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含非洲猪瘟病毒核酸序列病毒样颗粒的研制及其在检测方法中的应用

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中国畜牧兽医 2017年第11期44卷 3287-3293页

作者：冯春燕杜方原刘丹丹 Pershin Andrey 王彩霞张永宁吴绍强林祥梅中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所北京100176 俄罗斯联邦兽医研究所尤里耶韦茨600900

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的烈性传染病,为了保证其检测结果的准确性和可靠性,需要研制试剂盒中使用的阳性标准质控品。本试验旨在研制含ASFV核酸序列的病毒样颗粒,并探... 详细信息

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的烈性传染病,为了保证其检测结果的准确性和可靠性,需要研制试剂盒中使用的阳性标准质控品。本试验旨在研制含ASFV核酸序列的病毒样颗粒,并探究其在检测方法中的应用。首先扩增p72基因的全长片段,利用昆虫杆状病毒系统,包装出含有p72基因的ASF DNA病毒样颗粒。为了进一步验证该病毒样颗粒在应用中的可靠性,本研究将病毒样颗粒与ASF的组织毒及细胞毒同时进行DNA核酸提取,进行实时荧光定量PCR。结果表明,本研究制备的病毒样粒子能很好的取代ASFV在实时荧光定量PCR检测方法中作为阳性质控品,且能对核酸提取过程进行质控,实时荧光定量PCR检测试剂盒中,病毒样粒子的最低包装浓度为102 TCID50。进一步研究发现该病毒样颗粒也适用于普通PCR及LAMP检测方法中,最低浓度分别为103和101 TCID50。本试验结果将为规范ASF检测方法,促进ASF检测方法的转化应用及保证检测结果的准确度和可靠性提供科学依据。

关键词：非洲猪瘟参考物质病毒样颗粒检测方法

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实验室检测质量控制有效性评价方法探讨

理化检验（化学分册） 2014年第9期50卷 1156-1157页

作者：王九忱辽宁省产品质量监督检验院沈阳110032

控制检测结果质量,持续保持检测活动的有效性和检测结果的准确性,是检测实验室质量管理工作的根本目的。检测实验室质量控制方法主要有:1定期使用有证标准物质(参考物质)进行监控;2参加实验室间的比对或能力验证计划;3使用相同或不同方... 详细信息

控制检测结果质量,持续保持检测活动的有效性和检测结果的准确性,是检测实验室质量管理工作的根本目的。检测实验室质量控制方法主要有:1定期使用有证标准物质(参考物质)进行监控;2参加实验室间的比对或能力验证计划;3使用相同或不同方法进行重复检测;4对存留物品进行再检测或再校准;5分析一个物品不同特性结果的相关性。就上述几种质量控制方法而言,如何确定其评价方法是实验室面对的首要问题。

关键词：检测活动有效性评价能力验证计划实验室检测有证标准物质实验室质量控制实验室质量管理评价方法检测质量参考物质

激光剥蚀-等离子体质谱技术及其在地球化学宇宙化学和环境研究中的应用(英文)

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岩矿测试 2009年第1期28卷 53-68页

作者： JOCHUM Klaus Peter STOLL Brigitte FRIEDRICH Jon M AMINI Marghaleray BECKER Stefan DüCKING Marc EBEL Denton S ENZWEILER Jacinta HU Ming-yue KUZMIN Dmitry MERTZ-KRAUS Regina MüLLER Werner E G REGNERY Julia SOBOLEV Alexander WANG Xiao-hong ZHAN Xiu-chun Max Planck-lnstitut for Chemie Mainz 55020 Germany Department of Earth and Planetary Sciences American Museum of Natural History New York 10024 USA Department of Chemistry Fordham University BronxNew York 10458 USA Saskatchewan Isotope Laboratory Department of Geological Sciences University of Saskatchewan Saskatoon S7N 5E2 Canada Bundeskriminalamt Wiesbaden 65173 Germany Instituto de Geoci6ncias University of Campinas CP 6152 Campinas CEP 13083-970 Brazil National Research Center for Geoanalysis Beijing 100037 China Institut for Geowissenschaften Universitat Mainz Mainz 55099 Germany Institut for Physiologische Chemie Universitat Mainz Mainz 55099 Germany Institute of Geology and Mineralogy Siberian Branch of Russian Academy of Sciences Novosibirsk 630090 Russia V. I. Vernadsky Institute of Geochemistry and Analytical Chemistry Russian Academy of Sciences Moscow 119991 Russia

