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重型乙型肝炎患者肝组织和血清中乙型肝炎病毒前c区准种的比较

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中华肝脏病杂志 2005年第8期13卷 612-613页

作者：赵学兰王宇明兰林黄燕萍第三军医大学感染病研究所重庆400038

乙型肝炎病毒存在准种现象.为研究重型乙型肝炎患者血清和肝组织中乙型肝炎病毒(HBV)DNA前c区准种组成特点,本研究从3例重型乙型肝炎患者的血清和肝组织中提取HBV DNA,经巢式聚合酶链反应(PcR)扩增出HBV前c区,产物克隆后经单链构象多态... 详细信息

乙型肝炎病毒存在准种现象.为研究重型乙型肝炎患者血清和肝组织中乙型肝炎病毒(HBV)DNA前c区准种组成特点,本研究从3例重型乙型肝炎患者的血清和肝组织中提取HBV DNA,经巢式聚合酶链反应(PcR)扩增出HBV前c区,产物克隆后经单链构象多态性/异源双链分析(SScP/HDA)筛选不同的克隆并测序,比较血清和肝组织中HBV前c区准种组成的异同.

关键词：重型乙型肝炎肝组织血清乙型肝炎病毒前c区 PcR产物

福建省慢性HBV感染者HBV基因S区、基本核心启动子区和前c区基因变异特征分析

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病毒学报 2018年第4期34卷 491-497页

作者：李东杨秀惠陈致飞张苏晗郑凝旋潘伟毅周勇郑奎城福建省疾病预防控制中心、福建省人兽共患病重点实验室福州350001 福建医科大学公共卫生学院教学基地福州350001

为研究福建省慢性HBV感染者HBV基因多样性及变异规律,了解该人群HBV-DNA的病毒学特征。收集慢性HBV感染者血清标本,通过巢式PcR法扩增其HBV基因序列,比对NcBI数据库中标准基因型序列,分析HBV基因S区,基本核心启动子区（BcP）及前c区的... 详细信息

为研究福建省慢性HBV感染者HBV基因多样性及变异规律,了解该人群HBV-DNA的病毒学特征。收集慢性HBV感染者血清标本,通过巢式PcR法扩增其HBV基因序列,比对NcBI数据库中标准基因型序列,分析HBV基因S区,基本核心启动子区（BcP）及前c区的序列变异情况,并对这些变异可能造成的病毒抗原表达,疫苗逃逸,患者病症改变等情况进行探讨。最终成功扩增82例HBV全长基因序列,其中B基因型56例,c基因型26例。基因组特定功能区序列分析发现慢性HBV感染者HBV基因在S区（23.2%）、BcP区（61.0%）和前c区（29.3%）均出现了不同程度的变异。其中主蛋白（HBsAg）主要抗原决定簇a决定簇45.8%位点出现了变异,这些变异位点中包括与肝炎重症化及免疫逃逸密切相关的位点（aa126、aa129、aa145等）。位点G1896A（19.5%）,G1764A（11.0%）和A1762T（9.8%）依然是BcP/前c区的主要突变位点。而位点A1752G（25.6%）高突变率的出现在BcP区应引起关注。此外位点G1764A（χ2=5.742,P=0.030）、A1896G（χ2=14.392,P=0.000）以及A1762T/G1764A（χ2=7.289,P=0.012）的突变更容易发生在HBeAg阴性的样品中;而位点A1846T（χ2=11.882,P=0.003）、A1762T（χ2=6.561,P=0.038）和A1896G（χ2=6.958,P=0.030）的突变与HBV-DNA的病毒载量存在一定相关性。总之,福建省慢性HBV感染者在HBV不同基因功能区域均存在不同程度的变异,一些与HBeAg表达情况、HBV-DNA载量、疫苗免疫逃避及肝细胞癌发生具有相关联的变异位点已经出现,BcP区A1752G位点的高频率出现应值得关注,对于这些变异位点的患者应加强监测。

关键词：乙型肝炎病毒(HBV) 基因变异基本核心启动子(BcP) 前c区

乙型肝炎病毒相关慢性肝病前c区/BcP区基因突变的临床意义

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中华肝脏病杂志 2004年第4期12卷 246-247页

作者：周秀梅曲迅刘福利邹明谨张玉琦孙成刚解放军第88医院感染科泰安271000 齐鲁医院基础医学研究所山东省立医院消化内科

实验采用PcR技术及芯片杂交原理,对65例乙型肝炎病毒(HBV)相关性慢性肝病患者进行前-c区及BcP区A1896、A1899及nt1762/m1764联合突变检测,探讨HBV相关性慢性肝病前c区/BcP区基因突变的临床意义.一。

关键词：乙型肝炎病毒慢性肝病前c区 BcP区基因突变基因芯片

应用PcR-ASO技术检测乙型肝炎病毒基因前c区突变

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中国医科大学学报 1997年第4期26卷 40-42+50页

