荧光染色法观察细胞形态和增殖,流式细... 详细信息

目的:探讨多烯紫杉醇(Docetaxel,Doc)诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性。方法:0.8μmol/L Doc处理SK-OV-3细胞16 h,更换为完全培养液继续培养细胞至第3天和第5天。免疫荧光染色法观察细胞形态和增殖,流式细胞术检测细胞倍性、周期和凋亡,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:Doc处理后SK-OV-3细胞体积变大,细胞核增多,细胞增殖能力降低。Doc(3 day)组和Doc(5 day)组多倍体细胞(>4 N)百分比高于对照组(P细胞周期阻滞。Doc(5 day)组细胞迁移能力低于对照组(P细胞百分比高于对照组(P细胞形成多倍体肿瘤巨细胞,SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖和迁移能力降低,早期凋亡增加,这为探索多倍体肿瘤巨细胞特性提供了研究基础。

关键词：多烯紫杉醇多倍体肿瘤巨细胞 SK-OV-3 凋亡

SPTBN1对结直肠腺癌细胞及其多倍体肿瘤巨细胞生物学行为的影响及分子机制

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临床与实验病理学杂志 2022年第10期38卷 1187-1192页

作者：陈静曹立宇白真真温奕巽王玥安徽医科大学病理学教研室合肥230032

目的探讨SPTBN1在结直肠腺癌细胞及其多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells,PGCCs)中的作用及分子机制。方法应用CPTAC数据库分析结直肠腺癌组织和癌旁正常组织中SPTBN1蛋白表达水平;应用Kaplan-Meier Plotter、PrognoScan和U... 详细信息

目的探讨SPTBN1在结直肠腺癌细胞及其多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cells,PGCCs)中的作用及分子机制。方法应用CPTAC数据库分析结直肠腺癌组织和癌旁正常组织中SPTBN1蛋白表达水平;应用Kaplan-Meier Plotter、PrognoScan和UALCAN数据库分析SPTBN1蛋白表达与结直肠腺癌患者生存率的关系;应用Western blot法检测SPTBN1在结直肠腺癌组织和PGCCs中的表达量;应用平板克隆实验和划痕实验检测细胞的增殖与迁移能力;利用siRNA沉默PTPRN2和SPTBN1蛋白的表达。结果CPTAC数据库分析显示,SPTBN1蛋白在结直肠腺癌中的表达明显降低,其低表达与结直肠腺癌临床分期呈正相关;生存分析结果显示,SPTBN1低表达组患者的总生存率显著低于高表达组;应用奥沙利铂诱导的HCT116-PGCCs及LOVO-PGCCs,其增殖和迁移能力强于对照组HCT116和LOVO细胞;Western blot结果显示,SPTBN1蛋白在结直肠腺癌组织和PGCCs中的表达明显下降;SPTBN1敲低组HCT116-PGCCs及LOVO-PGCCs细胞的增殖和迁移能力增强;GEPIA数据库结果显示,SPTBN1蛋白表达与PTPRN2、E-cadherin蛋白表达呈正相关;敲低SPTBN1后,HCT116-PGCCs及LOVO-PGCCs细胞中E-cadherin蛋白表达水平下降;敲低PTPRN2后,HCT116-PGCCs及LOVO-PGCCs细胞中SPTBN1、E-cadherin蛋白表达水平明显降低。结论SPTBN1在结直肠腺癌和PGCCs中低表达,敲低SPTBN1可促进HCT116-PGCCs及LOVO-PGCCs细胞的增殖与迁移,其机制可能与PTPRN2/SPTBN1/E-cadherin通路相关。

关键词：结直肠肿瘤多倍体肿瘤巨细胞 SPTBN1 PTPRN2 E-cadherin

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多倍体肿瘤巨细胞的研究进展

南通大学学报（医学版） 2023年第3期43卷 273-276页

作者：宋高超(综述) 沈剑虹(审校) 南通大学附属医院神经外科南通226001 南京医科大学第二附属医院神经外科

多倍体肿瘤巨细胞(polyploid gaint cancer cells,PGCCs)是一类拥有特殊细胞周期的细胞,存在于多种实体肿瘤中。过去常认为此类细胞处于衰老、凋亡边缘,不能分裂且无法生存,但近年发现PGCCs可在化疗、放疗、缺氧等条件下存活,并参与肿... 详细信息

多倍体肿瘤巨细胞(polyploid gaint cancer cells,PGCCs)是一类拥有特殊细胞周期的细胞,存在于多种实体肿瘤中。过去常认为此类细胞处于衰老、凋亡边缘,不能分裂且无法生存,但近年发现PGCCs可在化疗、放疗、缺氧等条件下存活,并参与肿瘤的发展、治疗抵抗以及转移复发等。本文围绕PGCCs的研究现状进行阐述,为肿瘤的研究提供新思路。

关键词：多倍体肿瘤巨细胞细胞周期脑胶质瘤复发

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ALDH1酶活性对多西他赛诱导的多倍体肿瘤巨细胞血管生成和迁移的影响

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ALDH1酶活性对多西他赛诱导的多倍体肿瘤巨细胞血管生成和迁移的...

