检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库博看期刊

表皮生长因子通过间隙连接蛋白调控小鼠卵母细胞成熟的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生殖医学杂志 2024年第5期33卷 618-626页

作者：张桢田霄峰陈杰温碧超马玉珍内蒙古医科大学研究生院呼和浩特010010 内蒙古自治区人民医院妇产科呼和浩特010017 内蒙古自治区人民医院生殖中心呼和浩特010017

目的探讨表皮生长因子(EGF)促进卵母细胞成熟的作用机制。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测性未成熟昆明白实验小鼠未成熟卵母细胞复合体(COCs)和成熟COCs中11种间隙连接蛋白(Cx)基因的表达情况;采用细胞免疫荧光实验,确定... 详细信息

目的探讨表皮生长因子(EGF)促进卵母细胞成熟的作用机制。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测性未成熟昆明白实验小鼠未成熟卵母细胞复合体(COCs)和成熟COCs中11种间隙连接蛋白(Cx)基因的表达情况;采用细胞免疫荧光实验,确定Cx43在未成熟/成熟COCs及卵母细胞中的表达部位;将未成熟COCs培养于0μg/L、1μg/L、10μg/L、50μg/L EGF培养基中观察其成熟率;将未成熟COCs培养于10μg/L EGF培养基中,观察0 h、4 h、8 h、12 h、16 h、20 h和24 h时间点的成熟率;将未成熟COCs和去颗粒细胞未成熟COCs分别培养于10μg/L EGF培养基中24 h,观察其成熟率;将未成熟COCs培养于10μg/L EGF培养基并分别加入0μg/L、0.1μg/L、1μg/L、10μg/L EGF受体(EGFR)抑制剂(AG),培养22~24 h后观察EGFR对EGF的作用;采用Western blot法检测未成熟COCs培养于10μg/L EGF培养基10 min、30 min、1 h和2 h后Cx43的磷酸化水平。结果RT-PCR结果显示,在小鼠未成熟/成熟COCs中Cx43和Cx45高表达。细胞免疫荧光实验结果显示,Cx43在未成熟COCs中表达于颗粒细胞的细胞膜上,在未成熟卵母细胞的细胞膜和透明带上也有高表达,且呈簇状分布;在成熟的COCs中Cx43在颗粒细胞膜上的表达量降低,在成熟卵母细胞中Cx43的表达量减少,且为均匀分布于细胞膜上,在透明带上不表达。培养于10μg/L EGF中的小鼠未成熟COCs的卵母细胞成熟率最高,达86.9%,显著高于其他不同浓度组(P成熟COCs促进成熟的作用最显著,卵母细胞成熟率达86.2%,显著高于其他不同时长组(P成熟COCs去颗粒细胞后,培养于10μg/L EGF培养基中24 h后,未成熟COCs的卵母细胞成熟率没有显著变化(P>0.05)。EGFR特异性抑制剂AG能有效逆转EGF促进小鼠卵母细胞减数分裂恢复的作用,即抑制卵母细胞成熟,且1μg/L AG对EGF作用的逆转效果最显著(P成熟COCs中,Cx43以非磷酸化形式为主;添加10μg/L EGF,培养10 min后,Cx43以磷酸化形式为主,持续至2 h时,Cx43又以磷酸化和非磷酸化两种形式存在。结论在小鼠未成熟COCs中,EGF可能通过与颗粒细胞上的EGFR结合,使Cx43快速磷酸化,促进卵母细胞减数分裂恢复和卵母细胞成熟。

关键词：表皮生长因子间隙连接蛋白蛋白质磷酸化卵母细胞成熟

cAMP信号通路在5-羟色胺诱导硬壳蛤卵母细胞成熟过程中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高技术通讯 2008年第1期18卷 91-96页

作者：王清张涛张立斌中国科学院海洋研究所青岛266071 中国科学院研究生院北京100049

采用体外药物诱导的方法,研究了5-羟色胺(5-HT)诱导的硬壳蛤(Mercenariamercenaria)卵母细胞成熟过程中 cAMP 信号通路的作用。结果表明,浓度为0.01～100μM的5-HT 均能够显著地诱导硬壳蛤卵母细胞的成熟,处理60min 时生发泡破裂(GVBD)... 详细信息

