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非组培依赖的发根农杆菌介导的薄壳山核桃转化体系构建

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果树学报 2022年第1期39卷 131-140页

作者：谢晓婷黄巧宇温广超袁虎威何漪闫道良黄坚钦王晓飞郑炳松浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室杭州311300

【目的】建立一种简单高效的农杆菌介导薄壳山核桃Carya illinoinensis的转化体系。【方法】以薄壳山核桃钟山的幼苗为材料,采用四因素(菌种、菌液浓度、处理部位、苗龄)三水平正交试验进行农杆菌侵染薄壳山核桃茎部诱导发根,并通过DNA... 详细信息

【目的】建立一种简单高效的农杆菌介导薄壳山核桃Carya illinoinensis的转化体系。【方法】以薄壳山核桃钟山的幼苗为材料,采用四因素(菌种、菌液浓度、处理部位、苗龄)三水平正交试验进行农杆菌侵染薄壳山核桃茎部诱导发根,并通过DNA检测及GFP荧光验证。【结果】影响发根农杆菌侵染薄壳山核桃生根诱导率的因素大小为苗龄>处理部位>菌液浓度>菌种,OD_(600)为0.8的K599发根农杆菌于材料子叶期时侵染距离种子3~5 cm处,毛状根植株诱导率达56.5%,阳性毛状根植株诱导率为45.2%。【结论】建立并优化了非组培依赖的发根农杆菌介导的薄壳山核桃转化体系,为薄壳山核桃新品种培育、利用基因工程改良农艺性状奠定基础。

关键词：薄壳山核桃发根农杆菌非组培转化

发根农杆菌T-DNA诱变怀地黄突变体或品系的遗传学分析

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河南师范大学学报（自然科学版） 2013年第5期41卷 115-119页

作者：范红军姚换灵张永华周延清张喻李静云陈娟娟河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南师范大学资源微生物与功能分子河南省高校重点实验室培育基地河南新乡453007 河南师范大学道地中药材保育及利用河南省高校工程技术研究中心河南新乡453007

主要采用紫外吸收光谱法、高效液相色谱法、3,5-二硝基水杨酸比色法,PCR和SRAP技术,从叶绿素含量、还原糖和总糖含量、梓醇含量、毛蕊花糖苷含量和T-DNA片段的稳定性和基因组DNA的变化方面,对发根农杆菌转化怀地黄突变体或品系的变异性... 详细信息

主要采用紫外吸收光谱法、高效液相色谱法、3,5-二硝基水杨酸比色法,PCR和SRAP技术,从叶绿素含量、还原糖和总糖含量、梓醇含量、毛蕊花糖苷含量和T-DNA片段的稳定性和基因组DNA的变化方面,对发根农杆菌转化怀地黄突变体或品系的变异性状进行了分析.发现怀地黄突变体或品系的叶片形态、植高、叶绿素含量、糖含量、梓醇和毛蕊花糖苷的含量均有变异,一个SRAP引物组合从其基因组DNA中扩增出一个对照中没有的约400bp的DNA片段,T1-T7代突变体或品系中均检测到rolB基因的存在.这些结果表明发根农杆菌T-DNA可以诱导怀地黄产生变异,并且稳定遗传.

关键词：怀地黄发根农杆菌突变体高效液相色谱 SRAP

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发根农杆菌诱导栝楼毛状根的研究

安徽农业大学学报 2008年第3期35卷 436-439页

作者：丁婷马庆项艳安徽农业大学植物保护学院合肥230036 安徽农业大学林学与园林学院合肥230036

栝楼是一种重要的药用植物,提取物具有多种活性。以栝楼的无菌苗为材料,用A4、15834和LBA9402等3种发根农杆菌浸染茎段,诱导毛状根生成,并研究毛状根分化不定芽的条件。结果显示,3种农杆菌都能诱导栝楼毛状根产生,其中LBA9402诱导率最高... 详细信息

栝楼是一种重要的药用植物,提取物具有多种活性。以栝楼的无菌苗为材料,用A4、15834和LBA9402等3种发根农杆菌浸染茎段,诱导毛状根生成,并研究毛状根分化不定芽的条件。结果显示,3种农杆菌都能诱导栝楼毛状根产生,其中LBA9402诱导率最高,达到52%,且毛状根在6-BA 2.0 mg.L-1+KT 2.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1的培养基上,不定芽分化率达到了24%。对毛状根进行基因组DNA提取,PCR扩增检测出rolB基因的存在,初步证明R i质粒T-DNA已经整合到栝楼基因组中。

关键词：发根农杆菌栝楼毛状根

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发根农杆菌介导番茄遗传转化研究

北方园艺 2001年第3期 32-33页

作者：黄彩红孙洪祥周淑香于广建东北农业大学哈尔滨150030 黑龙江省鹤岗市东山区蔬园乡 154101 黑龙江省农业经济学校牡丹江157041

本实验设置基因型、菌液浓度、外植体部位和感染方法四个因素 ,利用发根农杆菌的Ri质粒介导将TMV外壳蛋白和CMV外壳蛋白基因按L16( 44 2 3)正交表转化番茄。用共培养的方法 ,诱导愈伤组织 ,经卡那霉素的抗性筛选 ,进一步培养得到转化再... 详细信息

本实验设置基因型、菌液浓度、外植体部位和感染方法四个因素 ,利用发根农杆菌的Ri质粒介导将TMV外壳蛋白和CMV外壳蛋白基因按L16( 44 2 3)正交表转化番茄。用共培养的方法 ,诱导愈伤组织 ,经卡那霉素的抗性筛选 ,进一步培养得到转化再生的植株。经PCR检测证明目的基因已被导入。卡那霉素抗性愈伤组织频率的结果表明 :不同品种不同菌液浓度的转化频率存在着显著性差异。

