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远端上游元件结合蛋白3对成骨细胞增殖、成骨分化和糖酵解的影响

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中国骨质疏松杂志 2024年第7期 994-999页

作者：姚尚辰赵波李艳清李林中山市骨科医院骨科延边大学附属医院骨科

目的探究远端上游元件结合蛋白3(far upstream element binding protein 3,FUBP3)介导糖酵解对成骨细胞分化能力和功能的影响。方法实时荧光定量PCR(reverse transcription real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测骨质疏松性骨折患者外周血和接受入院24 h、接受治疗1、2、3、4周时FUBP3 mRNA的表达水平，RT-qPCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测骨质疏松性骨折患者骨组织FUBP3 mRNA和蛋白表达水平。MC3T3-E1细胞分为sh-NC组、sh-FUBP3组、pcDNA组、pcDNA-FUBP3组，MTT和EdU检测细胞增殖活性，Western blot检测Runt相关转录因子2(runtrelated transcription factor 2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporters type 1,Glut1)、Glut3蛋白，试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatse, ALP)活性、葡萄糖消耗量及乳酸生成量。结果骨质疏松性骨折患者外周血中FUBP3 mRNA表达水平高于非骨质疏松性骨折患者，骨质疏松性骨折患者骨组织中FUBP3 mRNA和蛋白表达水平高于非骨质疏松性骨折患者(P增殖、成骨分化和糖酵解，过表达FUBP3则相反。

关键词：远端上游元件结合蛋白3 糖酵解成骨细胞增殖成骨分化骨质疏松性骨折

细胞周期相关基因的胶质母细胞瘤预后模型构建及RFC2的细胞增殖效应研究

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西安交通大学学报(医学版) 2024年

作者：王二静吴伟周浩宇王乙錩项健阳王佳王茂德西安交通大学第一附属医院神经外科西安交通大学第一附属医院神经外科

目的旨在研究复制因子C亚基2（RFC2）与胶质母细胞瘤（GBM）患者预后和肿瘤细胞增殖之间的关系，并探索其在胶质母细胞瘤发展中的潜在分子通路。方法利用生物信息学方法，筛选出可作为GBM独立预后因素的细胞周期基因，结合临床指标，... 详细信息

目的旨在研究复制因子C亚基2（RFC2）与胶质母细胞瘤（GBM）患者预后和肿瘤细胞增殖之间的关系，并探索其在胶质母细胞瘤发展中的潜在分子通路。方法利用生物信息学方法，筛选出可作为GBM独立预后因素的细胞周期基因，结合临床指标，构建GBM患者风险评分模型并验证，对目标基因RFC2进行GO、KEGG和GSEA分析。取对数生长期的U87 GBM细胞进行慢病毒转染后分组（空白对照组、shRFC2#1、shRFC2#2），通过qRT-PCR、Western blotting、Edu染色、克隆形成实验检测mRNA表达、蛋白表达和细胞增殖。结果 RFC2在GBM中表达上调，并随着胶质瘤病理级别升高，呈明显上调趋势。基因功能与通路分析结果提示，RFC2在姐妹染色体分离、染色体分离、细胞器裂变、核分裂、核有丝分裂等进程中，促进细胞周期过程中G1向S期转变。qRT-PCR和Western blotting结果显示，相较空白对照组，慢病毒敲低组中转录mRNA减少（P增殖，RFC2有可能成为GBM潜在的生物标志物和治疗靶标。

关键词：胶质母细胞瘤(GBM) 复制因子C亚基2(RFC2) 预后增殖

益气解毒方通过TGF-β1/SMAD3信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭

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中药新药与临床药理 2024年第7期 935-943页

作者：郭利培张文青刘洁史红健何迎春王贤文范婧莹湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室

目的研究益气解毒方对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并从转化生长因子β1（TGF-β1）/SMAD3信号通路探讨其对增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法（1）将鼻咽癌细胞分为4组：溶剂对照组、益气解毒方0.5 mg·mL-1组、益气解毒方1.0... 详细信息

