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单克隆丙种球蛋白病的骨髓活检——病理发现与临床资料的关系

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国际输血及血液学杂志 1991年第3期 187-188页

作者：谢波

本文对561例单克隆丙种球蛋白病骨髓活组织检查结果与临床资料的关系进行了分析。病例包括多发性骨髓瘤(MM)266例和未定意义的丙种球蛋白病(MGUS)295例。诊断标准:①血清或尿中有单克隆性球蛋白成分;②骨髓活检标本浆细胞百分率(BMPC％)... 详细信息

本文对561例单克隆丙种球蛋白病骨髓活组织检查结果与临床资料的关系进行了分析。病例包括多发性骨髓瘤(MM)266例和未定意义的丙种球蛋白病(MGUS)295例。诊断标准:①血清或尿中有单克隆性球蛋白成分;②骨髓活检标本浆细胞百分率(BMPC％)>20;③骨骼X线溶骨性破坏。在排除其它原因的浆细胞增高和单克隆丙种

关键词：骨髓浆细胞单克隆丙种球蛋白单纯蛋白骨髓活检临床资料

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单克隆抗脂A IgM治愈脑膜炎球菌败血症

国际儿科学杂志 1993年第2期 110-111页

作者：孙羽非

人类单克隆IgM抗脂A抗体(HA—IA)治疗严重革兰氏阴性菌败血症是有效的,但以往尚无婴儿应用的报道。病例男,8个月。因发热、呕吐和嗜睡而入院。入院时休克、发绀,腹部皮肤出现紫癜,无颈强或局灶性神经系统体征。实验室检查除白细胞减少外... 详细信息

人类单克隆IgM抗脂A抗体(HA—IA)治疗严重革兰氏阴性菌败血症是有效的,但以往尚无婴儿应用的报道。病例男,8个月。因发热、呕吐和嗜睡而入院。入院时休克、发绀,腹部皮肤出现紫癜,无颈强或局灶性神经系统体征。实验室检查除白细胞减少外,其它项目正常。脑脊液清晰。血涂片可见到革兰氏阴性双球菌,经鉴定为B组脑膜炎球菌,给予静脉输液及抗生素,开始有所改善,但入院16小时后病情突然恶化,意识障碍,格拉斯哥(Glasgow)昏迷6级,低血压及末梢循环差. 给予气管插管及辅助呼吸。在心搏停止复苏后,给予多巴胺及异丙基肾上腺素维持动脉血压。转

关键词：脑膜炎球菌败血症单克隆 A IgM

人BLyS基因克隆、表达和抗人BLyS单克隆抗体的制备

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中山医科大学学报 2002年第3期23卷 176-179,207,F003页

作者：张志方张春艳潘敬运林学颜中山大学中山医学院生理学教研室广东广州510089 中山大学中山医学院免疫学教研室广东广州510089

【目的】研制抗人BLyS单克隆抗体 ,以进一步探讨人BLyS与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLyS基因克隆到融合蛋白原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,构建重组质粒 pGEX 4T 1/hBLyS ,用此重组质粒转化大肠杆菌BL2 1,加IPTG诱导大肠杆菌表达G... 详细信息

【目的】研制抗人BLyS单克隆抗体 ,以进一步探讨人BLyS与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLyS基因克隆到融合蛋白原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,构建重组质粒 pGEX 4T 1/hBLyS ,用此重组质粒转化大肠杆菌BL2 1,加IPTG诱导大肠杆菌表达GST hBLyS融合蛋白 ,用此融合蛋白免疫BALB/c鼠 ,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,用ELISA法筛选阳性克隆 ,用免疫印迹和流式细胞仪进一步鉴定抗体的特异性。【结果】重组质粒双酶切结果和DNA序列测定以及表达蛋白SDS PAGE电泳结果表明 ,pGEX 4T 1/hBLyS重组质粒可以正确表达GST hBLyS融合蛋白 ;ELISA、免疫印迹和流式细胞仪检测结果表明 ,1c6杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体可以特异性结合人T淋巴细胞膜表面BLyS的膜外区 ,属于IgG2b亚类。【结论】所获得的单克隆抗体具有能够结合人T淋巴细胞上的BLyS特异性。