作者：马诗涵中国医科大学

学位级别：硕士

目的:多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cell,PGCC)是一类具有多个基因组DNA拷贝的巨细胞。在促进肿瘤转移方面具有重要意义。有研究显示,PGCC有部分细胞干性,表达一些干细胞标记物。乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALD... 详细信息

目的:多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cell,PGCC)是一类具有多个基因组DNA拷贝的巨细胞。在促进肿瘤转移方面具有重要意义。有研究显示,PGCC有部分细胞干性,表达一些干细胞标记物。乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)被认为是肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)的标记物,其酶活性和表达水平升高能促进肿瘤迁移和保持细胞干性。但人们对ALDH1酶活性的改变在PGCC中的作用关注较少。本研究探讨ALDH1活性变化对肺癌PGCC的生成、迁移和血管形成的潜在作用。方法:将培养的NCI-H1299,A549细胞分别分为四组:常规方法培养的细胞记为对照组;10μmol/L DEAB处理12h,撤除药物后在含10%胎牛血清的DMEM/F12完全培养基继续培养细胞至第3天记为DEAB组;1μmol/L Doc处理24h,撤除药物后更换完全培养基培养至第3天记为Doc组;10μmol/L DEAB预处理细胞12h,1μmol/L Doc处理24h后撤除药物,更换完全培养基培养至第3天记为Doc+DEAB组。乙醛脱氢酶(ALDH)测μ定试剂盒测定ALDH1活性;流式细胞术检测细胞DNA含量;细胞划痕实验评估细胞迁移能力;血管生成拟态实验和小管形成实验检测血管生成能力;蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞N-钙粘素(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)和血管内皮钙粘素(VE-cadherin)蛋白表达水平。结果:ALDH1酶活性检测结果提示,Doc组ALDH1酶活性显著高于对照组,且差异具有统计学意义(P细胞DNA含量检测结果,对照组与DEAB组大部分为二倍体细胞,Doc组和Doc+DEAB组PGCC(DNA含量>4N)亚群比例明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。细胞划痕实验结果提示,Doc组细胞迁移率高于Doc+DEAB组,差异有统计学意义(P细胞可以形成VM通道,并且Doc组小管生成总长度和分支点数均显著高于Doc+DEAB组(P细胞无法形成VM通道;小管形成实验结果证明,经过Doc组和Doc+DEAB组条件培养基处理后的HUVEC细胞均可形成小管,Doc+DEAB组分支点数和小管总长度明显低于Doc组,差异具有统计学意义(P细胞、H1299细胞Doc+DEAB组N-cadherin、Vimentin的表达水平下降(P细胞Doc+DEAB组VE-cadherin、VEGFA表达水平低于Doc组,两组之间差异有统计学意义(P细胞Doc+DEAB与组Doc组相比,VEGFA表达下降(P细胞产生PGCC,并伴随ALDH1酶活性升高,ALDH1酶活性升高参与PGCC迁移和血管生成,对PGCC的产生并无影响。

关键词：非小细胞肺癌 ALDH1 多倍体肿瘤巨细胞血管生成

增殖性多倍体肿瘤巨细胞促进高级别浆性卵巢癌复发及相关机制研究

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增殖性多倍体肿瘤巨细胞促进高级别浆性卵巢癌复发及相关机制研究

作者：王靖怡天津医科大学

学位级别：硕士

研究目的:卵巢癌是女性生殖系统第三大常见恶性肿瘤,高级别浆液性癌是最常见的卵巢恶性肿瘤,且预后最差。目前高级别浆液性卵巢癌主要运用手术辅以顺铂、紫杉醇化疗,但仍有多数患者出现复发和化疗耐药。多倍体肿瘤巨细胞（PGCC）是二倍... 详细信息

