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桉叶提取物抗细粒棘球蚴原头节作用及谱效关系分析

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桉叶提取物抗细粒棘球蚴原头节作用及谱效关系分析

作者：赵宇宁中国疾病预防控制中心

学位级别：硕士

目的：通过研究不同桉树叶的化学成分和体外抗原头节活性,建立二者间的谱-效关系,为寻找有效的抗原头节活性药物奠定基础。方法：1.于同一年连续12次,在每月同一日期收集大叶桉和巨桉成熟叶片,室内自然风干;2.用4种不同极性溶剂石油醚... 详细信息

目的：通过研究不同桉树叶的化学成分和体外抗原头节活性,建立二者间的谱-效关系,为寻找有效的抗原头节活性药物奠定基础。方法：1.于同一年连续12次,在每月同一日期收集大叶桉和巨桉成熟叶片,室内自然风干;2.用4种不同极性溶剂石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和无水乙醇进行超声提取;3.将提取物体外作用于细粒棘球蚴原头节,考察其对原头节的杀灭活性;4.采用气相色谱-质谱联用技术(GC/MS)分析不同溶剂提取物的成分。采用归一化峰面积和相对峰面积对不同样品中各成分含量的变化进行半定量分析;5.采用偏最小二成回归分析法建立不同种类桉树在不同月份收集的桉叶样品的生物活性数据与相应成分的色谱数据之间的关系,即谱-效关系分析。将分析模型所得的回归参数进行由大到小排序,推测与生物活性相关性较大的化学成分。结果：1.两种桉叶在不同月份中所含成分及含量均有不同。其中两者石油醚提取物成分种类数大体相同;而二氯甲烷提取物中,大叶桉桉叶各月份成分种类平均为49种,巨桉桉叶则为73种。纳入统计分析中,大叶桉桉叶石油醚提取物纳入峰为33个,二氯甲烷提取物为46个;巨桉桉叶石油醚和二氯甲烷提取物皆为32个。2.体外杀灭原头节的活性试验结果表明,低极性段的石油醚与二氯甲烷提取物活性较好。其中大叶桉石油醚提取物以6月份样品抗原头节作用最强,LC50为2.577μg/ml;二氯甲烷提取物以11月份样品抗细粒棘球蚴作用最强,其LC50为21.85μg/ml。巨桉桉叶石油醚提取物中,以12月份提取物活性最强,LC50为3.110μg/ml;二氯甲烷提取物中以3月份活性最强,LC50为2.679μg/ml。3.谱-效分析结果显示,不同成分对于原头节死亡率的参数值虽各不相同,但一些成分的参数值十分相近。结论：两种桉叶的提取物中,低极性成分对于原头节的杀灭作用更强。从谱效关系分析,多种成分对活性均有贡献,由此推测桉叶提取物对原头节的杀灭活性是不同化合物协同作用的结果。

关键词：大叶桉巨桉细粒棘球蚴原头节 LC50 GC/MS 偏最小二乘回归

TNF-α诱导细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡初步研究

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TNF-α诱导细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡初步研究

作者：刘玉红新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:初步观察研究体外培养的细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡现象及TNF-α对其有无凋亡诱导作用和特点。方法:以骆驼源细粒棘球绦虫原头节为体外培养对象,置于无菌生理盐水中,在37℃和4℃分别观察培养。37℃实验加入不同剂量TNF-α,分别为0... 详细信息

目的:初步观察研究体外培养的细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡现象及TNF-α对其有无凋亡诱导作用和特点。方法:以骆驼源细粒棘球绦虫原头节为体外培养对象,置于无菌生理盐水中,在37℃和4℃分别观察培养。37℃实验加入不同剂量TNF-α,分别为0.125(T1)、0.1875(T2)和0.375(T3)ug/ml,作用15小时。4℃培养实验加入TNF-α0.125ug/ml(T1),作用不同时段,分别为52、64、72小时。两实验均设空白对照组(T0)。实验结束后用HE染色和TUNEL法原位检测细胞凋亡,并用透射电镜观察检测凋亡现象。结果:TUNEL法检测凋亡细胞阳性率:37℃时,TNF-α组与空白对照组差异有统计学意义(P＜0.001),TNF-α各剂量间T1与T3组差异有统计学意义(P=0.002);4℃时,TNF-α组与空白对照组在64与72小时比较时差异均有统计学意义(P≤0.001),随着时间延长,TNF-α作用组有统计学差异(P＜0.001)而空白对照组无统计学差异。透射电镜观察检测到较典型的凋亡细胞。而HE染色观察不理想。结论:初步观察到体外培养的骆驼源细粒棘球绦虫原头节的细胞凋亡现象,TNF-α对其凋亡诱导作用在一定范围内可能具有剂量和时间依赖性,此现象及其机制有待进一步深入研究。

