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微生物学通报 2002年第4期29卷 99-101页

作者：杜翠红周集体黄丽萍董晓丽严滨大连理工大学环境科学与工程学院大连116012

染料降解基因工程菌的构建是染料生物降解研究的重要任务之一,它可以高效地除去废水中的常规生物难降解染料。文中综述了构建染料降解基因工程菌的基础研究进展,主要包括:染料降解菌的筛选、降解特性及酶系的研究、降解性质粒特性及基... 详细信息

染料降解基因工程菌的构建是染料生物降解研究的重要任务之一,它可以高效地除去废水中的常规生物难降解染料。文中综述了构建染料降解基因工程菌的基础研究进展,主要包括:染料降解菌的筛选、降解特性及酶系的研究、降解性质粒特性及基因定位的研究等等。

关键词：染料生物降解基因工程菌研究进展

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人胰岛素原在基因工程菌中的高效表达

华西药学杂志 2005年第1期20卷 14-17页

作者：李红霞余蓉李晓红四川大学华西药学院四川成都610041

目的　构建RRhPI-pQE4. 0E .coliM15表达系统 ,以高效表达 (His) 6 -Arg -Arg -人胰岛素原。方法　正交法优化发酵条件 ,通过湿菌体收率、包涵体收率及发酵液A60. 0 的测定对优化结果进行评估 ,并进一步分析发酵过程中主要因素对高密度... 详细信息

目的　构建RRhPI-pQE4. 0E .coliM15表达系统 ,以高效表达 (His) 6 -Arg -Arg -人胰岛素原。方法　正交法优化发酵条件 ,通过湿菌体收率、包涵体收率及发酵液A60. 0 的测定对优化结果进行评估 ,并进一步分析发酵过程中主要因素对高密度发酵和高效表达的影响。结果　发酵条件优化后 ,每升发酵培养基可得湿菌体约 4 3g ,包涵体约 14g(湿重 )。结论　优化发酵条件可使湿菌体及包涵体的收率提高。

关键词：收率发酵条件基因工程菌菌体发酵培养基发酵液人胰岛素包涵体高效表达 E.coli

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非随机方法构建酿酒酵母基因工程菌

生物工程学报 1998年第3期14卷 332-335页

作者：龚毅陈燕杨胜利中国科学院上海生物工程研究中心

酿酒酵母是基因工程产品研究和生产的一个重要表达系统，表达载体和宿主细胞是构成表达系统的两大要素，虽然外源基因表达的方式、强度主要由表达载体控制，但宿主细胞的选择对最终获取产品的质量和数量也具有十分关键的作用。酿酒酵母... 详细信息

酿酒酵母是基因工程产品研究和生产的一个重要表达系统，表达载体和宿主细胞是构成表达系统的两大要素，虽然外源基因表达的方式、强度主要由表达载体控制，但宿主细胞的选择对最终获取产品的质量和数量也具有十分关键的作用。酿酒酵母基因工程宿主菌除要求具有高的ＤＮＡ...

关键词：酿酒酵母基因工程菌构建非随机法

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利用细菌冰核基因构建促冻杀虫基因工程菌

科学通报 2003年第1期48卷 64-69页

作者：唐朝荣孙福在赵廷昌中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京 100094

冰核细菌是自然界中冰核活性最强的异源冰核(-1~-5℃),已成为一种重要的生物资源.大量研究证明,利用冰核细菌促冻杀虫在理论上已确凿无疑,但难以应用野生型冰核细菌冻杀田间和仓储越冬害虫,其因有二:其一,野生型冰核细菌不能在昆虫肠道... 详细信息

冰核细菌是自然界中冰核活性最强的异源冰核(-1~-5℃),已成为一种重要的生物资源.大量研究证明,利用冰核细菌促冻杀虫在理论上已确凿无疑,但难以应用野生型冰核细菌冻杀田间和仓储越冬害虫,其因有二:其一,野生型冰核细菌不能在昆虫肠道内长期稳定增生定殖,易被排泄体外而丧失冻杀效果;其二,这些冰核细菌在植物体上附生定殖能力强,田间施用后易诱发霜冻害.为解决这些阻碍促冻杀虫应用中的难题,利用自行分离的细菌冰核基因iceA,构建了携带该基因、能进行接合转移和Tn5转座作用的工程质粒mob-Tn5-iceA,又利用该工程质粒将冰核基因iceA整合到阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)染色体DNA上,成功地构建了在无选择压力下冰核基因仍稳定存在并有效表达冰核活性的促冻杀虫基因工程菌.经应用实验证明,解决了阻碍促冻杀虫应用中的难题,为防治我国三北地区农林果树和仓储主要越冬害虫,开辟了一条生防新途径.

