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合子基因组激活因子Dux、Dppa2和Dppa4与三羧酸循环核心酶的调控关系

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合子基因组激活因子Dux、Dppa2和Dppa4与三羧酸循环核心酶的调控...

作者：狄安琪内蒙古大学

学位级别：硕士

胚胎发育过程中会经历合子基因组激活（Zygotic genome activation,ZGA）事件,ZGA事件的成败决定着胚胎的发育命运。三羧酸循环（Tricarboxylic acid cycle,TCA cycle）作为生物体一种重要的代谢途径,为胚胎ZGA中的基因组激活、染色质... 详细信息

胚胎发育过程中会经历合子基因组激活（Zygotic genome activation,ZGA）事件,ZGA事件的成败决定着胚胎的发育命运。三羧酸循环（Tricarboxylic acid cycle,TCA cycle）作为生物体一种重要的代谢途径,为胚胎ZGA中的基因组激活、染色质开放和表观遗传修饰等生物学活动提供必要的反应底物及能量。最新研究表明,在ZGA发生时,与TCA相关的核心酶会短暂入核,并且这种位置的变换仅发生在早期胚胎发育阶段。然而,目前发现的ZGA激活因子Dux、Dppa2和Dppa4与TCA核心酶的调控关系还未知。本研究选取ZGA关键激活因子Dux、Dppa2和Dppa4为研究对象,设计以下三部分试验。首先,对小鼠胚胎中Dux、Dppa2和Dppa4进行敲减,选出最为关键的激活因子;其次,检测关键因子基因敲减后,TCA核心酶在2-细胞胚胎阶段的定位情况;最后,制备关键因子基因的诱导表达的小鼠模型,探究“时间异位”表达ZGA关键因子与TCA核心酶定位的关系。主要结果如下:（1）在Dux、Dppa2和Dppa4的敲减体中,我们发现Dppa2对胚胎发育的影响最大;敲减Dppa2后,胚胎2-细胞发育阻滞显著提高,且囊胚率显著降低（27.65%vs.82.88%,P＜0.001）。（2）单细胞转录组测序（Single-cell RNA sequencing,sc RNA-seq）分析发现,敲减Dppa2后ZGA有关基因的表达显著下调,TCA循环出现异常。（3）为了研究Dppa2与TCA核心酶的调控关系,对2-细胞胚胎中丙酮酸脱氢酶（Pyruvate dehydrogenase,PDH）的定位进行检测。我们发现Dppa2敲减后,PDH入核的比例仅为23.33±4.04%,而对照组的入核比例为91.67±3.51%。（4）为进一步研究Dppa2对PDH定位的影响,制备了Dppa2诱导表达小鼠。发现在正常ZGA事件发生前,“时间异位”表达Dppa2,会导致PDH核定位时间提前,表明Dppa2与TCA核心酶PDH存在着直接调控关系。综上,本研究发现在ZGA激活过程中,Dppa2起关键作用,直接决定着早期胚胎中TCA核心酶的定位,影响早期胚胎发育。本研究为深入理解早期胚胎发育与代谢调控之间的关系提供试验依据,对提高辅助生殖成功率有一定的指导意义。

关键词：合子基因组激活 Dux Dppa2 Dppa4 TCA PDH

母源-合子转换期中合子基因组激活的研究进展

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中国畜牧杂志 2021年第10期57卷 52-58页

作者：赵向远许保增中国农业科学院特产研究所吉林长春130112 中国农业科学院特种经济动物分子生物学重点实验室吉林长春130112

母源-合子转换(Maternal-to-Zygotic Transition,MZT)是早期胚胎发育过程中母体产物到新生合子基因组发育控制的关键,包括母体成分(mRNAs和蛋白质)降解和合子基因组激活(Zygotic Genome Activation,ZGA)。虽然这两个阶段的基因调控模式... 详细信息

母源-合子转换(Maternal-to-Zygotic Transition,MZT)是早期胚胎发育过程中母体产物到新生合子基因组发育控制的关键,包括母体成分(mRNAs和蛋白质)降解和合子基因组激活(Zygotic Genome Activation,ZGA)。虽然这两个阶段的基因调控模式不同,但在MZT中这些变化精确控制和高度关联。本文综述了ZGA过程中细胞周期、染色质和转录因子调控胚胎基因表达的特定模式,以及ZGA翻译后调控的变化,阐明了ZGA在MZT过程中的分子调控机制,为进一步研究MZT中基因表达的大规模变化提供理论基础。

