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半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3在乙醇致小鼠睾丸损伤模型中的表达及意义

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中华实验外科杂志 2014年第6期31卷 1247-1249页

作者：李冠儒顾朝辉田凤艳贾占奎孟政雷孙科杨锦建郑州大学第一附属医院泌尿外科、河南省泌尿外科研究所、郑州市泌尿外科肿瘤分子生物学重点实验室 450052 郑州大学第一附属医院儿科 450052

目的探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3在乙醇致睾丸损伤中表达的变化，并探讨其意义。方法将24只雄性昆明小鼠随机分为对照组和实验组，每组12只，连续对实验组小鼠腹腔注射乙醇14d，建立睾丸损伤模型，处死所有小鼠并收... 详细信息

目的探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3在乙醇致睾丸损伤中表达的变化，并探讨其意义。方法将24只雄性昆明小鼠随机分为对照组和实验组，每组12只，连续对实验组小鼠腹腔注射乙醇14d，建立睾丸损伤模型，处死所有小鼠并收集睾丸标本，应用实时定量聚合酶链反应（Real—time PCR）和Western blot检测Caspase-3 mRNA和蛋白的表达变化。结果Real-time PCR结果显示实验组Caspase-3 mRNA表达（3．35±0．13）显著高于对照组（P〈0．05）；Western blot结果显示Caspase-3蛋白表达（44．51±8．94）显著高于对照组（140．66±6．25，P〈0．05）。结论Caspase-3作为重要的促凋亡基因参与乙醇致睾丸损伤的过程。

关键词：乙醇睾丸半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3抑制剂早期干预在脓毒症急性肾损伤中的作用

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中华实验外科杂志 2012年第9期29卷 1802-1805页

作者：刘丽霞李勇胡振杰苏洁霍焱檀碧波河北医科大学第四医院ICU 石家庄050011 河北医科大学第四医院外三科

目的观察半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）抑制剂Ac—DEVD—CHO在脓毒症诱导的急性肾损伤（AKI）中的作用。方法健康清洁级雄性C57BL／6小鼠72只，随机分为3组（每组24只）：假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孑L组（CLP组）... 详细信息

目的观察半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）抑制剂Ac—DEVD—CHO在脓毒症诱导的急性肾损伤（AKI）中的作用。方法健康清洁级雄性C57BL／6小鼠72只，随机分为3组（每组24只）：假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孑L组（CLP组）和Caspase-3抑制剂组（cI组）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症AKI小鼠模型。cI组术后30min立即给予4μg／gCaspase．3抑制剂Ac—DEVD—CHO皮下注射。于术后6、12、24h各组小鼠取血及肾组织，测定血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）浓度，观察肾组织光镜下病理学变化并检测肾组织细胞凋亡率及凋亡相关因子Caspase-3、B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、bax蛋白在肾组织中的表达。结果与Sham组比较，CLP组血清Cr术后6h、BUN术后6h和12h显著升高（P〈0．05）；肾组织损伤评分、肾组织凋亡率各时间点均显著增高（P〈0．05）；术后24h肾组织Caspase-3、bcl-2、bax表达上调（P〈0．05）。与CLP组比较，CI组术后6h血清Cr、BUN浓度显著下降[血清cr：（83．82±10．15）μmol／L比（125．05±33．48）μmol／L；BUN：（10．15±4．34）mmol／L比（14．02±5．51）mmol／L，P〈0．05]；肾组织损伤评分、肾组织细胞凋亡率各时间点均显著降低[肾组织损伤评分6h：（0．88±0．64）分比（2．17±0．75）分，12h：（0．63±0．74）分比（1．83±0．98）分，24h：（1．83±0．98）分比（1．33±0．52）分；肾组织细胞凋亡率6h：（13．28±0．91）％比（18．27±1．40）％，12h：（9．71±0．91）％比（15．85±3．51）％，24h：（8．45±．55）％比（12．48±2．14）％，P〈0．05]；肾组织Caspase-3及促凋亡因子bax表达下调，而抗凋亡因子bcl-2表达上调（P〈0．05）。结论Caspase-3抑制剂可抑制肾组织细胞凋亡，从而起到肾保护性作用。

