检索结果-南通市图书馆

西南民族学院学报（自然科学版） 1999年第1期25卷 63-67页

作者：唐清成都华生基因医药研究所

以人ＡＰＫＤ基因探针２１８Ｅｐ６在大鼠基因组文库中筛选到阳性克隆ｐＭ１。

关键词： APKD 克隆同源顺序基因治疗基因组文库

稻瘟病菌细菌人工染色体(BAC)基因组文库的构建

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云南农业大学学报 2002年第4期17卷 331-334页

作者：周晓罡朱立煌翟文学李进斌罗朝喜李成云云南省农业科学院生物技术研究所云南昆明650223 中国科学院遗传研究所北京100101 云南省农业科学院植物保护研究所云南昆明650205

稻瘟病菌是一种重要的植物病原菌 ,同时又是研究植物和病原物之间相互关系的一个重要试验系统。实验通过采用 95 - 2 3- 4a稻瘟病菌株经提取纯化得到该稻瘟病菌的细胞核基因组总DNA ,用限制性内切酶部分酶解后 ,与经末端去磷酸化处理过... 详细信息

稻瘟病菌是一种重要的植物病原菌 ,同时又是研究植物和病原物之间相互关系的一个重要试验系统。实验通过采用 95 - 2 3- 4a稻瘟病菌株经提取纯化得到该稻瘟病菌的细胞核基因组总DNA ,用限制性内切酶部分酶解后 ,与经末端去磷酸化处理过的pCUGIBAC1质粒载体按一定摩尔比例相互连接 ,通过转化E .coliDH10B感受态细胞进而通过蓝白斑筛选挑取白色克隆从而构建了 95 - 2 3- 4a稻瘟病菌株的细菌人工染色体 (BAC)基因组文库。通过进行酶切检测及Southern杂交分析后确定所构建的BAC文库平均插入片段 2 9.1kb ,该文库覆盖 7.4倍基因组。

关键词：稻瘟病菌细菌人工染色体 BAC 基因组文库

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双元细菌人工染色体基因组文库研究进展

现代农业科技 2013年第2期 29-30,36页

作者：朱丹张杰伟陈亚娟张少斌魏建华沈阳农业大学辽宁沈阳110866 北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心

酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)是伴随着人类基因组计划的实施而产生的,这些大片段基因克隆载体的应用推动了分子生物学、遗传学等学科的快速发展。以农杆菌介导的直接转化植物为代表的双元细菌人工染色体(BIBAC)载体的发展... 详细信息

酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)是伴随着人类基因组计划的实施而产生的,这些大片段基因克隆载体的应用推动了分子生物学、遗传学等学科的快速发展。以农杆菌介导的直接转化植物为代表的双元细菌人工染色体(BIBAC)载体的发展,加速植物基因组的研究,成为植物基因组分析、基因功能鉴定、染色体结构与功能关系研究的重要工具。介绍了人工染色体文库的发展史,根据建库经验,着重阐述了BIBAC文库的构建、鉴定与应用。

关键词：人工染色体双元细菌人工染色体文库基因组文库

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高效生防菌B29抗菌物质基因组文库的构建

黑龙江科学 2013年第9期4卷 18-20,26页

作者：赵晓宇孟利强曹旭李晶张淑梅姜威张介驰黑龙江省科学院高技术研究院哈尔滨150020 黑龙江省科学院微生物研究所哈尔滨150010 黑龙江省生物工程重点实验室哈尔滨150010

生防菌株B29是一个能够防治多种植物病害并促进植物生长的专利菌株,经鉴定为枯草芽孢杆菌。根据抗菌物质基因大小,本研究将提取的枯草芽孢杆菌基因组DNA采用Sau3AI部分酶切,回收3~5 kb酶切产物,将产物与经BamHI单酶切并经去磷酸化后的pU... 详细信息

