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普洱茶的HPLC化学指纹图谱分类研究

浙江林业科技 2009年第1期29卷 25-30页

作者：王丽鸳成浩周健叶阳贺巍国家茶树改良中心中国农业科学院茶叶研究所浙江杭州310008 南京农业大学江苏南京210095

利用针对茶多酚类、咖啡碱及黄酮(苷)类物质含量变化的两个HPLC色谱数据的多元信息融合,制作了滇青(晒青毛茶)、青饼和普洱茶(熟饼)3组茶样的化学指纹图谱,并用欧氏距离、相似性分析、聚类分析和主成分分析等方法进行判别分析,结果发现... 详细信息

利用针对茶多酚类、咖啡碱及黄酮(苷)类物质含量变化的两个HPLC色谱数据的多元信息融合,制作了滇青(晒青毛茶)、青饼和普洱茶(熟饼)3组茶样的化学指纹图谱,并用欧氏距离、相似性分析、聚类分析和主成分分析等方法进行判别分析,结果发现,无论是生化组成、化学指纹图谱模式谱、聚类分析,还是主成分分析结果,青饼都与普洱茶(熟饼)有明显差异,而与晒青毛茶相似,说明1～2 a陈以内的青饼在化学成分上与普洱茶(熟饼)有着本质上的差异,而与晒青毛茶有很高的相似度,本质上还是属于绿茶。

关键词：普洱茶滇青青饼熟饼化学指纹图谱

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基于化学指纹图谱的扁形茶产地判别分析研究

茶叶科学 2008年第2期28卷 83-88页

作者：成浩王丽鸳周健叶阳刘栩陆文渊中国农业科学院茶叶研究所茶树资源与改良研究中心国家茶树改良中心浙江杭州310008

采用杭州西湖区、绍兴新昌县和丽水市辖四县区生产的三类扁形茶样本,按单一品种和混合品种两种策略,进行了基于多元化学指纹图谱和逐步判别技术的茶样产地鉴别分析方法研究。试验结果表明,无论是采用单一品种样本,还是采用混合品种样本... 详细信息

采用杭州西湖区、绍兴新昌县和丽水市辖四县区生产的三类扁形茶样本,按单一品种和混合品种两种策略,进行了基于多元化学指纹图谱和逐步判别技术的茶样产地鉴别分析方法研究。试验结果表明,无论是采用单一品种样本,还是采用混合品种样本进行判别分析,都能得到有效的判别函数,使三个不同产地的扁形茶得到有效区分。除迎霜品种有一个外部验证样本判别错误外,其它单一品种的判别分析的回判成功率和验证成功率都是100%。9个品种的混合品种判别试验中,训练集143个样本的回判正确率为93.7%,外部验证样本的判别正确率91.7%,表明采用化学指纹图谱方法结合判别技术对茶产品的产地属性进行鉴别或验证分析是可行的。

关键词：绿茶化学指纹图谱判别分析产地

不同产地中药赤芍在振荡体系中的化学指纹图谱研究

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分析测试学报 2011年第8期30卷 937-940页

作者：程旺兴管艺陈佳方成武安徽中医学院药学院安徽省现代中药重点实验室安徽合肥230031

采用H2SO4-CH2(COOH)2-Ce2(SO4)3-KBrO3化学振荡体系,研究了中药赤芍的化学指纹图谱,并对温度、赤芍用量进行了考察,确定体系的最佳实验条件为12 mL 3.0 mol/L H2SO4溶液、6 mL 0.4 mol/LCH2(COOH)2溶液、3 mL 0.005 mol/L Ce2(SO4)3和3 mL 0.2 mol/L KBrO3溶液,温度35℃、加入0.4 g的中药材粉末。通过对不同产地中药材赤芍(安徽亳州、山东菏泽、内蒙古赤峰、海拉尔)化学指纹图谱的研究,发现不同产地的中药材赤芍不仅具有明显不同的化学指纹图谱形状,而且主要参数也有很大区别。其中亳州赤芍的最高诱导时间较小(133.76 s),但振荡寿命最长(554.89 s);而海拉尔赤芍的诱导时间最长(214.17 s),但振荡寿命最短(237.11 s)。该化学指纹图谱可方便地用于不同产地中药材赤芍的区别和鉴定。

