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电针结合超短波疗法对大鼠全横断脊髓损伤后GAP-43和Caspase-3表达的影响

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中国康复医学杂志 2017年第12期32卷 1345-1350,1360页

作者：裴俐锋周达岸李灵玲王宏江李启超锦州医科大学附属第三医院锦州121000

目的:观察电针结合超短波疗法对脊髓全横断损伤大鼠损伤部位神经生长相关蛋白(GAP-43)、神经细胞凋亡相关蛋白(Caspase-3)的影响。探讨电针结合超短波疗法对脊髓全横断损伤大鼠运动功能恢复的机制。方法:复制并评价SCI大鼠模型。将75只... 详细信息

目的:观察电针结合超短波疗法对脊髓全横断损伤大鼠损伤部位神经生长相关蛋白(GAP-43)、神经细胞凋亡相关蛋白(Caspase-3)的影响。探讨电针结合超短波疗法对脊髓全横断损伤大鼠运动功能恢复的机制。方法:复制并评价SCI大鼠模型。将75只大鼠随机分为5组:假手术组、脊髓损伤组(SCI组)、SCI+电针治疗组(电针组)、SCI+超短波治疗组(超短波组)、SCI+电针治疗组+超短波治疗组(联合组),每组15只大鼠。检测各组1周、2周、3周、4周、5周5个时间点GAP-43、Caspase-3的表达,对各组大鼠进行BBB评分。结果:在不同时间点各治疗组的脊髓损伤大鼠BBB评分均有所提高(P3的表达显著增加,Caspase-3的表达显著减少(P3周、4周、5周较其他组GAP-43的表达显著增加,Caspase-3的表达显著减少(P3表达增多和抑制大鼠损伤区脊髓组织内Caspase-3表达增多。(2)联合治疗对大鼠运动功能的恢复更为有效。

关键词：电针超短波脊髓损伤生长相关蛋白43 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3

苦参碱增强顺铂抗人肝癌裸鼠移植瘤作用及其对survivin/caspase-3表达的影响

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中华肝脏病杂志 2015年第9期23卷 669-674页

作者：胡高裕黄赞松周喜汉胡静黄炳臣右江民族医学院消化疾病研究所右江民族医学院附属医院消化内科百色市533000 右江民族医学院消化疾病研究所右江民族医学院附属医院病理科

目的观察苦参碱（Ma）联用顺铂（DDP）对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响并探讨其作用的可能分子机制. 方法将人肝癌细胞株HepG2注入BALB/c裸鼠腋部皮下建立移植瘤模型,待成瘤后,随机分为4组：对照组、Ma组、DDP组及Ma和DDP联合组,均采用... 详细信息

目的观察苦参碱（Ma）联用顺铂（DDP）对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响并探讨其作用的可能分子机制. 方法将人肝癌细胞株HepG2注入BALB/c裸鼠腋部皮下建立移植瘤模型,待成瘤后,随机分为4组：对照组、Ma组、DDP组及Ma和DDP联合组,均采用腹腔注射给药.期间观察记录裸鼠的体质量和肿瘤体积,绘制体质量变化曲线与瘤体生长曲线图;用药14d后处死实验裸鼠称瘤重,计算抑瘤率;免疫组织化学法检测瘤组织中凋亡相关蛋白存活素与半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3 （caspase-3）的表达.多组间数据比较采用单因素方差（ANOVA）分析,两组间比较采用两独立样本t检验. 结果 Ma或DDP单用对裸鼠移植瘤抑瘤率分别为37.5％和75.0％,Ma和DDP联用可明显抑制瘤体生长（P＜0.05）,其抑瘤率达83.3％,明显高于Ma或DDP单用组.Ma＋DDP组裸鼠的平均体质量为21.50 g,比对照组（28.50 g）及Ma组（26.67 g）低,但较DDP组（17.33 g）高,且精神、活动、食量等全身状况也明显优于DDP组,瘤组织中细胞存活素阳性率为19.58％±4.52％,较对照组（83.26％±15.56％）、Ma组（62.50％±8.09％）及DDP组（38.67％±8.26％）降低（P＜0.05）.与之相对,NS组、Ma组及DDP组caspase-3的阳性细胞率分别为21.15％±3.68％、35.13％±10.57％、65.88％±4.81％,而Ma＋DDP组较之明显升高,为78.26％±6.09％,Ma＋DDP组与其他组比较,差异均具有统计学意义（P＜0.05）. 结论 Ma或DDP单用对裸鼠移植瘤具有抑制作用,Ma与DDP联用能增强DDP对裸鼠移植瘤的抑瘤作用和改善全身状况,降低DDP的不良反应.其可能的作用机制是影响存活素和caspase-3的表达,诱导肿瘤细胞凋亡.