作者：贺文萍武藤妙子香川昌平日本兵库医科大学病院中央检查部

应用碱性磷酸酶标记的ＡＳＯ探针杂交技术对１２３例临床各型乙肝病毒（ＨＢＶ）感染后的血清标本ＰＣＲ后检测了ＨＢＶ基因前Ｃ区１８９６位已知的Ｇ－Ａ点突变株。结果表明：在ＨＢｅＡｂ阳性血清中发现有Ｗ２８Ｘ突变株，而ＨＢｅＡ... 详细信息

应用碱性磷酸酶标记的ＡＳＯ探针杂交技术对１２３例临床各型乙肝病毒（ＨＢＶ）感染后的血清标本ＰＣＲ后检测了ＨＢＶ基因前Ｃ区１８９６位已知的Ｇ－Ａ点突变株。结果表明：在ＨＢｅＡｂ阳性血清中发现有Ｗ２８Ｘ突变株，而ＨＢｅＡｇ阳性血清样本中未发现该突变株；有突变株的患者亦未全部表现为重症肝炎。提示ＨＢＶ基因前Ｃ区突变并不一定导致病情加重。野生株、突变株与肝炎重症化之间的关系有必要在临床过程中慎重地观察。

关键词：乙型肝炎病毒前c区突变 ASO探针杂交

HBeAg阴性乙型肝炎患者前c区G1896A变异及其与前S1抗原的关系

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中华传染病杂志 2011年第11期39卷 687-689页

作者：张静徐维家王青石铭綦盛麟韩博大连市中心医院检验科 116033 大连市第六人民医院中心实验室

HBV感染初期表现为血清HBV DNA水平升高，随之出现HBeAg；当患者体内出现抗-HBe时，血清HBeAg转阴，HBV DNA水平则会降低。然而，有部分HBeAg转阴的患者仍表现为慢性乙型肝炎（乙肝）。有研究表明，前c区或核心启动子变异是导致HBeAg阴... 详细信息

HBV感染初期表现为血清HBV DNA水平升高，随之出现HBeAg；当患者体内出现抗-HBe时，血清HBeAg转阴，HBV DNA水平则会降低。然而，有部分HBeAg转阴的患者仍表现为慢性乙型肝炎（乙肝）。有研究表明，前c区或核心启动子变异是导致HBeAg阴性慢性乙肝的原因之一，

关键词： HBeAg阴性乙型肝炎患者启动子变异前c区前S1抗原血清HBV DNA水平慢性乙型肝炎

HBV前c区变异与HBe转换和慢性肝炎的预后

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中华传染病杂志 1996年第1期14卷 45-46页

作者：田琦琦骆抗先陈伟华杨洁王志明解放军第二六零医院第一军医大学南方医院

ＨＢＶ前Ｃ区变异与ＨＢｅ转换和慢性肝炎的预后田琦琦，骆抗先，陈伟华，杨洁，王志明为进一步了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区变异与血清ＨＢｅ转换及临床预后的关系，探讨其可能的发生机制，我们对４８例经肝活检及血清学确诊的慢... 详细信息

ＨＢＶ前Ｃ区变异与ＨＢｅ转换和慢性肝炎的预后田琦琦，骆抗先，陈伟华，杨洁，王志明为进一步了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区变异与血清ＨＢｅ转换及临床预后的关系，探讨其可能的发生机制，我们对４８例经肝活检及血清学确诊的慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者随访血清进...

关键词：肝炎乙型肝炎病毒前c区 HBe 预后

乙型肝炎病毒基本核心启动子及前c区突变对疾病进展的影响

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中国实用内科杂志 2005年第3期25卷 233-235页

作者：房继莲丛旭李若冰许军 Erwin Sablon 孙焱王豪王宇魏来北京大学人民医院北京大学肝病研究所100044 Hepatitis Diagnostics Program Innogenetic N.V.Belgium

目的　研究乙型肝炎病毒 (HBV)基本核心启动子 (BcP)T176 2 /A176 4双突变及前c区A1896突变与肝脏损伤程度的相关性。方法　 2 0 0 0～ 2 0 0 2年哈尔滨医科大学附属第二医院及广东省廉江市医院随机选取 113例慢性HBV感染者 ,采用INNO -... 详细信息