关键词：化学指纹图谱化学振荡体系赤芍鉴别

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豫道地金银花化学指纹图谱研究

河南师范大学学报（自然科学版） 2013年第1期41卷 130-133页

作者：李建军贾国伦李军芳范晗梁建强刘保彬杨丽河南师范大学生命科学学院河南省高校道地中药材保育及利用工程技术研究中心河南新乡453007 新乡佐今明制药股份有限公司河南新乡453007 封丘县贾庄金银花种植专业合作社新乡封丘453311 封丘县农村科技研究开发推广中心新乡封丘453341

目的:建立河南道地金银花药材HPLC标准指纹图谱.方法:高效液相色谱法,色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶,检测波长265nm,进样量10μL,流动相A为乙腈和流动相B为1%的醋酸水溶液进行梯度洗脱,流速为0.8mL/min.结果:该方法能够很好地分... 详细信息

目的:建立河南道地金银花药材HPLC标准指纹图谱.方法:高效液相色谱法,色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶,检测波长265nm,进样量10μL,流动相A为乙腈和流动相B为1%的醋酸水溶液进行梯度洗脱,流速为0.8mL/min.结果:该方法能够很好地分离河南道地金银花的各类成分;不同产地金银花药材指纹图谱相似度较好,建立了含有15个特征指纹峰的豫道地金银花标准指纹图谱;同时标定了绿原酸和木犀草苷的位置;HPLC标准指纹图谱具有良好的重现性和特征性.结论:本实验建立的金银花药材HPLC指纹图谱可用于对河南道地金银花药材的综合评价和质量控制.

关键词：金银花化学指纹图谱 HPLC

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食醋非线性化学指纹图谱掺伪鉴别原理的研究

食品与机械 2012年第1期28卷 86-92页

作者：杨代明方宣启冯敏唐小兰毛鹏飞张泰铭湖南省食品质量监督检测所湖南长沙410002 湖南省湘潭市仪器仪表成套制造有限公司湖南湘潭411100 中南大学化学化工学院湖南长沙410083

针对食醋掺伪问题对食醋非线性化学指纹图谱进行研究。通过对"溴酸钠-硫酸锰-硫酸-丙酮"体系的振荡机理的分析及食醋成分分析探讨食醋非线性化学指纹图谱的原理。通过正交试验考察建立食醋非线性化学指纹图谱的条件,并考察总酸、食盐、... 详细信息

针对食醋掺伪问题对食醋非线性化学指纹图谱进行研究。通过对"溴酸钠-硫酸锰-硫酸-丙酮"体系的振荡机理的分析及食醋成分分析探讨食醋非线性化学指纹图谱的原理。通过正交试验考察建立食醋非线性化学指纹图谱的条件,并考察总酸、食盐、防腐剂对食醋非线性化学的影响。结果表明,食盐、山梨酸对食醋非线性化学指纹图谱影响较大,应在试验前去除食醋样品中的盐分;在检测过程中,应严格控制振荡体系中物种及其浓度、电极类型、温度、搅拌速率、食醋用量。食醋非线性化学指纹图谱是食醋众多成分的整体表征,而不是一种或几种物质的体现,能表达食醋的真正质量,为食醋的掺伪鉴别和质量评价提供一种新的方法。

关键词：非线性化学指纹图谱掺伪化学振荡食醋

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三七化学指纹图谱及产地溯源研究

三七化学指纹图谱及产地溯源研究

作者：刘春路云南中医药大学

学位级别：硕士

目的:三七作为药食同源的中药材品种而深受消费者喜爱,其产业优势也作为云南省发展乡村振兴的重要抓手。目前,随着市场需求的不断增加,其资源短缺问题日益严峻。然而,栽培过程中连作障碍等因素导致播种面积有限。另一方面,三七商品供不... 详细信息