关键词：癌,肝细胞苦参碱顺铂存活素半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3

消栓肠溶胶囊清除β-淀粉样蛋白对大脑中动脉栓塞大鼠丘脑神经元损伤的影响

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首都医科大学学报 2015年第3期36卷 420-425页

作者：张宁吴曦王铄王蕾张秋霞赵晖王雅丽首都医科大学附属北京天坛医院神经精神与临床心理科北京100050 国家神经系统疾病临床医学研究中心北京100050 北京脑重大疾病研究院脑卒中研究所北京100050 首都医科大学附属北京天坛医院神经内科中心北京100050 首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室北京100069

目的观察消栓肠溶胶囊对大脑中动脉栓塞大鼠丘脑神经元损伤以及凋亡蛋白半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinaspartate protease-3,Caspase-3)、淀粉样前体蛋白(amyloid precursorprotein,APP)、β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)表达的影响。方法线栓法建立大脑中动脉栓塞模型,雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠采用数字表法随机分成假手术组、模型组、消栓肠溶胶囊(420、140、47 mg·kg^(-1))组、阳性对照药银杏叶提取物(28 mg·kg^(-1))组,连续灌胃给药15 d,每天给药1次。术后15 d采用苏木素-伊红染色染色法观察神经元损伤;采用免疫荧光染色结合图像分析技术检测Caspase-3的表达;采用免疫组织化学染色结合图像分析技术检测APP、Aβ42的表达。结果与假手术组比较,中动脉栓塞模型组大鼠丘脑神经元计数明显减少,Caspase-3阳性细胞数明显增多,APP、Aβ42阳性表达增强,差异具有统计学意义(P3阳性细胞数减少,APP、Aβ42阳性表达减弱,差异具有统计学意义(P3阳性细胞数,减弱APP、Aβ42阳性表达,差异具有统计学意义(P3信号分子激活,抑制APP表达、减少Aβ形成,从而保护缺血丘脑区。

关键词：消栓肠溶胶囊脑缺血半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3 淀粉样前体蛋白 β-淀粉样蛋白

胃癌患者根治术后Caspase-3、EGFR检测分析

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胃癌患者根治术后Caspase-3、EGFR检测分析

作者：李发娟青岛大学

学位级别：硕士

目的:在诱导细胞凋亡中半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3是重要的效应蛋白。表皮生长因子受体是介导细胞增殖、迁移、粘附、血管生成和器官生成及转移的重要受体。本研究通过免疫组化法检测半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3及表皮生长因子受体在人... 详细信息

