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夏枯草硫酸多糖对肝癌血管生成的作用及机制研究

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中国肿瘤临床 2014年第12期41卷 758-761页

作者：王雅楠曹蕊朱聪吴雄志天津医科大学肿瘤医院中西医结合科、国家肿瘤临床医学研究中心、天津市肿瘤防治重点实验室天津市300060 山东省胸科医院肿瘤内科

目的:观察夏枯草硫酸多糖(PVSP)对肝癌细胞中血管生成因子bFGF,VEGF和IL-8蛋白分泌及肝癌血管生成的影响。方法:ELISA法观察PVSP和香菇多糖(LNT,不含硫酸基,阴性对照)对bFGF、VEGF和IL-8在肝癌细胞中的分泌情况影响;免疫组化法观察PVSP... 详细信息

目的:观察夏枯草硫酸多糖(PVSP)对肝癌细胞中血管生成因子bFGF,VEGF和IL-8蛋白分泌及肝癌血管生成的影响。方法:ELISA法观察PVSP和香菇多糖(LNT,不含硫酸基,阴性对照)对bFGF、VEGF和IL-8在肝癌细胞中的分泌情况影响;免疫组化法观察PVSP和LNT以及PBS空白对照对肝癌组织微血管密度的影响。结果:同PBS空白对照相比,200μg/mL的PVSP抑制bFGF的分泌(P<0.01),而LNT对bFGF表达无影响。各剂量组的PVSP和LNT对VEGF、IL-8的分泌均无影响。200 mg/kgPVSP能够减少肿瘤组织块中的微血管密度(P=0.03),而LNT 10 mg/kg对肿瘤组织中微血管密度无影响。结论:PVSP对bFGF分泌的抑制作用是其抑制肝癌血管生成的一个可能原因。

关键词：夏枯草硫酸多糖香菇多糖血管生成肝癌微血管密度 bFGF

夏枯草硫酸多糖对CCl4致大鼠肝纤维化及TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞活化的影响

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中国实验方剂学杂志 2018年第14期24卷 147-152页

作者：付月月朱兰平张国梁张双霞天津医科大学第一中心临床学院天津300070 天津医科大学总医院天津300052 天津市第一中心医院天津300192

目的：观察夏枯草硫酸多糖（PSSP）对四氯化碳（CCl4）所致的大鼠肝纤维化及转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导活化大鼠肝星状细胞-T6（HSC-T6）的影响,从而初步探讨PSSP抗纤维化的机制。方法：采用CCl4-橄榄油溶液腹腔注射诱导大鼠肝纤... 详细信息

目的：观察夏枯草硫酸多糖（PSSP）对四氯化碳（CCl4）所致的大鼠肝纤维化及转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导活化大鼠肝星状细胞-T6（HSC-T6）的影响,从而初步探讨PSSP抗纤维化的机制。方法：采用CCl4-橄榄油溶液腹腔注射诱导大鼠肝纤维化造模,随机分为5组,分别为正常组,模型组,秋水仙碱组（0.25 mg·kg^-1）,PSSP高剂量组（300 mg·kg^-1）和PSSP低剂量组（100 mg·kg^-1）。分别测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,层粘连蛋白（LN）,透明质酸（HA）,Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和Ⅳ胶原（C-Ⅳ）的含量;采用苏木素-伊红（HE）及天狼猩红染色观察大鼠肝组织病理学改变;体外培养HSC-T6细胞;采用细胞增殖与活性法（CCK-8）测定PSSP对TGF-β1诱导的HSC-T6细胞增殖的影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HSC-T6细胞中Ⅰ型胶原（Col-I）,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA和蛋白的表达。结果：与模型组比较,PSSP可明显降低大鼠ALT,AST,HA,LN,PC-Ⅲ和C-Ⅳ的含量,并减轻大鼠肝纤维化程度（P〈0.01）;PSSP可抑制TGF-β1诱导的HSC-T6细胞的增殖,减少HSC-T6细胞Col-I,α-SMA mRNA和蛋白的相对表达量（P〈0.01）。结论：PSSP具有很好的抗纤维化作用,其机制可能与抑制肝星状细胞活化及抑制胶原合成与沉积,减少细胞外基质（ECM）的生成并促进其降解有关。