目的:三七作为药食同源的中药材品种而深受消费者喜爱,其产业优势也作为云南省发展乡村振兴的重要抓手。目前,随着市场需求的不断增加,其资源短缺问题日益严峻。然而,栽培过程中连作障碍等因素导致播种面积有限。另一方面,三七商品供不应求,常出现以次充好、以假乱真现象。因此,三七品质差异已成为目前值得关注的关键问题。其中,采集地点与三七的有效成分含量和市场价格有关,是三七产地溯源研究的重点。因此,拟采用具有快速、无污染、可揭示不同样品分子结构和化学性质的红外光谱（Infrared spectroscopy,IR）以及二维相关光谱图像结合传统的化学计量学和深度学习分析比较不同方法对三七产地溯源的结果,并结合高效液相色谱（High performance liquid chromatography,HPLC）对三七进行含量预测。以期建立高效、稳健、准确的三七产地溯源方法并证明可行性,为三七的质量评价、合理开发和利用提供科学依据。方法:1.通过查阅文献对目前中草药质量检测中常用的指纹图谱和化学计量学方法进行总结分析;2.采集光谱和高效液相色谱信息,基于质量标志物理论,利用网络药理学（有效性研究）、HPLC（可测试性研究）、衰减全反射傅里叶变换红外光谱（Attenuated total reflectance flourier transform infrared spectroscopy,ATR-FTIR）和近红外光谱（Near-infrared spectroscopy,NIR）(鉴别和预测研究)结合化学计量学方法对云南省4个产地182批三七主根样品进行分析;3.采集云南省5个产地429批三七样品的ATR-FTIR和NIR光谱信息,将预处理后的光谱数据转化为不同类型的二维相关光谱图像。通过与传统光谱结合化学计量学方法（Partial least squares discriminant analysis,PLS-DA、Extreme learning machine,ELM、Random forest,RF）对比,分析二维相关光谱图像结合残差神经网络（Residual convolutional neural network,ResNet）在三七产地鉴别研究中的优势和特点;4.采集4个不同区级和镇级229批三七样品的ATR-FTIR、NIR和HPLC数据。采用HPLC结合主成分分析（Principal component analysis,PCA）模型分析不同区级和镇级三七样品的差异性。构建相关性分析和偏最小二乘回归（Partial least squares regression,PLSR）模型,探讨不同产地三七主要成分含量累积与气候因子的相关性。此外,将原始光谱数据转换为二维相关光谱图像并结合ResNet验证该模型在三七产地鉴别中的可行性和优越性。结果:1.近年来,化学指纹图谱与化学计量学方法相结合已成为中草药质量控制的首选方法。但在建立有效模型时,需注意其性能可能会受到预处理、特征选择、特征提取以及建模方法的影响。对于不同应用范围和目的,质量控制过程应包括适当的分析技术、数据预处理工作流程和化学计量学方法。在基于整个框架标准化和验证的基础上,为进一步扩大中草药质量认证研究提供参考;2.三七皂苷R、人参皂苷Rg、人参皂苷Rb和人参皂苷Rd 4种皂苷类成分可作为三七质量标志物的潜在来源范围,通过24个核心靶点调节通路达到治疗疾病的目的。不同产地三七样品组间成分含量存在较大差异。基于二阶导数（Second derivative,SD）预处理后ATR-FTIR和NIR的低级数据融合策略是三七产地鉴别和含量预测的有效方法;3.二维相关光谱图像结合ResNet模型比传统模式识别模型（PLS-DA、ELM、RF）更适合三七产地鉴别研究。该模型不受样本量差异的影响,不需要复杂的数据处理过程。同步二维相关光谱图像结果明显优于异步和综合二维相关光谱图像;4.较低的年平均气温和年温差有利于三七中4种主要皂苷类成分含量累积。年降水量大、湿度大,适合三七皂苷R、人参皂苷Rg和人参皂苷Rb的含量累积,而人参皂苷Rd则相反。基于同步二维相关光谱图像的ResNet模型性能和鲁棒性高,且无过拟合现象,不受波段和采样点间距的影响,证明了深度学习模型在三七产地鉴别研究中的可行性。结论:化学指纹图谱,如色谱、光谱和质谱等可以提供有关植物次生代谢产物的全面信息。与传统模式识别方法相比,二维相关光谱图像结合ResNet模型在三七产地鉴别研究中具有绝对优势。同步二维相关光谱图像结果明显优于异步和综合二维相关光谱图像,更适用于复杂混合体系中草药的鉴定和分析。该模型不受样本量、波段和采样点间距的影响,不需要复杂的数据处理过程（如特征提取和数据融合等）,更专注于简单的数字图像处理问题,比