采用体外药物诱导的方法,研究了5-羟色胺(5-HT)诱导的硬壳蛤(Mercenariamercenaria)卵母细胞成熟过程中 cAMP 信号通路的作用。结果表明,浓度为0.01～100μM的5-HT 均能够显著地诱导硬壳蛤卵母细胞的成熟,处理60min 时生发泡破裂(GVBD)发生率均可达到70%左右。不同浓度5-HT 的诱导作用表现出时间依赖性,但未表现出浓度依赖效应。咖啡因、茶碱和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)可以单独抑制卵母细胞的自发成熟,但效果不显著。10mM 的咖啡因和茶碱以及5mM 的 IBMX 能够显著地抑制5-HT的诱导效果。1mM 的 IBMX 对5-HT 的诱导效果影响不显著,1mM 的咖啡因和茶碱能够促进5-HT 的诱导作用,但差异不显著。研究结果表明,cAMP 信号通路参与了5-HT 诱导的硬壳蛤卵母细胞的成熟过程,并且 cAMP 浓度的升高会抑制其成熟,cAMP 信号通路在硬壳蛤卵母细胞的成熟过程中可能起着负调控的作用。

关键词：硬壳蛤卵母细胞成熟 cAMP信号通路 CVBD 5-羟色胺

原癌基因在介导细胞因子影响卵母细胞成熟中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国应用生理学杂志 2009年第1期25卷 74-79页

作者：郑莉萍王晶磊郑月慧吴磊肖秋香李芳南昌大学医学院生殖研究室江西南昌330006 江西省赣南医学院江西赣州341000

目的:探讨原癌基因c-erbB_2、c-myb在介导表皮生长因子、肿瘤坏死因子α、内皮素-1及一氧化氮影响卵母细胞成熟中的作用。方法:建立小鼠卵母细胞体外培养模型,观察EGF、TNFα、ET-1及NO供体小剂量硝普钠(SNP)对卵细胞成熟的影响,用RT-PC... 详细信息

目的:探讨原癌基因c-erbB_2、c-myb在介导表皮生长因子、肿瘤坏死因子α、内皮素-1及一氧化氮影响卵母细胞成熟中的作用。方法:建立小鼠卵母细胞体外培养模型,观察EGF、TNFα、ET-1及NO供体小剂量硝普钠(SNP)对卵细胞成熟的影响,用RT-PCR和Western blotting方法检测在上述细胞因子作用下卵母细胞c-erbB2和c-myb表达及丝裂原蛋白激酶(MAPK)和成熟促进因子(MPF)含量的变化。结果:EGF(10μg/L)能促进卵母细胞的成熟,使c-erbB_2 mRNA、c-myb mRNA表达上升,伴随MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量升高;TNFα(10μg/L)和ET-1(10^(-7)mol/ L)均使卵母细胞中c-erb_2 mRNA和c-myb mRNA表达下降,伴随MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量下降,抑制卵母细胞的成熟。小剂量SNP(10^(-5)mol/L)对卵母细胞成熟无明显影响,但能反转二丁酰环磷酸腺苷(dbcAMP)对卵母细胞成熟的抑制作用,使c-erbB_2mRNA和c-myb mRNA表达升高,MAPK磷酸化水平及cyclinB1含量升高,但仍低于对照组。结论:细胞因子对卵母细胞成熟的影响与原癌基因c-erbB_2和c-myb有关,c-erbB_2和c-myb可能是介导细胞因子和MAPK、MPF间调控卵母细胞成熟的上游激活物。

关键词：卵母细胞成熟 c—erbB2和c—myb 细胞因子 MAPK和MPF

SIRT1功能及其对卵泡发育和卵母细胞成熟的调控作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物工程杂志 2020年第10期40卷 51-56页

作者：贾振伟内蒙古民族大学动物科技学院通辽028043

沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)是NAD+依赖的去乙酰化酶,通过使底物发生去乙酰化而参与细胞众多生理功能的调节,在糖脂代谢、衰老、细胞凋亡、氧化应激等过程中发挥了重要作用。另外,众多研究表明,SIRT1是调... 详细信息

沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)是NAD+依赖的去乙酰化酶,通过使底物发生去乙酰化而参与细胞众多生理功能的调节,在糖脂代谢、衰老、细胞凋亡、氧化应激等过程中发挥了重要作用。另外,众多研究表明,SIRT1是调控动物卵巢老化、卵泡发育和卵母细胞成熟的重要因子,SIRT1表达下降或活性改变将导致卵母细胞老化,降低动物的繁殖力。为了充分理解SIRT1功能,并通过调控SIRT1活性而延缓卵巢和卵母细胞老化,从而提高动物繁殖力,简述了SIRT1的激活及其参与细胞内调控的生物过程,并从能量代谢、抗氧化胁迫、染色质重塑的角度讨论了SIRT1的主要功能,重点阐述了SIRT1对动物卵泡发育和卵母细胞成熟的调控作用。