关键词：脓毒症急性肾损伤半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 脱噬作用

半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3和β-连环蛋白、糖原合成激酶-3β在体外培养保存关节软骨组织中的表达及其相关性

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中华实验外科杂志 2016年第1期33卷 151-153页

作者：宋洪强李雪芳玄燕华亓建洪泰山医学院运动医学研究所山东泰安271000

目的体外培养保存关节软骨组织，探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）和Wnt／β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中关键蛋白表达规律及其相关性。方法选取20只健康成年新西兰大白兔，切取膝骨软骨柱100枚，随机分为5组（n... 详细信息

目的体外培养保存关节软骨组织，探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）和Wnt／β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中关键蛋白表达规律及其相关性。方法选取20只健康成年新西兰大白兔，切取膝骨软骨柱100枚，随机分为5组（n=20）。对照组：取材2h内的新鲜软骨；实验组：分为4组，将软骨柱浸入MEME培养液中保存，第14、21、28、35天时各取一组检测指标。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V—FITC）细胞凋亡检测法测定凋亡率，Western blot检测Caspase-3、糖原合酶激酶-38（GSK-3B）表达，免疫组织化学法检测β-catenin表达。结果随着保存时间延长，软骨细胞凋亡率逐渐增加，Caspase-3、GSK-3β表达逐渐上调，各组间差异均有统计学意义（P〈0．05），各组软骨细胞凋亡率为：对照组（6．04±1．09）％、14d（12．75±0．40）％、21d（21．90±0．57）％、28d（30．44±0．79）％、35d（40．70±0．43）％，Caspase-3表达量为：0．078±0．032、0．193±0．026、0．327±0．041、0．510±0．023、0．719±0．063，GSK-3β表达量为：0．162±0．025、0．242±0．019、0．493±0．012、0．717±0．020、0．905±0．011；免疫组织化学结果显示，细胞质与细胞核中B-catenin阳性染色逐渐增强，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；细胞凋亡率与Caspase-3、GSK-3β、β—Catenin表达呈高度正相关（r=0．695、0．702、0．682，P〈0．01）；Caspase-3与GSK-3β、β—catenin表达呈高度正相关（r=0．713、0．661，P〈0．01）。结论体外培养保存关节软骨组织过程中，软骨细胞凋亡伴有Wnt／β-catenin信号通路关键蛋白β—catenin和GSK-3β表达的显著上调。

关键词：半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 糖原合酶激酶-3β β-连环蛋白关节软骨

芹菜素抑制PC-3细胞增殖及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3的作用

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中华实验外科杂志 2013年第12期30卷 2503-2505页

作者：南存金王怡君杨森木海琦陈映鹤温州医科大学附属第二医院泌尿外科 325027

目的观察芹菜素（API）对雄激素非依赖前列腺癌PC-3细胞的调控作用并探讨其机制.方法以不同浓度（0、10、20、40 μmol/L）的API干预PC-3细胞48 h,通过细胞形态学观察以及细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测API对PC-3细胞的增殖抑制作用,... 详细信息

目的观察芹菜素（API）对雄激素非依赖前列腺癌PC-3细胞的调控作用并探讨其机制.方法以不同浓度（0、10、20、40 μmol/L）的API干预PC-3细胞48 h,通过细胞形态学观察以及细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测API对PC-3细胞的增殖抑制作用,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3 mRNA的表达.结果 CCK-8法检测显示0、10、20、40μmol/L API处理PC-3细胞48 h后的吸光度值分别为1.48 ±0.04、0.81 ±0.04、0.69±0.03、0.33±0.03,相较于对照组,10、20、40 μmol/L API浓度组对PC-3细胞均有显著的增殖抑制作用,抑制率分别为44.7％、53.5％、77.4％（P＜ 0.01）.0、10、20、40 μmol/L API浓度组Caspase-3 mRNA的表达分别为0.230±0.036、0.410±0.080、0.480 ±0.100、0.730±0.150,实验组与对照组之间的差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 API对PC-3细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性,其机制可能通过诱导PC-3细胞Caspase-3表达的增加,最终导致细胞凋亡.