关键词：夏枯草硫酸多糖肝纤维化肝星状细胞 Ⅰ型胶原 α-平滑肌肌动蛋白

夏枯草硫酸多糖对四氯化碳致大鼠肝纤维化的干预作用

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天津医药 2018年第2期46卷 143-147页

作者：付月月张双霞张国梁天津医科大学-中心临床学院 300192

目的探讨夏枯草硫酸多糖(PVSP)对四氯化碳(CCl_4)致大鼠纤维化的干预作用。方法采用CCl_4-橄榄油腹腔注射诱导建立SD大鼠肝纤维化模型,将造模成功的大鼠随机分成3组,每组10只,分别为模型组(Model组)、PVSP高剂量组(PVSP-H组:400 mg/kg)... 详细信息

目的探讨夏枯草硫酸多糖(PVSP)对四氯化碳(CCl_4)致大鼠纤维化的干预作用。方法采用CCl_4-橄榄油腹腔注射诱导建立SD大鼠肝纤维化模型,将造模成功的大鼠随机分成3组,每组10只,分别为模型组(Model组)、PVSP高剂量组(PVSP-H组:400 mg/kg)和PVSP低剂量组(PVSP-L组:100 mg/kg)。并设空白对照组(Blank组)和溶剂对照组(Solvent组)。采用全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的含量,HE和天狼猩红染色比较炎症及肝纤维化程度;采用qRT-PCR和免疫组织化学分析肝组织中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白的表达量。结果 Solvent组大鼠血清中ALT、AST及肝组织中Col-Ⅰ、α-SMA mRNA和蛋白与Blank组相比差异均无统计学意义;与Model组相比,PVSP能显著降低血清ALT和AST(P<0.05);HE和天狼猩红染色结果显示PVSP能减轻炎症及纤维化程度;qRT-PCR和免疫组织化学结果显示PVSP明显降低大鼠肝脏内Col-Ⅰ、α-SMA mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论 PVSP具有减轻大鼠肝纤维化作用,其机制可能与抑制Col-Ⅰ、α-SMA表达,减少细胞外基质的生成并促进细胞外基质的降解有关。