关键词： SIRT1 能量代谢卵泡发育卵母细胞成熟

6种金属元素对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

卫生研究 2000年第4期29卷 202-204页

作者：沈维干陈彦李朝军李霖季全兰贡昌春扬州大学医学院扬州225001 徐州医学院南京师范大学生命科学学院扬州教育学院

为研究镉、铅、镍、锰、铬、铝元素的生殖毒性 ,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法 ,观察它们对卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果显示除了铝外 ,其它各金属元素均可以明显降低小鼠超排卵数 ;6个剂量组均可以抑制卵母细胞的成熟 ... 详细信息

为研究镉、铅、镍、锰、铬、铝元素的生殖毒性 ,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法 ,观察它们对卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果显示除了铝外 ,其它各金属元素均可以明显降低小鼠超排卵数 ;6个剂量组均可以抑制卵母细胞的成熟 ,显著降低卵母细胞第一极体释放率、体外受精率和细胞存活率 ,对体内卵母细胞的生发泡破裂没有影响 ,但是对体外培养卵母细胞的生发泡破裂有明显的抑制作用 (铝组除外 )。结果提示 ,这些金属元素被人体过量吸收后 ,可以破坏育龄妇女卵母细胞正常成熟 ,使受精能力下降。

关键词：金属元素卵母细胞成熟体外受精

蛋白激酶C在卵母细胞成熟、受精和早期胚胎发育过程中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物医学工程学杂志 2008年第3期25卷 747-750页

作者：陈雅隽钟淑琦冯秀清雷蕾哈尔滨医科大学组胚教研室哈尔滨150081

小鼠胚胎发育过程中,蛋白激酶C(PKC)家族在调节卵的活化、完成减数分裂和开始有丝分裂、胚胎的致密,以及囊胚形成过程中都有作用,但其多个亚型的功能还知之甚少。研究表明,已知的十种PKC亚型以及PKC锚定蛋白——活化的磷脂酶C受体(RACK... 详细信息

小鼠胚胎发育过程中,蛋白激酶C(PKC)家族在调节卵的活化、完成减数分裂和开始有丝分裂、胚胎的致密,以及囊胚形成过程中都有作用,但其多个亚型的功能还知之甚少。研究表明,已知的十种PKC亚型以及PKC锚定蛋白——活化的磷脂酶C受体(RACK)在小鼠胚胎2-细胞期至囊胚期都有表达。本文归纳了近年来对PKC亚型各自不同的动态分布模式和表达水平的研究,这些研究表明它们在早期胚胎发育的各个时期都至关重要,尤其在胚胎4-细胞期的早期,个别亚型在核内的浓度是瞬间升高的,提示我们这些PKC亚型也许控制着早期小鼠胚胎核的组建以及机能调节。本文对核移植胚胎中PKC的可能作用也进行了分析。

关键词：蛋白激酶C 卵母细胞成熟受精胚胎发育小鼠

蟾蜍泛素羧基末端水解酶(tUCH)以不依赖其UCH活性的方式参与卵母细胞成熟调控

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实验生物学报 2003年第2期36卷 105-112页

作者：孙兆贵孔维华颜山顾正左嘉客上海市计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室

本实验室已报道中华大蟾蜍卵母细胞的p28蛋白具泛素羧基末端水解酶活性,称作tUCH,它和哺乳类中发现的UCH L1的氨基酸序列具高度同源性,二级结构同源性比较发现,二者可能具类似的功能。本文实验表明:未成熟卵母细胞和成熟卵母细胞的可溶... 详细信息

本实验室已报道中华大蟾蜍卵母细胞的p28蛋白具泛素羧基末端水解酶活性,称作tUCH,它和哺乳类中发现的UCH L1的氨基酸序列具高度同源性,二级结构同源性比较发现,二者可能具类似的功能。本文实验表明:未成熟卵母细胞和成熟卵母细胞的可溶性蛋白中均含有tUCH,约占提取物中蛋白质总量的2%。根据测定所得到的GST-tUCH和GST-UCH L1对底物Ub-AMC的酶动力学参数,说明卵母细胞中tUCH可能与小鼠UCH L1有类似的生物学功能;anti-tUCH单抗可以与原核细胞表达的tUCH和显性失活突变类型tUCH C(90)S特异结合,但不识别小鼠的UCH L1。Anti-tUCH单抗能够和tUCH结合但不能封闭它的UCH活性。当anti-tUCH单抗注入卵母细胞内,则孕酮诱导的生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)过程受到抑制,足见tUCH参与GVHD调节并不依赖其UCH活性。