目的研究益气解毒方对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并从转化生长因子β1（TGF-β1）/SMAD3信号通路探讨其对增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法（1）将鼻咽癌细胞分为4组：溶剂对照组、益气解毒方0.5 mg·mL-1组、益气解毒方1.0 mg·mL-1组、5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil,5-Fu） 2μg·mL-1组，采用实时无标记细胞功能分析仪（real time cellular analysis technology,RTCA）监测细胞增殖；创伤愈合实验检测细胞迁移；药物干预24 h后，侵袭小室法检测细胞侵袭；Western Blot法检测细胞β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、TGF-β1、SMAD3蛋白的表达水平。（2）将鼻咽癌细胞分为5组：溶剂对照组、TGF-β1 10 ng·mL-1组、TGF-β1 10 ng·mL-1+益气解毒方1.0 mg·mL-1组、益气解毒方1.0 mg·mL-1组、LY3200882 10μmol·L-1组，采用实时无标记细胞功能分析仪监测细胞增殖；创伤愈合实验检测细胞迁移；药物干预24 h后，侵袭小室法检测细胞侵袭；Western Blot法检测细胞β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、TGF-β1、SMAD3蛋白的表达水平。（3）随机将裸鼠分为模型组、益气解毒方组和5-Fu组。皮下部位注射细胞悬液制备鼻咽癌裸鼠移植瘤模型，基本成瘤后，5-Fu组每2 d腹腔注射1次，其余组每天灌胃给药1次，连续3周。每隔3 d测量瘤体体积1次；Western Blot法检测各组组织中β-catenin、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平。结果与溶剂对照组比较，益气解毒方(0.5、1.0 mg·mL-1)组的细胞增殖曲线均下降，细胞迁移和侵袭能力均降低（P增殖、迁移和侵袭的能力明显增强（P增殖、迁移和侵袭。

关键词：益气解毒方鼻咽癌 TGF-β1/SMAD3信号通路增殖迁移侵袭 BALB/c-nu裸鼠人高转移鼻咽癌 5-8F 细胞

环状RNA CDR1-AS通过靶向miR-1277对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫因子表达的影响

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中国免疫学杂志 2024年第5期40卷 939-944页

作者：王頔郭兆刚亢野徐然中国医科大学附属盛京医院病理科沈阳110004 武警辽宁省总队医院沈阳110034 中国医科大学附属盛京医院胸外科沈阳110004

目的:探究环状RNA(circRNA)小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1-AS)对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫因子表达的影响及可能机制。方法:分别以癌旁组织、支气管上皮细胞BEAS-2B为对照,qRT-PCR检测肺癌组织、肺癌细胞系(NCI-H23、H1299、NCI-H4... 详细信息

目的:探究环状RNA(circRNA)小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1-AS)对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫因子表达的影响及可能机制。方法:分别以癌旁组织、支气管上皮细胞BEAS-2B为对照,qRT-PCR检测肺癌组织、肺癌细胞系(NCI-H23、H1299、NCI-H446)中CDR1-AS、miR-1277表达。以肺癌H1299细胞为研究对象,分别转染CDR1-AS小干扰RNA(si-CDR1-AS)、miR-1277模拟物或共转染si-CDR1-AS与miR-1277抑制剂后,CCK-8实验、克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞活性、克隆形成数、细胞凋亡率,ELISA检测细胞培养上清液中免疫因子(TNF-α、IFN-γ)表达。双荧光素酶报告基因实验验证CDR1-AS与miR-1277的调控关系。结果:与癌旁组织或BEAS-2B细胞比较,肺癌组织或细胞系(NCI-H23、H1299、NCIH446)中CDR1-AS表达升高(P增殖、凋亡及免疫因子表达的影响。结论:CDR1-AS在肺癌组织和细胞系中表达上调,沉默其表达可通过靶向上调miR-1277抑制肺癌H1299细胞增殖及肿瘤细胞免疫逃逸,并诱导细胞凋亡。

关键词：肺癌 CDR1-AS miR-1277 增殖凋亡免疫逃逸

川芎嗪通过抑制circ＿0026462调控先兆子痫发展中滋养层细胞增殖、侵袭和迁移

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中草药 2024年第13期 4455-4462页

作者：冯双苗张化莲驻马店市中心医院病理产科

目的探讨川芎嗪对先兆子痫发展中滋养层细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法用左旋硝基精氨酸甲酯建立先兆子痫动物模型，并随机分为对照组、模型组和川芎嗪组，采用苏木素-伊红染色观察胎盘组织病理学变化。人绒毛膜滋养层... 详细信息