激光剥蚀-等离子体质谱(LA-ICPMS)已成为地球化学、宇宙化学和环境研究领域元素和同位素原位分析最重要的技术之一。文章介绍了多种类型的质谱仪及其使用的激光器。用途最广的LA-ICPMS仪器之一是单接收器扇形磁场质谱仪,配有Nd:YAG激光... 详细信息

激光剥蚀-等离子体质谱(LA-ICPMS)已成为地球化学、宇宙化学和环境研究领域元素和同位素原位分析最重要的技术之一。文章介绍了多种类型的质谱仪及其使用的激光器。用途最广的LA-ICPMS仪器之一是单接收器扇形磁场质谱仪,配有Nd:YAG激光剥蚀系统(激光波长分为193 nm和213 nm两种),MPI Mainz实验室使用的就是这套系统,文章对此作一详细介绍。文中阐述了数据优化技术及其多种校正过程;介绍LA-ICPMS在痕量元素和同位素分析领域的一些应用,包括参考物质的研制,Hawaiian玄武岩、Martian陨石、生物骨针和珊瑚虫中痕量元素分析及熔融包裹体和富钙-铝碳质球粒陨石中的铅和锶同位素测量。

关键词：激光剥蚀-等离子体质谱地质样品参考物质陨石生物样品痕量元素同位素比值

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血清中钠离子检测的量值溯源性研究

化学试剂 2017年第9期39卷 949-951页

作者：吴永明陶武钟广蓉黄飞雪廖丽红北京科技大学化学分析中心北京100083

首先建立了血清钠检测的量值溯源流程系统,将厂商提供的校准品溯源至参考物质和参考方法,其中参考方法选用IFCC推荐的火焰原子发射光谱法(FAES)。根据EP9-A2要求,用临床检测的常规方法与参考方法同时测定49例血清样本进行对比实验。完... 详细信息

首先建立了血清钠检测的量值溯源流程系统,将厂商提供的校准品溯源至参考物质和参考方法,其中参考方法选用IFCC推荐的火焰原子发射光谱法(FAES)。根据EP9-A2要求,用临床检测的常规方法与参考方法同时测定49例血清样本进行对比实验。完成了血清钠离子产品校准品的量值溯源,建立了血清钠离子检测系统的量值溯源性,以提高检测结果的可靠性。实验结果显示,临床检测的常规方法和参考方法有很好的相关性,且两种方法的测量值偏差符合CLIA'88的要求。

关键词：钠原子吸收分光光度法参考物质参考方法量值溯源

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醛固酮候选参考方法的建立及其应用

醛固酮候选参考方法的建立及其应用

作者：罗文波北京协和医学院

学位级别：硕士

目的:基于同位素稀释液相色谱串联质谱技术(ID-LC-MS/MS)建立准确可靠的血浆/血清醛固酮检测方法,优化方法学性能,使其达到候选参考方法标准。方法:以 ACQUITY UPLCI-CLASS System 色谱仪与 Xevo TQ-S 质谱仪(Waters,美国)组建ID-LC-MS... 详细信息