关键词： BLyS 抗体单克隆 T淋巴细胞

重金属铜离子单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立

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中国生物制品学杂志 2011年第6期24卷 720-723页

作者：郭常伟唐勇向军俭邹军辉杨红宇暨南大学抗体工程中心广州510632

目的制备重金属铜离子单克隆抗体,并建立间接竞争ELISA检测方法。方法利用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Cu(Ⅱ)与载体蛋白BSA和OVA偶联,制备免疫抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-BSA和检测抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-OVA,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合筛选稳定分泌... 详细信息

目的制备重金属铜离子单克隆抗体,并建立间接竞争ELISA检测方法。方法利用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Cu(Ⅱ)与载体蛋白BSA和OVA偶联,制备免疫抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-BSA和检测抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-OVA,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合筛选稳定分泌抗重金属Cu(Ⅱ)-DTPA单克隆抗体的杂交瘤细胞株;制备腹水,测定抗体效价,鉴定抗体亚型,并检测其特异性;建立间接竞争ELISA检测方法,并与ICP-AES检测结果进行比较。结果共筛选出3株稳定分泌抗重金属Cu(Ⅱ)-DTPA单克隆抗体的杂交瘤细胞,选择其中的4C2E7株制备腹水。腹水抗体效价为1×106,抗体亚类为IgG1,该抗体除与Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)和Hg(Ⅱ)存在17.5%、8.75%和1.46%的交叉反应外,与其他7种金属离子的交叉反应率均较低。该法最低检测限为2.0 ng/ml,与ICP-AES法检测结果的总符合率超过94%。结论已成功制备了重金属铜离子单克隆抗体,并建立了间接竞争ELISA检测方法。

关键词：金属重铜抗体单克隆酶联免疫吸附测定

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Ⅱ型胶原C端肽单克隆抗体制备及鉴定

中华检验医学杂志 2007年第12期30卷 1389-1394页

作者：赵丹慧张励力蓝钒王娜袁越张砚卓北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所默沙东制药公司100035 北京庄笛浩禾生物医学科技公司

目的制备Ⅱ型胶原C端肽中EKGPDP多肽片段（谷氨酸-赖氨酸-甘氨酸-脯氨酸-天冬氨酸-脯氨酸）的单克隆抗体（McAb），并进行抗体的纯化、鉴定及初步临床验证。方法采用戊二醛法制备EKGPDP-钥孔嘁血蓝素（keyholelimpethemocyanin，KLH）... 详细信息

目的制备Ⅱ型胶原C端肽中EKGPDP多肽片段（谷氨酸-赖氨酸-甘氨酸-脯氨酸-天冬氨酸-脯氨酸）的单克隆抗体（McAb），并进行抗体的纯化、鉴定及初步临床验证。方法采用戊二醛法制备EKGPDP-钥孔嘁血蓝素（keyholelimpethemocyanin，KLH）抗原载体复合物。腹腔及静脉攻击法免疫BALB／c小鼠8只。按常规方法将小鼠骨髓瘤细胞和免疫小鼠脾细胞融合。筛选阳性克隆株，以有限稀释法克隆3次。对杂交瘤细胞株的染色体、亲和力、类型和稳定性进行鉴定，取其中亲和力较高的6株制备腹腔积液，用盐析及蛋白G琼脂糖凝胶珠层析法纯化抗体。对McAb的纯度、特异性、交叉反应性及免疫活性进行鉴定。用免疫组化法对骨性关节炎膝关节软骨和椎间盘软骨样品进行分析。结果本研究获得13株能高效分泌特异性McAb的杂交瘤细胞株；经5个月传代35代和反复冻存复苏6次，培养上清稳定性良好。6株McAb腹腔积液效价分别为2．8×10^4（EKG7）、5．1×10^5（EKG14）、5．1×10^5（EKG16）、5．1×10^5（EKG18）、5．1×10^5（EKG25）、3．2×10^4（EKG28）。电泳结果证明，盐析法纯化腹腔积液得到的单克隆抗体回收量、活性、存放1周后活性分别为8．07mg、3．35（A450）、3．10（A450），蛋白G亲和层析法得到的单克隆抗体回收量、活性、存放1周后活性分别为0．32mg、1．83（A450）、0．66（A450），盐析法优于蛋白G亲和层析法（t=25．26，P〈0．01）。抗体的最佳应用浓度为（50～150）μg／L。临床初步鉴定发现，6株EKGPDP单克隆抗体在骨性关节炎及突出椎间盘软骨标本中出现了不同程度的阳性结果。结论本研究成功获得抗Ⅱ型胶原C端肽片段McAb，为Ⅱ型胶原降解产物的测定提供了研究工具。

