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凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）和罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）卵黄蛋白原mRNA合成部位的初步研究

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凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）和罗氏沼虾（Macrobrachium ...

作者：李媛媛上海海洋大学

学位级别：硕士

甲壳纲十足目是我国水产养殖业的主要经济种类。卵黄积累是甲壳动物卵母细胞发育成熟的必要前提[1]，也是雌性个体生殖周期中的关键阶段[2]。虾类胚胎发育以及无节幼体发育完全依赖于卵黄来满足营养需要。卵黄蛋白在甲壳类中的合成部位... 详细信息

甲壳纲十足目是我国水产养殖业的主要经济种类。卵黄积累是甲壳动物卵母细胞发育成熟的必要前提[1]，也是雌性个体生殖周期中的关键阶段[2]。虾类胚胎发育以及无节幼体发育完全依赖于卵黄来满足营养需要。卵黄蛋白在甲壳类中的合成部位一直以来是一个争论不休的话题，就目前的研究成果看来，内源性合成和外源性合成都有报道。本实验选择甲壳纲十足目对下派的凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）和真虾派的罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）为研究对象，通过荧光定量PCR和Northern杂交的方法，初步探讨其卵巢发育不同阶段卵黄蛋白原的合成部位以及相对合成量。根据卵巢发育情况把凡纳滨对虾的卵巢分为6个时期：卵原细胞增殖期，卵黄发生前期，初级卵黄发生期，次级卵黄发生期，成熟期，恢复期。把罗氏沼虾的卵巢分为5个发育阶段：卵黄发生前期，初级卵黄发生期，次级卵黄发生期，成熟期，抱卵期。雌性凡纳滨对虾和罗氏沼虾分别提取卵巢和肝胰腺的总RNA，设计特异性引物进行荧光定量PCR扩增，对卵黄蛋白原mRNA表达进行相对定量分析。凡纳滨对虾的荧光定量PCR结果表明：在卵巢中，随着卵巢的发育，卵黄蛋白原mRNA的相对表达量不断增加，分别为：1.1,5.9,10.4,26.9,85.0，产卵以后急剧减少，为1.6。在肝胰腺中，随着卵巢发育，相对表达量不断增加，分别为：1.3,3.3,7.1,37.3,51.6，产卵以后急剧减少，为1.0。肝胰腺在次级卵黄发生期卵黄蛋白原mRNA增加明显，卵巢在成熟期卵黄蛋白原mRNA增加明显。同时，Northern杂交结果显示，卵巢和肝胰腺在大于6.0kb的位置都有杂交信号的出现。尤其在初级卵黄发生期，次级卵黄发生期和成熟期的卵巢和肝胰腺中都检测到了比较强烈的杂交信号，并且杂交信号有随着卵巢的发育不断增强的趋势，而且在成熟期，肝胰腺中的杂交信号要明显弱于卵巢。罗氏沼虾的荧光定量PCR研究表明：在卵巢和肝胰腺中都有卵黄蛋白原mRNA的表达。随着卵巢的发育，肝胰腺中卵黄蛋白原mRNA的相对表达量不断增加，分别为：3.4,12.6,15.2，并在成熟期达到最大，为38.9，产卵以后为2.9，而卵巢在整个发育过程中对卵黄蛋白原合成的贡献比较小，分别为1.0,1.3,1.7,4.8,1.5,除成熟期外，其他各期差异不显著。同时，Northern杂交结果表明在次级卵黄发生期和成熟期的肝胰腺中有较明显的杂交信号的出现，并且杂交信号随着卵巢的发育而增强。在卵巢中则没有检测到非常明显的杂交信号的出现。这与荧光定量PCR中的结果吻合。与凡纳滨对虾相似，罗氏沼虾的卵黄蛋白原的相对表达量也是随着卵巢的发育不断增加，在成熟期达到最大，抱卵期急剧减少。罗氏沼虾的卵巢合成卵黄蛋白原的能力与肝胰腺相比很小，这也是罗氏沼虾和凡纳滨对虾在卵黄蛋白原合成中的主要不同点。在罗氏沼虾中大部分卵黄蛋白原（87.7％）是由肝胰腺合成的，然而在凡纳滨对虾的卵黄蛋白原合成中卵巢和肝胰腺的合成能力几乎相同。

关键词：凡纳滨对虾罗氏沼虾卵黄蛋白原合成部位 mRNA表达卵巢肝胰腺

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日本沼虾卵黄蛋白原合成部位的初步研究

生物技术通报 2006年第C期22卷 438-444页

作者：高祥刚刘红徐佳念蔡生力上海水产大学生命科学与技术学院农业部水产种质资源和养殖生态重点开放实验室上海200090

十足目卵巢中卵黄的来源,在过去的几十年研究中一直存在争议,内源性合成和外源性合成均有报道。以雌性日本沼虾为实验材料,根据外形观察和组织学研究确定其发育阶段,可以分为:卵原细胞增殖期;卵黄发生前期;初级卵黄发生期;次级卵黄发生... 详细信息