研究目的:卵巢癌是女性生殖系统第三大常见恶性肿瘤,高级别浆液性癌是最常见的卵巢恶性肿瘤,且预后最差。目前高级别浆液性卵巢癌主要运用手术辅以顺铂、紫杉醇化疗,但仍有多数患者出现复发和化疗耐药。多倍体肿瘤巨细胞（PGCC）是二倍体肿瘤细胞在肿瘤微环境压力和癌症治疗压力下产生的染色体多于两套的多核或巨核癌细胞。PGCC存在于卵巢癌、结直肠癌、前列腺癌和乳腺癌等多种人类恶性肿瘤中,有研究发现PGCC可通过内复制进行自我更新并通过出芽、炸裂等方式产生子代细胞促进肿瘤耐药和转移。本研究旨在通过观察PGCC在高级别浆液性卵巢癌中的存在和分布,明确其临床病理意义及预后价值,明确增殖性多倍体肿瘤巨细胞（proliferative-PGCC）与肿瘤恶性行为间的关系,并进一步探究增殖性多倍体肿瘤巨细胞形成的可能机制。研究方法:1.收集59例配对的高级别浆液性卵巢癌患者化疗前和化疗后的组织标本进行苏木精-伊红（HE）染色,观察PGCC在化疗前后癌组织中的比例变化;收集89例临床预后信息完整的化疗后人高级别浆液性卵巢癌组织标本,利用苏木精-伊红染色及免疫组化方法,观察PGCC和其中的增殖性PGCC（Ki67表达阳性的PGCC）在癌组织中的分布,并分析它们在人高级别浆液性卵巢癌组织中的临床病理意义;利用Kaplan-Meier生存分析及COX多因素分析方法评估高级别浆液性卵巢癌患者癌组织中的PGCC和增殖性PGCC的临床预后价值。2.以人高级别浆液性卵巢癌细胞系HEY、SKOV3和OVCAR433为研究对象,用紫杉醇体外诱导其产生PGCC,利用免疫荧光方法检测卵巢癌细胞的对照组、PGCC组及子代细胞组的相对细胞核面积及相对细胞面积,通过流式细胞术检测这三组细胞的DNA含量,通过免疫荧光方法观察经紫杉醇处理不同时间后Ki67表达阳性的PGCC在总PGCC中的占比变化;利用免疫印迹（Western blotting）方法检测对照细胞组、PGCC组和子代细胞组周期相关、肿瘤休眠相关及凋亡和自噬相关蛋白的表达;通过CCK-8实验、细胞克隆形成实验和Transwell实验检测PGCC子代细胞和对照组细胞的增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力,并检测子代细胞与对照细胞对于紫杉醇的IC。3.以高级别浆液性卵巢癌细胞系HEY为研究对象,利用RT-PCR及Western blotting检测HEY细胞经500n M紫杉醇连续处理不同时间后YAP的表达及经紫杉醇处理18h后用无药培养基培养不同天数后YAP的表达;用慢病毒转染、嘌呤霉素筛选的方法构建稳定过表达和降表达YAP的HEY细胞株,通过Western blotting及RT-PCR验证构建的细胞系;用免疫荧光方法检测YAP过表达/降表达的HEY细胞系经紫杉醇诱导产生的PGCC中增殖性PGCC所占比例;利用流式细胞术检测YAP降表达细胞和对照组细胞经500n M紫杉醇连续处理不同时间后周期状态/DNA含量及细胞凋亡的情况,对比不同处理组和同一处理组不同YAP表达水平的细胞间凋亡细胞比例差异;用免疫组化方法检测YAP在高级别浆液性卵巢癌组织中的表达情况,分析YAP临床病理意义,验证YAP表达与PGCC、增殖性PGCC的关系。研究结果:1.59例化疗前和化疗后配对的高级别浆液性卵巢癌组织HE染色结果显示卵巢癌化疗后相较于化疗前出现更多的PGCC（P细胞经紫杉醇处理并撤药培养数天后体积普遍增大,但大部分细胞逐渐死亡,仅少部分以PGCC形式存活。免疫荧光结果显示HEY和SKOV3细胞经紫杉醇诱导产生的PGCC的相对细胞面积和相对细胞核面积均明显大于对照组细胞（P细胞组（P细胞面积与核面积呈正相关。流式细胞术结果显示,HEY细胞和SKOV3细胞的PGCC组中多倍体细胞的含量相对于对照组和子代细胞组明显增加（HEY:Control vs PGCC vs Daughter=3.37%vs 52.4%vs 7.07%;SKOV3:Control vs PGCC vs Daughter=0.57%vs 31.1%vs 3.55%）。免疫荧光结果显示随

关键词：多倍体肿瘤巨细胞增殖性多倍体肿瘤巨细胞 YAP 高级别浆液性卵巢癌复发