关键词：芹菜素雄激素非依赖性前列腺癌凋亡半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

生存素和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3在骶骨脊索瘤中的表达及其与凋亡的相关性

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中华实验外科杂志 2013年第7期30卷 1416-1418页

作者：陈超杨惠林陈康武王根林陆俭王治栋胡海苏州大学附属第一医院骨科 215007

目的探讨骶骨脊索瘤组织中生存素（Survivin）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）的表达相关性及其临床意义。方法应用免疫组织化学（SP）法检测30例人骶骨脊索瘤组织和10例癌旁组织中Survivin和Caspase-3的表达。结果Survi... 详细信息

目的探讨骶骨脊索瘤组织中生存素（Survivin）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）的表达相关性及其临床意义。方法应用免疫组织化学（SP）法检测30例人骶骨脊索瘤组织和10例癌旁组织中Survivin和Caspase-3的表达。结果Survivin在骶骨脊索瘤中的阳性表达率为70．0％，在瘤旁组织中不表达，两者差异有统计学意义（P〈0．05），Survivin的表达与患者肿瘤有无局部浸润、是否复发相关（P〈0．05）；Caspase．3在骶骨脊索瘤中的阳性表达率为33．3％，显著低于瘤旁组织的90．0％（P〈0．05），Caspase-3的表达与患者肿瘤有无局部浸润、是否复发相关（P〈0．05）。Survivin与Caspase-3表达呈显著负相关（r=-0．463，P〈0．05）。结论Survivin在骶骨脊索瘤中高表达，可能通过抑制Caspase-3活性，从而阻止细胞凋亡，促进肿瘤细胞增殖与肿瘤的发生、发展。

关键词：骶骨脊索瘤生存素半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

苦参碱诱导人乳腺癌细胞凋亡逆转耐药及对酸化蛋白激酶B、Fas、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达的影响

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中华实验外科杂志 2012年第9期29卷 1856-1857页

作者：周炳刚沈义军杨涛余生林鲍山林余建军宁夏自治区人民医院乳腺外科银川750012

乳腺癌的综合治疗除手术、放疗、内分泌外，化疗仍是最有效的治疗方法，化疗可明屈提高患者的生存率，但肿瘤的多约耐药（MDR）是临床化疗最棘手的难题，寻找高效低毒能抗肿瘤并能逆转MDR新药是目前肿瘤防治研究的热点。

关键词：半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 逆转耐药乳腺癌蛋白激酶B 癌细胞凋亡苦参碱 Fas 酸化

右美托咪定对痫性发作大鼠海马神经细胞B细胞淋巴瘤／白血病-2、B细胞淋巴瘤／白血病-2相关X蛋白、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3蛋白表达的影响

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中华实验外科杂志 2015年第8期32卷 1929-1932页

作者：宋伏虎张海星李传翔陈力黄海城南方医科大学第三附属医院麻醉科广州510630

目的观察右美托咪定（DEX）对痫性发作大鼠海马神经细胞凋亡蛋白表达的影响。方法将36只sD大鼠随机分为3组（n=12）：对照组（Control组）、右美托咪定组（DEX组）及致痫组（EP组）。DEX组给予10μg／k剂量DEX灌胃，连续3d，至致痫当日... 详细信息

目的观察右美托咪定（DEX）对痫性发作大鼠海马神经细胞凋亡蛋白表达的影响。方法将36只sD大鼠随机分为3组（n=12）：对照组（Control组）、右美托咪定组（DEX组）及致痫组（EP组）。DEX组给予10μg／k剂量DEX灌胃，连续3d，至致痫当日；对照组、致痫组则分别给予等体积生理盐水灌胃。以氯化锂-匹罗卡品制作致痫模型，观察SD大鼠行为学变化；采用Westernblot检测B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关x蛋白（bax）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）表达水平。结果EP组大鼠均表现易激惹，DEX组反复自发性痫性发作（SRS）次数[（5．67±1．53）次]比EP组[（10．33±3．06）次]明显减少，且差异有统计学意义（P〈0．05）。bcl-2、bax、bcl-2／bax和Caspase-3表达水平结果，对照组分别为1．0557±0．0081、0．5712±0．0057、1，0870±0．0026、0；DEX组分另U为0．9654±0．0216、0．6920±0．0028、1．3951±0．0328、0．6765±0．9697；EP组分另0为0．8925±0．0063、0．7427±0．0010、1．2016±0．0082、0．8565±0．9626。EP组与对照组比较，大鼠海马、bax、活化的active—Caspase-3表达水平增加，bcl-2表达水平降低，差异有统计学意义（P〈0．05），bcl-2／bax比值升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；DEX组与EP组比较，海马bcl-2表达水平、bcl-2／bax比值升高，bax、active—Caspase-3表达水平降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DEX可能作用抑制大鼠海马神经细胞Casepase-3和box基因表达，减少SRS次数，对海马神经元产生保护作用。