目的:基于同位素稀释液相色谱串联质谱技术(ID-LC-MS/MS)建立准确可靠的血浆/血清醛固酮检测方法,优化方法学性能,使其达到候选参考方法标准。方法:以 ACQUITY UPLCI-CLASS System 色谱仪与 Xevo TQ-S 质谱仪(Waters,美国)组建ID-LC-MS/MS系统,以醛固酮(Sigma Aldrich)标准溶液作为定量标准,以醛固酮同位素标准溶液为内标,以包括法进行定量。对样本前处理方法与液质系统条件进行选择与优化,根据相关EP文件要求,对方法定量限(LOQ)、不精密度、基质效应、正确度等性能指标进行评价。以Westgard网站上导出的血清醛固酮生物学变异标准评价方法性能。结果:以醛固酮-D8为内标,以阴离子交换固相萃取(Oasis Max96孔板)为样本前处理方法,以纯水与纯甲醇为流动相,以电喷雾离子源(ESI)负离子多反应检测模式(MRM)进行检测,以359.16/189.14为定量离子对,以359.16/331.23为定性离子对。方法单次分析时间为6min,生物样本中干扰可达到基线分离,无携带污染。方法定量限参考方法,为醛固酮测定标准化提供参考。目的:制备醛固酮候选基质参考物质(SRMs),为各厂家、实验室提供参考溯源标准,改进醛固酮检测结果质量,推进临床醛固酮检测结果标准化。方法:根据ISO导则35与EP30-A,从北京医院内分泌实验室收集剩余新鲜人血清用于制备不同浓度的SRMs。以醛固酮候选参考方法为SRMs进行定值。根据ISO导则35,对醛固酮SRMs的稳定性、均匀性、冻融效应与其在不同系统间的互通性进行考察。结果:根据醛固酮检测临床意义值范围,制备低、中、高三种浓度水平醛固酮SRMs,其靶值(N=4)分别为 54.61±1.99(pg/g)、139.26±3.47(pg/g)、226.58±7.39(pg/g);三种浓度水平醛固酮SRMs均具有良好均匀性,在-80℃条件下半年稳定性良好,无明显冻溶效应;局限于当前醛固酮常规检测方法的特异性与溯源性差异以及样本收集量不足等问题,只在国内两种常见醛固酮常规方法(索灵、安图)与一种质谱方法(沃特世液质系统)间进行互通性评价,三种浓度醛固酮SRMs在索灵与沃特世液质系统方法间具有互通性。以三种SRMs为样本开展2019年醛固酮能力验证调查项目,发现醛固酮测定方法间存在明显校准差异,测定结果间可比性不足。以高、低浓度SRMs对实验室的中浓度SRMs测定结果校准后,其测定值可比性明显改善。结论:本研究中研制了低、中、高三种浓度水平的醛固酮SRMs,可为各厂家、实验室间醛固酮检测免疫法与质谱法提供溯源与量值传递标准,开展正确度验证计划,有利于推进当前醛固酮检测标准化。目的:比较国内两种主流化学发光免疫分析法(索灵、安图)及一种同位素稀释质谱法临床醛固酮测定结果的相关性与一致性;考察醛固酮候选参考物质、厂家质控品与室间质评样本的互通性;结合醛固酮室间质评数据,评价我国醛固酮检测一致化/标准化现状。方法:根据EP9-A3与EP14-A3指南文件,收集浓度初测值在检测方法共同检测范围内的45例剩余新鲜单人血浆样本。根据EP15-A3指南文件对待评价方法精密度进行验证。以Deming回归分析对3种醛固酮常规检测方法进行两两比对,以决定系数R2评价方法间相关性,以一致性相关系数(Concordance Correlation Coefficient,CCC)评价方法间一致性,以Bland-Ataman图分析方法间绝对与相对偏差。根据EP14-A3指南文件对物质互通性进行评价,以95%的可预测区间(Prediction Intervals,PI)为评价标准。结果:3种醛固酮常规检测方法的精密度均达到声称水平且满足方法学比对要求。索灵与常规同位素稀释质谱法检测结果间具有较好相关性(R2=0.985)与一致性(CCC=0.967);安图与索灵/常规同位素稀释质谱法检测结果间相关性与一致性较差。三种醛固酮常规检测方法间平均相对偏差均超过生物学变异最低偏倚要求(18.6%)。3种常规醛固酮检测方法中,索灵与同位素稀释质谱法的相关性与特异性满足互通性评价对方法的要求,低、中、高三种浓度水平的醛固酮候选基质参考物质在该两种系统上具有互通性,而索灵、安图厂家质控品在

