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反转录聚合酶链式反应定量分析巨噬细胞炎症蛋白-2 mRNA

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海军医学杂志 2006年第4期27卷 289-291页

作者：王世锋王文波杨涛海军医学研究所上海200433

目的:建立反转录聚合酶链式反应定量分析巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)mRNA的方法。方法:以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照,通过优化RT-PCR条件定量MIP-2 mRNA的表达。结果:获取了PCR线性扩增范围,确定了RT-PCR的最佳循环次数和模板量。结... 详细信息

目的:建立反转录聚合酶链式反应定量分析巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)mRNA的方法。方法:以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照,通过优化RT-PCR条件定量MIP-2 mRNA的表达。结果:获取了PCR线性扩增范围,确定了RT-PCR的最佳循环次数和模板量。结论:优化的RT-PCR方法可以用于MIP-2 mRNA的分析。

关键词：巨噬细胞炎症蛋白-2 反转录聚合酶链式反应定量分析

反转录聚合酶链式反应法检测端粒酶催化蛋白亚单位mRNA

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中国实验诊断学 2001年第6期5卷 308-309页

作者：邱广斌邱广蓉富伟能孙开来解放军第202医院检验科辽宁沈阳110003 中国医科大学医学遗传学教研室

目的研究端粒酶催化蛋白亚单位（ｈＴＥＲＴ）ｍＲＮＡ在肿瘤组织中的表达情况，建立一种恶性肿瘤诊断的新方法。方法提取肿瘤组织总ＲＮＡ，用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法进行检测。结果７６例各型肿瘤组织中６６例阳性... 详细信息

目的研究端粒酶催化蛋白亚单位（ｈＴＥＲＴ）ｍＲＮＡ在肿瘤组织中的表达情况，建立一种恶性肿瘤诊断的新方法。方法提取肿瘤组织总ＲＮＡ，用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法进行检测。结果７６例各型肿瘤组织中６６例阳性，５例恶性胸腹水全部阳性。结论ＲＴ－ＰＣＲ法检测ｈＴＥＲＴｍＲＮＡ是一种灵敏、简便的恶性肿瘤辅助诊断的新方法。

关键词：端粒酶反转录聚合酶链式反应肿瘤催化蛋白亚单位 mRNA

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细菌总RNA提取方法的比较

现代食品科技 2013年第8期29卷 1948-1954页

作者：邹晓蕾刘礼崔罗立新华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

采用改良前后的Trizol法,RNAiso plus法、Qiagen试剂盒法以及Triton X-100法,从大肠杆菌(Escherichiacoli),枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)3株细菌中提取RNA。用琼脂糖凝胶电泳和核酸浓度测定仪检测总RNA的提取质量,并用RT-PCR(ReverseTranscription Polymerase Chain Reaction)对RNA的质量进行验证。结果表明:RNAiso plus法对3株菌的总RNA提取均有很好的效果。Trizol法和Qiagen试剂盒法对于***总RNA的提取效果不错,但对其他2株菌的提取效果均不明显,并且都伴有DNA污染。上述几种方法提取出的RNA样品中均含有23S和16S rRNA。***更适合用Triton X-100法提取总RNA。改良后的Trizol法和RNAiso plus法与Triton X-100法的原理基本相同,都是采用加热的方法,更彻底地裂解细菌细胞,而且得到的RNA中不含有rRNA和tRNA,只保留了mRNA,能更好地用于后续的实验研究。

关键词：细菌总RNA提取反转录聚合酶链式反应

天麻素对大鼠皮层缺氧神经细胞NR1亚基mRNA表达的影响

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中国中药杂志 2008年第9期33卷 1049-1052页

作者：付蕾毛艳华高远刘蕾王志平李良辰郑州大学药学院河南郑州450001 郑州大学基础医学院河南郑州450001

目的:观察天麻素对体外培养大鼠皮层缺氧神经细胞N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR1亚基mRNA表达的影响,探讨天麻素在神经保护方面的可能作用机制。方法:体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞,以缺氧无糖培养建立神经细胞损伤模型,采用不同质量... 详细信息