关键词：冰核基因工程质粒接合转移和转座促冻杀虫基因工程菌

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微囊化基因工程菌作为尿毒症口服制剂的研究

科学通报 2004年第8期49卷 750-754页

作者：高虹俞耀庭蔡宝立王满燕南开大学生物活性材料教育部重点实验室天津300071

微囊化基因工程菌怍为口服制剂治疗尿毒症是近年来的研究新思路，Klebsiella aerogenes脲酶基因(UreDABCEFG)通过质粒pKAU17转入大肠杆菌*** DH5α，经驯化后能以尿素或氨为惟一氮源生长，因此可将其视为尿素吸附剂，以聚乙烯醇为载体... 详细信息

微囊化基因工程菌怍为口服制剂治疗尿毒症是近年来的研究新思路，Klebsiella aerogenes脲酶基因(UreDABCEFG)通过质粒pKAU17转入大肠杆菌*** DH5α，经驯化后能以尿素或氨为惟一氮源生长，因此可将其视为尿素吸附剂，以聚乙烯醇为载体制各微囊化脲酶基因工程菌，其机械强度远远高于APA微囊，从而解决了APA微囊易破碎的缺点，制各聚乙烯醇微囊化工程菌的适宜条件是聚乙烯醇(平均聚合度为2450)浓度为6％(质量体积比)，用硼酸交联其pH值为6．5，反应时间24h，包菌量为8％(质量体积比)，气流量为3L／min，射流量为1mL／10min，粒径主要分布于20—40目．体外模拟试验表明，含100mg湿菌体的聚乙烯醇微囊4h内清除尿素约18.4mg。

关键词：基因工程菌口服制剂微囊化尿毒症大肠杆菌E.coli 聚乙烯醇平均聚合度机械强度适宜条件反应时间模拟试验 APA 体积比新思路酶基因尿素吸附剂 pH值 min 气流量质量硼酸氨

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天花粉蛋白基因工程菌发酵条件研究

食品科学 2005年第9期26卷 327-329页

作者：赵巧云黎志东宋继蓉董兆麟西北大学化工学院陕西西安710069 第四军医大学微生物学教研室陕西西安710032 西北大学生命科学院陕西西安710069

目的:通过对天花粉蛋白基因工程菌T239发酵条件研究,优化培养及表达条件。方法:研究温度、PH值、培养时间、培养基成分、接种量、诱导剂浓度等6种因素对于表达量的影响。结果:天花粉蛋白基因工程菌T239发酵条件在温度30℃、pH值7.3、摇... 详细信息

目的:通过对天花粉蛋白基因工程菌T239发酵条件研究,优化培养及表达条件。方法:研究温度、PH值、培养时间、培养基成分、接种量、诱导剂浓度等6种因素对于表达量的影响。结果:天花粉蛋白基因工程菌T239发酵条件在温度30℃、pH值7.3、摇床转速200r/min、50ml/500ml培养瓶、接种量3%、培养时间30h、添加葡萄糖浓度为2.0g/L时,表达量最高。

关键词：天花粉蛋白基因工程菌发酵条件

用基因工程菌酶法和化学法制备-D-对羟基苯甘氨酸(英文)

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第2期19卷 151-155页

作者：李志强胡卓逸刘景晶中国药科大学生物制药学院南京210009

D 对羟基苯甘氨酸 (D p HPG)是制备羟氨苄青霉素、羟氨苄头孢菌素和羟氨唑头孢菌素等β 内酰胺类抗生素的重要中间体 ,同时它也用于多种多肽类激素及农药的合成 .在D 对羟基苯甘氨酸的多种制备方法中 ,生物酶转化法具有原料易得、工艺... 详细信息