关键词：醛固酮同位素稀释液相色谱串联质谱法生物学变异参考测量程序醛固酮参考物质溯源性互通性标准化醛固酮化学发光同位素稀释质谱法一致性互通性

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高频燃烧-红外吸收法测定增碳剂中的硫

兵器材料科学与工程 2009年第5期32卷 92-94页

作者：晏高华杨浩义湖北省机电研究设计院湖北武汉430070

为了寻求一种简便、快速、准确测定增碳剂中硫含量的方法,探讨利用高频燃烧-红外吸收法测定增碳剂中硫的方法。试验表明,助熔剂的最佳配比为0.5 g纯铁+0.050 g试样+0.3 g锡粒+1.5 g钨粒,样品以平铺于混合助熔剂的中间层为宜,利用焦碳做... 详细信息

为了寻求一种简便、快速、准确测定增碳剂中硫含量的方法,探讨利用高频燃烧-红外吸收法测定增碳剂中硫的方法。试验表明,助熔剂的最佳配比为0.5 g纯铁+0.050 g试样+0.3 g锡粒+1.5 g钨粒,样品以平铺于混合助熔剂的中间层为宜,利用焦碳做参考物质,结果准确、可靠。将该法应用于实际样品的分析结果令人满意。

关键词：高频燃烧红外吸收法增碳剂硫参考物质

具有互换性和溯源性的酶校准品在临床酶学标准化应用中的研究

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具有互换性和溯源性的酶校准品在临床酶学标准化应用中的研究

作者：张莹第四军医大学

学位级别：硕士

背景:酶学检测方法的标准化是解决实验室间结果可比的重要因素,但是由于每个试剂公司在生产试剂时,试剂缓冲液种类选用的不同,缓冲液浓度的不同,以及样本∕试剂体积比的不同,不同生化分析仪光路系统和流路系统的性能参数不同以及反应槽... 详细信息