目的:在诱导细胞凋亡中半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3是重要的效应蛋白。表皮生长因子受体是介导细胞增殖、迁移、粘附、血管生成和器官生成及转移的重要受体。本研究通过免疫组化法检测半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3及表皮生长因子受体在人体胃癌组织中的表达情况;随访胃癌根治性术后患者的生存情况和预后情况;分析其相关性,为胃癌患者的研究及治疗提供方向。方法:（1）收集日照市人民医院2013年1月-2015年12月胃癌根治性切除手术的胃腺癌患者364例（其中男性278例,女性86例）,进行了回顾性分析。（2）采用免疫组化染色技术检测半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3和表皮生长因子受体在胃癌组织中的表达情况;采用统计学方法SPSS20.0分析半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3和表皮生长因子受体与胃癌根治术后患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置、肿瘤的总体外观、组织学分型、淋巴结转移和病理分期等的关系,并研究半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3和表皮生长因子受体蛋白表达与胃癌根治术后生存率与预后的相关性。结果:（1）胃癌多发于中老年男性,大于50岁的中老年男性占比为72.25%（263例）。在364例胃癌根治术后患者中,肿瘤大小主要为4-8cm 184（50.55%）例;浸润程度主要在肌层133（36.54%）例;多数发生淋巴转移259（71.15%）例;基质反应分型主要为硬化型200（54.95%）例;Lauren分型主要为肠型219（60.16%）例;Ming分型主要为浸润型249（68.41%）例;胃癌主要发生在胃窦（包括幽门）228（62.64%）例;TNM分期主要为III期198（54.40%）例;多数病理为中分化247（68.61%）例。（2）胃癌根治术后患者中半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3的阴性表达及阳性表达的5年总生存率分别为37.2%和51.3%（P=0.031）,有显著差异。胃癌根治术后患者中半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3的阴性表达及阳性表达的5年无病生存率分别为35.4%和49.7%（P=0.030）,有显著差异。（3）临床特征及病理分析显示,半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3的表达情况与年龄（P=0.023）、性别（P=0.038）、肿瘤大小（P=0.013）、淋巴转移情况（P=0.021）、基质反应分型（P=0.018）、Ming分型（P=0.032）具有显著相关性。与肿瘤位置、浸润程度、Lauren分型、TNM分期及分化程度无相关性。（4）胃癌根治术后患者中表皮生长因子受体的阴性表达及阳性表达的5年总生存率分别为36.20%和6.77%（P=0.001）,有显著差异。胃癌根治术后患者中表皮生长因子受体的阴性表达及阳性表达的5年无病生存率分别为37.38%和18.24%（P=0.005）,有显著差异。（5）临床特征及病理分析显示,表皮生长因子受体的表达情况与年龄（P=0.165）、性别（P=0.800）、TNM分期（P=0.053）无明确相关性。与肿瘤大小（P＜0.001）、淋巴转移情况（P=0.007）、基质反应分型（P=0.047）、Ming分型（P=0.010）、肿瘤位置（P=0.035）、浸润程度（P=0.001）、Lauren分型（P=0.017）及分化程度（P＜0.001）具有显著相关性。（6）多因素分析显示,胃癌患者的生存率及预后与年龄（P=0.048）、基质反应类型（P＜0.001）、TNM分型中浸润程度（P＜0.001）、TNM分型中淋巴转移程度（P=0.021）、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3阳性表达（P=0.001）、表皮生长因子受体阳性表达（P=0.005）（均P＜0.05,有显著差异）显著相关,与分化程度、肿瘤大小、Lauren分型无相关性。（7）半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3阴性表达胃癌根治术后的复发率为95/239（39.74%）,半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3阳性表达胃癌根治术后的复发率为29/125（23.20%）,表皮生长因子受体阴性表达胃癌根治术后的复发率为22/104（21.15%）,表皮生长因子受体阳性表达胃癌根治术后复发率为102/260（39.23%）。（P为0.002＜0.05,有统计学差异）。（8）通过Spearman等级相关性分析Caspase-3与EGFR在胃癌根治术后患者中的表达存在正相关性。（r=0.393,P＜0.001）。结论:（1）半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3在胃癌根治术后患者中的表达与胃癌根治术后良好的各种临床病理特征呈正相关,与胃癌根治术后良好的预后呈正相关。半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3可能是胃癌的抑癌因子。（2）表皮生长因子受体在胃癌根治术后患者中的表达与胃癌根治术后良好的各种临床病理特征呈负相关,与胃癌根治术后良好的预后呈负相关。表皮生长因子受体对胃癌的发生、复发、进展起到促进作用。

关键词：半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3 表皮生长因子受体胃癌根治术

凋亡抑制因子Livin在人非小细胞肺癌中的表达及与Caspase-3、Ki-67相关性的实验研究

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凋亡抑制因子Livin在人非小细胞肺癌中的表达及与Caspase-3、Ki-6...