D 对羟基苯甘氨酸 (D p HPG)是制备羟氨苄青霉素、羟氨苄头孢菌素和羟氨唑头孢菌素等β 内酰胺类抗生素的重要中间体 ,同时它也用于多种多肽类激素及农药的合成 .在D 对羟基苯甘氨酸的多种制备方法中 ,生物酶转化法具有原料易得、工艺简单、耗能少、产率高、成本低、光学纯度好、三废污染少等优势 .为利用生物酶转化法制备D 对羟基苯甘氨酸 ,首先用尿素、乙醛酸和苯酚合成底物D ,L 对羟基苯海因 ,然后利用D 海因酶基因工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞作酶源 ,进行底物D ,L 对羟基苯海因到中间体N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶法转化 ,最后用化学法将N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸进一步转化为D 对羟基苯甘氨酸 .结果表明 ,底物D ,L 对羟基苯海因的收率为 60 % .8L体积的发酵小试实验表明 ,发酵 12h ,工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht的海因酶活力为 30 0 0U L ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳薄层扫描结果显示海因酶表达量约占菌体总可溶性蛋白质的 60 % ,菌体收率为 6% .8L体积的海因酶转化实验表明 ,在 4 %底物D ,L 对羟基苯海因和 1%菌体 (湿重 )pH 9 0情况下 ,反应 5h ,D ,L 对羟基苯海因的转化率可达 96% .在酸性条件下 ,用NaNO2 将N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸转化为D 对羟基苯甘氨酸 ,反应 2h ,转?

关键词： D-对羟基苯甘氨酸制备抗生素中间体生物酶转化法化学法基因工程菌

生物合成茶氨酸的研究进展及构建基因工程菌合成茶氨酸的可行性探讨

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食品与发酵工业 2004年第1期30卷 71-75页

作者：李平宛晓春张正竹安徽农业大学轻工业学院农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室合肥230036

综述了近年来应用微生物发酵法、茶树细胞培养法生物合成茶氨酸的研究进展 ,讨论了构建基因工程菌生物合成茶氨酸的可行性。

关键词：微生物发酵法茶树细胞培养法茶氨酸基因工程菌生物合成

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培养过程对基因工程菌稳定性的影响

微生物学通报 2001年第2期28卷 86-89页

作者：刘志伟郭勇张晨华南理工大学食品与生物工程学院广州510640 嘉应大学生物系梅州514015

重组质粒不稳定性是基因工程菌生产中的主要问题，从培养过程的角度综述了选择压力、操作方式、培养基组成、溶氧、培养温度、ｐＨ等因素对质粒稳定性的影响，为基因工程菌的发酵提供参考。

关键词：基因工程菌培养质粒稳定性重组质粒

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利用基因工程菌去除电解废水中的汞离子

厦门大学学报（自然科学版） 2002年第3期41卷 330-333页

作者：邓旭李清彪孙道华黄益丽 Wilson David B 厦门大学化工系福建厦门361005 Dept.of Molecular Biology and Genetics

利用构建的基因工程菌生物富集真实电解废水中的汞离子 .电解废水中除含有 2 .5 8mg/L的汞离子外 ,还含有十种以上的其它成分 ,且 pH值为 9.6 .实验表明 ,与重组菌对只含汞离子的实验室模拟废水的处理结果比较 ,电解废水中其它组份的存... 详细信息

利用构建的基因工程菌生物富集真实电解废水中的汞离子 .电解废水中除含有 2 .5 8mg/L的汞离子外 ,还含有十种以上的其它成分 ,且 pH值为 9.6 .实验表明 ,与重组菌对只含汞离子的实验室模拟废水的处理结果比较 ,电解废水中其它组份的存在意外地增大了重组菌富集汞离子的作用速率 ,但同时却使细菌的最大汞富集量降低了30 % .废水 pH的变化对重组菌的汞富集行为影响很小 ,说明该基因工程菌能在很宽的pH范围内有效地富集汞 .实验还考察了EDTA及离子强度对富集行为的影响 .

关键词：电解废水基因工程菌生物富集废水处理汞离子废水组成酸碱度离子强度