关键词：右美托咪定癫痫 B细胞淋巴瘤/白血病-2 B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3

B细胞淋巴瘤/白血病-2、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3在人脑胶质瘤中的表达及意义

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中华实验外科杂志 2015年第7期32卷 1713-1715页

作者：刘力强方艳伟孙志敏李文华耿少梅赵宗茂焦保华河北医科大学第二医院神经外科石家庄050000

目的探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3在不同级别脑胶质瘤中的表达及其意义.方法采用免疫组织化学法检测60例脑胶质瘤和11例正常脑组织中bcl-2、Caspase-3蛋白表达.结果 bcl-2在正常脑... 详细信息

目的探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3在不同级别脑胶质瘤中的表达及其意义.方法采用免疫组织化学法检测60例脑胶质瘤和11例正常脑组织中bcl-2、Caspase-3蛋白表达.结果 bcl-2在正常脑组织、低、高级别胶质瘤组表达阳性率分别为9％、78％、100％,两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;Caspase-3表达阳性率分别为0％、100％、84％,两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;bcl-2、Caspase-3在肿瘤组表达呈负相关（r=-0.814,P＜0.05）.结论在胶质瘤中bcl-2表达增高,通过抑制Caspase-3表达,失去对细胞周期的调控,促进胶质瘤的增殖和恶性进展.

关键词：胶质瘤 B细胞淋巴瘤/白血病-2 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 免疫组织化学

二硫代氨基甲酸吡咯烷对人骨肉瘤细胞凋亡及黑色素瘤凋亡抑制蛋白和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达的影响

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中华实验外科杂志 2016年第11期33卷 2496-2498页

作者：王玉峰黄涛叶天宝成硕胡春吉柴利鹏中国医科大学附属第一医院骨科沈阳110001

目的观察二硫代氨基甲酸吡咯烷对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡及黑色素瘤凋亡抑制蛋白（Livin）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达的影响.方法采用体外培养人骨肉瘤MG-63细胞株,用50、100、200、400 μmol/L的吡咯烷二硫代... 详细信息

目的观察二硫代氨基甲酸吡咯烷对人骨肉瘤MG-63细胞凋亡及黑色素瘤凋亡抑制蛋白（Livin）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达的影响.方法采用体外培养人骨肉瘤MG-63细胞株,用50、100、200、400 μmol/L的吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）分别作用于骨肉瘤MG-63细胞,在24、48、72 h后,噻唑蓝（MTT）法测各组细胞存活率,用流式细胞仪检测细胞的凋亡率.作用于骨肉瘤MG-63细胞24h后,用Western blot方法检测各组细胞Livin和Caspase-3蛋白的表达水平.结果随PDTC浓度增加骨肉瘤MG-63细胞增殖活性呈下降趋势,作用时间越长细胞的增殖活性越低,而细胞的凋亡率呈上升趋势（P＜0.05）.作用24h后,随PDTC浓度增加各组细胞中Livin蛋白的表达为1.384±0.009、0.912±0.007、1.501±0.011、0.751 ±0.008,对照组为1.834±0.006,呈下降趋势,而Caspase-3蛋白表达呈上升趋势（P＜0.05）.结论 PDTC可诱导入骨肉瘤MG-63细胞凋亡,其机制可能与PDTC抑制核因子（NF）-κB传导通路,下调Livin表达继而上调Caspase-3表达有关.

关键词：二硫代氨基甲酸吡咯烷骨肉瘤黑色素瘤凋亡抑制蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 Cysteinyl aspartate-specific protease-3