生防菌株B29是一个能够防治多种植物病害并促进植物生长的专利菌株,经鉴定为枯草芽孢杆菌。根据抗菌物质基因大小,本研究将提取的枯草芽孢杆菌基因组DNA采用Sau3AI部分酶切,回收3~5 kb酶切产物,将产物与经BamHI单酶切并经去磷酸化后的pUC19质粒连接,转化DH5α大肠杆菌,培养后共获得11 090个阳性克隆,按99.99%的概率计算,构建的基因组文库共覆盖了B29基因组3次,符合文库构建要求。该研究为生防菌株防治作物真菌病害及筛选抗菌物质调控基因奠定了基础。

关键词：生物防治枯草芽孢杆菌基因组文库

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一种快速简便初步筛选酵母基因组文库的方法

广东医学 2003年第1期24卷 19-20页

作者：崔东郑文岭马文丽叶长烂姜敏罗剑陈勋东赵林广州军区广州总医院医学实验科广州510010 第一军医大学分子生物学研究所广州510515 华南理工大学食品与生物工程学院广州510640

目的　建立一种快速、简便、灵敏的筛选酵母基因组文库的方法。方法　利用同源重组技术 ,将酵母基因组文库中发生突变的菌株通过LacZ报告基因进行检测 ,从而检测出酵母突变株。结果　在X -gal培养基上出现蓝色菌落 ,即为所需的阳性菌落... 详细信息

目的　建立一种快速、简便、灵敏的筛选酵母基因组文库的方法。方法　利用同源重组技术 ,将酵母基因组文库中发生突变的菌株通过LacZ报告基因进行检测 ,从而检测出酵母突变株。结果　在X -gal培养基上出现蓝色菌落 ,即为所需的阳性菌落。结论　运用同源重组技术 ,初步筛选了所需的酵母突变株 ,为新的功能性基因组的研究和发展构建平台。

关键词：同源重组酵母基因组文库

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平菇基因组文库的构建

中国食用菌 1992年第6期11卷 15-16页

作者：吕作舟马爱民杨新美华中农业大学武汉430070 上海农科院食用菌研究所

本文采用原生质体裂解法制备高分子量平菇总DNA。通过Sau3A部分酶切和蔗糖密度梯度离心,获得15～25Kb平菇总DNA酶切片段。并以Lambda的衍生物EMBL3为载体,酶连形成重组DNA。然后将其包装,转染受体菌LE392,在TB平板上获得2.5×10~4个重... 详细信息

本文采用原生质体裂解法制备高分子量平菇总DNA。通过Sau3A部分酶切和蔗糖密度梯度离心,获得15～25Kb平菇总DNA酶切片段。并以Lambda的衍生物EMBL3为载体,酶连形成重组DNA。然后将其包装,转染受体菌LE392,在TB平板上获得2.5×10~4个重纽子克隆。此重组子克隆群即构成中蔬10号平菇菌株基因组文库。

关键词：平菇原生质体裂解基因组文库

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鼠疫菌EV76株BAC基因组文库的构建

中国地方病防治 2019年第1期34卷 17-18页

作者：王照邵奎东邴琪马娜任瑞冰关心王铁峰张廷博袁英良唐丹吉林省地方病第一防治研究所吉林白城137000 白城市师范学院白城市畜牧科学研究院

目的构建鼠疫EV76株基因组BAC文库,为对鼠疫菌的分子变异、活菌疫苗的安全性等方面的研究奠定基础。方法凝胶包埋裂解法获得完整的鼠疫菌基因组,经HindⅢ部分酶切至50 kb～300 kb大小片段,连接载体pCC1BAC后,电转化于*** EPI300感受态,... 详细信息

目的构建鼠疫EV76株基因组BAC文库,为对鼠疫菌的分子变异、活菌疫苗的安全性等方面的研究奠定基础。方法凝胶包埋裂解法获得完整的鼠疫菌基因组,经HindⅢ部分酶切至50 kb～300 kb大小片段,连接载体pCC1BAC后,电转化于*** EPI300感受态,经氯霉素抗性、蓝白斑筛选得到阳性克隆,并对文库进行连接转化效率、稳定性、同源性等技术检测。结果所建文库各项指标符合预期,文库构建成功。结论鼠疫菌EV76株文库的成功构建,将为鼠疫的功能研究和疫苗稳定性的检测监控提供有力的依据。