背景:酶学检测方法的标准化是解决实验室间结果可比的重要因素,但是由于每个试剂公司在生产试剂时,试剂缓冲液种类选用的不同,缓冲液浓度的不同,以及样本∕试剂体积比的不同,不同生化分析仪光路系统和流路系统的性能参数不同以及反应槽恒温设备性能的不同,使得常规检测方法之间有差异,常规检测系统之间的检测结果存在明显差异。并且各试剂生产厂家酶校准品的溯源程度不同,导致产品校准品的溯源性存在很大的差异。最终导致临床酶学项目检测结果间可比性差,不同医院间结果互认存在困难。为了降低常规检测系统之间的检测结果的差异,为使血清酶定量测定的结果具有可比性,国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)研究并形成多个酶学检测的参考测量程序。人们探索着如何将参考测量程序的可靠性通过溯源链传递给临床常规检测系统用户使用的校准品,常规实验室用户使用具有溯源性的常规校准品,就可以使患者样品的检测结果溯源至参考测量程序,使得患者的检测结果具有溯源性。但是,如果不认识到校准品还需要具备互换性的话,一致性将无法实现,更无法谈及实现溯源性。目的:本课题试图制备具有良好的溯源性和互换性的血清基质的参考物质,并用具有溯源性和互换性的参考物质作校准品去校准临床常规方法,提高各实验室检测结果的正确度和实验室间结果的精密度,进一步提高不同医院间结果的一致性和可比性。方法:收集GGT,CK,LDH三个项目乙肝表面抗原(Hbs Ag)、丙肝抗体(Anti-HCV)、梅毒抗体(Anti-TP)、艾滋(HIVAg/Ab)全阴性混合血清作参考物质,-80℃冻存,验证混合血清的稳定性和互换性,并和国际知名品牌的校准品(如和光校准品和罗氏校准品)进行性能评估。由四家参加国际RELA成绩合格的酶学参考实验室联合给参考物质赋值,确保参考物质赋值结果的正确性和溯源性。参考物质作校准品在临床实验室应用,参加试验的11个实验室先使用各自配套的GGT,CK,LDH校准品校准仪器,在校准通过后,将GGT,CK,LDH高中低3个水平的血清样本和参考物质各测定3次,记录检验结果;再使用具有溯源性和互换性的参考物质作为校准品校准仪器,在校准通过后重复测定GGT,CK,LDH高中低3个水平的血清样本和参考物质各3次,记录检验结果。计算11家实验室在使用具有溯源性和互换性的参考物质作为校准品校准前后,参考物质检测结果与靶值的偏移和高中低3个水平的血清样本GGT,CK,LDH检测结果的变异系数(CV%)。结果:本课题制备的参考物质互换性良好,-80℃冻存一年稳定性良好。分别于2014年8月,2014年11月,2015年3月和2015年7月对混合血清GGT,CK和LDH结果进行检测,结果稳定性良好。GGT检测结果均值为133.88U/L,标准差(SD)为0.63U/L,变异系数(CV)为0.47%;CK检测结果均值为151.60U/L,标准差(SD)为0.33U/L,变异系数(CV)为0.22%;LDH检测结果均值为230.63U/L,标准差(SD)为1.31U/L,变异系数(CV)为0.57%。由四家酶学参考实验室联合赋值,实验室间检测结果的变异系数较小,赋值合格。GGT参考物质检测结果均值127.71 U/L,SD 0.92U/L,CV 0.72%;CK参考物质检测结果均值140.79 U/L,SD 2.20U/L,CV 1.56%;LDH参考物质检测结果均值226.95 U/L,SD 1.52U/L,CV 0.67%。参考物质作校准品在临床实验室应用,使用了具有溯源性和互换性的参考物质作为校准品校准后,GGT参考物质检测结果的均值128.08 U/L,检测结果与靶值的偏移0.30%;CK参考物质检测结果的均值144.94 U/L,检测结果与靶值的偏移2.94%;LDH参考物质检测结果的均值227.49 U/L,检测结果与靶值的偏移0.23%。使用具有溯源性和互换性的参考物质作为校准品校准后,GGT参考物质检测结果与靶值的偏移由0.66%降到0.30%,CK参考物质检测结果与靶值的偏移由4.18%降到2.94%,LDH参考物质检测结果与靶值的偏移由-4.10%降到0.23%。11家实验室GGT项目低中高3个水平的血清样本检测结果的变异系数(CV)由6.13%,5.90%和6.04%降到了3.30%,1.18%和1.83%;CK项目低中高3个水平的血清样本检测结果的变异系数(CV)由3.76%,4.19%和4.96%降到了3.19%,2.61%和2.81%;LDH项目低中高3个水平的血清样本检测结果的变异系数(CV)由8.39%,8.74%和8.76降到了1.14%,1.21%和2.73%。结论:本研究收集新鲜混合血清制备参考物质,去除混合血清中的杂质后分装,验证混合血清的稳定性和互换性,由四家参加国际RELA成绩合格的酶学

关键词：参考物质溯源性互换性标准化 γ-谷氨酰转移酶肌酸激酶乳酸脱氢酶

基于防护平板法的建筑保温材料导热系数测定仪的研究

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基于防护平板法的建筑保温材料导热系数测定仪的研究

作者：刘晴晴西安建筑科技大学

学位级别：硕士

建筑产业化的快速发展使传统的保温材料很难再为其服务,寻找高效、环保的新型保温材料已成为建筑行业亟待解决的问题之一。深入地了解常用保温材料的保温特性,不仅对能源利用效率具有重要的意义,而且也是今后新型保温材料研究的基础。... 详细信息