目的:观察天麻素对体外培养大鼠皮层缺氧神经细胞N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR1亚基mRNA表达的影响,探讨天麻素在神经保护方面的可能作用机制。方法:体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞,以缺氧无糖培养建立神经细胞损伤模型,采用不同质量浓度的天麻素(13,26,52 mg.L-1)处理细胞,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测神经细胞NR1 mRNA的表达。结果:神经细胞缺氧损伤后,NR1 mRNA的表达显著增高;加入不同质量浓度的天麻素后均能显著降低神经细胞NR1 mRNA的表达。其中以26,52 mg.L-1的抑制作用最佳。结论:天麻素可能通过拮抗由缺氧引起的神经细胞NMDA受体NR1亚基mRNA表达的增加,发挥其神经保护作用。

关键词：天麻素神经细胞缺氧 NR1 mRNA 反转录聚合酶链式反应

补肾调经方、逍遥丸对促性腺激素预处理小鼠组织蛋白酶-L mRNA的影响

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中国中西医结合杂志 2011年第1期31卷 80-84页

作者：段彦苍杜惠兰贺明宋翠淼河北医科大学中西医结合学院石家庄050091 河北医科大学生理教研室石家庄050017

目的探讨补肾调经方、逍遥丸对小鼠组织蛋白酶-L(cathepsin-L,Cat L)mRNA的影响。方法选择未成年小鼠随机分为正常组、对照组、逍遥丸组和补肾调经方组,每组12只,采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reac... 详细信息

目的探讨补肾调经方、逍遥丸对小鼠组织蛋白酶-L(cathepsin-L,Cat L)mRNA的影响。方法选择未成年小鼠随机分为正常组、对照组、逍遥丸组和补肾调经方组,每组12只,采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测给予5IU人绒毛促性腺激素(humanchorionic gonadotropin,HCG)0、4、8、12h后Cat L mRNA在各组小鼠卵巢的表达强度。结果注射HCG0、4、8、12h后,Cat L mRNA在促性腺激素预处理小鼠对照组卵巢的表达逐渐升高,Cat L mRNA的相对表达含量分别为:0.066±0.005、0.383±0.045、0.737±0.024、1.036±0.073,各时间点比较差异有统计学意义(P0.05);注射HCG12h后与对照组比较,补肾调经方组Cat LmRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论补肾调经方通过使Cat L mRNA表达增强而达到促排卵的作用,消遥丸通过使Cat L mRNA表达高峰提前达到促排卵的目的。

关键词：补肾调经方逍遥丸排卵组织蛋白酶-L 反转录聚合酶链式反应

甘糖酯对大鼠肝脏CuZn-SOD mRNA表达和酶活的诱导作用

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药学学报 2002年第1期37卷 23-26页

作者：胡晓珂于文功路新枝韩峰宫倩红高焱管华诗青岛海洋大学药物与食品研究所山东青岛266003

目的　探讨甘糖酯对大鼠肝脏CuZn SOD的诱导作用。方法　RT PCR法检测甘糖酯po后的Wistar大鼠肝脏中CuZn SODmRNA的表达情况 ;亚硝酸盐法测定肝组织中CuZn SOD酶活。结果　po甘糖酯后 ,高剂量组大鼠肝组织的SODmRNA水平与对照组相比有... 详细信息

目的　探讨甘糖酯对大鼠肝脏CuZn SOD的诱导作用。方法　RT PCR法检测甘糖酯po后的Wistar大鼠肝脏中CuZn SODmRNA的表达情况 ;亚硝酸盐法测定肝组织中CuZn SOD酶活。结果　po甘糖酯后 ,高剂量组大鼠肝组织的SODmRNA水平与对照组相比有显著的差异 (P 酶活。

关键词：甘糖酯超氧物歧化酶反转录聚合酶链式反应 mRNA CuZn-SOD 大鼠

巨噬细胞内马尔尼菲青霉异柠檬酸裂解酶的表达

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南方医科大学学报 2007年第5期27卷 631-633页

作者：李军席丽艳刘红芳张军民李希清徐晓容中山大学第二附属医院皮肤科广东广州510120

目的比较巨噬细胞内马尔尼菲青霉(Pm)的异柠檬酸裂解酶(ICL1)基因转录及蛋白表达水平,初步探讨乙醛酸循环在Pm致病中的意义。方法将Pm分生孢子与Raw264.7细胞共培养16份,随机分为4组:处理组(T)采用脂多糖及小鼠γ干扰素处理,处理抑制组(... 详细信息