十足目卵巢中卵黄的来源,在过去的几十年研究中一直存在争议,内源性合成和外源性合成均有报道。以雌性日本沼虾为实验材料,根据外形观察和组织学研究确定其发育阶段,可以分为:卵原细胞增殖期;卵黄发生前期;初级卵黄发生期;次级卵黄发生期;成熟期和抱卵期(消退期)。从处于不同发育期的卵巢和肝胰腺中提取总RNA,用RT-PCR方法探讨不同发育期的日本沼虾卵巢和肝胰腺卵黄蛋白原mRNA表达,确定是否有卵黄蛋白原的合成功能。检测结果可以初步判定日本沼虾卵巢和肝胰腺都具有卵黄蛋白原mRNA表达功能,都是卵黄蛋白原的合成部位,其合成的量与沼虾卵巢的发育阶段相关。

关键词：日本沼虾卵黄蛋白原合成部位卵巢肝胰隙

对虾卵黄蛋白的生化性质及卵黄蛋白原合成部位的研究进展

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上海水产大学学报 2003年第2期12卷 168-173页

作者：张成锋蔡生力上海水产大学渔业学院上海200090

随着对虾养殖的不断发展，对于高质量苗种的需求也越来越大，而对虾苗种生产中，获得充分成熟的高质量是卵是至为重要的一环。多数对虾种类在人工控制条件下，卵巢很难发育，必须通过切孤芳自赏眼柄的方法才能促使亲虾成熟。切除眼柄对... 详细信息

随着对虾养殖的不断发展，对于高质量苗种的需求也越来越大，而对虾苗种生产中，获得充分成熟的高质量是卵是至为重要的一环。多数对虾种类在人工控制条件下，卵巢很难发育，必须通过切孤芳自赏眼柄的方法才能促使亲虾成熟。切除眼柄对大多数甲壳动物来说是有效的促使发育成熟的手段，但这种方法也有它有副作用。亲虾切除眼两柄后因失去性腺抑制激素（gonad-inhibiting GIH）的抑制，卵巢会不间断成熟，不断产卵，卵巢得不到必要的休息，导致卵的质量越来越差，直至衰竭。剪眼柄破坏了卵巢发育的正常生理机制。卵母细胞在卵巢中没有积聚充足的卵黄，造成先天不足，卵子成熟度不够，很容易引起产卵后不孵化。多数种类地是育苗也常遇到此类总是尤其是亲虾后几批所产卵质量中较差，孵化率普遍较低，或者所培育苗健康程度较差。因此，只有弄清卵母细胞发育的生理过程、卵黄发生和积累的内在机理以及内分泌系统在这一发育过程中所起的调控作用，才能真正达到人工控制亲黄蛋白原（vitelloginin Vg）合成部位的确定，是了解虾卵巢对程过程中第一步。国内外学者已经做了大量的工作，但对于合在机理及内分泌调控机制的研究波波涉及较少，有待进一步加强。

关键词：对虾卵黄蛋白生化性质合成部位合成机理内分泌调控机制

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对虾主要卵黄蛋白纯化及合成部位的研究进展

对虾主要卵黄蛋白纯化及合成部位的研究进展

豌豆植株和胡萝卜根中细胞分裂素的生物合成部位

甲壳动物学分会成立20周年暨刘瑞玉院士从事海洋科教工作55周年学术研讨会

作者：张成锋蔡生力

对虾卵黄合成是与卵细胞发育紧密相连的一个重要过程。卵黄主要由脂肪和蛋白质组成,卵黄蛋白的主要成分是卵黄磷蛋白(Vitellin,Vn),对卵黄磷蛋白的分离纯化是了解卵黄合成机制的第一步,也是制备特异性抗体进而找出卵黄合成部位的关键所... 详细信息

对虾卵黄合成是与卵细胞发育紧密相连的一个重要过程。卵黄主要由脂肪和蛋白质组成,卵黄蛋白的主要成分是卵黄磷蛋白(Vitellin,Vn),对卵黄磷蛋白的分离纯化是了解卵黄合成机制的第一步,也是制备特异性抗体进而找出卵黄合成部位的关键所在。对于不同种类对虾的主要卵黄蛋白分子量的大小和合成部位,各个学者有着不同的观点;对同一种对虾的卵黄磷蛋白分子量的大小,不同学者得出的结论也不尽相同。本文比较了国内外学者对对虾卵黄主要蛋白的分离纯化及合成部位的研究,对目前研究状况及存在的问题进行了探讨。

关键词：卵黄蛋白纯化合成部位

来源： cnki会议评论

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核农学通报 1987年第1期 25-27页

作者： Chong-Maw Chen 俞美玉

Torrey 认为细胞分裂素存在于根中,而且木质部渗出物中的细胞分裂素可能来自根部。我们也曾证明,施加了8-14C-腺嘌呤（Ade）的无根烟草植株具有合成放射性细胞分裂素的能力,但茎和叶及形成层和非形成层是否是细胞分裂素生物合成的部位... 详细信息