关键词：鼠疫耶尔森氏菌基因组文库 BAC文库

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植物可转化基因组文库的发展和应用

生物技术通报 1999年第5期15卷 12-15页

作者：方玉达刘大钧南京农业大学农业部作物细胞遗传重点开放实验室南京210095

在基因克隆时，如应用通常的一些基因组文库如ＹＡＣ、ＢＡＣ和ＰＡＣ等进行目的基因的筛选，在获得候选克隆后，通常进行亚克隆，然后对每个亚克隆逐一进行基因功能互补试验，不仅工作量大，而且有遗漏的可能。近年来，对一些通常的... 详细信息

在基因克隆时，如应用通常的一些基因组文库如ＹＡＣ、ＢＡＣ和ＰＡＣ等进行目的基因的筛选，在获得候选克隆后，通常进行亚克隆，然后对每个亚克隆逐一进行基因功能互补试验，不仅工作量大，而且有遗漏的可能。近年来，对一些通常的基因组文库载体进行改建，已发展了既可用于克隆，又能直接进行转化的载体，这将大大方便大片段ＤＮＡ的转移。

关键词：根癌农杆菌可转化基因组基因组文库应用发展

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濒危畜禽品种YAC基因组文库的构建

中国农业科技导报 2003年第4期5卷 77-79页

作者：关伟军马月辉中国农业科学院畜牧研究所北京100094

尽管酵母人工染色体 (Yeast artificial chrom osome,YAC)存在着克隆效率低、嵌合体出现率高、部分克隆不稳定和缺失等弊端 ,但由于它容纳高分子量 DNA的优点其它载体无法替代 ,而成为人类和动物基因组研究中最为主要的研究工具之一。因... 详细信息

尽管酵母人工染色体 (Yeast artificial chrom osome,YAC)存在着克隆效率低、嵌合体出现率高、部分克隆不稳定和缺失等弊端 ,但由于它容纳高分子量 DNA的优点其它载体无法替代 ,而成为人类和动物基因组研究中最为主要的研究工具之一。因此 ,利用 YAC载体系统构建我国濒危畜禽品种的基因组文库 ,对于在分子水平保存国家重要的基因资源和深入的分子生物学研究等方面 ,均具有非常重要的意义。

关键词：濒危畜禽品种基因组文库酵母人工染色体种质资源 YAC

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毛竹简易基因组文库的快速构建

世界竹藤通讯 2008年第2期6卷 14-18页

作者：梁银燕周明兵汤定钦浙江林学院浙江省现代森林培育技术重点实验室临安311300

以毛竹(Phyllostachys edulis)当年所发新叶为材料,用改良的CTAB法提取基因组DNA,通过超声波震断DNA,琼脂糖凝胶电泳回收大小为700 bp-2000 bp的片段,经T4 DNA聚合酶末端补平,与经过牛小肠碱性磷酸酶处理的pUC19载体连接,通过电转化转... 详细信息

以毛竹(Phyllostachys edulis)当年所发新叶为材料,用改良的CTAB法提取基因组DNA,通过超声波震断DNA,琼脂糖凝胶电泳回收大小为700 bp-2000 bp的片段,经T4 DNA聚合酶末端补平,与经过牛小肠碱性磷酸酶处理的pUC19载体连接,通过电转化转染受体菌XL-1Blue,构建了毛竹基因组文库。文库容量为2.8×107,通过PCR验证,插入片段大小为750 bp-2000 bp,插入效率为91%,符合基因组文库构建的要求,为毛竹特异功能基因的克隆和分子标记的研究奠定了基础。

关键词：毛竹基因组文库 PCR