关键词：三七化学指纹图谱化学计量学产地鉴别

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云茯苓化学指纹图谱研究

云茯苓化学指纹图谱研究

作者：李妍云南中医学院

学位级别：硕士

中药质量评价是保证其安全性和有效性的重要前提,药用资源质量安全可控有利于药材品质从源头上得到保障,建立符合中医药特点的质量评价技术已成为推进中药现代化和国际化发展的首要任务之一。药用资源特有属性依赖于所含化学成分的复杂... 详细信息

中药质量评价是保证其安全性和有效性的重要前提,药用资源质量安全可控有利于药材品质从源头上得到保障,建立符合中医药特点的质量评价技术已成为推进中药现代化和国际化发展的首要任务之一。药用资源特有属性依赖于所含化学成分的复杂性及生物活性物质种类的多样性,易受环境因素影响,导致品质具有差异。化学指纹图谱技术基于对物质群整体作用的认识,能较充分反映复杂混合体系特征性成分种类及含量的整体状况,在药用资源产地鉴别、质量评价等方面应用较为广泛。本论文以云南道地药材茯苓(Wolfiporia extensa (Peck) Ginns)为研究对象,采用紫外光谱法、傅里叶变换红外光谱技术、超高效液相色谱法建立茯苓化学指纹图谱,辅以化学计量学方法解析不同产地、部位、野生及栽培茯苓样品图谱化学信息,探讨样品间的差异与联系,系统评价茯苓质量,为茯苓资源的深入研究和合理开发利用提供基础数据,同时为茯苓资源质量评价体系的构建提供参考。采用氯仿提取来源于云南楚雄、红河以及普洱地区的野生茯苓样品,构建茯苓低极性成分紫外特征指纹图谱,结合偏最小二乘判别分析和聚类分析对样品进行研究,结果表明,产地对茯苓中低极性成分的累积具有一定影响,依据低极性成分紫外光谱信息能够对产地进行准确鉴别。利用傅里叶变换红外光谱技术构建不同产地野生茯苓指纹图谱,获取整体化学成分信息,结合主成分分析和聚类分析探讨样品间的差异,结果表明,产地对茯苓化学成分具有一定影响,不同产地的样品具有明显差异,所有样品能够按照产地来源进行区分;采样地点的海拔可能与野生茯苓化学成分的累积相关,野生茯苓化学成分因海拔不同而具有差异。采用紫外指纹图谱技术结合超高效液相色谱法对采自云南5个地区野生茯苓样品进行质量评价研究,测定指纹图谱的同时,对茯苓酸进行量化分析,拟合指纹图谱数据和茯苓酸含量数据,辅以偏最小二乘判别分析和聚类分析从整体角度探讨不同部位野生茯苓质量与产地的关系,结果表明,不同产地、部位样品之间化学组成和茯苓酸含量具有差异,茯苓不同部位化学成分和含量的差异大于采自不同产地相同部位样品的差异;产地来源对茯苓皮中化学成分的影响大于对白茯苓的影响：同一产地的样品,其质量亦存在差异。如要获得质量相对稳定一致的茯苓原药材,采样地点应当相对统一。基于仪器联用技术对茯苓品质进行分析,包含较丰富的样品信息,可作为一种系统评价茯苓资源的方法。结合红外光谱与超高效液相色谱技术的优势特征,对云南不同产地栽培茯苓进行质量评价,同时辅以偏最小二乘判别分析和聚类分析,对拟合数据进行解析。结果表明,栽培茯苓皮中化学成分可能与其生长环境的土壤有关,产地土壤颜色相同的样品,质量差异较小;在选择茯苓栽培产地时,可以考虑土壤性质对其的影响。此外,产地土壤颜色不同的白茯苓也会聚为一类,以此推测,土壤性质对茯苓皮和白茯苓成分的影响不一致。对不同药用部位分析发现,对于栽培茯苓而言,白茯苓的质量比茯苓皮有更好的一致性。采用傅里叶变换红外光谱结合超高效液相色谱法对云南野生、栽培茯苓进行质量评价,通过两种仪器的优势特征,辅以偏最小二乘判别分析初步研究野生与栽培茯苓品质的差异与联系,结果表明,野生与栽培茯苓样品质量差异较大,无论是茯苓皮还是白茯苓,均能较好区分;不同部位野生茯苓的差异较明显,栽培样品差异相对较小,推测可能由样品生长环境以及人为因素造成。