关键词：胶原Ⅱ型抗体单克隆标本制备

肾意义的单克隆免疫球蛋白血症病例报道并文献复习

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中国全科医学 2021年第18期24卷 2359-2363页

作者：魏宇君李新申曼张佳佳詹晓凯汤然黄仲夏首都医科大学附属北京朝阳医院西院血液科北京市100043

肾意义的单克隆免疫球蛋白血症(MGRS)是由低级别淋巴浆细胞增殖性疾病分泌的单克隆免疫球蛋白(Ig)介导的肾损害,为疾病早期阶段,尚不足以诊断为多发性骨髓瘤(MM)或淋巴瘤。本文分析了2018年3月-2020年2月首都医科大学附属北京朝阳医院... 详细信息

肾意义的单克隆免疫球蛋白血症(MGRS)是由低级别淋巴浆细胞增殖性疾病分泌的单克隆免疫球蛋白(Ig)介导的肾损害,为疾病早期阶段,尚不足以诊断为多发性骨髓瘤(MM)或淋巴瘤。本文分析了2018年3月-2020年2月首都医科大学附属北京朝阳医院西院血液科收治的1例MM合并肾损害和3例不同类型的MGRS患者的临床特点及诊治过程,对其肾损害进行了鉴别诊断,并结合病例和文献进行了系统分析。建议对表达浆细胞克隆或B淋巴细胞克隆的患者分别采用硼替佐米或利妥昔单抗为基础的治疗方案,提示临床医生对存在单克隆Ig和无法解释的肾脏疾病患者,需早期进行肾活检以确诊MGRS,遵循国际肾病和单克隆免疫球蛋白病研究组(IKMG)提出的诊断共识和诊断流程,进一步明确MGRS的诊断分型,有利于早期进行克隆指导的靶向治疗,改善患者的肾功能和预后。

关键词：单克隆免疫球蛋白浆细胞增殖多发性骨髓瘤诊断治疗

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稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体GluA1亚基单克隆细胞株的构建

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解剖学报 2018年第5期49卷 591-597页

作者：李炯张吉凤赵波蔡振彬朱肖楠郭国庆暨南大学基础医学院解剖学系广州510632 暨南大学附属第一医院康复科广州510630 暨南大学附属第一医院骨科广州510630

目的构建稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体GluA1亚基的细胞株。方法PCR扩增GluA1目的基因,并将其装载至慢病毒表达载体PLV. 0-绿色荧光蛋白(GFP),采用4质粒系统转染HEK293T细胞包装慢病毒。嘌呤霉素抗性筛选细胞,... 详细信息