关键词：合子基因组激活细胞周期染色质开放性转录因子翻译后调控

先锋转录因子DUX4在人类胚胎合子基因组激活中的作用

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生物学杂志 2022年第3期39卷 94-96,119页

作者：刘玉兵刘辰辰千日成同济大学附属第十人民医院上海200072

总结近几年人类DUX4(double homeobox 4,DUX4)基因在细胞模型和早期胚胎基因组激活中的研究进展,发现先锋转录因子可与靶标基因的特定序列结合,诱导早期胚胎特异性染色质开放性建立及合子基因组激活(zygotic genome activation,ZGA),在... 详细信息

总结近几年人类DUX4(double homeobox 4,DUX4)基因在细胞模型和早期胚胎基因组激活中的研究进展,发现先锋转录因子可与靶标基因的特定序列结合,诱导早期胚胎特异性染色质开放性建立及合子基因组激活(zygotic genome activation,ZGA),在母型-合子转换中发挥关键作用。探究先锋转录因子在人类早期胚胎ZGA中的作用,DUX4蛋白参与启动其他合子基因组激活基因的表达,可能是人类合子基因组激活的先锋转录因子,并对未来研究方向进行展望。

关键词：人类胚胎植入前胚胎发育合子基因组激活先锋转录因子 DUX4

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山羊合子基因组激活期基因差异表达的研究

中国畜牧杂志 2010年第3期46卷 12-14页

作者：赵振华钱红娟周敏敏王杏龙扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 中国农业科学院家禽研究所江苏扬州225003

本研究用mRNA差异显示技术对山羊体内发育和体外培养的8～16细胞期的胚胎基因差异表达进行研究。结果表明:8～16细胞期共检测到14条特异性表达的基因片段克隆测序,其中11条为体内发育胚胎特异性表达,3条为体外培养胚胎特异性表达。通过G... 详细信息

本研究用mRNA差异显示技术对山羊体内发育和体外培养的8～16细胞期的胚胎基因差异表达进行研究。结果表明:8～16细胞期共检测到14条特异性表达的基因片段克隆测序,其中11条为体内发育胚胎特异性表达,3条为体外培养胚胎特异性表达。通过GenBank/Blast数据库同源性检索发现,3个基因片段在EST库中可以找到同源的表达标签,11个未见同源片段,是首次发现其在山羊植入前发育阶段表达。体内发育胚胎特异性表达的片段在合子型基因激活过程中起着重要作用,体外培养胚胎的这些基因不表达,是导致胚胎发育阻滞的原因。

关键词：胚胎 mRNA差异显示合子基因组激活山羊

斑马鱼合子基因组激活过程中表观遗传调控的研究进展

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生命科学 2017年第2期29卷 146-152页

作者：王湘秀刘桂芬同济大学生命科学与技术学院上海200092

合子基因组激活作为斑马鱼胚胎发育早期的关键转折事件,其发生对早期胚胎发育和全能性的形成有着重要的意义。研究发现,合子基因组激活在不同物种中发生的时间和持续的过程有着很大的差异,且有多种因素共同参与调控合子基因组的激活过程... 详细信息

合子基因组激活作为斑马鱼胚胎发育早期的关键转折事件,其发生对早期胚胎发育和全能性的形成有着重要的意义。研究发现,合子基因组激活在不同物种中发生的时间和持续的过程有着很大的差异,且有多种因素共同参与调控合子基因组的激活过程,其中表观遗传调控是最重要的因素之一。综述了斑马鱼合子基因组激活过程中表观遗传调控因素的研究进展,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和核小体定位等,有助于深入理解合子基因组激活的发生过程。

关键词：合子基因组激活 DNA甲基化核小体定位组蛋白修饰斑马鱼

等位基因差异表达分析解析牛合子基因组激活及牛早期胚胎多组学数据库构建

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等位基因差异表达分析解析牛合子基因组激活及牛早期胚胎多组学数...