关键词：茯苓化学指纹图谱化学计量学资源评价

忍冬种质资源评价与道地金银花化学指纹图谱建立研究

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忍冬种质资源评价与道地金银花化学指纹图谱建立研究

作者：李军芳河南师范大学

学位级别：硕士

忍冬（Lonicera japonica Thunb.）是忍冬科忍冬属多年生半常绿木质藤本植物，金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，广泛应用于医药产业、饮料食品产业、保健品产业及日用化工产业。本研究从外部形态、内部结构和指标成分的... 详细信息

忍冬（Lonicera japonica Thunb.）是忍冬科忍冬属多年生半常绿木质藤本植物，金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，广泛应用于医药产业、饮料食品产业、保健品产业及日用化工产业。本研究从外部形态、内部结构和指标成分的含量上对13个不同种质的金银花进行了资源评价，探讨了鉴别金银花质量的方法;通过比较金银花不同部位的指标成分含量，探讨了金银花不同部位的药用价值，为金银花各个部位的开发利用提供参考;通过建立豫金银花的HPLC化学指纹图谱，找出豫金银花的共有特征峰，探讨了运用中药化学指纹图谱鉴别中药材道地金银花质量的方法。1、不同种质的忍冬根据叶的长度、宽度及长宽比可分成大型叶和小型叶，根据表皮非腺毛密度可分成密毛类和寡毛类;不同种质的忍冬除了叶片的大小、非腺毛的密度不同外，其非腺毛的长度、气孔器的大小和密度也存在差异。因此，忍冬叶片的长度、宽度及长宽比，非腺毛的长度、密度和气孔器的大小及密度等，可以作为忍冬划分种质的依据。2、利用扫描电镜法比较了13个种质忍冬花粉粒的大小、萌发孔及表面刺突的长短和疏密等，发现不同种质忍冬的花粉粒的形状相似，极面观均为三角形，赤道面观为近圆形，且萌发孔均为3，但是花粉粒的大小、萌发孔的大小、表面刺突的长度、密度等存在差异。可以作为忍冬划分种质的依据。3、测定并分析了不同种质金银花花蕾的形状、长短、粗细、千针重、折干率及指标成分的含量，结果表明通过外部形态、内部结构及化学指标成分含量的差异分析可以更好的划分和评价金银花的种质，为新品种选育和质量控制奠定理论基础。4、采用高效液相色谱法测定了豫金银花花蕾、叶、枝及茎尖等4个部位的绿原酸和木犀草苷的含量，发现豫金银花不同部位的绿原酸和木犀草苷含量存在差异，其中绿原酸含量花蕾>叶>芽尖>枝，木犀草苷含量芽尖>叶>花蕾>枝，为金银花综合开发提供理论依据。5、采用高效液相色谱法，建立了豫金银花的道地化学指纹图谱，确定了15个共有峰，为中药材金银花与山银花的区别及道地金银花品质的鉴别提供了方法。

关键词：忍冬金银花扫描电镜叶表皮花粉 HPLC 化学指纹图谱

基于化学指纹图谱与生物评价联用的红花注射液质量一致性研究

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基于化学指纹图谱与生物评价联用的红花注射液质量一致性研究

作者：冯五文成都中医药大学

学位级别：硕士

中药注射剂在临床上应用广泛,然而其引发的不良反应阻碍了中药注射剂的使用以及相关产业的发展。为了减少中药注射剂引发的不良反应,建立适合的质量控制方法是有效手段之一。然而,当前以化学检测为主的质量控制手段存在着不足,一是难以... 详细信息