目的比较巨噬细胞内马尔尼菲青霉(Pm)的异柠檬酸裂解酶(ICL1)基因转录及蛋白表达水平,初步探讨乙醛酸循环在Pm致病中的意义。方法将Pm分生孢子与Raw264.7细胞共培养16份,随机分为4组:处理组(T)采用脂多糖及小鼠γ干扰素处理,处理抑制组(TI)在处理组的基础上加入一氧化氮合酶抑制剂(LNMMA),对照组(C)加入同体积的培养基,对照抑制组(CI)在对照组基础上加入LNMMA;采用实时RT-PCR法比较各组细胞内Pm的ICL1基因转录水平;采用酶催化反应检测ICL1蛋白表达及活性;采用菌落计数比较各组细胞内Pm的数量;采用化学法检测一氧化氮含量。结果C组、CI组、T组、TI组的ICL1相对转录水平分别为1.00、1.42、33.09、74.88,蛋白表达及活性分别为0.06、0.07、0.18、0.93,组间差异有统计学意义(P转录及蛋白表达,从而抑制巨噬细胞内Pm的生长。

关键词：马尔尼菲青霉异柠檬酸裂解酶一氧化氮反转录聚合酶链式反应实时

甘糖酯对高脂血症大鼠血脂及脂蛋白脂酶的调节作用

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药学学报 2002年第9期37卷 687-690页

作者：高焱于文功韩峰路新枝宫倩红胡晓珂管华诗青岛海洋大学海洋药物与食品研究所山东青岛266003

目的　探讨甘糖酯调节血脂的分子机制。方法　以不同剂量甘糖酯 (37 8,75 6mg·kg-1 ·d-1 )给高脂血症大鼠ig给药 3周 ,禁食 1 2h后 ,测定大鼠血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)和高密度脂蛋白胆固醇 (HDL... 详细信息

目的　探讨甘糖酯调节血脂的分子机制。方法　以不同剂量甘糖酯 (37 8,75 6mg·kg-1 ·d-1 )给高脂血症大鼠ig给药 3周 ,禁食 1 2h后 ,测定大鼠血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)和高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)的浓度变化 ,用反转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法检测组织中脂蛋白脂酶 (LPL)mRNA的表达。结果　甘糖酯有降低血清TC ,TG和LDL C ,升高HDL C的作用 ,同时提高LPLmRNA的表达 ,且呈剂量依赖性关系。甘糖酯对LPLmRNA转录的促进作用与其降低TC ,TG和LDL C的作用呈正比关系。结论　甘糖酯通过促进LPLmRNA转录而调节血脂水平 ,这可能是甘糖酯降血脂。

关键词：血脂甘糖酯高脂血症脂蛋白脂酶反转录聚合酶链式反应

异丹叶大黄素对人滑膜细胞白细胞介素-8生成及mRNA表达的影响

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药学学报 2001年第6期36卷 407-410页

作者：侯琦李良成郭颖程桂芳中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050

目的　研究异丹叶大黄素 (isorhapotigenin ,Iso)对肿瘤坏死因子α(TNF α)诱导的人滑膜细胞 (humansynovialcell,HSC)白细胞介素 8(IL 8)生成和mRNA表达的影响。方法　用RIA方法测定IL 8的含量 ,以RT PCR法测IL 8mRNA。结果　Iso在 1... 详细信息

目的　研究异丹叶大黄素 (isorhapotigenin ,Iso)对肿瘤坏死因子α(TNF α)诱导的人滑膜细胞 (humansynovialcell,HSC)白细胞介素 8(IL 8)生成和mRNA表达的影响。方法　用RIA方法测定IL 8的含量 ,以RT PCR法测IL 8mRNA。结果　Iso在 1× 10 -6 - 1× 10 -5mol·L-1浓度范围内对TNF α诱导的人滑膜细胞IL 8生成有抑制作用 ,并抑制TNF α诱导的HSCIL 8mRNA表达。结论　Iso抑制TNF α诱导的HSCIL 8生成 ,可能与影响IL

关键词：异丹叶大黄素白细胞介素-8 放免测定法反转录聚合酶链式反应人滑膜细胞 mRNA