作者：谢郭翔西北农林科技大学

学位级别：硕士

家养动物中胚胎的早期发育对育种和经济生产具有重要意义,通过体外受精或体细胞克隆技术生产胚胎,胚胎移植后可快速高效地获得良种后代,有利于优质种质资源的扩充与保存,不仅为基因编辑提供了时间窗口,也是实现良种快繁的关键途径。然... 详细信息

家养动物中胚胎的早期发育对育种和经济生产具有重要意义,通过体外受精或体细胞克隆技术生产胚胎,胚胎移植后可快速高效地获得良种后代,有利于优质种质资源的扩充与保存,不仅为基因编辑提供了时间窗口,也是实现良种快繁的关键途径。然而体外生产的胚胎存在着发育阻滞的问题;同时研究发现大多数胚胎阻滞于合子基因组激活(zygotic genome activation,ZGA)时期,哺乳动物合子基因组激活的过程中,大量新基因被转录,替代母源物质调控早期胚胎发育。合子基因组激活又可以分为小波(minor ZGA)和大波(major ZGA),目前的研究集中在major ZGA上,而minor ZGA的研究较少。哺乳动物早期胚胎发育及合子基因组激活的研究以小鼠为代表的模式动物为主,家畜方面的研究较少,严重阻碍了人们对家畜早期胚胎发育的深入认知。本研究通过收集牛早期胚胎发育的多组学数据及利用等位基因特异性表达分析(allelespecific expression,ASE)解析minor ZGA,并构建了牛早期胚胎发育的多组学数据库,为牛早期胚胎发育研究提供了重要的理论支持。主要结果如下:1、本研究构建了牦牛精子和荷斯坦牛卵子体外受精的杂交胚胎早期发育转录组图谱,通过ASE分析鉴定出牛的minor ZGA时期发生在2细胞到4细胞阶段,并准确鉴定到了383个minor ZGA基因;其中296个(77.3%)minor ZGA基因为母源再表达(maternal-zygotic,MZ),这些MZ基因的准确鉴定体现了本研究采用ASE分析的优势。另外,本研究还鉴定了minor ZGA时转座元件的激活,发现minor ZGA激活的转座元件前五位均为牛属特异性转座元件,这一发现暗示着这些物种特异性转座元件在minor ZGA时起到重要作用,并可能导致minor ZGA物种间保守性低。本研究还对人、牛及小鼠的minor ZGA进行了比较,minor ZGA物种间保守性很差,仅ZSCAN4和UBTFL1在3个物种内均为minor ZGA基因。本研究还通过开放染色质鉴定到了3个物种minor ZGA可能的基因调控元件和相关的转录因子,发现人和牛有共有的调控minor ZGA的转录因子;综上所示,牛和人的minor ZGA更加相似,牛的早期胚胎发育研究使人类辅助生殖及不孕不育研究受益。2、通过收集牛早期胚胎多组学数据,本研究构建了一个牛早期胚胎发育多组学数据库(Cattle embryo DB,http://***/code/***/Cattle Embryo DB),全面整合牛早期胚胎发育的转录组数据、表观组学数据;并支持用户检索牛的ZGA基因,以及这些基因所在区域的表观组学数据信息,并整合了包括UCSC Genome Browse、W ash U Epigenome Browser等便于搜索、可视化的工具;该数据库为研究者们提供了深入研究哺乳动物早期胚胎发育进行的新途径和新工具。综上,本研究结合基因组重测序、转录组、表观组学数据,利用等位基因特异表达分析等多组学研究手段解析了牛早期胚胎minor ZGA时期的基因及转座元件激活,并进行了不同哺乳动物间minor ZGA的比较。同时,构建了牛早期胚胎发育多组学数据库,对进一步了解胚胎发育机制具有重要的理论意义。

关键词：早期胚胎发育合子基因组激活等位基因特异性表达多组学数据库

Akt特异性抑制剂对小鼠植入前胚合子基因组激活的影响

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Akt特异性抑制剂对小鼠植入前胚合子基因组激活的影响

作者：陈俊明福建医科大学

学位级别：硕士

目的:通过观察Akt特异性抑制剂API-2和MK2206对小鼠1-细胞胚体外发育的影响及Akt特异性抑制剂对体外发育2-细胞胚内Akt主要活性形式p-Ser473-Akt定位与表达的改变,结合Akt特异性抑制剂API-2对小鼠合子基因组激活(Zygotic Gene Activatio... 详细信息