中药注射剂在临床上应用广泛,然而其引发的不良反应阻碍了中药注射剂的使用以及相关产业的发展。为了减少中药注射剂引发的不良反应,建立适合的质量控制方法是有效手段之一。然而,当前以化学检测为主的质量控制手段存在着不足,一是难以从化学层面完全厘清中药注射剂的化学信息,二是难以从生物效应角度关联临床上的有效性与安全性。因此,亟需建立有效的中药注射剂质量控制模式与方法,以尽量减少中药注射剂引发的不良反应。从任何药品均具有化学与生物学两方面基本属性的角度出发,结合课题组在中药及中药注射剂质量控制领域的相关研究,本论文从药物的化学与生物学效应一致性入手,选择临床常用且不良反应发生较多的红花注射液为模式药,在现行的中药注射剂质量评控方法的基础上,引入关联生物活性的评控方法,从化学信息、生物学信息层面综合评价中药注射剂质量,并在此基础上对接整合中药注射剂的临床效应,建立关联临床安全性与有效性的中药注射剂质量综合评控方法,以保障中药注射剂的临床用药安全,最大限度地减少不良反应的发生。主要研究内容与结果如下：1建立红花注射液的化学指纹图谱评价方法,从化学信息层面评价红花注射液的质量一致性.在全面调查红花注射液相关信息的基础上,收集并制备不同红花注射液样品52批,其中合格样品10批,不良反应样品12批,高温处理样品10批,光照处理样品10批,暴露处理样品10批。随后,采用HPLC技术建立了含有25个特征峰的红花注射液化学指纹图谱,较为综合全面地反映了红花注射液的化学信息,并在此基础上开展了数据分析,包括相似度分析、PCA分析、HCA分析等。结果显示,暴露处理样品、光照处理样品、以及部分不良反应样品能被有效区分。其中,被鉴定出的红花注射液不良反应样品具有明显的部分成分含量较高的特点,提示某些成分含量过高可能是红花注射液不良反应的原因之一。2建立红花注射液的细胞指纹图谱评价方法,从细胞生物学效应层面评价红花注射液的质量一致性.针对红花注射液不良反应以过敏或类过敏反应为主,结合课题组对细胞指纹图谱技术的相关研究,采用RBL-2H3细胞作为模式生物,使用RTCA xCELLigence技术平台,建立基于细胞指纹图谱法的红花注射液质量评价方法,从细胞生物效应角度保障红花注射液的质量一致性。在提取参数ΔT、AUC、I1、I2、I3的基础上,对检测结果进行PCA与HCA分析。结果显示,高温处理样品、光照处理样品、暴露处理样品能被有效区分,而不良反应样品仅仅有部分能被区分。提示红花注射液储运过程中应注意避开高温、光照等条件。同时,细胞指纹图谱技术拥有较强的样品鉴别能力,提示该技术可作为红花注射液质量控制手段的有益补充。3初步建立基于化学指纹图谱-生物评价联用的红花注射液综合质量一致性评价体系.由于上述2种方法未能有效对非正常红花注射液进行有效区分,我们考虑对上述检测结果进行更深入的数据挖掘。综合前文的检测结果,采用两种不同结果整合方式-平行整合法与顺序排除法-对2种检测结果进行整合。其中,在化学指纹图谱检测法、细胞指纹图谱检测法基础上采用顺序排除法能对大多数非正常样品进行有效区分,表明全面整合化学与生物学信息能明显提高对红花注射液的质量控制能力。最后,在整合结果的基础上,建立综合的、全面的红花注射液质量评控价模式。综上所述,本论文以红花注射液为代表,在关联课题组以往工作的基础上,采用不同评价方法从化学、生物学层面全面表征红花注射液质量的一致性问题,通过比较、整合不同的评控技术,构建了整合化学、生物学效应的能够在一定程度上关联药物临床药效与安全性的红花注射液质量评控体系。该研究思路也为其它中药注射剂质量控制模式的建立提供了参考。

关键词：红花注射液质量一致性中药注射剂化学指纹图谱细胞指纹图谱不良反应