建筑产业化的快速发展使传统的保温材料很难再为其服务,寻找高效、环保的新型保温材料已成为建筑行业亟待解决的问题之一。深入地了解常用保温材料的保温特性,不仅对能源利用效率具有重要的意义,而且也是今后新型保温材料研究的基础。导热系数的研究直接影响和决定了建筑结构导热效率和性能参数的好坏。本文的主要目的是研制一套防护平板法导热系数测量装置,主要工作如下:详细调研了国内外平板导热仪的研究现状。参照平板导热系数测试仪的国家标准,本文研制了双平板法导热系数测量装置。新建装置采用双试样结构使得测试结果更准确;冷板和热板都使用高导热系数的铝板,使得加热速率更快;热板采用绝缘性好、热传导高、电阻稳定和温度控制精度高的聚酰亚胺薄膜加热器进行加热。冷板设计成逆流冷迷宫式结构,保证了板面受热的均匀;设计的夹紧装置使试样与板紧密贴合,有效的排除了试样与板接触面间可能存在的空气层;高精度恒温槽及Agilent 34970A数据采集仪,大大提高了测量精度。利用新建的双平板法导热系数测量装置,在200℃温度范围内对参考物质有机玻璃进行了导热系数的测量,得到的导热系数值与参考值之间的最大偏差为1.11%,平均偏差为0.25%,重复性在1%以内;对新建测试装置的不确定度进行了分析,结果表明,本实验系统测量导热系数的不确定度为±1%。利用新建的双平板法导热系数测量装置,分别对泡沫玻璃、橡塑保温棉、聚氨酯保温板、酚醛保温板的导热系数进行了测试。整体测试偏差在±2%以内,测量重复性在1%以内。本文对部分建筑保温材料导热系数的实验研究为当前正在进行的保温材料的推广应用、低成本高效保温材料的开发以及成熟可靠的先进工艺的进一步研究提供了一定的支持。

关键词：导热系数防护平板法导热系数测定仪参考物质保温材料

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固体材料导热率测量标准装置的研究

固体材料导热率测量标准装置的研究

作者：邓建兵华中科技大学

学位级别：硕士

导热率是固体材料重要的热物性参数,它对科学研究和实际应用有着重要的作用。中国计量科学研究院在国家科技部的支持下,开展了建立保护热板法固体材料导热率测量装置的研究工作,为建立国内材料导热率测量标准装置作好准备。本课题旨在... 详细信息

导热率是固体材料重要的热物性参数,它对科学研究和实际应用有着重要的作用。中国计量科学研究院在国家科技部的支持下,开展了建立保护热板法固体材料导热率测量装置的研究工作,为建立国内材料导热率测量标准装置作好准备。本课题旨在对保护热板法(GHP)导热率测量装置进行较系统的实验研究。为了验证该测量装置的性能,实验采用德国PTB提供的参考物质(有机玻璃),对其在300℃温度范围内进行导热率测量,先前有十七个国家实验室和研究机构采用保护热板法装置、其它的稳态法装置和瞬态法装置测量了PTB参考物质的导热率,欧洲测量结果的最大相对偏差达到了24%。与欧洲的测量结果进行了对比,本文新建装置测量的结果位于这些数据的中间位置,与PTB测量的结果较为接近。并且进一步利用本文建立的保护热板法(GHP)导热率测量装置在8030℃温度范围内测量了花岗岩和光学玻璃两种材料的导热率,装置具有高温下准确测量材料导热率的能力。本文还分析实验中热流流过样品的热流损失以及以本文装置为基础进行数值模拟分析。对PTB参考物质导热率测量的结果进行了曲线拟合,拟合标准偏差为1.1×10-3 W/(m·K),合成的相对标准不确定度(1σ)估计值为1.0×10-2,扩展不确定度(k=2)为2.0×10-2。测量对比和误差分析表明,新建装置测量的结果与国外发达国家装置的测量结果具有可比性和较好的可靠性。

关键词：标准装置导热率保护热板法不确定度参考物质