目的:通过观察Akt特异性抑制剂API-2和MK2206对小鼠1-细胞胚体外发育的影响及Akt特异性抑制剂对体外发育2-细胞胚内Akt主要活性形式p-Ser473-Akt定位与表达的改变,结合Akt特异性抑制剂API-2对小鼠合子基因组激活(Zygotic Gene Activation,ZGA)中四个标志基因和干细胞因子Oct4与Sox2的表达影响,为进一步探讨Akt在小鼠植入前胚发育ZGA中可能发挥的作用提供基础。方法:1.收集KM小鼠体内植入前胚(1-细胞胚至4-细胞胚),应用免疫荧光技术观察细胞内p-Ser473-Akt和总Akt(pan-Akt)的表达与定位情况。2.收集KM雌性小鼠与KM雄性小鼠交配所得的1-细胞胚,分别观察其在KSOM培养液、不同浓度的API-2和MK2206的KSOM培养液中体外发育的情况;3.收集KM小鼠1-细胞胚,分别置于KSOM和含API-2(2μM)和MK2206(30μM)的KSOM培养液中培养,获取体外发育的2-细胞胚,采用免疫荧光技术观察细胞内p-Ser473-Akt和pan-Akt的定位与表达情况;4.收集KM小鼠1-细胞胚,分别置于KSOM和含API-2(2μM)的KSOM培养液中培养,获取体外发育的2-细胞胚,运用Real-Time PCR技术检测Hsp70.1、Zscan4d、Mu ERV-L和e IF-1A等ZGA标志基因m RNA的表达水平。5.收集KM小鼠1细胞胚,分别置于KSOM和含API-2(2μM)的KSOM培养液中培养,获取体外发育的2-细胞胚,运用Real-Time PCR技术检测干细胞因子Oct4和Sox2的m RNA表达水平。结果:1.p-Ser473-Akt和pan-Akt存在于小鼠植入前胚的1-细胞至4-细胞阶段。作为Akt主要的活性形式,p-Ser473-Akt在小鼠1-细胞胚至4-细胞胚内定位存在动态变化,其在1-细胞胚和2-细胞胚期间核内出现的时间与ZGA发生的时相(minor ZGA和major ZGA)基本一致。pan-Akt主要分布在胞质里,在不同发育阶段的细胞中其表达和定位没有发生明显的改变;***特异性抑制剂API-2和MK2206对小鼠1-细胞胚的体外发育具有明显的抑制作用,呈剂量依赖性。一定浓度的API-2(2.0μM)和MK2206(30μM)均可使体外培养的1-细胞胚出现“2-细胞阻滞”现象;3.2.0μM API-2和30μM MK2206阻滞的2-细胞胚内,p-Ser473-Akt在细胞核内的表达发生了明显的下调,而pan-Akt的定位与表达并没有产生明显的变化;4.2.0μM API-2诱导阻滞的2-细胞胚内,Mu ERV-L和e IF-1A的m RNA水平明显低于KSOM对照组(P基因的m RNA水平与KSOM组比较,没有明显差别(P>0.05)。5.2.0μM API-2诱导阻滞的2-细胞胚内,干细胞因子Oct4的m RNA水平明显低于KSOM对照组(P组比较,没有明显差别(P>0.05)。结论:Akt主要活性形式p-Ser473-Akt在小鼠1-细胞胚至4-细胞胚内定位存在动态变化,其在1-细胞胚和2-细胞胚期间核内出现的时间与ZGA发生的时相(minor ZGA和major ZGA)基本一致,提示p-Ser473-Akt可能参与ZGA过程。Akt特异性抑制剂API-2和MK2206对小鼠1-细胞胚的体外发育具有明显的抑制作用,一定浓度的API-2(2.0μM)和MK2206(30μM)均可使体外培养的1-细胞胚出现“2-细胞阻滞”现象,同时,也使2-细胞胚核内p-Ser473-Akt表达水平下降。且一定浓度的API-2(2.0μM)使2-细胞胚内ZGA标志基因Mu ERV-L和e IF-1A,以及干细胞因子Oct4的m RNA水平明显下调。这些结果进一步证实,Akt特异性抑制剂诱导产生的“2-细胞阻滞”,以及ZGA启动失败和干细胞因子Oct4表达下调与其降低核内p-Ser473-Akt表达水平有关。

关键词： p-Ser473-Akt 小鼠植入前胚 2-细胞阻滞合子基因组激活

EGCG对小鼠合子基因组激活和干细胞因子Sox2与Oct4表达的影响

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EGCG对小鼠合子基因组激活和干细胞因子Sox2与Oct4表达的影响