目的　研究乙型肝炎病毒 (HBV)基本核心启动子 (BcP)T176 2 /A176 4双突变及前c区A1896突变与肝脏损伤程度的相关性。方法　 2 0 0 0～ 2 0 0 2年哈尔滨医科大学附属第二医院及广东省廉江市医院随机选取 113例慢性HBV感染者 ,采用INNO -LiPA法测定HBVBcPT176 2 /A176 4双突变及前c区A1896突变 ,同时测定HBVS基因序列明确基因型。结果　cHB组、Lc组、Hcc组BcPT176 2 /A176 4双突变率明显高于Asc组 (分别为 2 4 . 1%比 2. 8% ,χ2 =5 .93,P c组BcPT176 2 /A176 4双突变率显著高于cHB组 (71 .4 %比 2 4 . 1% ,χ2 =9 .12 ,P c基因型感染者cHB、Lc和Hcc组BcPT176 2 /A176 4双突变率明显高于Asc组 (分别为 33 .3%比 5 . 3% ,χ2 =3 .89,P 前c区A1896突变率均较低 ,在cHB组和Lc组无一例发生 ;Hcc组前c区A1896突变率与Asc组比较差异无显著性 (11 .1%比 8. 3% ,χ2 =0 . 0 0 ,P >0 . 0 5 )。结论　在慢性HBV感染者中 ,BcPT176 2 /A176 4双突变与慢性肝病进展有关。

关键词：前c区 cHB Lc 核心启动子乙型肝炎病毒 Hcc 疾病进展 BcP 廉江市突变率

乙型肝炎病毒前c区和BcP区突变株复制质粒的构建

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中华实验和临床病毒学杂志 2004年第3期18卷 218-222页

作者：王燕蒋栋魏来陈红松丛旭费然王宇北京大学人民医院肝病研究所 100044

目的　构建乙型肝炎病毒 (HBV)前c区和基本核心启动子区 (BcP)突变株的复制质粒。方法　以含 1 2倍拷贝HBVDNA全基因的质粒 (pHBV1 2 )为工具 ,采用分子克隆、PcR定点诱变、限制性酶切长度多态性和序列分析等技术构建目的质粒。转染肝... 详细信息

目的　构建乙型肝炎病毒 (HBV)前c区和基本核心启动子区 (BcP)突变株的复制质粒。方法　以含 1 2倍拷贝HBVDNA全基因的质粒 (pHBV1 2 )为工具 ,采用分子克隆、PcR定点诱变、限制性酶切长度多态性和序列分析等技术构建目的质粒。转染肝癌细胞株Huh7后 ,测定培养上清HBsAg、HBVDNA来了解病毒抗原的表达和病毒复制。结果　成功构建了 10种HBV全基因前c区 /BcP区突变的表达质粒 ,转染肝癌细胞株 ,获得病毒的表达和病毒颗粒的分泌。其中 ,pUc HBVT176 2、A176 4双突变以及pUc HBVT175 3突变株复制效率较高 ,转染细胞培养上清的HBVDNA为3 16× 10 5拷贝 ml。野生型复制子培养上清HBVDNA含量稍低于BcP突变复制子。结论　获得 10株含有不同前c区和BcP区突变的HBV全基因复制质粒 ,为体外进一步研究上述变异的生物学意义提供基本模型。

关键词：前c区 HBVDNA 质粒培养上清乙型肝炎病毒肝癌细胞株突变株限制性酶切定点诱变基因复制

反向杂交检测肝癌相关乙型肝炎病毒前c区突变方法的建立和应用

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中国癌症杂志 2014年第4期24卷 266-272页

作者：赵芝梅朱宇吴燕樊春笋陈陶阳甘愉屠红上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室上海200032 启东肝癌防治研究所启东肿瘤医院病因室江苏启东226200

背景与目的：日益增多的研究表明，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）DNA前c区G1896A和G1899A突变是肝癌发生的危险因素。本研究旨在建立简单、快速、灵敏和准确的检测HBV前c区突变的反向杂交方法，并应用于检测江苏省启东地区HBV... 详细信息

背景与目的：日益增多的研究表明，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）DNA前c区G1896A和G1899A突变是肝癌发生的危险因素。本研究旨在建立简单、快速、灵敏和准确的检测HBV前c区突变的反向杂交方法，并应用于检测江苏省启东地区HBV DNA前c区突变与肝癌发生的关系。方法：设计并合成HBV DNA前c区1896和1899位点的特异性探针，通过优化条件建立特异、敏感的杂交体系，并与直接测序检测结果进行比较。将该方法应用于检测启东100例肝癌和100例慢性HBV携带者（对照组），分析HBV DNA前c区突变与肝癌的关系。结果：反向杂交对血清样本的最低检测下限为HBV DNA 103 copy/mL，检测混合感染时比直接测序更占优势，混合株中10％以上的突变株均可被检测。启东地区HBV DNA前c区G1899A突变与肝癌高发具有相关性（P=0.000, OR=4.846, 95%cI：2.240～10.485），而G1896A突变未见其相关性。结论：反向杂交检测HBV DNA前c区突变方便、快速、准确，可有效监控肝癌的发生，适合临床大规模推广应用。

关键词：乙型肝炎病毒前c区反向杂交突变肝癌