作者：董凌云苏州大学

学位级别：硕士

目的研究凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein, IAP)Livin两种异构体Livinα、Livinβ在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)组织中的表达及临床意义,并分析Livin与磷酸化Caspase-3及增殖相关抗原Ki-67表达的相关性,初步探讨Livin的作用机制和在靶向治疗中应用的价值。方法(1)取NSCLC组织48例、癌旁肺组织29例和良性病变肺组织13例。肺癌患者中腺癌21例、鳞癌24例、大细胞肺癌3例;高分化6例、中分化29例、低分化10例、未分化3例;TNM临床分期为Ⅰ期11例、Ⅱ期18例、Ⅲ期14例和Ⅳ期5例;有淋巴结转移34例,无转移14例。(2)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上述组织中Livin mRNA并同时用组织微阵列(TMA)结合免疫组织化学(IHC)SP法检测Livin蛋白、磷酸化Caspase-3和增殖相关抗原Ki-67的表达水平,并结合临床病理资料进行分析。结果(1)Livin在NSCLC组织、癌旁和良性病变肺组织中的表达阳性率分别为66.67%、6.90%和0.00%,差异具有显著性(P0.05),Livin mRNA和Livin蛋白的表达水平基本一致。(3)在淋巴结转移组,Livin的表达阳性率高于无转移组(P0.05)。(4)肺癌组织中Caspase-3蛋白的阳性表达率明显低于癌旁组织和良性病变组织(P3的阳性表达与肺癌组织的分化程度有关(P3呈负相关(r=-0.344,P=0.017)(5)肺癌组织中的Ki-67指数(LI)显著高于癌旁组织和良性病变肺组织(P蛋白的表达水平基本一致。(2)Livin的异常表达可能对NSCLC细胞的浸润、转移起重要作用。(3)Livin可能通过抑制凋亡过程中活化的Caspase-3蛋白而发挥抑制细胞凋亡的作用,并且Livin可能具有调节细胞有丝分裂,促进细胞增殖的作用,使NSCLC细胞呈现无限制的生长。(4)Livin有可能成为NSCLC靶向治疗新的靶点。

关键词：凋亡抑制蛋白 Livin 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3 增殖相关抗原非小细胞肺癌靶向治疗

替米沙坦对糖尿病心肌病大鼠心肌超微结构的影响及其作用机制

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广西医学 2016年第6期38卷 766-769页

作者：卫银芝熊世熙干学东龚斐曹建雷湖北省黄石市中心医院老年病科黄石市435000 武汉大学中南医院心血管内科武汉市430071

目的探讨替米沙坦对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌超微结构的影响及其可能作用机制。方法 30只健康雄性Wistar大鼠,随机分成空白组10只和糖尿病组20只,糖尿病组用链脲佐菌素腹腔注射诱导建立DCM模型,建模成功后随机分成对照组及治疗组各10... 详细信息

目的探讨替米沙坦对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌超微结构的影响及其可能作用机制。方法 30只健康雄性Wistar大鼠,随机分成空白组10只和糖尿病组20只,糖尿病组用链脲佐菌素腹腔注射诱导建立DCM模型,建模成功后随机分成对照组及治疗组各10只。治疗组给予替米沙坦(20 mg/kg)灌胃治疗,空白组和对照组给予相同体积的生理盐水灌胃。给药16周后,光镜和电镜下观察各组大鼠心肌病理改变,采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的d UTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测心肌细胞B淋巴细胞瘤因子-2(Bcl-2)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况。结果光镜下对照组心肌细胞排列紊乱,心肌细胞核出现融合、消失、间质纤维化等改变,电镜下对照组心肌线粒体肿胀、嵴断裂甚至空泡化,肌丝成分减少、断裂。与对照组相比,治疗组光镜下心肌病理改变减轻,电镜下心肌超微结构病理改变也减轻。与空白组相比,对照组左室指数明显升高、凋亡细胞增多、Bcl-2表达减少,Caspase-3的表达及TGF-β1的A值增加(P3及TGF-β1的表达减少(P<0.05)。结论替米沙坦可以改善DCM大鼠心肌超微结构,延缓心室重构。

关键词：糖尿病心肌病替米沙坦心肌转化生长因子β1 淋巴细胞瘤-2 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3 大鼠细胞超微结构心室重构