作者：杜娟福建医科大学

学位级别：硕士

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠体外发育1-细胞胚至2-细胞胚过渡的影响,研究EGCG对小鼠合子基因组激活和干细胞因子Sox2与Oct4表达水平的改变,为进一步探讨EGCG影响小鼠植入前胚体外发育的机制提供实验和理论依据。方法... 详细信息

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠体外发育1-细胞胚至2-细胞胚过渡的影响,研究EGCG对小鼠合子基因组激活和干细胞因子Sox2与Oct4表达水平的改变,为进一步探讨EGCG影响小鼠植入前胚体外发育的机制提供实验和理论依据。方法:1.以空白M16培养液为对照组,在M16中添加浓度为10μg/ml、20μg/ml EGCG为实验组,收集昆明(kunming,KM)小鼠1-细胞胚(h CG后21h)。(1)进行体外连续培养,计数各组发育至2-细胞胚、4-细胞胚、桑葚胚和囊胚的数目,并以1-细胞胚为基数,计算各组至不同阶段的发育率。(2)M16组及20μg/ml EGCG组的1-细胞胚体外培养至h CG后33h,利用荧光显微镜分别对磷酸化组蛋白H3阳性和阴性的1-细胞胚数量进行计数,同时在倒置显微镜下计数2-细胞胚数量,观察EGCG对1-细胞胚至2-细胞胚过渡的影响。。2.取h CG后21h 1-细胞胚分别在M16及20μg/ml EGCG培养液中体外培养至h CG后27h,收集1-细胞胚。(1)激光扫描共聚焦显微镜检测e IF1A、ZSCAN4、SOX2和OCT4蛋白的表达定位情况。(2)Realtime-PCR检测合子基因组激活相关基因e IF1A、Zscan4d、Mu ERV-L、Hsp70.1及干细胞因子Sox2与Oct4的m RNA水平。3.取h CG后27h 1-细胞胚分别在M16及20μg/ml EGCG培养液中体外培养至h CG后45h,收集2-细胞胚。(1)激光扫描共聚焦显微镜检测e IF1A、ZSCAN4、SOX2和OCT4蛋白的表达定位情况。(2)Realtime-PCR检测合子基因组激活相关基因e IF1A、Zscan4d、Mu ERV-L、Hsp70.1及干细胞因子Sox2与Oct4的m RNA水平。结果:1.添加EGCG实验组的1-细胞胚体外培养各阶段的发育率明显高于M16组。添加20μg/ml EGCG的实验组1-细胞胚至2-细胞胚的过渡率明显高于对照组(P组(P组1-细胞胚核内ZSCAN4和SOX2荧光染色相对强度明显高于M16组,其差异有统计学意义(P组,其差异无统计学意义。(2)Realtime-PCR检测结果显示:EGCG组合子基因组激活相关基因Zscan4d、Mu ERV-L、Hsp70.1及干细胞因子Oct4的m RNA表达水平均高于M16组,其差异具有统计学意义(P组,其差异无统计学意义(P>0.05)。3.体外培养的2-细胞胚(h CG后27h至45h):(1)激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示:EGCG组2-细胞胚核内ZSCAN4和OCT4荧光染色相对强度明显高于M16组,且差异有统计学意义(P组,其差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Realtime-PCR检测结果显示:EGCG组合子基因组激活相关基因Mu ERV-L、Hsp70.1及干细胞因子Oct4的m RNA表达水平高于M16组,且差异有统计学意义(P组,差异都无统计学意义(P>0.05)。结论EGCG可以显著提高小鼠胚胎体外发育1-细胞胚至2-细胞胚的过渡率,促进植入前胚早期的细胞周期进程。EGCG组1-细胞胚内合子基因组激活相关基因Zscan4d、Mu ERV-L、Hsp70.1以及干细胞因子Oct4的m RNA水平明显高于M16组,且SOX2的蛋白水平也明显升高,说明EGCG可能调控小规模合子基因组的激活以及SOX2、Oct4的表达,促进1-细胞胚向2-细胞胚过渡。其次,EGCG组2-细胞胚内e IF1A、Mu ERV-L、Hsp70.1与Oct4的m RNA或蛋白水平也明显提高。这些结果显示,EGCG可能通过调节合子基因组的激活及干细胞因子的表达水平,促进植入前胚的体外发育。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯植入前胚合子基因组激活干细胞因子