Torrey 认为细胞分裂素存在于根中,而且木质部渗出物中的细胞分裂素可能来自根部。我们也曾证明,施加了8-14C-腺嘌呤（Ade）的无根烟草植株具有合成放射性细胞分裂素的能力,但茎和叶及形成层和非形成层是否是细胞分裂素生物合成的部位还有待回答。

关键词：细胞分裂素生物合成合成部位放射性胡萝卜根生化反应毕豆豌豆植株

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有机合成中的反应部位控制方法

广东轻工职业技术学院学报 2002年第1期1卷 16-18页

作者：李忠军广东轻工职业技术学院教务处广州510300

本文对有机化合物合成路线的控制过程中形成的干扰及排除干扰的方法进行归纳和探讨。希望它能对有机合成路线的设计有一定的参考价值。

关键词：有机合成合成部位控制

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胎儿肝、脾、肾组织中凝血因子Ⅷ的研究

中华血液学杂志 1995年第9期16卷 456-458页

作者：程庆文黄宇闻王鸿利柏乃庆黄秋花秦兰娣邵慧珍张钦辉王振义上海第二医科大学瑞金医院上海血液学研究所上海市血液中心

应用一期法测定了１６～２２周胎儿肝、脾、肾组织中凝血因子ＶＩＩＩ：Ｃ（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）活性，发现肾组织中ＦＶＩＩＩ：Ｃ活性为１．７２３ＩＵ／ｍｌ，高于肝和脾（Ｐ＜０．０１）。三种组织细胞培养液中肾细胞培养液的ＦＶＩＩ... 详细信息

应用一期法测定了１６～２２周胎儿肝、脾、肾组织中凝血因子ＶＩＩＩ：Ｃ（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）活性，发现肾组织中ＦＶＩＩＩ：Ｃ活性为１．７２３ＩＵ／ｍｌ，高于肝和脾（Ｐ＜０．０１）。三种组织细胞培养液中肾细胞培养液的ＦＶＩＩＩ：Ｃ活性始终较高。ＬＳＡＢ法免疫组化检测发现在肾远曲小管和集合管上皮细胞以及肝的胆管上皮细胞和肝、脾血管内皮细胞ＦＶＩＩＩ：ＣＡｇ呈阳性。逆转录－多聚酶链反应证实三种组织中均有ＦＶＩＩＩｍＲＮＡ表达。表明在１６～２２周胎龄期肝、脾、肾均可合成ＦＶＩＩＩ：Ｃ，其中以肾最为明显。

关键词：胎儿凝血因子VIII 肝脾肾合成部位

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家畜卵泡抑制素研究进展

黑龙江畜牧兽医 2005年第11期 83-85页

作者：张明朱庆郑鸿培四川农业大学动物科技学院胚胎工程与冷冻生物技术实验室四川雅安625014 四川农业大学动物科技学院分子遗传实验室四川雅安625014

卵泡抑制素简称抑制素(INH).自1932年Macullagh提出这个概念以来,家畜INH的研究日益受到人们重视.目前对哺乳动物INH的合成部位、分子结构及生理作用已有较深入的认识,利用蛋白质分离技术、蛋白质合成技术和基因重组技术已得到了猪、牛... 详细信息

卵泡抑制素简称抑制素(INH).自1932年Macullagh提出这个概念以来,家畜INH的研究日益受到人们重视.目前对哺乳动物INH的合成部位、分子结构及生理作用已有较深入的认识,利用蛋白质分离技术、蛋白质合成技术和基因重组技术已得到了猪、牛、绵羊的INH或INH亚基;利用蛋白质固相合成技术合成了绵羊、母牛、猪的INHα-亚基N端26肽、32肽等肽链片段.INH的应用,也从主动或被动免疫调节生殖,扩大到疾病诊断与疾病控制、生殖细胞体外成熟诱导等方面.

关键词：卵泡抑制素 INH 合成部位分子结构生理作用相对分子质量生物活性

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肺功能的生化基础

生理科学进展 1980年第2期 103-112页

作者：丁延衸北京医学院生化教研组

一、监视肺功能的手段肺的主要功能是进行血液和大气之间的气体交换。近年来方注意到肺的非呼吸功能(参与身体内环境稳定的维持)。监视肺功能的手段,以前是使用形态学方法,如X光观察,以后加用生理学方法。目前已获得不少肺功能的形态和... 详细信息

一、监视肺功能的手段肺的主要功能是进行血液和大气之间的气体交换。近年来方注意到肺的非呼吸功能(参与身体内环境稳定的维持)。监视肺功能的手段,以前是使用形态学方法,如X光观察,以后加用生理学方法。目前已获得不少肺功能的形态和生理相关的知识。但这些了解仍停留在较粗浅的水平,只采用了血

关键词：肺细胞激素弹性纤维前列腺素生化学女用避孕药蛋白水解酶蛋白酶主质细胞肺功能结缔组织基质表面性质表面活性肺泡细胞白纤维胶原纤维肺结构合成部位吞噬细胞巨噬细胞