关键词：番茄转基因发根农杆菌介导遗传转化

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发根农杆菌介导的花生遗传转化体系的建立

安徽农业科学 2008年第35期36卷 15367-15368页

作者：姚庆收武玉永王学全滨州医学院药学院生物技术教研室山东烟台264003

[目的]为花生的转基因研究和白芦藜醇的生物技术生产奠定基础。[方法]利用发根农杆菌R1601分别侵染花生的子叶、叶片和茎段,诱导毛状根;利用PCR技术检测毛状根。[结果]叶片和茎段在发根农杆菌R1601侵染后产生毛状根,但叶片诱导率较高,... 详细信息

[目的]为花生的转基因研究和白芦藜醇的生物技术生产奠定基础。[方法]利用发根农杆菌R1601分别侵染花生的子叶、叶片和茎段,诱导毛状根;利用PCR技术检测毛状根。[结果]叶片和茎段在发根农杆菌R1601侵染后产生毛状根,但叶片诱导率较高,其诱导率达65.6%,更适合作为转化外植体。毛状根除菌后,能在MS培养基上自主生长。PCR扩增表明,T-DNA序列整合进花生的基因组中。[结论]建立了发根农杆菌介导的花生遗传转化体系。

关键词：发根农杆菌花生毛状根转化

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发根农杆菌在植物细胞壁上受体位点的研究

华东师范大学学报（自然科学版） 1996年第1期 95-100页

作者：黄祥辉陈思学颜季琼华东师范大学生物学系

刚分离的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）和元麦（ＨＯｒｄｅｕｍｄｉｓｔｉｃｈｏｎ）叶肉原生质体及用植物细胞壁再生抑制剂处理的上述原生质体分别与发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）共培养... 详细信息

刚分离的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）和元麦（ＨＯｒｄｅｕｍｄｉｓｔｉｃｈｏｎ）叶肉原生质体及用植物细胞壁再生抑制剂处理的上述原生质体分别与发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）共培养，未发现农杆菌的附着；随着原生质体壁再生时间的延长，农杆菌的附看率逐渐增加；用植物细胞壁各主要组分的水解酶和ＴｒｉｔｏｎＸ—１００分别处理３日龄烟草叶内原生质体后，进行附着菌数的放射性分析。结果表明，细菌对经过胰蛋白酶和ＴｒｉｔｏｎＸ—１００处理的细胞的附着率显著下降，ＴｒｉｔｏｎＸ—１００提取液中含有糖蛋白。初步认为发根农杆菌在植物细胞壁上的受体位点为糖蛋白。

关键词：受体位点发根农杆菌原生质体植物细胞细胞壁

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发根农杆菌诱导青蒿发根产生及其离体培养

Acta Botanica Sinica 1994年第A11期36卷 165-170页

作者：秦明波叶和春

维普期刊数据库评论

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发根农杆菌介导云南萝芙木的遗传转化

西南师范大学学报（自然科学版） 2006年第2期31卷 137-141页

作者：王泓廖志华田桂香徐秀梅曾建军孙敏西南大学生命科学院重庆400715 井冈山学院生物系江西吉安343009

用发根农杆菌A4分别感染云南萝芙木幼嫩的真叶和茎段,诱导出毛状根,并对毛状根进行了离体培养, PCR检测转基因毛状根和HPLC检测毛状根中利血平的含量．结果表明:这两种外植体的转化频率及诱导出的毛状根差异极大,幼嫩的真叶叶片比茎段... 详细信息

用发根农杆菌A4分别感染云南萝芙木幼嫩的真叶和茎段,诱导出毛状根,并对毛状根进行了离体培养, PCR检测转基因毛状根和HPLC检测毛状根中利血平的含量．结果表明:这两种外植体的转化频率及诱导出的毛状根差异极大,幼嫩的真叶叶片比茎段更适合作转化外植体用．PCR检测结果表明,诱导毛状根的基因rolB和 rolC整合到云南萝芙木基因组中,HPLC含量检测表明毛状根中利血平的含量比自然根中利血平的含量有显著的增加,因此可以作为利血平来源生产的有效途径之一．

关键词：发根农杆菌云南萝芙木遗传转化毛状根

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发根农杆菌诱导毛酸浆毛状根条件的优化

北方园艺 2017年第8期 115-119页

作者：任如意李思璇金秋梁仕茹王珊珊牡丹江师范学院生命科学与技术学院黑龙江牡丹江157011

以4种发根农杆菌A4、C58C1、R1601、ATCC15834为诱导菌株侵染毛酸浆叶片、茎段,研究了发根农杆菌种类、外植体类型、不同预培养时间、不同侵染时间、不同共培养时间和乙酰丁香酮对毛酸浆毛状根诱导率的影响,并用PCR检测rolB基因。结果表... 详细信息

以4种发根农杆菌A4、C58C1、R1601、ATCC15834为诱导菌株侵染毛酸浆叶片、茎段,研究了发根农杆菌种类、外植体类型、不同预培养时间、不同侵染时间、不同共培养时间和乙酰丁香酮对毛酸浆毛状根诱导率的影响,并用PCR检测rolB基因。结果表明:4种发根农杆菌均能诱导毛酸浆外植体产生毛状根,ATCC15834的诱导率相对较高,叶片优于茎段;最佳侵染时间为6~8min;预培养和共培养时间均为2~3d时诱导率较高;乙酰丁香酮(AS)浓度为100μmol·L^(-1)有利于促进毛状根的产生,经PCR检测证明,rolB基因已整合到毛酸浆毛状根基因组中。

关键词：毛酸浆发根农杆菌毛状根诱导率