目的构建稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体GluA1亚基的细胞株。方法PCR扩增GluA1目的基因,并将其装载至慢病毒表达载体PLV. 0-绿色荧光蛋白(GFP),采用4质粒系统转染HEK293T细胞包装慢病毒。嘌呤霉素抗性筛选细胞,挑选单克隆细胞株用Real-time PCR、Western blotting、免疫荧光和全细胞膜片钳鉴定GluA1的表达与功能。结果菌落PCR鉴定扩增产物与GluA1分子量(2724 bp)一致,经测序插入慢病毒载体序列与GluA1序列一致;慢病毒感染并抗性筛选的HEK293T细胞经Real-time PCR、Western blotting和免疫荧光实验证明,GluA1在过表达GluA1组的HEK293T细胞正确表达,空载体组不表达。单克隆挑选的稳定细胞株免疫荧光染色显示,各细胞膜表面GluA1蛋白表达相对一致。单克隆细胞在电压钳模式下,细胞外液加10 mmol/L谷氨酸诱导,空载体组检测不到电信号,而过表达GluA1组可记录5~40 p A电信号。结论成功构建了稳定表达AMPA受体GluA1亚基的HEK293T细胞株。

关键词： GluA1亚基慢病毒单克隆细胞株实时定量聚合酶链反应免疫印迹法

单克隆抗体间接免疫荧光试验检测生殖器单纯疱疹病毒感染

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第四军医大学学报 2004年第8期25卷 728-729页

作者：刘军连徐志凯喻启桂王红英郑燕华吕世超张建中解放军第306医院皮肤科北京100101 第四军医大学基础部微生物学教研室陕西西安710033 第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710033

目的 :评价间接免疫荧光试验 (IFA)在生殖器疱疹(GH)诊断中的应用价值 .方法 :采用以单纯疱疹病毒 (HSV)型共同性单克隆抗体为夹心的IFA方法 ,检测了 1 2 0例临床诊断为GH患者皮疹中的HSV ,并与病毒培养法进行比较 .结果 :IFA检测HSV的... 详细信息

目的 :评价间接免疫荧光试验 (IFA)在生殖器疱疹(GH)诊断中的应用价值 .方法 :采用以单纯疱疹病毒 (HSV)型共同性单克隆抗体为夹心的IFA方法 ,检测了 1 2 0例临床诊断为GH患者皮疹中的HSV ,并与病毒培养法进行比较 .结果 :IFA检测HSV的总阳性率为 85 .8% ,高于病毒培养法的阳性率 (70 .8% ,χ2 =1 2 .0 4 ,P 0 .0 5 ) ;而检测糜烂和结痂性皮疹内的HSV时 ,IFA的阳性率分别为 92 .6 %和 6 9.4 % ,均分别高于病毒培养法 (75 .9% ,χ2 =5 .82 ,P <0 .0 5 ;4 7.2 % ,χ2 =1 4 .1 7,P <0 .0 1 ) .结论 :IFA法具有简单、快速、敏感性高的优点 ,适用于检测GH患者皮疹内HSV 。

关键词：单纯病毒属生殖器疱疹抗体单克隆荧光抗体技术间接检测

抗鸡传染性法氏囊病病毒中和性单克隆抗体的建立和应用

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南京农业大学学报 1993年第3期16卷 79-84页

作者：王成明蔡宝祥陈溥言南京农业大学动物医学系

用氟利昂去除法氏囊组织杂蛋白,并经甘油-酒石酸钾密度梯度离心进一步纯化,通过电镜观察、光密度测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE).证明得到的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)形态完整。将纯化的IBDV 免疫 BALB/C 鼠,取其脾细胞与 SP2/0骨髓... 详细信息

用氟利昂去除法氏囊组织杂蛋白,并经甘油-酒石酸钾密度梯度离心进一步纯化,通过电镜观察、光密度测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE).证明得到的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)形态完整。将纯化的IBDV 免疫 BALB/C 鼠,取其脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和病毒中和试验(VNT)检测分泌抗体,获得了6株稳定分泌抗 IBDV 中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为 NIB_1、NIB_2、NIB_3、NIB_4、NIB_5、NIB_6。还建立了检测 IBDV 的单克隆抗体双抗体 ELISA。

关键词：鸡病 IBD 单克隆抗体