关键词：泛素羧基末端水解酶卵母细胞成熟调控酶动力学参数中华大蟾蜍酶活性孕酮生发泡破裂

体外培养条件下促性腺激素对昆明白小鼠卵母细胞成熟及卵丘扩展的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

动物学报 2001年第2期47卷 203-208页

作者：陈勇夏国良苏友强王海滨赫晨中国农业大学生物学院北京100094

研究促卵泡激素 (FSH)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对昆明白小鼠卵母细胞成熟和卵丘扩展的影响 ,以及体外培养时卵丘扩展与卵母细胞成熟之间的关系。FSH可以明显促进次黄嘌呤 (HX)抑制条件下的卵丘 -卵母细胞复合体CEO卵母细胞成熟及卵... 详细信息

研究促卵泡激素 (FSH)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对昆明白小鼠卵母细胞成熟和卵丘扩展的影响 ,以及体外培养时卵丘扩展与卵母细胞成熟之间的关系。FSH可以明显促进次黄嘌呤 (HX)抑制条件下的卵丘 -卵母细胞复合体CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展 ,其最佳作用剂量为 10 0IU/L ,且FSH作用 30分钟即可以使CEO获得恢复减数分裂的信息。在HX存在的条件下 ,FSH处理后 10hr,CEO卵丘明显扩展 ,而生发泡破裂(GVBD)则在 16～ 2 0hr明显增加 ,所有卵丘未扩展的CEO中卵母细胞均未发生GVBD。低剂量hCG单独或与FSH共同存在 ,对CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展均无明显影响 ;高剂量hCG可以部分抑制FSH对卵母细胞成熟的促进作用。结果表明 :FSH明显促进CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展 ,而hCG却不具有此作用。体外培养条件下 (含次黄嘌呤 ) ,卵丘扩展是卵母细胞成熟的前提条件 ,但卵母细胞成熟并不需要卵丘完全扩展。

关键词：昆明白小鼠卵丘扩展卵母细胞成熟促性腺激素

颗粒细胞EGF类因子信号通路在调控卵母细胞成熟和发育中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

遗传 2019年第2期41卷 137-145页

作者：杨鑫宇贾振伟内蒙古民族大学动物科学技术学院通辽028043

动物体内卵泡排卵前促黄体素(luteinizing hormone, LH)诱导了卵丘颗粒细胞扩散,并启动卵母细胞恢复减数分裂。普遍认为,卵泡壁层颗粒细胞表达LH受体,卵母细胞及其周围卵丘细胞不表达LH受体,LH通过作用于卵泡壁层颗粒细胞产生信号分子,... 详细信息

动物体内卵泡排卵前促黄体素(luteinizing hormone, LH)诱导了卵丘颗粒细胞扩散,并启动卵母细胞恢复减数分裂。普遍认为,卵泡壁层颗粒细胞表达LH受体,卵母细胞及其周围卵丘细胞不表达LH受体,LH通过作用于卵泡壁层颗粒细胞产生信号分子,这些信号分子作用于卵丘颗粒细胞介导了LH生物作用。然而,一直以来,关于排卵前介导LH作用而诱导卵母细胞成熟的机制一直存在争议。目前研究认为,LH作用于卵泡壁层颗粒细胞后产生了EGF类因子,并与颗粒细胞的受体结合,促进了卵母细胞的成熟和发育。由于体外成熟的卵丘卵母细胞复合体来源于生长卵泡,其卵丘颗粒细胞EGF类因子信号系统不完善,目前的体外成熟培养体系难以模拟卵泡内的生理环境,导致卵母细胞体外发育能力较差,限制了这些卵母细胞的利用效率。本文综述了颗粒细胞EGF类因子信号系统、EGF类因子在调控卵母细胞成熟中的作用及对卵母细胞发育能力的影响,为优化卵母细胞体外成熟培养体系,完善卵丘颗粒细胞的EGF类因子的信号系统,进而提高卵母细胞体外成熟效率提供理论依据。

关键词：颗粒细胞 EGF类因子卵母细胞成熟卵母细胞发育能力