关键词：肝硬化疾病模型动物四氯化碳夏枯草硫酸多糖

夏枯草硫酸多糖对大鼠肝纤维化的保护作用及部分机制的研究

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夏枯草硫酸多糖对大鼠肝纤维化的保护作用及部分机制的研究

作者：付月月天津医科大学

学位级别：硕士

目的:观察夏枯草硫酸多糖(Prunella vulgaris sulfated polysaccharide,PVSP)对TGF-β(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导活化的大鼠肝星状T6细胞(HSC-T6)的作用,同时探索PVSP四氯化碳(carbon tetrachaloride,CCl)所致大鼠肝纤维化的作用,并探讨其部分相关机制。方法:体外培养HSC-T6细胞,用不同浓度的PVSP(50、100、200μg/ml)作用于TGF-β(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导活化的HSC-T6细胞,采用细胞增殖与活性法(CCK8)测定PVSP对HSC-T6细胞增殖的影响;采用荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HSC-T6细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原(Col-I)mRNA和蛋白的相对表达量。采用40%CCl-橄榄油溶液腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,将大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、秋水仙碱阳性对照组(0.25 mg/kg)、PVSP高剂量组(300 mg/kg)和PVSP低剂量组(100 mg/kg)和模型组。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法分别测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、III型前胶原(procollagen-III-peptide,PC-III)、IV胶原(type IV collagen,C-IV)的含量;采用苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)及天狼猩红染色观察大鼠肝组织病理学改变。此外,采用RT-PCR和免疫组织化学法检测大鼠肝组织中α-SMA、Col-I和TGF-β mRNA及蛋白的表达,并采用Western blot检测大鼠肝组织中Smad3、Smad2/3和Smad7蛋白的表达。结果:细胞实验显示,PVSP可抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的增殖(P<0.05);与TGF-β组相比,PVSP可减少HSC-T6细胞α-SMA和Col-I mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.05或P<0.01)。体内动物实验显示,模型组大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PC-III和C-IV的含量均显著高于正常组(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,PVSP组大鼠血清ALT、AST、HA、LN、PC-III和C-IV的含量显著降低(P<0.05),且高剂量作用比较明显(P<0.05)。病理学结果显示,PVSP可减轻大鼠肝脏组织胶原沉积及减轻大鼠肝纤维化程度。模型组大鼠肝组织α-SMA、Col-I和TGF-β mRNA及蛋白的表达高于正常组(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,PVSP组α-SMA、Col-I和TGF-β mRNA及蛋白明显低于模型组(P<0.05),且高剂量组作用明显(P<0.05)。模型组大鼠肝组织中Smad3和Smad2/3蛋白表达显著高于正常组(P<0.05或P<0.01),而Smad7蛋白表达显著低于正常组(P<0.05);与模型组相比,PVSP组大鼠肝组织中Smad3和Smad2/3明显增加(P<0.05),Smad7蛋白表达减少(P<0.05),且高剂量作用比较明显(P<0.05)。结论:PVSP可抑制TGF-β诱导的大鼠肝星状细胞的活化;并对CCl所致的大鼠肝纤维化有保护作用,其作用机制可能通过调控TGF-β/Smads信号通路,从而抑制HSC增殖与活化,减少ECM生成及促进其降解,最终起到抗纤维化的作用。本研究为PVSP应用于临床提供了理论基础,并鼓励进一步的基础实验及临床实验来开发治疗肝纤维化的新药。

关键词：夏枯草硫酸多糖肝纤维化肝星状细胞 α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原TGF-β1 Smads通路

夏枯草硫酸多糖对异烟肼所致小鼠抗结核药物性肝损伤的保护作用及机制

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临床消化病杂志 2021年第4期33卷 242-245页

作者：王蓉韩亮赵戈蕾青海省第4人民医院呼吸2科青海西宁810000 河南省中医院科研科河南郑州450000 河南省中医院肿瘤一区河南郑州450000

[目的]分析夏枯草硫酸多糖对异烟肼所致小鼠抗结核药物性肝损伤的保护作用,并探究其可能的机制。[方法]将24只SPF级雄性C57 BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组和实验组,每组8只。模型组和实验组每日定时予以异烟肼100 mg/kg灌胃1次。... 详细信息

[目的]分析夏枯草硫酸多糖对异烟肼所致小鼠抗结核药物性肝损伤的保护作用,并探究其可能的机制。[方法]将24只SPF级雄性C57 BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组和实验组,每组8只。模型组和实验组每日定时予以异烟肼100 mg/kg灌胃1次。实验组于异烟肼灌胃前予以夏枯草硫酸多糖100 mg/kg灌胃预处理,每4 d灌胃1次,共3次。异烟肼处理2周后处死小鼠,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性;肝脏匀浆后检测肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理形态学的改变;RT-qPCR技术检测肝脏组织白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达;Western blot技术检测肝脏组织IL-6和TNF-α蛋白的表达。[结果]与正常对照组相比,模型组和实验组小鼠血清AST、ALT活性水平和肝组织MDA含量升高(P夏枯草硫酸多糖对异烟肼所致小鼠抗结核药物性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化应激反应、降低炎症反应有关。

关键词：肝损伤夏枯草硫酸多糖异烟肼炎症因子氧化应激