目的探讨川芎嗪对先兆子痫发展中滋养层细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法用左旋硝基精氨酸甲酯建立先兆子痫动物模型，并随机分为对照组、模型组和川芎嗪组，采用苏木素-伊红染色观察胎盘组织病理学变化。人绒毛膜滋养层HTR8/SVneo细胞和人绒毛膜癌JEG3细胞给予川芎嗪干预后，采用CCK-8实验、EdU实验、Transwell实验以及划痕实验检测细胞增殖、侵袭及迁移能力；利用NCBI在线数据库（GSE165324）分析先兆子痫患者来源的人脐静脉血管内皮细胞和正常人脐静脉血管内皮细胞中前8个上调的circRNAs;qRT-PCR法检测川芎嗪对HTR8/SVneo和JEG3细胞circRNA表达的影响，以及先兆子痫患者和对照组胎盘组织中的circ＿0026462表达量；利用RNase R分析circRNA稳定性。circRNA过表达后，检测川芎嗪对HTR8/SVneo和JEG3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。结果川芎嗪可以改善左旋硝基精氨酸甲酯诱导的大鼠胎盘组织细胞肿胀、空泡化增加以及炎症细胞浸润现象，并促进滋养层细胞增殖、侵袭和迁移（P增殖、侵袭和迁移（P增殖、侵袭和迁移的促进作用（P增殖、侵袭和迁移。

关键词：川芎嗪先兆子痫滋养层细胞增殖迁移侵袭 circ＿0026462

虎杖苷调节YAP1/TAZ信号通路对缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2024年第1期53卷 68-74页

作者：刘文光刘思佟张薇薇庄桂银谢思雨田雪李晓珊谷强新疆维吾尔自治区石河子大学第一附属医院儿科石河子832000 新疆维吾尔自治区石河子大学第一附属医院产科石河子832000 新疆维吾尔自治区石河子市人民医院产科石河子832000

目的探究虎杖苷(PD)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法将新生大鼠随机分为6组:对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂(PD高剂量+... 详细信息

目的探究虎杖苷(PD)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法将新生大鼠随机分为6组:对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂(PD高剂量+XMU-MP-1)组,每组10只。缺氧2周后,检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化,并计算肺动脉管壁厚度占总厚度的百分比(WT%)和管壁面积占总面积的百分比(WA%)。分离各组新生大鼠PASMCs,分为NC组、低氧(Hypoxia)组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+XMU-MP-1组。CCK-8和EdU检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹(Western blot)检测肺组织和PASMCs中Yes相关蛋白1(YAP1)、PDZ结合域的转录共刺激因子信号通路(TAZ)、哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肺动脉管壁明显增厚,管腔变窄,RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著升高(均P增殖,促进凋亡。

关键词：缺氧性肺动脉高压虎杖苷肺动脉平滑肌细胞增殖凋亡 YAP1/TAZ信号通路

HSD17B12对兔卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响

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中国畜牧杂志 2024年第5期60卷 206-212页

作者：韩旭东任宇尧刘燕赵博昊吴信生陈阳扬州大学动物与科学学院江苏扬州225000 浙江省农科院畜牧兽医研究所浙江杭州310000

本实验旨在研究羟基类固醇17-β脱氢酶12(17βHydroxysteroid Dehydrogenase Type 12,HSD17B12)对兔卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。首先克隆了兔HSD17B12基因,进行生物信息学分析;分离原代兔颗粒细胞(Granulosa Cells,GCs),并利用FSHR... 详细信息

本实验旨在研究羟基类固醇17-β脱氢酶12(17βHydroxysteroid Dehydrogenase Type 12,HSD17B12)对兔卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。首先克隆了兔HSD17B12基因,进行生物信息学分析;分离原代兔颗粒细胞(Granulosa Cells,GCs),并利用FSHR免疫荧光法进行鉴定;构建HSD17B12基因过表达质粒及干扰RNA,转染GCs,利用qRT-PCR检测HSD17B12对增殖、凋亡相关基因的调控作用,并利用流式细胞、CCK8等方法检测HSD17B12对GCs增殖、凋亡的影响。结果显示:①利用FSHR免疫荧光染色,鉴定分离原代细胞是GCs,FSHR表达呈阳性。②克隆HSD17B12基因,发现其cDNA全长为938 bp,编码312个氨基酸。进化树显示兔与黑猩猩(Pan Troglodytes)、猕猴(Macaca Mulatta)等聚在一起,鸡(Gallus Gallus)为外支。③过表达HSD17B12可以提高增殖相关基因AKT1-1的表达(P增殖,抑制GCs凋亡(P增殖,抑制其凋亡,为其在母兔卵巢发育中的作用机制研究提供理论依据。

