检索结果-南通市图书馆

肿瘤 2019年第4期39卷 270-279页

作者：叶凯山王拴科周海宇马兵兰州大学第二医院骨科甘肃兰州730030

目的 :探讨骨肉瘤细胞中巨噬细胞集落刺激因子1(macrophage colony-stimulating factor-1,CSF-1)的表达对肿瘤血管生成的影响及其可能的机制。方法 :采用蛋白质印迹法检测人成骨细胞hF OB 1.19和骨肉瘤SAOS-2、MG-63、U2OS细胞中CSF-1... 详细信息

目的 :探讨骨肉瘤细胞中巨噬细胞集落刺激因子1(macrophage colony-stimulating factor-1,CSF-1)的表达对肿瘤血管生成的影响及其可能的机制。方法 :采用蛋白质印迹法检测人成骨细胞hF OB 1.19和骨肉瘤SAOS-2、MG-63、U2OS细胞中CSF-1及同种异体移植炎性因子1(allograft in ammatory factor-1,AIF-1)的表达。将siRNA-CSF-1或其阴性对照(siRNA-NC)转染骨肉瘤SAOS-2细胞后,应用蛋白质印迹法检测各组细胞中AIF-1和Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate-1,Rac-1)的表达。收集siRNA-CSF-1或siRNA-NC转染组SAOS-2细胞的培养上清液,以未转染的SAOS-2细胞作为空白对照(blank control,BC)组,分别与完全培养液以1︰1的体积比混合,制成条件培养液,培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)。分别应用MTT法、Transwell小室法和小管形成实验检测HUVECs增殖、迁移和小管形成情况,应用蛋白质印迹法检测HUVECs中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和Rac-1蛋白的表达。分别用siRNA-CSF-1条件培养液、siRNA-CSF-1条件培养液+DMSO(终体积分数为0.1%)和siRNA-CSF-1条件培养液+Rac-1激活剂佛波酯(phorbol12-myristate 13-acetate,PMA)处理HUVECs 24 h后,分别应用MTT法、Transwell小室法和小管形成实验检测细胞增殖、细胞迁移和小管形成情况,应用蛋白质印迹检测HUVECs中VEGF和Rac-1蛋白的表达。结果 :骨肉瘤SAOS-2、MG-63和U2OS细胞中CSF-1及AIF-1蛋白的表达水平均显著高于人成骨细胞hFOB 1.19(P值均<0.05),且二者呈正相关(R^2=0.492 2,P=0.001 2)。siRNA-CSF-1转染组骨肉瘤SAOS-2细胞中AIF-1和Rac-1的表达水平均下调(P值均<0.05)。骨肉瘤SAOS-2细胞条件培养液处理HUVECs后,siRNA-CSF-1组HUVECs增殖、迁移以及小管形成能力均显著降低(P值均<0.05),VEGF和Rac-1的表达水平均下调(P值均<0.05)。Rac-1激活后,siRNA-CSF-1条件培养液对HUVECs增殖、迁移、小管形成以及VEGF和Rac-1蛋白表达的作用均被反转(P值均<0.05)。结论 :骨肉瘤细胞中CSF-1可能通过AIF-1/Rac-1通路促进肿瘤血管的生成。

关键词：骨肉瘤巨噬细胞集落刺激因子血管生成诱导剂同种异体移植炎性因子

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