关键词：细粒棘球绦虫原头节凋亡 TNF-α 体外实验

原头节抗原IFAT和IEST诊断人体包虫病的比较研究

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疾病预防控制通报 1989年第4期 43-46页

作者：王虎青海医学院寄生虫学教研室西宁

以冰冻保存的绵羊棘球蚴内原头节为抗原作间接荧光抗体试验(IFAT)和间接免疫酶染色试验(IEST),检测对包虫病人、非包虫病人及键康人的敏感性、特异性及交叉反应性,并与间接血凝试验相比较(IHAT)。结果表明IFAT的敏感性和特异性分别为90... 详细信息

以冰冻保存的绵羊棘球蚴内原头节为抗原作间接荧光抗体试验(IFAT)和间接免疫酶染色试验(IEST),检测对包虫病人、非包虫病人及键康人的敏感性、特异性及交叉反应性,并与间接血凝试验相比较(IHAT)。结果表明IFAT的敏感性和特异性分别为90.36％和97.67％;IEST的敏感性和特异性分别为96.55％和100.0％;两种方法均高于IHAT的敏感性(85.54％)和特异性(95.35％)。三种方法对血吸虫感染者和癌症病人血清均无交叉反应,但对囊虫病人的交叉反应率为IFAT(51.35％)>IHAT(37.84％)>IEST(21.62％)。以原头节为抗原IEST诊断人体包虫病敏感性高、特异性强,适用范围广,不需特殊设备,具有现场应用价值。

关键词：原头节间接荧光抗体试验间接免疫酶染色试验包虫病诊断

吡喹酮对体外细粒棘球绦虫原头节作用机理的初步探讨

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疾病预防控制通报 1988年第3期 6-10+120-121页

作者：杨元清张超威尤纪青郭惠芳焦佩英肖树华柴杰君焦伟中国预防医学科学院寄生虫病研究所乌鲁木齐新疆自治区地方病防治研究所新疆自治区地方病防治研究所上海

细粒棘球绦虫原虫节受浓度为0.05～1μg/ml的吡喹酮作用后,其皮层即出现肿胀、空泡,严重者还发生破裂,脱落并暴露肌层或实质组织;部分细胞显示核浓缩,溶解及崩裂。该药还能迅速引起原头节体内糖原含量的减少以及AKP和ATP酶活力的减弱,... 详细信息

细粒棘球绦虫原虫节受浓度为0.05～1μg/ml的吡喹酮作用后,其皮层即出现肿胀、空泡,严重者还发生破裂,脱落并暴露肌层或实质组织;部分细胞显示核浓缩,溶解及崩裂。该药还能迅速引起原头节体内糖原含量的减少以及AKP和ATP酶活力的减弱,但对虫体核酸及蛋白质的作用则发生较慢或影响较小。初步认为吡喹酮的体外杀虫作用主要是通过药物破坏原头节的皮层并抑制虫体的糖代谢而实现的。

关键词：细粒棘球绦虫原头节吡喹酮皮层糖原 AKP ATP酶

细粒棘球绦虫原头节在NIH小鼠体内发育的组织化学研究

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疾病预防控制通报 1988年第2期 43-48+100-101页

作者：杨元清张超威柴君杰焦伟中国预防医学科学院寄生虫病研究所乌鲁木齐新疆自治区地方病防治研究所新疆自治区地方病防治研究所上海

本文报道了细粒棘球绦虫原头节在NIH小鼠体内发育过程的组织化学变化,结果如下: 一、糖原:感染后1～2周,原头节体内糖原含量明显减少或消失;4周～6个月,生发层内出现糖原并陆续增加。二、核酸及蛋白质:感染后1～4周,原头节体内的核酸... 详细信息

本文报道了细粒棘球绦虫原头节在NIH小鼠体内发育过程的组织化学变化,结果如下: 一、糖原:感染后1～2周,原头节体内糖原含量明显减少或消失;4周～6个月,生发层内出现糖原并陆续增加。二、核酸及蛋白质:感染后1～4周,原头节体内的核酸及蛋白质含量均有逐渐减少的趋势;2～3个月时,生发细胞内的上述生化物质含量仍然较少;感染后4～6个月,凡在芽状增殖的生发层内,其聚集生发细胞中均含有相当丰富的核酸及蛋白质成分。三、AKP、ATP及ACP酶感染后1～2周,原头节体内AKP及ATP酶的活力逐渐减弱;但在4周～6个月,生发层内的酶活力有所增强;原头节皮层内的ACP活力则在感染后1～2周才开始显现;但4周后活力减弱,感染后2～6个月,生发层内ACP的活力又逐渐增强。对细粒棘球绦虫不同时期幼虫的上述生化物质动态变化的生理意义,进行了扼要的讨论。

关键词：细粒棘球绦虫原头节 NIH小鼠皮层细粒棘球蚴生发层糖原核酸蛋白质 ACP AKP ATP酶

新疆不同地区不同来源细粒棘球蚴原头节的几种同工酶谱比较研究

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疾病预防控制通报 1992年第S1期23卷 76-81页