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丙酮酸对猪早期胚胎合子基因组激活的影响

丙酮酸对猪早期胚胎合子基因组激活的影响

作者：闵昌国吉林农业大学

学位级别：硕士

在哺乳动物中,合子基因组激活是早期胚胎发育的重要过程,发生在胚胎从输卵管转移到子宫角期间,合子基因组激活失败将会导致早期胚胎发育阻滞。丙酮酸在哺乳动物早期胚胎发育中可以为胚胎提供能量以及抑制活性氧的生成,但其对猪早期胚胎... 详细信息

在哺乳动物中,合子基因组激活是早期胚胎发育的重要过程,发生在胚胎从输卵管转移到子宫角期间,合子基因组激活失败将会导致早期胚胎发育阻滞。丙酮酸在哺乳动物早期胚胎发育中可以为胚胎提供能量以及抑制活性氧的生成,但其对猪早期胚胎合子基因组激活的影响并没有详细报道,因此本试验预探究丙酮酸对猪早期胚胎合子基因组激活的影响及其机制。本试验分为3组,分别为:PZM-3组(对照组),-P组(不含丙酮酸组,去除PZM-3培养基中所有干扰丙酮酸生成的物质),+P组(-P组基础上添加丙酮酸,添加量等同PZM-3组)。每组50个受精卵,每次试验至少重复3次以上。为探究丙酮酸对猪早期胚胎合子基因组激活的影响,采用体外受精的方法,将培养成熟后的卵母细胞进行受精后将受精卵分别置于3组胚胎培养基中进行体外培养,48h后观察卵裂数,测定4-细胞的合子基因组激活标志基因Eif1a和母源基因GDF9的m RNA相对表达量,120h后统计4-细胞阻滞数。体外培养48h后,收集4-细胞,分别检测各组的活性氧、谷胱甘肽,线粒体膜电位和ATP水平,并收集胚胎培养基用于检测α-酮戊二酸、氨基酸含量及钙离子浓度。从氧化应激、能量代谢及信号调节三个方面探究丙酮酸对猪早期胚胎合子基因组激活的影响机制。结果发现,(1)相较于PZM-3组,-P组的卵裂率显著降低(P组的卵裂率没有显著改变(P>0.05),+P组卵裂率显著高于-P组(P组,-P组4-细胞阻滞率显著升高(P组4-细胞阻滞率没有显著改变(P>0.05),+P组4-细胞阻滞率显著低于-P组(P组,-P组和+P组Eif1a的m RNA相对表达量均显著下降(P组Eif1a的相对表达量显著高于-P组(P组,+P组母源基因GDF9的相对表达量没有显著改变(P>0.05),-P组GDF9的相对表达量显著升高(P组GDF9的相对表达量显著低于-P组(P合子基因组激活有促进作用。(2)相较于PZM-3组,-P组和+P组活性氧水平均显著升高(P组水平显著低于-P组(P组谷胱甘肽水平较PZM-3组显著降低(P组谷胱甘肽水平较PZM-3组没有显著变化(P>0.05),+P组的谷胱甘肽水平显著高于-P组(P组,-P组和+P组ATP水平均显著降低(P组的ATP水平显著高于-P组(P组的线粒体膜电位水平较PZM-3组显著降低(P组的线粒体膜电位水平没有显著变化(P>0.05),+P组的线粒体膜电位水平显著高于-P组(P组,-P组和+P组培养基中α-酮戊二酸的含量均显著降低(P组α-酮戊二酸含量显著高于-P组(P组和-P组培养基中氨基酸含量相差不显著(P>0.05),但-P组培养基中氨基酸含量有所下降;相较于PZM-3组,-P组中钙离子浓度显著降低(P组培养基中钙离子浓度没有显著变化(P>0.05),+P组培养基中钙离子浓度显著高于-P组(P合子基因组激活之前的主要供能物质,其可能是通过缓解胚胎细胞氧化应激降低其活性氧水平以促进猪早期胚胎合子基因组激活。同时,丙酮酸可通过三羧酸循环途径生成α-酮戊二酸进而影响ATP的生成,为猪早期胚胎合子基因组激活时期的能量代谢提供保障。此外,丙酮酸还可能通过钙离子通道调节进入细胞内的钙离子含量进而对合子基因组激活产生促进作用。

关键词：丙酮酸猪早期胚胎合子基因组激活