关键词： HSD17B12 兔颗粒细胞增殖凋亡

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CircRHOT1调节miR-187-3p/SOX4轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

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中国免疫学杂志 2024年第3期40卷 577-585页

作者：孙沛姜振伟刘倩武汉市普仁医院检验科武汉430080 武汉市普仁医院肿瘤科武汉430080

目的:研究环状RNA ras同源物基因家族成员T1(CircRHOT1)调节miR-187-3p/性别决定区Y框蛋白4(SOX4)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:采用实时荧光定量PCR和Western blot检测体外培养的人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺... 详细信息

目的:研究环状RNA ras同源物基因家族成员T1(CircRHOT1)调节miR-187-3p/性别决定区Y框蛋白4(SOX4)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:采用实时荧光定量PCR和Western blot检测体外培养的人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、Hs-578T、MDA-MB-231中CircRHOT1、miR-187-3p与SOX4表达;将体外培养的MCF-7细胞随机分为对照组、CircRHOT1敲低(转染CircRHOT1 siRNA质粒)组、miR-187-3p mimics(转染miR-187-3p mimics)组、共转染阴性对照(转染空载质粒和miR-187-3p inhibitor阴性对照)组、CircRHOT1敲低+miR-187-3p inhibitor(转染CircRHOT1 siRNA质粒和miR-187-3p inhibitor)组,分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞CircRHOT1、miR-187-3p与SOX4表达;采用EdU染色和平板集落形成实验检测各组细胞增殖;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡;采用免疫荧光染色检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达比值(Bax/Bcl-2)。各组细胞与人外周血淋巴细胞共培养并分组转染后,采用流式细胞术检测各组人外周血淋巴细胞中活化CD8^(+)T细胞比例;采用MTT法检测人外周血淋巴细胞对各组MCF-7细胞的杀伤率。采用双荧光素酶报告实验检测MCF-7细胞CircRHOT1对miR-187-3p、miR-187-3p对SOX4的靶向调控。结果:与人正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,人乳腺癌MCF-7、Hs-578T、MDA-MB-231细胞CircRHOT1、SOX4蛋白与mRNA表达明显升高(P0.05),SOX4蛋白与mRNA表达、EdU阳性率、集落生成率升高(P0.05)。结论:敲低CircRHOT1可通过上调miR-187-3p而降低SOX4表达,从而减弱乳腺癌细胞增殖活性,并促进其凋亡,还可抑制CD8^(+)T细胞活化并增强其癌细胞杀伤力,减弱乳腺癌细胞免疫逃逸。

关键词： CircRHOT1 miR-187-3p/SOX4轴乳腺癌增殖凋亡免疫逃逸

LncRNA MYLK-AS1调节miR-141-3p/STMN1轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

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重庆医科大学学报 2024年第3期49卷 276-282页

作者：刘洁谢兴明钮洪霞杨先智遵义医科大学第三附属医院/遵义市第一人民医院胃肠外科遵义563000

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肌球蛋白轻链激酶反义RNA1(myosin light chain kinase antisense RNA1,MYLK-AS1)调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1(stathmin 1,STMN1)轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:将HGC27细胞分为NC组、si-NC组、si-MYLK-AS1组、si-MYLK-AS1+inhibitor NC组、si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor组。双萤光素酶报告基因实验检测LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1的关系;qRT-PCR检测HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p表达;CCK-8法检测HGC27细胞增殖情况;流式细胞术检测HGC27细胞凋亡;使用Transwell实验评估了HGC27细胞的侵袭和迁移能力,并统计了穿透基质膜的细胞数量;同时采用Western blot技术检测了HGC27细胞中STMN1、E-cadherin、Vimentin及N-cadherin这几种蛋白表达量的变化。结果:HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、STMN1水平高于GES-1细胞(P增殖、凋亡及侵袭特性产生明显影响。

关键词：长链非编码RNA肌球蛋白轻链激酶反义RNA1 微小RNA-141-3p/微管不稳定蛋白1轴胃癌增殖凋亡侵袭