作者：严雷张文林瞿群依斯拉音汤旭柴君杰新疆地方病防治研究所

本文报导采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),对我国新疆不同地区的羊源、牛源细粒棘球蚴(***)原头节的 EST、GPI、MDH、G6PDH、ACP、ALP 和 ME 同工酶进行了比较研究。分别采集了南疆和田和北疆阿勒泰、伊犁和乌鲁木齐的羊肝细粒棘球... 详细信息

本文报导采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),对我国新疆不同地区的羊源、牛源细粒棘球蚴(***)原头节的 EST、GPI、MDH、G6PDH、ACP、ALP 和 ME 同工酶进行了比较研究。分别采集了南疆和田和北疆阿勒泰、伊犁和乌鲁木齐的羊肝细粒棘球蚴原头节及阿勒泰、伊犁的牛肝细粒棘球蚴原头节样本,采用垂直板 PAGE 电泳,进行上述7种酶的同工酶检测,结果表明:在同一地区的羊源和牛源的细粒棘球蚴样本之间,EST、MDH、GPI 和 G6PDH 的同工酶在区带数目、排列形式、Rf 值、Sm 值和相对活性方面都存在着一定的差异;每个样品除具有各自不同的特征酶谱外,同时,又都具有共同的特征酶带。

关键词：细粒棘球绦虫原头节同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳宿主新疆

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新疆不同地区不同来源细粒棘球蚴原头节几种同工酶的等电聚焦分析

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疾病预防控制通报 1992年第S1期23卷 82-87页

作者：严雷张文林瞿群依斯拉音汤旭柴君杰新疆地方病防治研究所

本文报告用等电聚焦方法对新疆和田、乌鲁木齐和阿勒泰三地绵羊及伊犁和阿勒泰两地的黄牛细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)原头节标本进行苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、莆萄糖磷酸异构酶(GPI)、酯酶(EST)和酸性磷酸酶(ACP)同... 详细信息

本文报告用等电聚焦方法对新疆和田、乌鲁木齐和阿勒泰三地绵羊及伊犁和阿勒泰两地的黄牛细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)原头节标本进行苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、莆萄糖磷酸异构酶(GPI)、酯酶(EST)和酸性磷酸酶(ACP)同工酶谱的分析。实验结果表明:在新疆不同地区绵羊中传播的*** 存在着以和田与乌鲁木齐羊源为代表的两个在同工酶酶谱上有明显差异的虫株;和田羊源与阿勒泰羊源的同工酶谱十分相近;阿勒泰和伊犁两地牛源样本有显著不同,这表明至少在同一种中间宿主中可能也有生物学性状不同的变异株;阿勒泰羊源与牛源标本酶谱的相似性说明存在有同一虫株感染不同宿主的可能性.

关键词：细粒棘球绦虫原头节同工酶等电聚焦电泳

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青海高原不同源原头节感染犬后细粒棘球绦虫成虫的形态学观察

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地方病通报 1993年第3期8卷 6-10页

作者：王虎慈延令闫海玉武海燕青海医学院西宁810001 青海省卫生学校

本文对青海高原藏羊、牦牛体内棘球蚴和原头节实验感染犬后获得的细粒棘球绦虫成虫进行了形态学观察和测量。结果表明二者在某些形态学上有显著差异,很可能是不同的虫株。牦牛-犬型细粒棘球绦虫的形态与世界各地报道过的虫株相比,有其... 详细信息

本文对青海高原藏羊、牦牛体内棘球蚴和原头节实验感染犬后获得的细粒棘球绦虫成虫进行了形态学观察和测量。结果表明二者在某些形态学上有显著差异,很可能是不同的虫株。牦牛-犬型细粒棘球绦虫的形态与世界各地报道过的虫株相比,有其独特之处,很可能是存在于我国的独立株系。

关键词：原头节细粒棘球绦虫成虫形态学

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细粒棘球蚴病的实验研究 Ⅰ、不同来源的细粒棘球蚴原头节对小白鼠感染情况的比较观察

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青海医药 1982年第1期 5-10页

作者：陈钦铭叶于聪寇星灿青海省医科所

包虫病(Hydatidosis)是一种常见的人畜共患的寄生虫病,其病原体为细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,简称E.g.)和多房棘球绦虫(Echino-coccus multiocularis,简称E.m.)的幼虫,前者可引起细粒棘球蚴病(Echi-nococcosis granulosus)后者可引起泡球蚴病(Echinococcosis alveolar-is),临床上统称为包虫病。在我国,该病广泛流行于北部、西北及西南一些省、区,其发病率约在0.3—4.8％,在某些畜牧地区高达10％,所以它又是一种地

关键词：原头节不同来源感染率小白鼠细粒